1 00:00:00,110 --> 00:00:23,019 Os he abierto ya en el aula virtual el primer tema, el tema de seguridad en el laboratorio, que lo tenemos aquí, aquí abajo está. 2 00:00:23,320 --> 00:00:29,859 Es un tema que es de medidas de seguridad en el laboratorio, muchas cosas ya las sabréis, sobre todo las que estáis trabajando, 3 00:00:29,859 --> 00:00:56,060 Es un tema relativamente sencillo, muy teórico. Aquí tenéis todos los apuntes. Sistema de prevención de riesgos laborales, la normativa sobre clasificación y almacenamiento, los riesgos que conlleva trabajar con productos químicos, técnicas de seguridad, el diseño de los laboratorios, equipos de protección personal. 4 00:00:56,060 --> 00:01:17,780 Creo que aquí está también la protección colectiva en esta unidad. Si no está en esta, está en la 4. Os lo he ido abriendo por si queréis ir echándole un vistazo. El día 3 os subiré una conferencia relativa con un poco el compendio y el resumencillo de todo lo de esta unidad. 5 00:01:17,780 --> 00:01:41,480 ¿Vale? Otra cosa que teníamos pendiente que quiero que hagamos antes de comenzar con nada, me preguntasteis sobre la prueba del sesgo porque es algo que tenéis incluido en uno de los ejercicios entregables de la tarea de este tema, del tema 5, que la voy a abrir aquí para tenerla delante. 6 00:01:41,480 --> 00:02:01,250 En el primer ejercicio que decía se utilizó una disolución 0,1 molar de ácido para valorar 10 mililitros de una disolución de alcalí. 7 00:02:01,250 --> 00:02:11,250 Y se registraron los siguientes volúmenes y nos da cinco datos y nos pide que comprobemos si entre los resultados hay algún dato anómalo. 8 00:02:11,250 --> 00:02:18,189 anómalo. Como no nos dice nada, no sé si os lo dije yo, pero bueno, utilizamos el criterio 9 00:02:18,189 --> 00:02:23,629 de la Q de Dixon, ¿vale? Lo tendríamos que evaluar, acordaos de la fórmula, que tenemos 10 00:02:23,629 --> 00:02:29,250 que ver cuál es el dato que consideramos que puede ser anómalo, que normalmente es, 11 00:02:29,770 --> 00:02:33,750 bueno, siempre es un dato de los extremos y lo evaluamos viendo cuál es el que más 12 00:02:33,750 --> 00:02:40,389 se desvía de la media. Calculamos nuestro parámetro Q, nuestro estadístico, y lo comparamos 13 00:02:40,389 --> 00:02:46,090 con el valor que está tabulado para el número de datos que tenemos. 14 00:02:48,150 --> 00:02:54,870 Una vez que hemos evaluado si el dato del que dudábamos lo tenemos que eliminar o no, 15 00:02:55,509 --> 00:02:58,710 ya podemos calcular nuestra media y nuestro intervalo de confianza, 16 00:02:58,789 --> 00:03:02,770 porque será distinto si hemos eliminado el dato o si no lo hemos eliminado. 17 00:03:02,969 --> 00:03:05,870 Variará la media unas décimas. 18 00:03:05,870 --> 00:03:16,590 Y luego nos dice calcular los límites de confianza de la media al 95% y utilizarlos para decir si existe alguna evidencia de sesgo. 19 00:03:17,289 --> 00:03:22,689 Aquí tenemos que tener dos cosas en cuenta. Bueno, una cosa en cuenta principalmente. 20 00:03:22,949 --> 00:03:33,729 Cuando nosotros evaluamos la prueba del sesgo, es la prueba de la TED Student cuando comparamos un valor de referencia con una serie de valores. 21 00:03:33,729 --> 00:03:54,349 ¿Vale? Lo tenéis, os lo voy a poner aquí porque lo tenéis en vuestros apuntes como tal, los que vienen en el aula virtual por defecto, no los que subo yo, que acordaos que, bueno, yo amplío todo lo que está aquí, pero bueno, os viene bien echarle un ojo a todos los apuntes. 22 00:03:54,349 --> 00:04:02,909 Y aquí nos dicen, perdonadme que no sé dónde está. 23 00:04:03,729 --> 00:04:24,079 Aquí, jolín, la prueba del sesgo, ¿vale? Que es, bueno, el sesgo es si tenemos una tendencia, ¿no?, hacia un, que se sale del valor que esperaríamos, ¿vale? 24 00:04:24,079 --> 00:04:33,339 Entonces, ¿cómo lo comparamos? Es calculando nuestra T calculada, lo que hacíamos cuando comparábamos con un valor de referencia, ¿vale? 25 00:04:33,339 --> 00:04:43,860 Que lo que hacíamos era el valor de referencia menos la media de nuestra serie de datos, dividido entre S y multiplicado por raíz de N, ¿no? 26 00:04:43,860 --> 00:04:52,939 Era S partido por raíz de N nuestra fórmula. Con este T que calculábamos, lo evaluábamos comparándolo con el de la tabla de la T de Student 27 00:04:52,939 --> 00:05:01,839 y si el que nosotros habíamos calculado era menor, no había diferencia significativa, no podíamos afirmar que hubiese diferencia. 28 00:05:02,060 --> 00:05:11,040 En cambio, si era mayor, sí. Entonces, lo que estamos haciendo aquí no es más ni menos que evaluar si un valor que nosotros tenemos 29 00:05:11,040 --> 00:05:18,779 está dentro de un determinado intervalo de confianza, porque acordaos que el intervalo de confianza es T por S partido por raíz de N 30 00:05:18,779 --> 00:05:42,740 Y nosotros, cuando hacemos nuestro intervalo de confianza, lo que hacemos es la media más menos t por s dividido entre raíz de m, ¿vale? Aquí, ¿qué estamos haciendo? Evaluar si el dato de referencia menos nuestra media en valor absoluto, valor positivo, está realmente dentro de este intervalo de confianza, ¿vale? 31 00:05:42,740 --> 00:05:59,779 Entonces, tenemos dos maneras de hacerlo. Vamos a coger el caso de nuestro ejercicio. Nosotros aquí no tenemos un valor de referencia como tal, pero como estamos familiarizados con las valoraciones, 32 00:05:59,779 --> 00:06:27,259 Nosotros sabemos que hemos utilizado 10 mililitros de un ácido 0,1 molar, lo hemos valorado con una base 0,1 molar y estamos esperando que, siendo una relación 1-1 y considerando ácido base fuerte, vamos a tener la misma cantidad de ácido que de base. 33 00:06:27,259 --> 00:06:37,220 Estamos esperando un resultado de 10 mililitros. En este caso concreto nos está dando un valor de referencia y es un poco más ambiguo el ejercicio. 34 00:06:37,480 --> 00:06:45,259 Pero vamos a contar con que el valor de referencia es 10. Nosotros hemos conseguido 9,8, 10,2, 10,2, 10,4, 10,3. 35 00:06:46,100 --> 00:06:58,120 Evaluaremos si tenemos que eliminar alguno de los valores extremos, luego calcularemos la media y esa media podremos calcular un intervalo de confianza asociado. 36 00:06:58,120 --> 00:07:12,199 Tenemos la media y más menos la T de student por la desviación de esos valores dividido entre raíz de n, que será en función de si hemos eliminado uno de los valores o no, pues será o 4 o 5. 37 00:07:12,199 --> 00:07:32,639 ¿No? Nosotros con eso vamos a calcular un intervalo de confianza. Ese intervalo de confianza, si nuestra serie de datos tiene sesgo, hay una evidencia de sesgo, ese valor de referencia que nosotros hemos establecido en 10 no va a estar dentro de ese intervalo de confianza. 38 00:07:32,639 --> 00:07:43,240 Que es lo mismo que calcular esta T y que nos dé mayor que la T tabulada, ¿vale? 39 00:07:46,819 --> 00:07:56,000 Como todavía tenéis tiempo para entregarlo, pensad en esto, lo intentáis hacer y si tenéis dudas me preguntáis el próximo día, ¿vale? 40 00:07:56,000 --> 00:08:04,000 Y luego también quería que hablásemos del ejercicio 2. 41 00:08:04,019 --> 00:08:11,560 del de la recta de calibrado, ¿vale? De los entregables, digo, porque yo luego subí una tanda de ejercicios que hoy vamos a resolver algunos 42 00:08:11,560 --> 00:08:20,579 o a dejarlos planteados por lo menos para que los hagáis, ¿vale? Aquí nos dice, el análisis de una serie de patrones de cation plata 43 00:08:20,579 --> 00:08:27,519 realizada por espectroscopía de absorción atómica ha proporcionado los siguientes resultados. Vale, tenemos unos patrones 44 00:08:27,519 --> 00:08:38,679 Y tenemos unas absorbancias para estos patrones. Así a priori no nos están diciendo nada, estamos viendo cómo se ha hecho el calibrado, patrones externos, no hay ninguna duda. 45 00:08:39,460 --> 00:08:53,620 Y nos piden establecer la ocasión de la recta de calibrado. Aquí todo bien porque simplemente tenemos que meter nuestros pares de x y en la calculadora y calcular nuestra ecuación. 46 00:08:54,480 --> 00:09:01,899 Tendremos el parámetro A, la ordenada en el origen, la B, que es la pendiente, que es la que va a multiplicar a la concentración, 47 00:09:02,799 --> 00:09:10,960 y tendremos un coeficiente R cuadrada con el que cuantificaremos el ajuste. 48 00:09:12,179 --> 00:09:21,120 Ahora, el límite de detección. Acordaos que el límite de detección, creo que os he añadido una diapositiva que luego os lo actualizaré, 49 00:09:21,120 --> 00:09:34,740 ¿Vale? El límite de detección, acordaos que es la cantidad mínima que nosotros podemos detectar, ¿vale? Es la cantidad mínima que se puede detectar, o sea, que nos dice si tenemos analito o no tenemos analito. 50 00:09:35,700 --> 00:09:46,940 El límite de cuantificación es la cantidad mínima que nosotros podemos cuantificar, o sea, dar un dato, ya no decir solo si sí o si no, sino decir cuánto tenemos de ese analito, ¿vale? 51 00:09:46,940 --> 00:10:02,080 Y los cálculos para calcular los límites de detección y de cuantificación los podemos hacer a partir de la recta de calibrado. Hay dos maneras de cuantificar esto. Una es, imaginad que nosotros tenemos medidas sobre el blanco. 52 00:10:02,080 --> 00:10:15,500 Nosotros tenemos un blanco, que acordaos que es las medidas que hacemos sobre, por ejemplo, si estamos haciendo disoluciones acuosas solo sobre el agua, sobre todo lo que no es el analito, 53 00:10:15,500 --> 00:10:31,960 Hacemos una serie de medidas y podemos calcular la desviación de esas medidas y con eso podemos calcular la señal que nos da mínima para detectar el blanco. 54 00:10:33,259 --> 00:10:44,879 Con eso calculamos el límite de detección, que es multiplicar la señal del blanco más tres veces por esa desviación de las medidas del blanco. 55 00:10:44,879 --> 00:11:06,360 Y para el límite de cuantificación lo mismo, pero multiplicado por 10. ¿Qué pasa? Que hay veces que tenemos una serie de datos en la que no nos dan medidas del blanco. Por ejemplo, el ejercicio que tenéis planteado, que está abierto aquí, aquí os están dando una sola medida del blanco. 56 00:11:06,360 --> 00:11:13,980 Se están diciendo que para 0 ppm de plata, o sea, tú has cogido tu disolución sin el analito, has medido el observante y te ha dado 0. 57 00:11:16,720 --> 00:11:23,500 Entonces, tú aquí no tienes una manera de tener la desviación de los blancos porque no has hecho una medida de varios blancos. 58 00:11:23,500 --> 00:11:42,720 En este caso, podemos reemplazar este valor de la desviación del blanco por la desviación estándar del residuo, del ajuste de mínimos cuadrados de nuestra recta de calibrado, como con esta fórmula de aquí. 59 00:11:42,720 --> 00:12:04,779 ¿Vale? Esto es ese cuadrado, acordaos que de esto tendríamos que hacer la raíz cuadrada, ¿vale? Entonces tendríamos que coger el valor experimental menos el valor calculado con la recta de calibrado, elevarlo al cuadrado, dividirlo entre n-2, ir haciendo el sumatorio de todo esto, ¿vale? 60 00:12:04,779 --> 00:12:13,500 De cada valor de I menos el valor calculado con la recta de calibrado y todo ello dividido entre N-2. 61 00:12:13,659 --> 00:12:16,019 Y de esto haríamos la raíz cuadrada, ¿vale? 62 00:12:16,700 --> 00:12:26,019 Entonces, con esto obtendríamos la señal que nos da el blanco, pero como queremos pasarlo a concentración, dividimos eso entre la pendiente, ¿vale? 63 00:12:26,019 --> 00:12:42,500 Entonces, el límite de detección es tres veces la señal del blanco dividida entre el blanco, pero como no tenemos la desviación del blanco, lo pasamos, utilizamos la desviación estándar del residuo. 64 00:12:42,500 --> 00:13:04,600 Esto, que no sé si os ha quedado claro, lo que me dice es, imaginaos que yo tengo una ecuación de la recta que sea, pues mira, voy a coger una tal cual, esta de, ¿dónde la puedo coger? 65 00:13:04,600 --> 00:13:16,389 Bueno, me da lo mismo, yo tengo Y es igual a BX más A 66 00:13:16,389 --> 00:13:20,629 Yo he tenido una serie de valores X y Y 67 00:13:20,629 --> 00:13:24,409 Por ejemplo, 0, 1, 2, 3 y 4 las concentraciones 68 00:13:24,409 --> 00:13:31,309 Y de la Y, 0, 5, 1, 1, 2 69 00:13:31,309 --> 00:13:34,470 A ver cómo lo hago para que salga 70 00:13:34,470 --> 00:13:52,210 este 0, 1, 1.1, 1.9, 2.9 y 4, ¿vale? Imaginaos. Voy a calcular la recta de regresión de estos 71 00:13:52,210 --> 00:14:04,590 datos de aquí. Es más o menos una línea recta, ¿no? Inserto la línea de tendencia 72 00:14:04,590 --> 00:14:09,509 y voy a coger la ecuación de la recta que me dé. 73 00:14:12,169 --> 00:14:20,590 Vale, me dice que tiene una R cuadrado, me inventa los datos, de 0,997, 74 00:14:20,809 --> 00:14:24,889 vamos a darlo por aceptable, ¿vale?, aunque normalmente queremos tres nueves, 75 00:14:25,450 --> 00:14:33,990 y me dice que esta es la ecuación de la recta, ¿vale?, me dice que I es igual a 0.96 por X, 76 00:14:33,990 --> 00:14:52,289 por la concentración, ¿vale? Y es igual a 0.96 por la concentración, por X, más 0.08, ¿no? 77 00:14:52,389 --> 00:14:57,789 Esta ecuación de aquí que yo calcularía con mi calculadora a partir de estos datos que son datos que yo tengo, ¿vale? 78 00:14:57,789 --> 00:15:22,250 Que me han dado como dato. Ahora, a lo que yo me refiero con la I que calcularíamos si utilizásemos la recta de calibrado es que esta I de aquí son mis datos experimentales. Estos datos los he medido yo en el laboratorio. He cogido y para concentración cero. He medido la absorbancia, por ejemplo, y me ha dado que es 0,1. He cogido mi matraz de concentración 1, lo he medido y me ha dado 1,1. 79 00:15:22,250 --> 00:15:34,090 He cogido el matraz de 2, he medido y me ha dado 1,9. Estos son datos reales, datos que yo he tomado. Ahora, yo tengo aquí una estimación que me relaciona la Y con la X. 80 00:15:34,090 --> 00:15:51,850 Yo puedo calcular estas señales de aquí con mi recta de calibrado. Si me ajustes bueno, el valor que obtenga real va a ser muy parecido al valor que obtenga experimental. 81 00:15:52,250 --> 00:16:03,669 con mi recta, ¿no? Entonces, en el caso primero, ¿qué tendría que hacer? Pues y es igual a 0,96 por 0 más 0,08. 82 00:16:03,669 --> 00:16:21,590 O sea, ahí me daría 0,08. En el segundo caso, y es igual a 0,96 por x por 1 más 0,08. O sea, 0,96 más 0,08. 83 00:16:22,250 --> 00:16:36,830 Y me da 1,04, también muy cercano a este, ¿no? Ahora, ¿cuál sería mi calculada con mi recta de regresión para x igual a 2? Pues sería meter aquí, sustituir la x por un 2. 84 00:16:36,830 --> 00:16:59,889 0.96 por 2 más 0.08 y me da 2. Este de aquí, pues lo mismo, ¿no? 0.96 por 3 y más 0.08 85 00:16:59,889 --> 00:17:27,559 y aquí 0.96 por 4 más 0.08, ¿vale? Pues ahora, esta es mi I calculada con mi recta de regresión, que si os dais cuenta, es muy muy similar a la I real, ¿vale? 86 00:17:27,559 --> 00:17:47,700 Entonces, esta fórmula de aquí, que os dice cada valor de i menos el valor de i predicho elevado al cuadrado, sería hacer la recta, la resta entre estos valores, este menos este de aquí, este menos este, este menos este, ¿vale? 87 00:17:47,700 --> 00:17:59,579 Y todo ello en valor absoluto, o sea, si me sale negativo lo pongo positivo, ¿vale? 88 00:18:01,500 --> 00:18:13,980 Ya tengo la diferencia de cada uno de los pares del valor real de Y y el valor que calcularía con mi recta de regresión, que es cada uno de estos de aquí. 89 00:18:13,980 --> 00:18:28,079 Ahora tengo que elevarlo al cuadrado y sumarlos. Entonces, elevaría cada uno de estos al cuadrado y luego los sumaría, ¿vale? Y eso lo divido entre n-2. 90 00:18:28,759 --> 00:18:42,519 Y con eso, de esa manera, calculo la desviación estándar del residuo, que la puedo equiparar a la desviación del blanco cuando no tengo distintas señales del blanco para hacer ese tratamiento estadístico, ¿vale? 91 00:18:43,460 --> 00:18:55,839 Entonces, en este caso de aquí, del ejercicio que tenéis planteado, la ecuación de la recta de calibrado, ok, el límite de detección, como no tenemos blancos, lo tendremos que calcular así, ¿vale? 92 00:18:55,839 --> 00:19:01,839 Entonces, hacemos esta recta de calibrado y nos hacemos aquí una columna nueva que se llame absorbancia calculada. 93 00:19:03,079 --> 00:19:11,079 ¿Y qué hacemos? En la recta de calibrado que nosotros hemos calculado previamente, meteremos en la X cada uno de estos valores. 94 00:19:11,819 --> 00:19:18,960 Y ya podremos comparar la absorbancia medida real con la absorbancia calculada con nuestra recta de calibrado. 95 00:19:18,960 --> 00:19:46,480 Pero, como nosotros hemos hecho un modelo matemático que nos ajusta de la mejor manera posible nuestros datos experimentales con esa ecuación, lo suyo es que, como tenemos un ajuste bueno, mayor de 0,99, 0,999, nuestros datos que nosotros calculemos van a ser muy, muy reales a los que calcularíamos con la recta, porque de eso se trata. 96 00:19:46,480 --> 00:19:56,799 Pero esa pequeña diferencia es como vamos a poder calcular la desviación de los residuos y con eso podremos calcular el límite de detección. 97 00:19:58,180 --> 00:20:14,460 Luego el siguiente punto que nos pide la sensibilidad del método, que acordaos que la sensibilidad del método sí que la habíamos definido, se definía con uno de los parámetros de la recta de calibrado, con la pendiente concretamente y acordaos que tiene unidades. 98 00:20:14,460 --> 00:20:24,460 Y luego, el apartado D determina la concentración de una muestra que contiene plata si la media de la absorbancia es 0,565. 99 00:20:25,460 --> 00:20:32,759 O sea, te están dando un valor de Y y tú tienes tu recta de calibrado hecha que te relaciona Y con X y te están pidiendo X. 100 00:20:33,619 --> 00:20:39,220 Primera parte. Ahora, te dicen que se han tomado 25 mililitros y se han llevado a 50. 101 00:20:39,220 --> 00:20:52,980 O sea, que tú has diluido esa muestra y tú lo que estás midiendo es tu muestra diluida y tú quieres saber tu concentración de tu muestra original. Por lo tanto, tienes que revertir esa dilución. 102 00:20:52,980 --> 00:21:07,420 ¿Vale? Entonces, bueno, estas eran las pequeñas anotaciones que yo os quería hacer. ¿Vale? No sé si alguien habrá comentado algo porque como estoy con... Sí, un chat. 103 00:21:07,420 --> 00:21:31,940 La prueba del sesgo. Esto, no sé si te has conectado más tarde, Sonia, pero lo he explicado al principio. Contéstame, por favor. Lo has puesto antes de que lo dijera. Ah, vale, vale, genial. 104 00:21:31,940 --> 00:21:35,180 Te quería preguntar porque no me ha quedado muy claro 105 00:21:35,180 --> 00:21:35,920 Lo del sesgo 106 00:21:35,920 --> 00:21:39,420 Vale, eres Tania, ¿verdad? 107 00:21:39,519 --> 00:21:40,000 ¿No eres Sonia? 108 00:21:40,019 --> 00:21:41,579 Sí, Tania 109 00:21:41,579 --> 00:21:45,619 Vale, pues lo volvemos a 110 00:21:45,619 --> 00:21:48,519 A ver si lo entiendo bien 111 00:21:48,519 --> 00:21:50,460 ¿Se puede decir que no hay sesgo 112 00:21:50,460 --> 00:21:52,579 Si está dentro del intervalo de confianza? 113 00:21:52,819 --> 00:21:53,259 Justo 114 00:21:53,259 --> 00:21:56,240 Ya está, con eso vale, no hay que hacer ninguna fórmula 115 00:21:56,240 --> 00:21:57,140 Ni nada de eso, ¿no? 116 00:21:57,420 --> 00:21:59,240 Claro, bueno, la fórmula que has hecho realmente 117 00:21:59,240 --> 00:22:03,720 Es este que hay aquí de la T 118 00:22:03,720 --> 00:22:05,900 lo que estamos haciendo al final es 119 00:22:05,900 --> 00:22:08,099 despejar la x de nuestra fórmula 120 00:22:08,099 --> 00:22:10,140 de t por s partido por raíz de n 121 00:22:10,140 --> 00:22:12,339 se puede 122 00:22:12,339 --> 00:22:13,619 hacer de dos maneras distintas 123 00:22:13,619 --> 00:22:15,880 lo que hice aquí del método del intervalo 124 00:22:15,880 --> 00:22:18,079 es básicamente ver si está dentro del intervalo 125 00:22:18,079 --> 00:22:20,039 de confianza y lo del método del 126 00:22:20,039 --> 00:22:21,900 estadístico es en vez de calcular 127 00:22:21,900 --> 00:22:24,200 el intervalo de confianza, calcular 128 00:22:24,200 --> 00:22:26,119 la t y compararla con 129 00:22:26,119 --> 00:22:28,160 las tablas, pero al final los dos 130 00:22:28,160 --> 00:22:30,059 llegamos al mismo resultado, es despejar 131 00:22:30,059 --> 00:22:31,059 de un lado o del otro 132 00:22:31,059 --> 00:22:34,779 Vale, lo podemos hacer de cualquier manera, ¿verdad? 133 00:22:35,019 --> 00:22:35,859 Sí, sí 134 00:22:35,859 --> 00:22:36,839 Vale, vale 135 00:22:36,839 --> 00:22:38,099 Bueno, en este caso, espera, espera 136 00:22:38,099 --> 00:22:39,259 Que te he dicho que sí muy rápido 137 00:22:39,259 --> 00:22:40,140 Te dice 138 00:22:40,140 --> 00:22:42,660 Comprobar siempre los resultados de elaboración 139 00:22:42,660 --> 00:22:46,259 Calcular los límites de confianza de la media al 95 140 00:22:46,259 --> 00:22:50,599 Y utilizarlos para decir si existe alguna evidencia de sesgo 141 00:22:50,599 --> 00:22:51,279 Ah, vale 142 00:22:51,279 --> 00:22:51,660 ¿Vale? 143 00:22:51,900 --> 00:22:54,900 O sea, en este caso te lo está especificando mucho 144 00:22:54,900 --> 00:22:58,000 Pero si no, lo puedes hacer de cualquiera de las dos maneras 145 00:22:58,000 --> 00:22:59,480 Vale 146 00:22:59,480 --> 00:23:00,099 ¿Vale? 147 00:23:00,099 --> 00:23:01,099 Gracias. 148 00:23:01,099 --> 00:23:23,059 Nada. Vale, ahora, hoy os quería explicar un poco de Excel porque está dentro de nuestro temario. No sé cómo de bien lo utilizáis, pero bueno, si no lo que podemos hacer es resolviendo ejercicios, verlo a la vez. 149 00:23:23,059 --> 00:23:34,619 Excel o una hoja de cálculo en general, que yo utilizo LibreOffice porque es la que es gratuita, la del paquete Office es la que se llama Excel y la del LibreOffice se llama Calc. 150 00:23:34,940 --> 00:23:45,680 La interfaz es muy parecida, las fórmulas son también muy parecidas y hay algún pequeño matiz que cambia, pero si sabes manejar uno, sabes manejar el otro. 151 00:23:45,680 --> 00:24:13,160 Yo antes utilizaba siempre Excel y como ya no tengo licencia, utilizo el LibreOffice. Para resolver los ejercicios aquí, que a mí me resulta bastante más sencillo, os cuento que cuando abrimos el documento se llama hojas, una hoja de cálculo y tenemos un libro, perdonadme, es un libro, y tenemos distintas hojas dentro de ese libro, que las podemos ir creando aquí para tener todas las que queramos. 152 00:24:13,160 --> 00:24:28,079 Cada una de estas delimitaciones es una celda que está siempre definida por una letra y por un número. Aquí tenemos la A1, esta sería la C4 y aquí arriba nos lo indica el número que es. 153 00:24:28,079 --> 00:24:49,539 Y ahora nosotros podemos introducir en las celdas texto, números, podemos introducir fórmulas, tenemos muchas características y la utilidad que tiene Excel es que hace cálculos muy rápidos y tenemos la posibilidad de introducir funciones que luego nos corrijan si cambiamos los datos. 154 00:24:49,539 --> 00:25:03,460 A lo que voy, si ya que escribo 5, 3, 6, 7, 8, yo en vez de sumar poniendo las funciones o cualquier operación, se pone poniendo un igual delante. 155 00:25:03,460 --> 00:25:19,220 Ya que podría decir 5 más 5 más 3 más 6 más 7 más 8 y me dice que el resultado es 34. ¿Qué pasa si ahora yo esto en vez de ser un 6 es un 8? 156 00:25:19,220 --> 00:25:32,279 Que el 34 no me cambia. En cambio, si yo utilizo una función que me relacione estas celdas, yo pongo aquí la suma de todos estos valores y me dice que son 34. 157 00:25:32,480 --> 00:25:36,539 Pero es que si cambio este número, la suma se me actualiza automáticamente. 158 00:25:36,539 --> 00:25:58,240 Entonces, bueno, esto es un poco la funcionalidad que tiene, vamos, una de las ventajas que tiene trabajar con Excel. También que, pues para hacer, obviamente en el examen no lo tenéis y tenéis que hacerlo con calculadora, pero si tenéis que hacer cualquier informe, cualquier tipo de ejercicio, etc., con Excel es muy sencillo. 159 00:25:58,240 --> 00:26:09,720 Entonces tenemos distintas funciones, tenemos aquí una chuleta que nos las indica, tenemos aquí todas las funciones que hay, matemáticas, estadísticas, etc. 160 00:26:10,019 --> 00:26:18,720 Y nos permite calcular un montón de parámetros, la recta de regresión nos establece, nos da el parámetro A, el B, el ajuste, etc. 161 00:26:18,720 --> 00:26:29,579 Entonces, bueno, para introducir una función tenemos que poner el igual, la función que queramos, por ejemplo, pues la media es la función promedio 162 00:26:29,579 --> 00:26:34,119 Y luego el rango de celdas en el que queremos que esa función se aplique, ¿vale? 163 00:26:34,119 --> 00:26:40,799 Ahora mismo están vacías, así que me va a decir que nada, porque no se puede dividir, o sea, porque no hay ningún número 164 00:26:40,799 --> 00:27:05,559 Pero si, por ejemplo, pongo unos valores, pues me calcula la media de esto de aquí, ¿no? Y es muy, muy útil, ¿vale? Entonces, bueno, como tampoco tenemos muchísimo tiempo, voy a plantear, a resolver o a plantear los ejercicios que teníamos de calibrado, si os parece bien. 165 00:27:05,559 --> 00:27:11,819 y si luego al final de todo nos sobra tiempo, al final de curso, digo, 166 00:27:12,279 --> 00:27:16,420 pues podemos hacer un día más intenso de hacer sobrehojas de cálculo, 167 00:27:16,619 --> 00:27:20,980 pero igual ahora es mejor que nos centremos un poco en los ejercicios, yo creo. 168 00:27:20,980 --> 00:27:24,980 Entonces, no sé si lo habéis intentado, 169 00:27:26,920 --> 00:27:34,059 la sensibilidad es solo un dato, la B, sin más operaciones, es la B. 170 00:27:34,059 --> 00:27:46,119 Carolina, pero con unidades, las mismas unidades que tiene tu concentración, porque al final lo está multiplicando, entonces las unidades son las mismas. 171 00:27:46,119 --> 00:27:57,460 Si estamos, por ejemplo, representando absorbancia frente a concentración en gramos litro, la sensibilidad que tú calcules va a ser esa pendiente y las unidades gramos litro. 172 00:27:57,640 --> 00:27:59,980 Si es molaridad, pues molar, por ejemplo. 173 00:27:59,980 --> 00:28:11,940 Entonces, lo que os comentaba de los ejercicios de calibración, que estaban separados por 174 00:28:11,940 --> 00:28:19,440 patrones externos, adición estándar que teníais dos y patrón interno que también 175 00:28:19,440 --> 00:28:29,440 Tenéis dos, ¿vale? Entonces, bueno, ¿los habéis hecho más o menos? ¿O los habéis...? 176 00:28:30,359 --> 00:28:30,660 Sí. 177 00:28:31,299 --> 00:28:32,220 Vale, genial. 178 00:28:32,539 --> 00:28:32,720 Sí. 179 00:28:33,299 --> 00:28:41,980 Venga, pues vamos a ello entonces, ¿no? Vamos más rápido. Vale, el primero nos dice, calibración de hierro en agua potable, de hierro 3. 180 00:28:41,980 --> 00:28:51,359 Nos dice que un laboratorio ambiental mide la concentración de hierro 3 en muestras de agua potable mediante espectrofotometría ultravioleta visible a 510 nanómetros. 181 00:28:51,359 --> 00:29:07,799 Muchas veces, en nuestro caso, en calidad, lo digo para el examen, se os proporcionan muchos datos que a veces parece que están ahí para darle rigor al ejercicio para que no hay que utilizar a vosotros. 182 00:29:07,799 --> 00:29:12,859 os da absolutamente igual que esto esté a 510 nanómetros o que esté a otra longitud de onda, ¿vale? 183 00:29:12,859 --> 00:29:19,019 Quiero decir que se explica mucho lo que es el procedimiento, el método que se está haciendo, 184 00:29:19,180 --> 00:29:23,539 pero bueno, que al final a ti te da absolutamente igual, siempre que sepas que hay una relación lineal, 185 00:29:23,539 --> 00:29:29,539 a ti te da absolutamente igual lo que sea esto, ¿vale? A nivel puramente estadístico. 186 00:29:30,839 --> 00:29:36,339 Entonces, nos dice eso, que tenemos la concentración de hierro en muestras de agua potable 187 00:29:36,339 --> 00:29:53,599 Y que hemos preparado cinco soluciones estándar con concentraciones de hierro conocidas. Aquí también quiero hacer otra anotación que nos he hecho durante las clases pasadas. Aquí tenemos una medida a cero, que sería la medida del blanco. 188 00:29:54,319 --> 00:30:05,980 Hemos medido nuestra matriz, nuestro agua destilada sin añadir nada de hierro y le hemos medido la absorbancia. 189 00:30:06,079 --> 00:30:12,619 ¿Esto para qué se hace? Además de eso, si hacemos muchas medidas del blanco para poder calcular el límite de detección, etc., 190 00:30:12,619 --> 00:30:22,500 porque podemos corregir y obtener el valor real de cada uno, de absorbancia de cada uno de mis patrones. 191 00:30:22,500 --> 00:30:42,299 ¿Esto qué quiere decir? Que yo realmente si sé que para 0 ppm le está dando una señal de 0,002, esa señal no se corresponde con hierro porque no tiene, se está correspondiendo con los efectos que tiene mi disolución, mi blanco sobre la absorbancia. 192 00:30:42,299 --> 00:30:50,880 Entonces, ¿qué puedo hacer? Para tener más rigor y ser más precisa, a cada uno de estos valores le puedo restar el valor del blanco. 193 00:30:50,980 --> 00:31:07,359 Y en ese caso tengo mi señal corregida y ya esos interferentes que tengo en mi disolución de concentración cero, que es mi blanco, los puedo restar al resto de las absorbancias. 194 00:31:07,359 --> 00:31:26,900 Quiero decir, en este caso, para cero, 0,002 menos 0,002, cero. Y es como si pusiese a cero mi equipo. Es como cuando, no es calibrar exactamente, pero como cuando tu balanza de la cocina, ves que te está pesando, las antiguas, las analógicas, que te está pesando un poquito de más y mueves la ruedecita. 195 00:31:26,900 --> 00:31:29,680 Realmente tú lo que estás haciendo es ajustar a tu 0 196 00:31:29,680 --> 00:31:34,460 Entonces, yo aquí tendría que para concentración 0, absorbancia 0 197 00:31:34,460 --> 00:31:42,000 Para concentración 0,5, absorbancia 0,081 menos 0,002 198 00:31:42,000 --> 00:31:44,160 O sea, 0,0079 199 00:31:44,160 --> 00:31:48,380 0,079, perdón, que he dicho un 0 de más 200 00:31:48,380 --> 00:31:51,319 Aquí lo mismo, para un TPM, ¿qué tendría? 201 00:31:51,319 --> 00:32:16,299 O sea, 0,159 menos 0,002, o sea, 0,157, ¿vale? Y así ya tengo mis datos corregidos y puedo calcular mi recta de calibrado contando con ese efecto que está teniendo el blanco que realmente este 0,002 no me lo está dando el hierro, me lo está dando algo que yo no quiero cuantificar y por eso se lo resto a todos mis valores de aquí, ¿vale? 202 00:32:16,299 --> 00:32:31,859 Entonces, ¿qué tendría que hacer? Pues me hago mi recta de calibrado con estos valores. Tengo para concentración de hierro 0, 0.5, 1, 2 y 3. 203 00:32:31,859 --> 00:32:50,440 Y la señal que tengo es 0, para 0,5 tengo 0,081 menos 0,02, 0,02, ¿vale? 204 00:32:50,440 --> 00:33:14,980 Para la siguiente tengo 0,159 menos 0,002 y así, ¿no? 0,317 menos 0,002 que es 0,315 y 0,466, ¿no? 205 00:33:14,980 --> 00:33:30,839 Vale, esta es mi X y esta es mi Y. ¿Qué hago? Meto mis datos en la calculadora, pares de X y Y y calculo mi recta de regresión. 206 00:33:30,839 --> 00:33:56,039 Yo lo voy a hacer con Excel, que se puede hacer de distintas maneras, pero yo lo hago normalmente, creo un gráfico de dispersión y luego a este gráfico de dispersión yo lo veo y así a simple vista sí que parece una línea recta, parece que los datos están alineados. 207 00:33:56,039 --> 00:34:22,190 Entonces, inserto una línea de tendencia lineal y pido que me dé la recta de calibrado. Insertaré R cuadrada y ecuación. Veo que mi R cuadrada es de 0,99999. Ni me planteo eliminar un punto porque está perfectamente ajustado. 208 00:34:22,190 --> 00:34:39,849 Es muy muy cercano a 1. Y ya tengo mi recta que me dice que Y es igual a 0,155586X, la concentración, más 0,00113. Ya tengo mi recta de calibrado. 209 00:34:39,849 --> 00:34:55,150 Ok. Ya la he obtenido, que era la primera parte del ejercicio. La segunda me decía que calcule la concentración de hierro en la muestra problema. 210 00:34:55,150 --> 00:35:08,369 Y la muestra problema me dice que tengo una absorbancia de 0,235. Entonces yo esta absorbancia la tengo que reemplazar por la Y y despejar la X. Pues vamos a ello. 0,235. 211 00:35:09,849 --> 00:35:29,849 Vale, pues yo tengo que, perdonad que esto lo voy a hacer más pequeño, aquí, venga, y es igual a 0.235, pues tendré que despejar la x, ¿no? 212 00:35:29,849 --> 00:35:55,010 Y es igual a 0,235, que es igual a 0.1556 por X, por la concentración que yo quiero calcular, más 0,00114, ¿vale? 213 00:35:55,010 --> 00:36:18,590 Pues despejo la x de aquí que me dice que x es igual a 0,235 menos 0,00114 y todo ello dividido entre 0,1556, entre la pendiente. 214 00:36:18,590 --> 00:36:38,369 Entre 0,1556 y me dice, no me dice nada porque le he puesto aquí una X delante, que es igual a 1,50, ¿no? 1,5029. 215 00:36:38,369 --> 00:36:55,650 ¿Vale? ¿Tiene sentido? Pues vamos a verlo. Me decía que mi señal es de 0,235 y aquí para una señal de 1 tengo 0,159, para una señal de 2 0,317. Esto está aquí entre medias y mi valor también que me ha dado está entre medias. 216 00:36:55,650 --> 00:37:18,110 Entonces sí que tiene sentido, ¿no? 0, perdón, 1,50 y muy importante ppm, ¿vale? Tengo que decir las unidades. Yo lo que he metido es esta absorbancia que es adimensional, ¿vale? Que no tiene unidades y he obtenido una X y esa X sí que las tiene, ¿vale? 217 00:37:18,110 --> 00:37:32,170 Entonces, tendría que decir que mi concentración de hierro 3 más en la muestra problema es de 1,50 ppm, ¿vale? Y lo dejo con los mismos decimales que me han dado en los datos originales, ¿vale? 218 00:37:32,170 --> 00:37:46,730 Entonces, bueno, la ecuación de la recta he calibrado, ok, he calculado mi concentración de hierro, mi R cuadrado era altísimo y me ha dicho que por eso sí que es suficientemente bueno y no tengo que eliminar ningún punto, ¿vale? 219 00:37:46,730 --> 00:38:16,710 Y ahora me dice, se mide la absorbancia de otra muestra obteniendo un valor de 0,732. ¿Podemos saber cuál es la concentración de esta muestra problema? Vale, pues a priori no podemos porque realmente nosotros hemos hecho una recta de calibrado que nos da unos valores que están comprendidos para datos entre 0 ppm y 3 ppm y me está dando unas absorbancias de como máximo 0,468 o 466 si lo corrijo. 220 00:38:16,730 --> 00:38:19,329 unidades de absorbancia. Aquí 221 00:38:19,329 --> 00:38:21,090 yo estoy midiendo una muestra 222 00:38:21,090 --> 00:38:23,349 que me está diciendo que tengo 223 00:38:23,349 --> 00:38:25,469 0,732. Yo no 224 00:38:25,469 --> 00:38:27,510 lo puedo meter en mi ecuación 225 00:38:27,510 --> 00:38:29,530 de calibrado porque yo sé el trozo 226 00:38:29,530 --> 00:38:31,630 que yo he establecido 227 00:38:31,630 --> 00:38:33,389 pero no sé lo que va a pasar después. 228 00:38:34,210 --> 00:38:34,690 Entonces 229 00:38:34,690 --> 00:38:37,449 no podemos saber 230 00:38:37,449 --> 00:38:39,489 cuál es la concentración de esa muestra. ¿Qué es lo que 231 00:38:39,489 --> 00:38:41,309 podríamos hacer? Diluir. 232 00:38:41,869 --> 00:38:43,409 Efectivamente. Cogemos y me 233 00:38:43,409 --> 00:38:45,309 ha dado 0,732. Pues yo cojo 234 00:38:45,309 --> 00:38:49,789 y me hago una dilución 1.10, por ejemplo, o incluso una dilución un poco más pequeña, 1.5. 235 00:38:50,570 --> 00:38:57,150 Yo cojo un mililitro o 10 mililitros de mi muestra y me lo llevo a un matraz de 50 mililitros. 236 00:38:57,550 --> 00:39:02,369 Ahora, cuando yo mida, voy a obtener un resultado que probablemente esté dentro de este intervalo. 237 00:39:02,869 --> 00:39:08,650 Pues genial, calculo la concentración y luego la multiplico por el inverso de la dilución que he hecho. 238 00:39:08,650 --> 00:39:14,949 Si he diluido 1.5, multiplicaré por 5, porque mi muestra real está 5 veces más concentrada 239 00:39:14,949 --> 00:39:27,789 que esta que he preparado yo. Esto es un problema facilito porque es de patrón externo, que es el más sencillo, pero muy completo, tiene un poco todo lo que se puede pedir. 240 00:39:27,789 --> 00:39:50,070 Se podría pedir también el límite de detección, que en este caso ¿qué haríamos? Hacernos aquí la columnita con la absorbancia calculada, con nuestra I, calcularíamos la desviación de los residuos y ya lo aplicaríamos a nuestra fórmula de límite de detección o de cuantificación. 241 00:39:50,070 --> 00:40:00,849 Acordaos que si os piden límite de detección o límite de cuantificación, la única diferencia es que uno es multiplicar por 3 y el otro por 10, la desviación, pero se calculan igual. 242 00:40:02,110 --> 00:40:08,889 Y también os podrían pedir la sensibilidad del método. En este caso, como ya tenemos hecha nuestra recta de calibrado, lo vemos directamente. 243 00:40:09,710 --> 00:40:17,449 La sensibilidad del método es 0,15 ppm, que es la pendiente de mi recta de calibrado. 244 00:40:17,449 --> 00:40:20,809 vale, el ejercicio 2 245 00:40:20,809 --> 00:40:23,150 si de este no ha habido dudas 246 00:40:23,150 --> 00:40:25,349 igual no lo hacemos porque es muy muy parecido 247 00:40:25,349 --> 00:40:27,329 a ver 248 00:40:27,329 --> 00:40:29,769 vale 249 00:40:29,769 --> 00:40:32,789 nos dice, nos da unos datos 250 00:40:32,789 --> 00:40:34,630 y nos pide que obtengamos la ecuación 251 00:40:34,630 --> 00:40:36,110 de la recta de calibrado 252 00:40:36,110 --> 00:40:40,869 lo mismo, tenemos una concentración 253 00:40:40,869 --> 00:40:42,150 tenemos una señal 254 00:40:42,150 --> 00:40:45,289 pares x y, nos metemos en la calculadora 255 00:40:45,289 --> 00:40:46,329 y calculamos 256 00:40:46,329 --> 00:40:54,889 la A, la B y la R al cuadrado. Después nos dice que calculemos la concentración de etanol 257 00:40:54,889 --> 00:41:02,150 en la muestra diluida. Nos está dando una muestra de la que hemos tomado 5 mililitros 258 00:41:02,150 --> 00:41:08,510 y la hemos diluido 50. O sea, hemos hecho una dilución 1-10 y nos ha dado una absorbancia 259 00:41:08,510 --> 00:41:17,369 de 0,310. ¿Qué tendremos que hacer? Meter el 0,310 como Y en la recta de calibrado que 260 00:41:17,369 --> 00:41:24,449 hemos calculado previamente y despejar la X. Y esa X que obtengamos va a ser la concentración 261 00:41:24,449 --> 00:41:30,190 de esta disolución que yo acabo de preparar con mi muestra de la diluida. Para saber cuál 262 00:41:30,190 --> 00:41:35,010 es la concentración que yo tenía en mi muestra antes de diluirla, tendré que multiplicar 263 00:41:35,010 --> 00:41:41,650 por 50 y dividir entre 5, o sea, multiplicar por 10. La he diluido 10 veces para saber 264 00:41:41,650 --> 00:41:50,409 la concentración real, multiplico por 10. Determinar la concentración en la muestra 265 00:41:50,409 --> 00:41:55,369 diluida y luego en la muestra original, que es esta multiplicada por 10. Ahora me dice 266 00:41:55,369 --> 00:41:59,969 ¿el método de calibración por patrón externo es adecuado para este análisis? Pues aquí 267 00:41:59,969 --> 00:42:18,369 Podemos decir que en función del efecto matriz, porque cuando tenemos una muestra compleja, como puede ser una bebida alcohólica, si tiene más componentes que puedan afectar a la señal, a lo mejor no es el método más adecuado, 268 00:42:18,369 --> 00:42:31,190 aunque se puede utilizar por su sencillez, por su rapidez, pero sería más adecuado a lo mejor utilizar un método de adiciones estándar que considera el efecto de la matriz, 269 00:42:31,309 --> 00:42:36,389 aunque sea un método más laborioso de realizar. Eso podría ser una respuesta. 270 00:42:36,389 --> 00:42:53,389 Ejercicio 3, lo mismo, es de patrón externo y nos dice, se mide la emisión de sodio en soluciones estándar preparadas a partir de una disolución madre de 100 milimoles por litro de sodio. 271 00:42:53,389 --> 00:43:02,389 Para preparar los patrones se toman alícuotas y se diluyen a 100 mililitros con agua desllamizada y se obtiene la siguiente tabla de datos. 272 00:43:02,389 --> 00:43:13,550 Entonces, me están dando, aquí ojo, cuidado, porque no me están dando las concentraciones, sino el volumen de la disolución madre que estoy tomando para hacer esas disoluciones, ¿vale? 273 00:43:15,590 --> 00:43:30,650 ¿Por qué digo esto? Porque en este caso, vale, como son 100 y 100, va a dar lo mismo, pero si yo tengo una disolución madre de 80 milimoles por litro y lo llevo a 100 mililitros de agua, 274 00:43:30,650 --> 00:43:36,789 como representéis el volumen de disolución madre, en vez de la concentración os sale todo mal, ¿vale? 275 00:43:36,789 --> 00:43:45,010 Lo que tenemos que representar para hacer una recta de calibrado es siempre concentración en el eje de las X y señal en el eje de las Y. 276 00:43:45,010 --> 00:43:51,489 O sea, mis pares XY que yo meto en la calculadora son siempre concentración frente a señal, ¿vale? 277 00:43:51,909 --> 00:43:53,469 Entonces, ¿qué es lo primero que hago aquí? 278 00:43:54,670 --> 00:43:59,010 Volumen 1 por concentración 1 es igual a volumen 2 por concentración 2. 279 00:43:59,010 --> 00:44:17,130 me calculo una nueva columna que sea concentración de sodio, ¿vale? En este caso, la primera, añado 0 mililitros de la disolución madre, solo echo agua en el matraz, mi absorbancia es 0, ¿vale? 280 00:44:17,130 --> 00:44:40,070 En esta, ¿qué concentración tengo? Pues volumen 1 por concentración 1 es igual a volumen 2 por concentración 2, así que concentración 2, que es esta de aquí, es volumen 1, 5 mililitros por concentración 1, 100 milimoles por litro, partido por 100 mililitros, que me sigue dando 5. 281 00:44:40,070 --> 00:44:50,989 En este caso, este ejercicio estaba hecho un poco por si alguien se equivocaba que le saliesen los mismos datos, pero siempre, siempre, siempre hay que representar concentración frente a absorbancia. 282 00:44:51,849 --> 00:45:01,929 Entonces, ¿aquí qué es lo que haríamos? Pues lo primero, nos calculamos las concentraciones y una vez que tenemos concentración frente a absorbancia, hacemos nuestra recta de calibrado. 283 00:45:01,929 --> 00:45:13,969 Tendremos los parámetros, y es igual a BX más A, y nos dice que nuestra muestra problema tiene una intensidad de 30,8 unidades arbitrarias de absorbancia. 284 00:45:14,530 --> 00:45:25,110 Pues meteremos nuestro 30,8 en nuestra recta de calibrado como Y, despejaremos la X y con eso tendremos la concentración de nuestra muestra. 285 00:45:25,110 --> 00:45:29,210 y ya eso es lo que te pedí 286 00:45:29,210 --> 00:45:31,010 este también era muy sencillito 287 00:45:31,010 --> 00:45:34,210 lo habéis hecho para ver si nos da el mismo resultado 288 00:45:34,210 --> 00:45:35,670 por ahí 289 00:45:35,670 --> 00:45:47,480 la resta del blanco antes de hacer la curva 290 00:45:47,480 --> 00:45:50,960 siempre en los de patrón externo 291 00:45:50,960 --> 00:45:54,300 y es la buena práctica hacerlo 292 00:45:54,300 --> 00:45:56,840 así que en los de patrón externo siempre 293 00:45:56,840 --> 00:45:59,179 en los otros no 294 00:45:59,179 --> 00:46:15,800 Porque realmente en adiciones estándar, como no estamos teniendo nunca un cero, no es tan sencillo porque estamos emulando el efecto de la matriz, pero en los de patrones externos sí. 295 00:46:15,800 --> 00:46:33,599 ¿Vale? Entonces, vale, ahora ya vamos a adiciones estándar. Que acordaos que adiciones estándar, vamos a poner un segundín el dibujo, esto es patrón interno, vamos a poner el gráfico para recordarlo. 296 00:46:34,159 --> 00:46:41,980 Acordaos que cuando tenemos adiciones estándar, lo que tenemos es siempre para la misma cantidad de muestra, 297 00:46:41,980 --> 00:46:46,579 o sea, tenemos una serie de matraces, en este caso estamos considerando cuatro, 298 00:46:47,000 --> 00:46:55,719 cogemos cuatro matraces, en uno echamos la muestra, en el siguiente echamos una cantidad de disolución patrón, 299 00:46:55,840 --> 00:47:00,039 en el siguiente más cantidad, en el siguiente más cantidad y enrasamos con agua. 300 00:47:00,039 --> 00:47:13,980 O sea, realmente lo que estamos haciendo es un calibrado como el que hacíamos de patrones externos, o sea, añadiendo de una disolución madre cada vez mayor cantidad, haciéndola más concentrada, pero también añadiendo siempre la misma cantidad de nuestra muestra. 301 00:47:13,980 --> 00:47:21,019 Al final, como llevamos los matraces al mismo volumen, la concentración de la muestra siempre va a ser la misma. 302 00:47:22,320 --> 00:47:32,519 Entonces, acordaos, misma cantidad de muestra, volúmenes crecientes o concentraciones crecientes de mi patrón. 303 00:47:32,519 --> 00:47:54,420 Y acordaos también que el patrón es del mismo analito que la muestra que yo quiero analizar. Si estoy evaluando potasio, pues mi disolución madre es de potasio y mi muestra lo que estoy evaluando es el potasio. 304 00:47:54,420 --> 00:48:16,099 ¿Vale? Entonces, nos dice, se mide plomo o es más en agua residual por espectrofotometría de absorción atómica, con la técnica de adicciones estándar, ¿vale? Aquí me lo están diciendo, pero no tendrían, quiero decir, en algunos ejercicios os pueden decir simplemente de cómo se ha realizado el procedimiento, ¿no? 305 00:48:16,099 --> 00:48:36,539 Te dicen, he puesto en cada matraz no sé cuántos mililitros de muestra y luego en el matraz 1, 0 mililitros. En el matraz 2, 10 mililitros, ¿vale? Pero aquí te dice ya expresamente que estás midiendo plomo en agua por adiciones estándar. 306 00:48:36,539 --> 00:48:56,440 Aquí ten en cuenta que no podría restar el cero porque realmente no es que sea un efecto del ruido que tú tengas que te esté afectando el disolvente, es que es tu propia muestra, ¿vale? Porque tu muestra está en todos los matraces, ¿vale? 307 00:48:56,440 --> 00:49:05,500 Entonces, se añaden volúmenes crecientes de un estándar de 5 ppm a una alícuota de la muestra y se mide la absorbancia. 308 00:49:07,639 --> 00:49:15,360 Entonces, tenemos esta absorbancia para esta cantidad añadida. 309 00:49:17,880 --> 00:49:23,039 Obtén la ecuación de calibración y calcula la concentración original de plomo en la muestra. 310 00:49:23,780 --> 00:49:25,280 ¿Vale? Pues, ¿qué tendríamos que hacer aquí? 311 00:49:25,280 --> 00:49:39,420 Lo que tenemos que hacer es una recta de calibrado de la concentración añadida de mi estándar frente a la absorbancia. 312 00:49:40,360 --> 00:49:50,780 ¿Vale? ¿Y qué me va a dar? Me va a dar una ecuación, perdón, una recta que cruce con el eje de la 6. 313 00:49:50,780 --> 00:50:11,719 Ese punto es en el que yo emularía que mi muestra se cruza con el eje de las Is, y por lo tanto es igual a cero en la I, y puedo calcular la concentración que solo corresponde a mi muestra y no al patrón que yo he añadido, ¿vale? 314 00:50:11,719 --> 00:50:19,510 o sea, representaría mi concentración añadida frente a la absorbancia. 315 00:50:27,119 --> 00:50:34,849 Esto de aquí lo mismo, me dice que se determina la concentración de cafeína en una bebida energética 316 00:50:34,849 --> 00:50:39,489 mediante montemperatitud de onda cuadrada, lo que os digo que hay veces que he dado más información 317 00:50:39,489 --> 00:50:44,150 que no tenéis ni por qué saber cómo es esta técnica, con un electrode de carbono vitro 318 00:50:44,150 --> 00:50:48,210 y se aplican adiciones estándar a una alícuota fija de la muestra. 319 00:50:48,210 --> 00:50:54,570 Se mide la corriente en microamperios, lo mismo, me da igual lo que sea la corriente de pico, yo sé que es la señal, ¿vale? 320 00:50:55,789 --> 00:51:04,150 Entonces, yo aquí tengo unas concentraciones de cafeína, ¿vale?, añadida y una corriente de pico. 321 00:51:04,510 --> 00:51:15,090 Pues si yo me calculo mi calibrado, vamos a hacer uno aunque sea, tengo concentración añadida. 322 00:51:15,090 --> 00:51:24,710 Yo lo que estoy evaluando es cafeína y lo que estoy haciendo es un patrón, utilizar las adiciones estándar con patrones de cafeína, ¿vale? A mi muestra. 323 00:51:24,889 --> 00:51:32,449 Entonces, concentración añadida cero. Concentración añadida cero no significa que la concentración de cafeína en ese matraz sea cero. 324 00:51:32,449 --> 00:51:34,170 Esa es la concentración de mi muestra 325 00:51:34,170 --> 00:51:36,070 Por eso no se puede restar nada 326 00:51:36,070 --> 00:51:36,670 ¿Vale? 327 00:51:37,289 --> 00:51:38,849 Concentración añadida de cafeína 328 00:51:38,849 --> 00:51:46,429 Aquí 0, 5, 10, 15, 20, 25 y 30 329 00:51:46,429 --> 00:51:46,889 ¿Vale? 330 00:51:46,989 --> 00:51:53,429 Ahora, la señal que me da cada uno de estos matraces 331 00:51:53,429 --> 00:51:55,849 Me da... 332 00:51:58,380 --> 00:52:03,780 4,85... 333 00:52:04,079 --> 00:52:22,550 6,98, 8,92, 11,10, 13,05, 15,22 y 17,30, ¿vale? 334 00:52:22,969 --> 00:52:33,699 Esta es mi X, esta es mi Y, la represento, insertar, gráfico, vale. 335 00:52:33,699 --> 00:52:45,980 Y veis que aquí, si yo esto continuase, tendría un valor que cortaría con el eje de las íes. 336 00:52:45,980 --> 00:52:55,139 Si hiciese una extrapolación de esta línea de aquí, veis que para el valor de concentración cero es la concentración cero de mi patrón añadido, 337 00:52:55,239 --> 00:52:59,599 no la concentración cero en la muestra, porque lo que yo quiero calcular es cuánto tiene mi muestra. 338 00:52:59,599 --> 00:53:27,449 Y veis que da, gráficamente, igual que en los datos, un valor mayor que cero, ¿vale? Entonces, yo tengo aquí mi recta de calibrado, que es, vamos a calcularla, y me dice que es 0,414 por x más 4,85. 339 00:53:27,449 --> 00:53:34,090 ¿Y yo qué quiero hacer? Igualar la Y a 0, ¿vale? El valor absoluto, obviamente. 340 00:53:34,090 --> 00:53:55,429 Entonces, mi resultado de X será 4.85 entre 0.414. 341 00:53:55,429 --> 00:54:05,150 Y esto es igual a 4.85 entre 0.414. 342 00:54:05,869 --> 00:54:08,869 Y esto me da 11,71. 343 00:54:10,190 --> 00:54:11,190 Vale. 344 00:54:13,809 --> 00:54:19,070 11,71 miligramos por litro que estaría por aquí, ¿no? 345 00:54:19,070 --> 00:54:30,869 determinada de protección lineal 346 00:54:30,869 --> 00:54:32,349 que ya lo hemos determinado y calculado 347 00:54:32,349 --> 00:54:34,150 la concentración original de cafeína en la bebida 348 00:54:34,150 --> 00:54:36,289 estaba comprobando que realmente estuviésemos 349 00:54:36,289 --> 00:54:38,510 en el mismo intervalo 350 00:54:38,510 --> 00:54:42,409 vale 351 00:54:42,409 --> 00:54:44,650 pues ya está calculado 352 00:54:44,650 --> 00:54:47,090 y esto lo que sí que tengo que poner son las unidades 353 00:54:47,090 --> 00:54:49,170 que son 354 00:54:49,170 --> 00:54:52,530 miligramos partido por litro 355 00:54:52,530 --> 00:54:54,570 o sea la concentración de mi muestra son 356 00:54:54,570 --> 00:54:57,150 11,7 miligramos 357 00:54:57,150 --> 00:55:13,840 partido por litro de cafeína. Y patrón interno, que es el último tipo de ejercicio que tenemos, 358 00:55:14,000 --> 00:55:19,119 el último tipo de calibrado. Nos dice análisis de benzeno en gasolina por cromatografía 359 00:55:19,119 --> 00:55:25,179 de gases acoplada. Entonces, se mide la condición de benzeno en gasolina usando tolueno como 360 00:55:25,179 --> 00:55:29,199 patrón interno. Acordaos que el patrón interno es una sustancia que utilizamos que tiene 361 00:55:29,199 --> 00:55:36,340 que cumplir ciertos requisitos, que es que tenga una concentración, perdón, unas propiedades 362 00:55:36,340 --> 00:55:41,460 químicas y un comportamiento muy parecido a nuestro analito, pero que no interfiera, 363 00:55:41,579 --> 00:55:47,579 que dé una señal diferente. Entonces, en este caso el benceno es lo que nosotros queremos 364 00:55:47,579 --> 00:55:54,659 cuantificar, es nuestro analito, y utilizamos como patrón interno el tolueno, porque cumple 365 00:55:54,659 --> 00:56:00,619 esos requisitos y nos dice, este nos lo da ya casi hecho, que se obtienen las siguientes 366 00:56:00,619 --> 00:56:07,139 relaciones de áreas, ¿vale? Para, acordaos que del patrón interno siempre añadimos 367 00:56:07,139 --> 00:56:14,500 la misma cantidad, ¿vale? Entonces, para una concentración de benceno de 1, el área 368 00:56:14,500 --> 00:56:19,739 entre el benceno y el tolueno nos da 0,42. Para una concentración del benceno de 2, 369 00:56:19,739 --> 00:56:24,420 el área entre el benceno y el tolueno nos da 0,87 y así sucesivamente. 370 00:56:25,179 --> 00:56:30,440 Ahora nos dicen que la muestra problema tiene una relación de áreas de 3,60 371 00:56:30,440 --> 00:56:33,760 y que calculemos la concentración de benceno de la muestra. 372 00:56:34,639 --> 00:56:37,179 Pues muy fácil, tengo que hacer lo mismo que he estado haciendo hasta ahora. 373 00:56:37,860 --> 00:56:42,000 Esto es mi eje de las X y esto de aquí es mi eje de las Y. 374 00:56:42,000 --> 00:57:01,320 ¿Vale? Nosotros siempre comparamos concentración de patrón de nuestra sustancia de patrón frente a concentración de patrón interno. Eso es el eje de las X y el eje de las Y es área del patrón dividida entre área del patrón interno. 375 00:57:01,320 --> 00:57:12,860 ¿Qué pasa? En este caso se está diciendo solo concentración de benceno, porque al final, como de tolueno, que es el patrón interno, siempre tenemos la misma concentración, esto sería como dividir aquí entre 1, por ejemplo. 376 00:57:13,440 --> 00:57:22,780 ¿Pero qué haríamos? Esto en el eje de las X, esto en el eje de las Y, obtenemos una recta de calibrado e interpolamos este valor de aquí. 377 00:57:22,780 --> 00:57:44,000 ¿Vale? Acordaos que voy a poner también un segundo el dibujito de patrón interno. Para patrón interno, ¿qué teníamos? Tenemos nuestra disolución de patrón de la sustancia que nosotros estamos cuantificando. 378 00:57:44,000 --> 00:57:56,400 Por ejemplo, imaginaos que estamos pontificando, en este caso sería el benceno. Y luego tenemos el patrón interno, que es esa sustancia que tiene propiedades similares, pero nos da una señal independiente. 379 00:57:57,300 --> 00:58:04,000 Entonces, esta de aquí sería nuestra disolución de tolueno. De tolueno, de nuestro patrón interno, estamos poniendo... 380 00:58:04,000 --> 00:58:21,480 Era tolbero el interno, ¿verdad? A ver si estoy liando. Sí. De tolbero siempre la misma cantidad y de benceno, que es lo que yo estoy intentando cuantificar, cantidades crecientes, ¿vale? Acordaos para cuando se haga el calibrado. 381 00:58:21,480 --> 00:58:41,619 Entonces, de todo lo del patrón interno siempre la misma. Sería como dividir esto. Imaginaos que hemos añadido 80 ppm, perdón, 8 ppm de patrón interno. Sería 1 entre 8, 2 entre 8, 5 entre 8. 382 00:58:41,619 --> 00:58:58,039 Pero es que luego la concentración que nos daría sería también entre 8, ¿vale? O sea, como que nos lo podemos ahorrar, que a veces puede sonar un poco confuso, ¿vale? Pero mira, el siguiente precisamente por eso os lo he puesto con todos los datos, ¿vale? 383 00:58:58,039 --> 00:59:20,119 Entonces el último nos dice cuantificación de paracetamol en suero por HPLC, cromatografía de líquida de alta definición con patrón interno. Se analiza la concentración de paracetamol en suero sanguíneo mediante cromatografía líquida de alta eficiencia con detección ultravioleta 245. 384 00:59:20,119 --> 00:59:31,800 Pero esto de aquí a mí me da absolutamente igual, ¿vale? Me importa el análisis instrumental, pero ahora mismo lo único que quiero saber es que es una relación lineal, ¿vale? 385 00:59:32,360 --> 00:59:42,199 Entonces, yo quiero analizar paracetamol, esto sí que me importa. Y el patrón interno que utiliza es ibuprofeno, que asumo, lo estoy utilizando de patrón interno, 386 00:59:42,199 --> 00:59:50,559 Entonces, tiene unas propiedades parecidas al paracetamol y me da una señal distinta, ¿vale? 387 00:59:51,059 --> 00:59:58,400 Y se añade una concentración constante a cada muestra y estándar, o sea, como se hacen los calibrados por patrón interno, ¿vale? 388 00:59:58,980 --> 01:00:07,780 Me dicen que se preparan soluciones estándar de paracetamol con una cantidad fija de 20 miligramos litro de ibuprofeno en cada uno, ¿vale? 389 01:00:07,780 --> 01:00:15,300 O sea, el paracetamol va a ir variando en concentración, pero el ibuprofeno, que es el patrón interno, va a ser siempre 20 miligramos litro. 390 01:00:16,260 --> 01:00:18,119 Y se mide la relación de áreas, ¿ok? 391 01:00:20,619 --> 01:00:25,320 Vale, se prepara una disolución estándar de ibuprofeno a 100 miligramos litro. 392 01:00:25,400 --> 01:00:32,739 Y para cada muestra y para cada estándar se añaden 0,20 mililitros de esta disolución de ibuprofeno a una cantidad fija de muestra 393 01:00:32,739 --> 01:00:36,880 para lograr una concentración final de 20 miligramos por litro de ibuprofeno. 394 01:00:36,880 --> 01:00:45,199 O sea, me está dando de una manera un poco enrevesada la concentración que yo voy a tener en cada uno de mis matraces de ibuprofeno, ¿vale? 395 01:00:46,139 --> 01:00:53,219 Entonces, tengo de paracetamol, tendré 0, 10, 20, 40, tendré unas cantidades distintas. 396 01:00:53,320 --> 01:00:55,219 De ibuprofeno, siempre tengo 20. 397 01:00:55,599 --> 01:00:59,539 Y acordaos que esto de aquí, o sea, esto de aquí es una medición, esta primera línea. 398 01:00:59,760 --> 01:01:01,420 Esto de aquí es otra medición, ¿vale? 399 01:01:01,420 --> 01:01:14,599 O sea, yo tengo mi disolución que tiene 0 de paracetamol y 20 de ibuprofeno, la mido y me da que el área de paracetamol es 0 y el de ibuprofeno es 155.000, ¿vale? 400 01:01:14,860 --> 01:01:25,820 Ahora, la siguiente, la de paracetamol es 10, la de ibuprofeno 20, el área de paracetamol es 74.400 y el de ibuprofeno sigue siendo el mismo, ¿vale? 401 01:01:25,820 --> 01:01:45,739 Entonces, ¿qué tengo que hacer yo ahora? Me tendré que hacer una columna nueva que se llame concentración de paracetamol entre concentración de ibuprofeno, ¿vale? 0 entre 20, 0. 10 entre 20, 0,5. 20 entre 20, 1. 40 entre 20, 2. 60 entre 20, 3. 80 entre 20, 4. Y 100 entre 20, 5. 402 01:01:45,739 --> 01:01:53,139 Me hago una nueva columna y me hago otra columna que se llame área de paracetamol entre área de ibuprofeno. 403 01:01:53,599 --> 01:01:58,980 ¿Cero entre 155.000? Cero. Esto entre esto, esto entre esto. 404 01:01:59,380 --> 01:02:05,739 Y ya tengo dos columnas nuevas, una de relación de concentraciones y otra de relación de áreas. 405 01:02:06,519 --> 01:02:15,119 En el eje de las X tendré la relación de concentraciones y en el eje de las Y la relación de áreas. 406 01:02:15,760 --> 01:02:22,840 me calculo mi ecuación de la recta de calibrado y ya tengo todos los datos. 407 01:02:22,840 --> 01:02:27,840 Me dice ahora, para la muestra problema se toma un mililitro de suero sanguíneo, 408 01:02:28,780 --> 01:02:32,760 se le añaden 0,2 mililitros de la disolución madre de ibuprofeno, 409 01:02:32,940 --> 01:02:35,500 o sea que al final le añado la misma disolución a mi muestra, 410 01:02:35,940 --> 01:02:43,840 la misma concentración de patrón interno a mi muestra que a los demás patrones con los que he calculado la recta. 411 01:02:43,840 --> 01:02:48,699 Y me dice, si obtiene la siguiente relación de áreas, pues ¿qué tengo que hacer? 412 01:02:51,579 --> 01:03:04,800 Hacer la relación de áreas entre el paracetamol y el ibuprofeno va a ser el que mi eje de la cis, mi valor de Y, pues lo meto en mi recta de calibrado y calculo mi X, 413 01:03:04,800 --> 01:03:15,539 que es la concentración de paracetamol, que es lo que yo quiero calcular, dividido entre 20 miligramos litro, que es la concentración de ibuprofeno. 414 01:03:16,980 --> 01:03:28,460 Entonces, obtengo la ecuación de calibrado por regresión lineal, calculo la concentración de paracetamol metiendo la relación de áreas en mi recta de calibrado 415 01:03:28,460 --> 01:03:33,599 y explico por qué es preferible un patrón interno en lugar de un patrón externo. 416 01:03:33,739 --> 01:03:42,880 Y bueno, el patrón interno es un método mucho más tedioso, pero que compensa efectos de la matriz. 417 01:03:42,880 --> 01:03:47,139 Cuando tenemos una técnica que no es muy reproducible, por ejemplo en cromatografía, 418 01:03:47,219 --> 01:03:50,920 que la inyección no siempre es exactamente igual, compensamos esas fluctuaciones 419 01:03:50,920 --> 01:03:55,880 y obtenemos unos resultados que son mucho más precisos. 420 01:03:58,460 --> 01:04:00,460 y