1
00:00:00,000 --> 00:00:11,539
Hoy vamos a hablar sobre los medios de cultivo, que son básicamente los sitios donde vamos a meter las bacterias para que crezcan, ver colonias y poder identificarlos después.

2
00:00:12,919 --> 00:00:25,379
Bueno, primero, ¿qué es un medio de cultivo? Pues un medio de cultivo es básicamente una solución a cosas, es agua, que les metemos toda la comida que necesitan, que son nutrientes tanto esenciales como no esenciales, con factores de crecimiento y otras cosas.

3
00:00:25,379 --> 00:00:28,239
eso al final es como una sopa

4
00:00:28,239 --> 00:00:29,920
entonces tenemos que meterle también

5
00:00:29,920 --> 00:00:31,879
un agar, un gelificante que es el agar

6
00:00:31,879 --> 00:00:33,299
para que tenga esa consistencia

7
00:00:33,299 --> 00:00:35,119
y se pueda gelificar

8
00:00:35,119 --> 00:00:39,939
a ver, la posición del

9
00:00:39,939 --> 00:00:42,060
medio de cultivo va a variar

10
00:00:42,060 --> 00:00:43,320
en función de lo que queremos cultivar

11
00:00:43,320 --> 00:00:44,719
luego os hablaré de los diferentes tipos

12
00:00:44,719 --> 00:00:46,460
pero que básicamente

13
00:00:46,460 --> 00:00:50,899
por ejemplo, no es lo mismo

14
00:00:50,899 --> 00:00:53,420
una bacteria que vive en el océano

15
00:00:53,420 --> 00:00:55,299
que vive en agua con una bacteria que vive en tierra

16
00:00:55,299 --> 00:01:00,299
Entonces tenemos que tener diferentes nutrientes, entonces hay que tener eso en cuenta.

17
00:01:00,299 --> 00:01:06,299
Así que es verdad que hay unos microorganismos como el Mycobacterium leprae, que es el que provoca la lepra,

18
00:01:06,299 --> 00:01:12,299
y el Treponema quadridum, que es el que provoca la sífilis, que todavía no se han podido aislar en un medio de cultivo.

19
00:01:12,299 --> 00:01:16,299
O sea, sabemos que existen, pero todavía no se han podido cultivar, ¿vale?

20
00:01:16,299 --> 00:01:22,299
Bueno, aquí he puesto dos fotos. Este es el hongo Sporotrix. ¿Dónde estoy?

21
00:01:22,299 --> 00:01:24,920
que, bueno, la voy a imitar a poco, pero casi nos va a salir.

22
00:01:25,439 --> 00:01:32,540
Y este, pues, es porque es llamativo, porque es una bacteria que es fluorescente,

23
00:01:32,659 --> 00:01:35,819
entonces, al aplicar otra violeta, pues, se define esa cosa.

24
00:01:37,260 --> 00:01:38,620
Vale, tipos de medios de cultivo.

25
00:01:39,079 --> 00:01:41,739
Entonces, en función de la composición, se pueden diferenciar los tipos.

26
00:01:42,579 --> 00:01:45,760
Vamos a hacer los medios de cultivo, que son definidos sintéticos,

27
00:01:46,519 --> 00:01:49,920
que vienen con un porcentaje determinado,

28
00:01:49,920 --> 00:01:53,040
O sea, es 50% a lo mejor un corsa, por ejemplo, y un mento.

29
00:01:53,659 --> 00:01:55,939
O sea, se sabe exactamente la cantidad que tiene.

30
00:01:56,560 --> 00:01:59,159
Y luego están los complejos, que es como que no sabemos lo que tiene,

31
00:01:59,280 --> 00:02:01,400
que metemos ahí sangre, pero no sabemos lo que tiene realmente.

32
00:02:01,560 --> 00:02:03,480
Es como, pero sabemos que hay que retener ese sitio.

33
00:02:04,439 --> 00:02:07,200
Luego están, en función de la utilización, los generales,

34
00:02:07,260 --> 00:02:11,479
que son los que traemos hoy, que son el FSA y el DHA.

35
00:02:12,620 --> 00:02:16,219
El DHA, por ejemplo, es Brain, Heart, Algarve.

36
00:02:16,219 --> 00:02:20,780
O sea, es cerebro en corazón, o sea, es como un caldo de eso y ya está.

37
00:02:21,960 --> 00:02:25,860
Eso lo general es donde crece la mayoría de microorganismos, o sea, casi todos crecen ahí.

38
00:02:26,159 --> 00:02:33,219
Luego los selectivos son los medios especiales donde es como que permite el crecimiento de unas bacterias,

39
00:02:34,020 --> 00:02:36,240
pero las otras las inhibe, o sea, no crecen.

40
00:02:36,680 --> 00:02:41,240
Entonces como se utilizan selectivamente para aislar un tipo de bacteria.

41
00:02:41,240 --> 00:02:49,240
Luego diferenciales, que es como para diferenciar si un microorganismo es lactosa positivo, bueno, para diferenciar cosas.

42
00:02:49,240 --> 00:02:55,240
Luego del crecimiento, pues como que permite el crecimiento, como más el crecimiento de una bacteria que la de otra.

43
00:02:55,240 --> 00:02:59,240
O sea, ambos crecen, pero una crece más, esta que más.

44
00:02:59,240 --> 00:03:02,240
¿Por qué esa es la cosa?

45
00:03:02,240 --> 00:03:12,240
Básicamente también se puede simplificar en función de tipo. Nosotros trajimos placas Petri con agar, son sólidos.

46
00:03:12,240 --> 00:03:20,240
También se puede trabajar en líquidos, en tubos de ensayo y semisolidos, que es como se mete agar pero poco, entonces como semisolidos.

47
00:03:23,240 --> 00:03:27,240
Este es un ejemplo de un medio, Semedioclet, que no sé por qué tampoco...

48
00:03:27,240 --> 00:03:28,240
¿Le das un toque?

49
00:03:28,240 --> 00:03:28,560
¿Un toque?

50
00:03:28,699 --> 00:03:28,979
Un toque.

51
00:03:29,479 --> 00:03:29,800
Ah, luego.

52
00:03:30,780 --> 00:03:34,060
Vale, pues el medio es un ejemplo de esos medios diferenciales,

53
00:03:34,120 --> 00:03:38,219
pero también es en este caso no selectivo porque crece a todo el mundo,

54
00:03:38,379 --> 00:03:42,460
o sea, todas las bacterias que se meten ahí crecen,

55
00:03:43,039 --> 00:03:45,879
pero sí que se puede diferenciar entre las lactosa positiva y lactosa negativa

56
00:03:45,879 --> 00:03:46,599
en función del color.

57
00:03:47,000 --> 00:03:49,240
Por ejemplo, las azules son diferentes a las amarillas,

58
00:03:49,479 --> 00:03:52,520
entonces se diferencian ahí el tipo de metabolismo que tienen.

59
00:03:52,520 --> 00:04:13,000
Por ejemplo, tenemos una bacteria que se llama Escherichia coli. Escherichia coli, como todo el mundo la conoce, está en todos lados, pero hay una como prepa diferente de Escherichia coli, que es la que causa patógenos, que es la que más nos provoca enfermedades.

60
00:04:13,000 --> 00:04:16,259
y ese medio que está

61
00:04:16,259 --> 00:04:18,220
mencionando Astrapes

62
00:04:18,220 --> 00:04:20,759
es el que se utiliza habitualmente

63
00:04:20,759 --> 00:04:22,740
en un análisis microbiológico de orina

64
00:04:22,740 --> 00:04:24,600
si alguien ha tenido cistitis alguna vez

65
00:04:24,600 --> 00:04:27,060
y ha ido y le han pedido una muestra de orina

66
00:04:27,060 --> 00:04:28,240
y han hecho un cultivo

67
00:04:28,240 --> 00:04:29,819
aunque no le hayan enseñado el cultivo

68
00:04:29,819 --> 00:04:32,540
pues han sentado una placa probablemente de medioclet

69
00:04:32,540 --> 00:04:33,779
es un medio en el que crecen

70
00:04:33,779 --> 00:04:37,160
todos los microorganismos que típicamente causan infecciones de orina

71
00:04:37,160 --> 00:04:40,120
Estas son

72
00:04:40,120 --> 00:04:42,000
placas que hemos hecho nosotros

73
00:04:42,000 --> 00:04:50,680
en prácticas de microbiología, bueno, exactamente ella, y aquí se puede diferenciar entre bacterias

74
00:04:50,680 --> 00:04:56,259
aerobias y anaerobias, aquí con medios de iconos que enseñé antes, esto huele muy mal,

75
00:04:56,360 --> 00:05:04,800
ese clostridium, pues eso huele mal, y este es el que lo paramos, o sea que al final hay

76
00:05:04,800 --> 00:05:05,379
diferentes tipos.

77
00:05:06,100 --> 00:05:11,319
El clostridium, igual que el escherichia coli, es un organismo de agüita intestinal, entonces

78
00:05:11,319 --> 00:05:16,319
cuando fermenta produce volatiles que huelen más mal.

79
00:05:16,319 --> 00:05:21,319
Vale, esto os lo pongo más que nada para que veáis el tema de las resistencias.

80
00:05:21,319 --> 00:05:25,319
Al final eso es lo que tenéis que hacer vosotros, luego lo vais para identificar.

81
00:05:25,319 --> 00:05:29,319
Cada uno de estos puntitos es un antibiótico.

82
00:05:29,319 --> 00:05:36,319
Entonces en la placa nosotros lo metemos en la bacteria y vemos si hay un halo de resistencia.

83
00:05:36,319 --> 00:05:44,319
Esto es un halo de inhibición.

84
00:05:44,319 --> 00:05:47,319
Eso significa que la bacteria en este sitio no crece.

85
00:05:47,319 --> 00:05:51,319
¿Por qué? Porque la está inhibiendo el antimicrobial que tenemos aquí.

86
00:05:51,319 --> 00:05:58,319
¿Qué pasa? Pues que si desarrollas resistencia, por ejemplo, a este antimicrobial, sí que va a crecer en esta zona.

87
00:05:58,319 --> 00:06:01,319
Y eso es lo que hace la diferencia entre una bacteria resistente o no resistente.

88
00:06:01,319 --> 00:06:04,319
Aquí vemos que es resistente a este pero no tanto a este.

89
00:06:04,319 --> 00:06:09,319
qué tal es que aquí, sé que eres sensible a todos.

90
00:06:09,319 --> 00:06:13,319
Claro, esto es una placa Petri, son las que vamos a usar ahora mismo.

91
00:06:13,319 --> 00:06:18,319
Nosotros en nuestro experimento, bueno, pues veis que tiene el medio sólido, el agar,

92
00:06:18,319 --> 00:06:22,319
con todos los nutrientes necesarios para que crezcan los microorganismos,

93
00:06:22,319 --> 00:06:25,319
pero bueno, pues no hay nada, no hay toda esta guarrería.

94
00:06:25,319 --> 00:06:27,319
Esto es el crecimiento microbiano.

95
00:06:27,319 --> 00:06:30,319
Cuando siembras ahí un microorganismo, al principio no lo ves,

96
00:06:30,319 --> 00:06:36,759
Pero después de jugarlo 24 o 48 horas, pues come, crece y desarrolla algo que ves macroscópicamente.

97
00:06:37,180 --> 00:06:41,720
Pueden ser colonias aisladas, que es lo que queremos conseguir hoy, o puede ser un césped.

98
00:06:42,199 --> 00:06:46,879
Lo que llamamos nosotros un césped microbiano, es decir, microbios invadiendo toda la planta.

99
00:06:47,819 --> 00:06:52,500
Estos son pequeños discos de celulosa, como de cartoncito, ¿no?

100
00:06:52,500 --> 00:06:54,300
Son discos de papel de filtro.

101
00:06:54,300 --> 00:07:11,959
Y esta técnica se llama antibiograma y esto es lo que se hace en los servicios de microbiología en los grandes hospitales a partir de los microorganismos que aíslan de los pacientes para ver si el microorganismo es sensible o resistente a los antibióticos.

102
00:07:11,959 --> 00:07:16,040
Y lo que lo determina es precisamente el diámetro de este halo de inhibición.

103
00:07:16,339 --> 00:07:20,620
Y esto al fin y al cabo, este antibiograma que está estandarizado en las comisiones internacionales,

104
00:07:20,680 --> 00:07:27,420
que tiene la normativa, el protocolo y tal, para que salga el mismo resultado aquí que en Tokio o en Atlanta,

105
00:07:28,120 --> 00:07:32,740
esto es exactamente el mismo tipo de ensayo que vamos a hacer nosotros,

106
00:07:33,060 --> 00:07:35,779
pero en lugar de sobrediscos, lo que vamos a poner ahí es bichos vivos,

107
00:07:35,779 --> 00:07:42,779
para ver si alguno de ellos, de casualidad, es capaz de producir este fenómeno de antibiosis.

108
00:07:42,779 --> 00:07:44,779
Lo vamos a ver así.

109
00:07:44,779 --> 00:07:48,779
Hacía modo de anécdota, cuando tuve que hacer un antibiograma en práctica,

110
00:07:48,779 --> 00:07:54,779
que salía mucho más a la definición en ácidos esenciales que en lejía y en alcohol.

111
00:07:54,779 --> 00:08:01,779
Lo cual, estábamos haciendo una prueba de si los ácidos esenciales eran antimicrobianos

112
00:08:01,779 --> 00:08:03,779
y si había más que la lejía y el alcohol.

113
00:08:03,779 --> 00:08:14,420
Efectivamente, esto es una de las grandes maravillas de la naturaleza. Los aceites esenciales salen de las plantas, de lavanda, de romero, de cítrico, lo que sea.

114
00:08:14,879 --> 00:08:25,439
Las plantas llevan evolucionando millones y millones de años para resistir infecciones por parte de bacterias y hongos y producen antimicrobianos no muy potentes,

115
00:08:25,439 --> 00:08:28,139
son antibióticos, son antibióticos de sustancias

116
00:08:28,139 --> 00:08:30,079
y están en los aceites esenciales

117
00:08:30,079 --> 00:08:30,980
son muy ricos en ellas

118
00:08:30,980 --> 00:08:34,139
las otras cosas que he mencionado ya son desinfectantes

119
00:08:34,139 --> 00:08:36,320
no son antibióticos pero sí que son

120
00:08:36,320 --> 00:08:37,700
compuestos que darían

121
00:08:37,700 --> 00:08:40,480
este tipo de comportamiento

122
00:08:40,480 --> 00:08:41,700
bueno, pues para que veáis

123
00:08:41,700 --> 00:08:43,840
porque se ve muy chulo

124
00:08:43,840 --> 00:08:46,000
simplemente como os he hablado

125
00:08:46,000 --> 00:08:47,679
de medios de cultivo, pues introduciros

126
00:08:47,679 --> 00:08:49,480
el medio que vamos a utilizar nosotros aquí

127
00:08:49,480 --> 00:08:51,899
podríamos haber seleccionado cualquier

128
00:08:51,899 --> 00:08:54,019
medio rico, que tuviera

129
00:08:54,019 --> 00:08:58,980
todos los nutrientes necesarios para que crezca cualquier cosa. Pero, de hecho, el éxito

130
00:08:58,980 --> 00:09:04,220
de este proyecto depende de que nosotros utilicemos un medio que les guste a microorganismos potencialmente

131
00:09:04,220 --> 00:09:09,059
productores de antibióticos. Claro, a priori no lo sabemos. Entonces, lo que hemos utilizado

132
00:09:09,059 --> 00:09:15,840
es un medio muy general y un medio que su composición es tripticasa soja. ¿Qué significa

133
00:09:15,840 --> 00:09:23,659
esto? Pues básicamente sabéis que la soja, que es rica en proteínas, es un hidrolizado

134
00:09:23,659 --> 00:09:25,100
de las proteínas de soja

135
00:09:25,100 --> 00:09:26,860
como si hiciéramos una sopa de soja

136
00:09:26,860 --> 00:09:28,960
y hidrolizaramos esas proteínas

137
00:09:28,960 --> 00:09:31,919
entonces esto es un medio que es muy rico en aminoácidos

138
00:09:31,919 --> 00:09:33,960
que son nutrientes esenciales

139
00:09:33,960 --> 00:09:35,200
para los microorganismos

140
00:09:35,200 --> 00:09:37,240
como fuente de nitrógeno, como fuente de carbono

141
00:09:37,240 --> 00:09:39,840
es decir, que es un medio rico que tiene de todo

142
00:09:39,840 --> 00:09:41,659
pero lo hemos diluido 10 veces

143
00:09:41,659 --> 00:09:43,059
respecto a lo que se suele usar

144
00:09:43,059 --> 00:09:44,299
este medio se llama TSA

145
00:09:44,299 --> 00:09:48,980
lo hemos diluido 10 veces

146
00:09:48,980 --> 00:09:50,139
porque los bichos del suelo

147
00:09:50,139 --> 00:09:51,440
son muy poco exigentes

148
00:09:51,440 --> 00:09:53,039
se llama oligotrofo

149
00:09:53,039 --> 00:09:56,919
Es decir, como que no les gusta la comida en abundancia, se agobian.

150
00:09:57,419 --> 00:09:59,360
Entonces es mejor dársela en pequeña dosis.

151
00:09:59,480 --> 00:10:03,820
Y así además evitamos que los que son muy glotones nos invadan la placa muy rápidamente.

152
00:10:03,940 --> 00:10:08,519
Y les damos margen a estos oligotrofos, a estos microorganismos que van a ser los que crecen despacio,

153
00:10:08,600 --> 00:10:10,980
los que más nos interesan, les damos tiempo a crecer.

154
00:10:11,299 --> 00:10:14,039
Entonces vais a utilizar TSA al 10%.

155
00:10:14,039 --> 00:10:14,740
Inhalar.