1
00:00:00,000 --> 00:00:24,300
Importante de aquí, las funciones de las proteínas, ¿vale? Entonces, ahora seguro que muchas de estas funciones ya os suenan un poco más. El otro día vimos que, ¿os acordáis? Los anticuerpos que eran proteínas, los anticuerpos eran las moléculas que el cuerpo genera, el organismo genera para defenderse de un antígeno.

2
00:00:24,300 --> 00:00:36,000
El antígeno era el patógeno, que podía ser una bacteria, un virus. Los anticuerpos son proteínas y por eso son de tipo defensivo, defensivas.

3
00:00:38,409 --> 00:00:46,890
Ahora os sonará también más la ADN polimerasa. Esta ya la conocéis más de la síntesis del ADN. Esta tiene función enzimática.

4
00:00:47,890 --> 00:01:04,930
¿Os acordáis también? La función estructural tenía, por ejemplo, el colágeno. El colágeno o la queratina también tiene función estructural. Y luego, por ejemplo, de transporte, sabemos la hemoglobina que transporta el oxígeno de la sangre.

5
00:01:04,930 --> 00:01:21,209
Vale, entonces de estas funciones tenéis que saber alguna de ellas, ¿vale? Os puede caer en alguna pregunta de test, os puede caer algo de esto, de funciones de las proteínas.

6
00:01:21,209 --> 00:01:24,950
Bueno, aquí tenéis una autoevaluación

7
00:01:24,950 --> 00:01:27,870
que ya está, yo creo que ya la hicimos

8
00:01:27,870 --> 00:01:33,900
Vale, bien

9
00:01:33,900 --> 00:01:36,120
Otra cosa importante también de

10
00:01:36,120 --> 00:01:39,180
bueno, esto ya lo sabemos, ¿no?

11
00:01:39,180 --> 00:01:41,540
Las proteínas están formadas por aminoácidos

12
00:01:41,540 --> 00:01:43,840
Bueno, pues tenemos que saber

13
00:01:43,840 --> 00:01:47,700
la fórmula de estos aminoácidos, ¿no?

14
00:01:47,700 --> 00:01:51,159
Cómo están formados por un grupo ácido, el COOH

15
00:01:51,159 --> 00:01:53,420
y por un grupo amino

16
00:01:53,420 --> 00:02:13,949
Y esta sería la parte común, bueno, con el hidrógeno de aquí, esto sería la parte común de todos los aminoácidos y luego saber también que lo que diferencia unos aminoácidos de otros es el radical, el grupo este R, el radical, ¿vale?

17
00:02:13,949 --> 00:02:29,870
Importante también de los aminoácidos, que al tener un grupo ácido y un grupo básico, pues se comportan con, o sea, tienen carácter anfótero, es decir, que pueden actuar como ácidos o como bases.

18
00:02:29,870 --> 00:02:35,590
como ácidos, pues perderán este protón de aquí

19
00:02:35,590 --> 00:02:37,490
al reaccionar con una base

20
00:02:37,490 --> 00:02:41,490
y se quedará este grupo como C o doble enlace O o menos

21
00:02:41,490 --> 00:02:47,129
y como bases, pues al reaccionar con un ácido

22
00:02:47,129 --> 00:02:50,669
se quedará este grupo de aquí como NH3+.

23
00:02:50,669 --> 00:02:53,750
Entonces, esto es carácter anfótero.

24
00:02:54,069 --> 00:02:56,789
Pueden reaccionar como ácidos o como bases.

25
00:02:56,789 --> 00:03:13,550
Ahora, importante también, si os acordáis, hay un determinado pH, el número de cargas positivas como negativas es igual y ese es el punto isoeléctrico.

26
00:03:14,270 --> 00:03:22,009
Y a esta molécula de aquí se le llama, o sea, se dice que se encuentra en forma de ión dipolar o suiterión.

27
00:03:22,009 --> 00:03:39,530
Entonces, cuando tenemos el mismo número de cargas positivas como negativas, a ese pH se llama punto isoeléctrico y a esta molécula de aquí se le llama ión dipolar o suiterión.

28
00:03:39,530 --> 00:03:59,139
Y ahora, cuando el pH es ácido, el aminoácido va a tener carga positiva. ¿Por qué va a tener carga positiva? Porque este NH2 de aquí se va a convertir en medio ácido en NH3+.

29
00:03:59,139 --> 00:04:14,719
Y ahora, el medio básico, pues el aminoácido va a tener carga negativa. ¿Por qué? Porque el medio básico, este grupo de aquí, va a estar como C doble enlace O o menos.

30
00:04:14,719 --> 00:04:53,209
¿Vale? Bien.

31
00:04:53,209 --> 00:05:03,310
grupo metilo, un CH3. Pues esos son grupos R-A polares, alifáticos y A polares. Y estos

32
00:05:03,310 --> 00:05:10,529
son algunos ejemplos. La glicina solamente tiene un grupo, o sea, el R es un hidrógeno

33
00:05:10,529 --> 00:05:16,430
solamente. Este sería el más sencillo de todos los aminoácidos, la glicina. Luego

34
00:05:16,430 --> 00:05:40,910
Polalanina, bueno, yo no me lo sé, no os voy a preguntar fórmula el aminoácido valina, yo os diré, pues a lo mejor si la valina tiene como grupo RCH3, este es un aminoácido alifático, bueno, lo pondré en forma de test, pero bueno, más o menos, sería algo así.

35
00:05:40,910 --> 00:05:56,750
Este aminoácido es alifático, es aromático, es polar. Esto lo tenéis que saber. Estos son alifáticos. La glicina, la lalina, la prolina, la valina, la leucina, la isoleucina, la metionina.

36
00:05:56,750 --> 00:06:11,750
Y luego tenemos los que tienen en el grupo R un grupo aromático, aromático es un ciclo de 6 átomos de carbono y esta sería el...

37
00:06:13,750 --> 00:06:26,129
Como esto lo tenéis vosotros, si estáis con el ordenador pues ampliándolo vosotros a la vez que lo amplio yo, porque es que no sé cómo compartir esto.

38
00:06:26,750 --> 00:06:47,370
Vale, entonces tenemos grupos apolares alifáticos, que serían, por ejemplo, CH3 o CH2CH3, serían estos de aquí, los aromáticos, que son los que ya os acabo de comentar.

39
00:06:47,370 --> 00:07:00,290
Y después tenemos los grupos en los que tienen R polares, los radicales que sean polares, pero además sin carga. Y estos serían la serina, la treonina, la cisteína.

40
00:07:00,290 --> 00:07:21,089
Por ejemplo, la serina. En el radical tiene CH2OH, pues esto es un grupo polar, pero es sin carga. Es CH2OH, esa es la serina.

41
00:07:21,089 --> 00:07:41,589
Y luego, pueden haber también grupos polares, pero cargados positivamente. Por ejemplo, la lisina. Por la lisina, si nos vamos al cuadro en el que tenemos los aminoácidos, la lisina tiene 4 CH2 y luego tiene un NH2.

42
00:07:41,589 --> 00:07:49,910
Pues la lisina es un aminoácido que es polar y que va a tener carga positiva.

43
00:07:50,350 --> 00:07:54,290
Como tiene aquí un NH2, va a tener carga positiva.

44
00:07:57,480 --> 00:08:03,339
Luego, los aminoácidos con grupos R cargados negativamente, por ejemplo, aspartato y glutamato.

45
00:08:04,019 --> 00:08:08,899
Pues estos, por ejemplo, son el, aquí tenemos el aspartato, que es igual que el ácido aspártico,

46
00:08:08,899 --> 00:08:12,920
y que tiene en el grupo R un CH2, COOH.

47
00:08:13,860 --> 00:08:19,339
O el ácido glutámico, que en el grupo R tiene CH2, CH2, COOOH.

48
00:08:19,980 --> 00:08:26,100
Pues estos dos aminoácidos son aminoácidos polares y con carga negativa.

49
00:08:30,829 --> 00:08:34,830
Entonces, bueno, aquí también tenéis una autoevaluación, que esta ya la hicimos.

50
00:08:37,480 --> 00:08:47,669
Vale, pues vamos a pasar al siguiente punto, que son los péptidos.

51
00:08:47,669 --> 00:08:54,669
O sea, ya aquí empezamos a ver cómo se forman las proteínas.

52
00:08:56,009 --> 00:09:04,870
Entonces, los aminoácidos se unen uno con otro y se forman lo que se llaman péptidos.

53
00:09:05,049 --> 00:09:08,129
Si se unen dos aminoácidos, pues sería un dipéptido.

54
00:09:08,669 --> 00:09:12,309
Si son tres aminoácidos, un tripéptido y así hasta polipéptido.

55
00:09:12,309 --> 00:09:20,789
entonces si se unen menos de 10 aminoácidos se llama oligopéptido

56
00:09:20,789 --> 00:09:27,429
y cuando se unen ya muchos aminoácidos se denomina polipéptido

57
00:09:27,429 --> 00:09:37,490
y para formar una proteína se forma cuando tenemos más de 50 aminoácidos

58
00:09:37,490 --> 00:09:45,649
O también se puede llamar proteína cuando tenemos masas moleculares mayor de 10.000

59
00:09:45,649 --> 00:09:53,610
Entonces esto es importante, menos de 10 aminoácidos, oligopéptido

60
00:09:53,610 --> 00:09:57,429
Más de 10 aminoácidos, polipéptido

61
00:09:57,429 --> 00:10:01,570
Y cuando ya es más de 50 ya hablamos de proteínas

62
00:10:01,570 --> 00:10:09,419
Y ahora otra cosa importante es que cuando se unen dos aminoácidos

63
00:10:09,419 --> 00:10:25,919
La unión se produce por el grupo ácido de un aminoácido y el grupo amino del otro aminoácido.

64
00:10:27,299 --> 00:10:33,879
Así se desprende una molécula de agua y se forma el enlace peptídico.

65
00:10:33,879 --> 00:10:38,559
¿Os acordáis? Enlace peptídico. Este es un grupo amida.

66
00:10:39,419 --> 00:10:57,519
Pero con que sepáis que es enlace peptídico. Se une la parte ácida de un aminoácido y el grupo amino del otro aminoácido. Se pierde una molécula de agua y esto se queda unido por medio de un enlace peptídico.

67
00:10:57,519 --> 00:11:05,110
Bueno, pues así es como se forman las proteínas

68
00:11:05,110 --> 00:11:11,450
Ahora, ¿qué es lo que ocurre?

69
00:11:11,549 --> 00:11:14,429
Que las proteínas, claro, se van uniendo a los aminoácidos

70
00:11:14,429 --> 00:11:20,230
Y por lo tanto, al final, los péptidos o las proteínas

71
00:11:20,230 --> 00:11:25,970
Lo que tienen es, en un extremo, tienen un grupo amino, un NH2

72
00:11:25,970 --> 00:11:29,110
Y en el extremo final tienen un grupo ácido

73
00:11:29,110 --> 00:11:33,090
O sea, igual que los aminoácidos, lo que pasa es que en medio

74
00:11:33,090 --> 00:11:40,169
pues tienen muchas uniones de aminoácidos. Vale, pues para nombrar una proteína se nombra

75
00:11:40,169 --> 00:11:48,570
primero por el grupo amino, por el N terminal y el último aminoácido sería el que tiene

76
00:11:48,570 --> 00:12:03,570
el grupo ácido. Vale, entonces otra cosa importante, claro, como tenemos grupo amino

77
00:12:03,570 --> 00:12:09,429
y grupo ácido, pues las proteínas también van a tener comportamiento ácido básico

78
00:12:09,429 --> 00:12:14,309
igual que los aminoácidos y por lo tanto tienen también carácter anfótero.

79
00:12:14,690 --> 00:12:16,809
Pueden actuar como ácidos o como bases.

80
00:12:24,960 --> 00:12:28,600
Bueno, aquí nos preguntaban si sabía representar este péptido.

81
00:12:30,740 --> 00:12:33,139
Vale, esto yo creo que ya lo hicimos.

82
00:12:40,100 --> 00:12:42,879
Vale, pues ahora ya pasamos a las proteínas.

83
00:12:43,940 --> 00:12:47,519
Vamos a ver qué es lo más importante de las proteínas.

84
00:12:50,860 --> 00:12:54,320
Bueno, pues cosas importantes de las proteínas.

85
00:12:54,500 --> 00:13:11,139
Pues, vale, esto ya lo hemos dicho, son uniones de aminoácidos. Mirad aquí esta frase, cada proteína se forma siguiendo las instrucciones contenidas en el ADN, el material genético de la célula.

86
00:13:11,340 --> 00:13:23,720
Esta frase ahora ya la entenderéis mejor. Estas instrucciones son las que determinan cuáles de los 20 aminoácidos se incorporan a la proteína y en qué orden relativo o secuencia lo hacen.

87
00:13:23,720 --> 00:13:36,340
Entonces, a partir de los 20 aminoácidos, pues se van a formar unas proteínas u otras, a partir de la combinación de esos 20 aminoácidos.

88
00:13:37,700 --> 00:13:47,600
Ahora, estas proteínas, para entender su estructura, se describen cuatro niveles estructurales.

89
00:13:47,600 --> 00:14:01,340
Lo primero sería la estructura primaria. La estructura primaria es simplemente el orden y la secuencia de qué aminoácidos tiene esa proteína y qué orden, qué secuencia tiene.

90
00:14:02,159 --> 00:14:16,700
Esa sería la estructura primaria. Y dependiendo de cómo sea esa estructura primaria, pues luego va a tener una forma, esa proteína va a tener una forma tridimensional u otra.

91
00:14:17,600 --> 00:14:26,299
Y si se modifica un aminoácido, pues eso puede dar lugar a que la estructura sea diferente, la estructura tridimensional.

92
00:14:27,940 --> 00:14:36,539
Entonces, estructura primaria, simplemente tipo de aminoácidos y número de aminoácidos y la secuencia, el orden que sigue.

93
00:14:37,539 --> 00:14:42,980
Dependiendo de cómo sea esta secuencia de aminoácidos, las proteínas van a tener unas funciones u otras.

94
00:14:42,980 --> 00:14:48,299
Ahora, esta secuencia de aminoácidos, ¿qué pasa?

95
00:14:48,299 --> 00:14:58,299
Que se forman enlaces, dentro de la misma cadena se forman unos enlaces por puentes de hidrógeno

96
00:14:58,840 --> 00:15:04,360
Que estos enlaces por puente de hidrógeno, ¿os acordáis?

97
00:15:04,899 --> 00:15:12,139
Los enlaces por puentes de hidrógeno podían ser entre oxígeno e hidrógeno o entre nitrógeno e hidrógeno

98
00:15:12,139 --> 00:15:23,840
Pues aquí se unen, o sea, se forman puentes de hidrógeno entre el hidrógeno del amino, de un aminoácido, y el oxígeno del carboxilo, de otro aminoácido.

99
00:15:24,980 --> 00:15:37,600
Entonces, ¿qué pasa? Que esta estructura primaria que la teníamos así alargada, pues de repente se forma una unión entre un ácido de por aquí y un grupo amino de otro aminoácido cercano.

100
00:15:37,600 --> 00:15:55,220
En concreto es en el cuarto aminoácido siguiente. ¿Y esto a qué da lugar? Pues a la estructura secundaria, que podía ser de estos dos tipos. Bueno, yo os conté un tipo más, el de colágeno, pero aquí con que os aprendáis estos dos tipos es suficiente.

101
00:15:55,220 --> 00:16:03,960
entonces teníamos que estas uniones, si las uniones son entre un aminoácido y uno cercano

102
00:16:03,960 --> 00:16:09,019
que es el cuarto siguiente, como os digo, pues se nos forma la estructura alfa hélice

103
00:16:09,019 --> 00:16:10,600
que sería esto de aquí

104
00:16:10,600 --> 00:16:19,740
ahora, si las uniones por puentes de hidrógeno se forman entre un aminoácido de aquí

105
00:16:19,740 --> 00:16:33,259
y un aminoácido que está mucho más lejano, pues eso lo que nos va a dar lugar es a la estructura secundaria de hoja plegada, o beta, que sería esta de aquí.

106
00:16:34,899 --> 00:16:40,879
Estas son uniones por puentes de hidrógeno, pero entre un aminoácido y otro que está bastante más lejano.

107
00:16:40,879 --> 00:16:55,320
Entonces, estructura secundaria alfa-hélice o hoja plegada o beta o con formación beta.

108
00:16:55,320 --> 00:17:20,940
Vale, entonces estas son las dos estructuras secundarias, pero claro, ahora una vez que tenemos así la proteína, ¿qué pasa? Pues que esta proteína adquiere otro tipo de estructura que es la estructura terciaria.

109
00:17:20,940 --> 00:17:40,180
Y esta estructura terciaria también hay de dos tipos. La estructura terciaria ya es la estructura tridimensional. Y teníamos dos tipos de estructura terciaria. Puede ser con formación filamentosa o con formación globular.

110
00:17:40,180 --> 00:17:58,779
La filamentosa es una sola estructura secundaria. Son proteínas que tienen un solo tipo de estructura secundaria. Por ejemplo, la hélice de colágeno. Aquí todas las cadenas tienen conformación de alfa-hélice.

111
00:17:58,779 --> 00:18:07,880
Y en cambio, las proteínas que tienen conformación globular son las que tienen varios tipos de estructura secundaria.

112
00:18:11,480 --> 00:18:25,880
Aquí no hay dibujo, pero sería en los apuntes que os di en las presentaciones, en un dibujo teníais lo que era la estructura globular, la conformación globular.

113
00:18:25,880 --> 00:18:33,640
globular. Entonces, en la conformación globular tenemos una parte de la cadena que tiene conformación

114
00:18:33,640 --> 00:18:40,279
de alfa hélice, otra parte de la cadena que tiene conformación beta, otra parte que es

115
00:18:40,279 --> 00:18:46,059
conformación al azar, no tiene ninguna estructura secundaria. Luego sigue la cadena y ahí otra

116
00:18:46,059 --> 00:18:53,779
vez vuelve a tener estructura de conformación de alfa hélice y así se van aglomerando,

117
00:18:53,779 --> 00:19:00,779
van formando un glóbulo, la propia cadena va formando un glóbulo.

118
00:19:02,759 --> 00:19:09,920
Y ahora, importante, pues las que tienen proteínas con conformación filamentosa

119
00:19:09,920 --> 00:19:13,000
son insolubles en agua y en disoluciones salinas.

120
00:19:13,619 --> 00:19:18,220
Y en cambio, las de conformación globular son solubles en agua y en disoluciones salinas.

121
00:19:20,940 --> 00:19:24,619
Importante también, pues algún ejemplo de esta, de conformación filamentosa,

122
00:19:24,619 --> 00:19:34,279
el colágeno y la queratina. Y ahora, de conformación globular, importantes, por ejemplo, serían las enzimas.

123
00:19:35,700 --> 00:19:45,359
Las enzimas tienen conformación globular. Otras serían las globulinas, las albúminas, histonas, protaminas.

124
00:19:45,359 --> 00:20:06,599
Y, por último, se pueden unir varias proteínas con diferentes conformaciones, dando lugar a la estructura cuaternaria.

125
00:20:06,599 --> 00:20:15,339
Esta estructura cuaternaria no la tienen todas las proteínas, solamente la tienen algunas

126
00:20:15,339 --> 00:20:25,880
Entonces, la estructura cuaternaria es la unión de varias cadenas proteicas que se llaman protómeros

127
00:20:25,880 --> 00:20:32,619
Por ejemplo, la hemoglobina sí que tiene estructura cuaternaria

128
00:20:32,619 --> 00:20:37,619
La hemoglobina está formada por cuatro cadenas distintas que forman un tetrámero.

129
00:20:39,920 --> 00:20:42,839
Entonces, las estructuras son importantes.

130
00:20:44,000 --> 00:20:47,059
Estructura primaria, secundaria, terciaria y cuaternaria.

131
00:20:47,319 --> 00:20:48,579
Las tenéis que tener claras.

132
00:20:49,799 --> 00:20:51,799
Por aquí también tenéis una autoevaluación.

133
00:21:00,210 --> 00:21:01,890
Vale, ahora teníamos las enzimas.

134
00:21:02,930 --> 00:21:08,009
Las enzimas ya hemos dicho que son proteínas y que son de tipo globular.

135
00:21:08,009 --> 00:21:29,730
O sea, estructura terciaria globular. Son importantes porque son biocatalizadores. ¿Por qué son biocatalizadores? Son biocatalizadores porque catalizan reacciones que ocurren en las células.

136
00:21:29,730 --> 00:21:49,130
Por esto es lo de bio, bio porque ocurren en las células y catalizadores catalizan reacciones que ocurren en las células. Y ya vimos lo que era un catalizador. Un catalizador lo que hace es disminuir la energía de activación de una reacción química.

137
00:21:50,029 --> 00:21:56,970
La energía de activación, ya vimos que es esto de aquí, es el paso anterior a formar los productos.

138
00:21:58,309 --> 00:22:03,890
Los sustratos se transforman en un estado, primero tienen que pasar por un estado de transición.

139
00:22:04,869 --> 00:22:09,390
Aquí en rojo tenemos que aumentar la energía hasta este estado de transición.

140
00:22:09,390 --> 00:22:21,150
Ahora, si añadimos una enzima, el mecanismo ya es diferente y ya el estado de transición ya no es, no se necesita tanta energía para llegar a este estado de transición.

141
00:22:21,809 --> 00:22:30,009
Pues esto es lo que hacen las enzimas, disminuyen la energía de activación de una reacción que ocurre en una célula.

142
00:22:30,009 --> 00:22:51,799
Y vimos también que el mecanismo es que la enzima se une a un sustrato, o sea, a una molécula, por ejemplo, la lactasa que se une a la lactosa, a este sustrato.

143
00:22:51,799 --> 00:23:09,880
Se une enzima-sustrato, se modifica el sustrato dando lugar a productos y, por último, la enzima queda libre por un lado y los productos de la reacción por otro lado quedan libres.

144
00:23:10,119 --> 00:23:15,180
Entonces, esta enzima puede volver a reaccionar con un sustrato.

145
00:23:15,180 --> 00:23:42,930
Entonces, importante también de las enzimas es que la velocidad depende de la concentración de sustrato que está presente en el medio.

146
00:23:42,930 --> 00:24:04,710
En la presentación que os puse, os puse una gráfica en la que se veía cómo a baja concentración de sustrato la velocidad aumenta, al aumentar la concentración de sustrato, hasta llegar a un punto, hasta llegar a una concentración de sustrato en la que la velocidad ya se mantiene constante.

147
00:24:04,710 --> 00:24:18,509
¿Por qué? Porque todas las enzimas ya se han saturado de sustrato y ya no puede aumentar más la velocidad, ya no hay enzimas que puedan reaccionar con ese sustrato, entonces la velocidad ya se mantiene constante.

148
00:24:18,509 --> 00:24:33,250
Entonces, las enzimas, o sea, la velocidad a la que reaccionan las enzimas depende de la concentración de sustrato que esté presente.

149
00:24:33,250 --> 00:25:05,390
Y ahora, otra cosa importante, nosotros habíamos visto que estas enzimas son proteínas globulares, o sea que estas enzimas forman un glóbulo y ahora en este glóbulo hay una zona que se llama sitio activo, que sería esto de aquí, sitio activo y este sitio activo es diferente para unas enzimas de otras.

150
00:25:05,650 --> 00:25:23,369
Y este sitio activo es el que va a hacer que esta enzima, por ejemplo, pueda reaccionar con este sustrato de aquí, porque este sustrato encaja aquí, encaja en este hueco, en este sitio activo de la enzima.

151
00:25:24,230 --> 00:25:30,289
Ahora, la enzima modifica a este sustrato, veis aquí ya tenemos dos productos, el azul y el rojo,

152
00:25:31,130 --> 00:25:37,190
y como decíamos antes, la enzima queda libre y aquí tendríamos los productos de la reacción.

153
00:25:38,289 --> 00:25:43,750
Bueno, pues por esto se dice que la reacción enzima-sustrato es específica.

154
00:25:44,670 --> 00:25:45,609
Específica, ¿vale?

155
00:25:45,609 --> 00:25:51,809
Tenemos dos modelos de definir esta especificidad, el modelo de llave-cerradura

156
00:25:51,809 --> 00:25:56,009
y ahora se utiliza más el de encaje inducido.

157
00:25:56,829 --> 00:26:08,710
Pero los dos vienen a decir lo mismo, que la enzima va a tener un hueco, un sitio activo que va a ser específico para un sustrato determinado.

158
00:26:14,539 --> 00:26:20,180
Y luego tenemos también los nombres de las enzimas, bueno esto yo lo amplié un poquito,

159
00:26:20,180 --> 00:26:29,400
pero de aquí lo que tenéis que saber es que las enzimas, el nombre familiar es el terminado en asa.

160
00:26:31,079 --> 00:26:38,140
La enzima que modifica la lactosa es la lactasa, la que modifica la maltosa es la maltasa.

161
00:26:39,079 --> 00:26:42,059
Todas las que terminan en asa son enzimas.

162
00:26:43,400 --> 00:26:47,920
Por ejemplo, aquí tenéis la ADN polimerasa, que esta ya os suena más.

163
00:26:47,920 --> 00:26:52,680
Es la enzima que cataliza la reacción de polimerización del ADN.

164
00:26:57,259 --> 00:27:03,839
Ahora, importante también qué función o qué actividad tienen algunas de las enzimas.

165
00:27:05,259 --> 00:27:07,299
Esto en realidad es fácil, ¿no?

166
00:27:07,359 --> 00:27:13,720
Porque las oxidorreductasas, pues catalizan reacciones de oxidación-reducción, redox.

167
00:27:14,960 --> 00:27:18,599
Transferasas, pues catalizan reacciones de transferencia de grupos activos.

168
00:27:18,599 --> 00:27:28,180
activos. Hidrolasas catalizan reacciones de hidrólisis. Hidrólisis suele ser porque

169
00:27:28,180 --> 00:27:33,559
a partir de un polímero, de una macromolécula, esa macromolécula se rompe y se quedan los

170
00:27:33,559 --> 00:27:42,000
monómeros. Y estas son hidrolasas. Liasas son las que catalizan reacciones a las que

171
00:27:42,000 --> 00:27:50,660
eliminan agua, CO2 o amoníaco y se forma un doble enlace. Estas quizás sean un poco menos

172
00:27:50,660 --> 00:27:59,039
intuitivas. Luego están las isomerasas. Estas también son un poquito más complicadas. Actúan

173
00:27:59,039 --> 00:28:11,019
sobre moléculas y dando lugar a diferentes tipos de isómeros. Es fácil ver de isomerasas,

174
00:28:11,019 --> 00:28:20,690
pues se obtienen isómeros. Isómeros, no sé si habréis visto de química orgánica,

175
00:28:21,910 --> 00:28:30,230
pero son moléculas que tienen la misma estructura química, pero que pueden tener diferente posición de sus...

176
00:28:31,630 --> 00:28:36,230
Bueno, hay varios tipos de isómeros, de isómeros de función...

177
00:28:37,190 --> 00:28:41,430
Vale, esto no me voy a meter en ello porque es complicarlo.

178
00:28:43,230 --> 00:28:53,329
Y luego las ligasas son las que catalizan reacciones de la síntesis, la degradación o síntesis de enlaces fuertes.

179
00:28:53,670 --> 00:28:58,230
Ligasas, o sea, ligasas que unen enlaces.

180
00:28:59,190 --> 00:29:05,170
Entonces, óxido reductasas, transferasas, hidrolasas, liasas, isomerasas y ligasas.

181
00:29:08,349 --> 00:29:12,730
Aquí teníamos esta autoevaluación, que yo creo que también la hicimos.

182
00:29:12,730 --> 00:29:30,470
Es bueno que hagáis también estas autoevaluaciones, que os puede servir para luego el examen. Aunque no sea exactamente así como lo pongan, pero puede ser algo parecido.

183
00:29:30,470 --> 00:29:58,660
Vale, pues luego vimos también cómo había que separar y extraer estas proteínas. Y había varios tipos para extraer las proteínas.

184
00:29:58,660 --> 00:30:11,920
Entonces, teníamos la lisis celular, la destrucción mecánica y la congelación-descongelación

185
00:30:11,920 --> 00:30:17,920
Bueno, pues de aquí tenéis que saber un poco lo que es cada método

186
00:30:17,920 --> 00:30:24,240
La lisis, la destrucción y congelar y luego descongelar

187
00:30:24,240 --> 00:30:27,019
De aquí saber estos tres tipos

188
00:30:27,019 --> 00:30:55,660
Bueno, aquí lo único que nos indican es que para manipular las proteínas normalmente se utilizan disoluciones tamponadas y se suele trabajar a bajas temperaturas para que no se degraden estas proteínas.

189
00:30:55,660 --> 00:31:20,970
¿Vale? Importante, claro, se trabaja con disoluciones tamponadas para que no haya cambios de pH y el cambio de pH puede desnaturalizar las proteínas. La desnaturalización era la rotura de todos los enlaces y quedándose la proteína con la estructura primaria.

190
00:31:20,970 --> 00:31:47,789
Luego teníamos cómo podemos saber la concentración que tenemos de proteínas y teníamos también tres métodos. Estos métodos pues tienen que sonar Lowry, Bradford y luego era el método espectrofotométrico.

191
00:31:47,789 --> 00:31:59,950
El espectro fotométrico simplemente era absorber luz ultravioleta, o sea, preparar una disolución en la que tenemos solo proteínas y miramos a ver cuánto absorben.

192
00:32:00,150 --> 00:32:03,329
Y sabemos que las proteínas absorben a 280 nanómetros.

193
00:32:04,410 --> 00:32:09,849
Este sería el método más sencillo y luego teníamos el método de Lowry y el de Bradford.

194
00:32:09,849 --> 00:32:27,569
En estos métodos obteníamos sustancias coloreadas. Por ejemplo, aquí en el de Bradford hacíamos reaccionar nuestras proteínas con este colorante que al reaccionar con las proteínas pasa de color rojo a azul y lo que se hace también es medir en el espectrofotómetro.

195
00:32:27,569 --> 00:32:59,950
Entonces, en las tres técnicas se mide con un espectrofotómetro, se mide luz ultravioleta, bueno, en este caso sería luz visible, luz ultravioleta visible sería en el visible, porque estamos aquí, 595, entonces de aquí eso es saber más o menos cómo es un poquito cada método,

196
00:32:59,950 --> 00:33:06,319
Sobre todo eso que se utiliza un espectrofotómetro.

197
00:33:09,240 --> 00:33:11,519
Aquí también tenéis una autoevaluación.

198
00:33:18,190 --> 00:33:24,309
Esto sería cómo se mide la concentración de proteínas.

199
00:33:29,460 --> 00:33:32,640
Y ahora pasamos a fraccionar esas proteínas.

200
00:33:34,920 --> 00:33:36,960
Y teníamos también varios métodos.

201
00:33:37,079 --> 00:33:40,660
Teníamos diálisis, cromatografía y electroforesis.

202
00:33:40,660 --> 00:33:47,099
Bueno, pues de aquí tendríais que saber un poco lo que es la diálisis

203
00:33:47,099 --> 00:33:56,779
Y luego tendríais que saber de la cromatografía

204
00:33:56,779 --> 00:33:59,619
Pues un poquito que es la cromatografía

205
00:33:59,619 --> 00:34:06,440
Cómo separar mediante una fase estacionaria y una fase móvil

206
00:34:06,440 --> 00:34:10,019
Cómo separar los componentes de una muestra

207
00:34:10,019 --> 00:34:18,739
y luego saber de los tres tipos de cromatografía que se ven

208
00:34:18,739 --> 00:34:23,539
que son filtración en gel, intercambio iónico y afinidad

209
00:34:23,539 --> 00:34:26,480
pues saber un poco la diferencia entre unas de otras

210
00:34:26,480 --> 00:34:30,840
filtración en gel, separamos las proteínas según su tamaño

211
00:34:30,840 --> 00:34:38,119
teníamos aquí unos polímeros que tienen una serie de oquedades

212
00:34:38,119 --> 00:34:42,619
y se van quedando retenidas las proteínas de menor tamaño.

213
00:34:43,340 --> 00:34:45,539
Y entonces así podemos separar por tamaños.

214
00:34:46,619 --> 00:34:51,420
La de intercambio iónico, pues aquí separamos las proteínas según su carga.

215
00:34:52,420 --> 00:34:59,340
En la fase estacionaria poníamos una fase estacionaria que tuviera carga negativa, por ejemplo,

216
00:35:00,019 --> 00:35:05,119
y entonces ahí se quedarían retenidas las proteínas que tengan carga positiva.

217
00:35:05,119 --> 00:35:08,039
Y así se pueden separar unas de otras.

218
00:35:08,119 --> 00:35:38,019
Y por último la de afinidad, la cromatografía de afinidad. Aquí lo que podíamos separar era, por ejemplo, aquí vais a entender mejor esta porque podríamos tener aquí una serie de anticuerpos como fase estacionaria y añadimos en la fase móvil los antígenos y si se quedan unidos es que hay reacción.

219
00:35:38,119 --> 00:35:47,489
También podría ser en reacciones encima-sustrato.

220
00:35:56,239 --> 00:35:59,300
Aquí tenéis otra autoevaluación.

221
00:36:02,250 --> 00:36:12,030
Aquí dice si el principio del método de separación es la interacción entre moléculas de uno de los componentes de la muestra y moléculas unidas al soporte, hablamos de...

222
00:36:12,030 --> 00:36:14,849
Pues sería cromatografía de afinidad.

223
00:36:14,849 --> 00:36:39,480
Entonces, esto sería cromatografía y luego teníamos cromatografía. Aquí no está explicada, pero sí que tenéis que saber lo que es la cromatografía en capa fina.

224
00:36:39,480 --> 00:36:58,440
Que eso lo tenéis en las presentaciones y también hicimos la práctica de cromatografía en capa fina. Si os acordáis teníamos una fase móvil que era una mezcla de disolventes, tenemos una fase estacionaria que es el gel de sílice.

225
00:36:58,440 --> 00:37:01,139
y entonces de ahí tenéis que saber

226
00:37:01,139 --> 00:37:03,059
pues por ejemplo

227
00:37:03,059 --> 00:37:04,840
si tenemos, estamos separando

228
00:37:04,840 --> 00:37:06,139
una serie de aminoácidos

229
00:37:06,139 --> 00:37:07,800
pues como

230
00:37:07,800 --> 00:37:10,599
porque unos quedan retenidos

231
00:37:10,599 --> 00:37:12,659
más abajo y en cambio otros suben más

232
00:37:12,659 --> 00:37:14,420
a lo largo de la

233
00:37:14,420 --> 00:37:16,559
fase estacionaria

234
00:37:16,559 --> 00:37:18,619
a lo largo del gel de sílice

235
00:37:18,619 --> 00:37:21,039
como se calculan los RF

236
00:37:21,039 --> 00:37:23,019
esas cosillas

237
00:37:23,019 --> 00:37:24,840
tenéis que saber, eso lo tenéis

238
00:37:24,840 --> 00:37:26,119
en las presentaciones

239
00:37:26,119 --> 00:37:44,320
Y por último teníamos la electroforesis. La electroforesis sé que es un poquito más complicada. De la electroforesis pues tenéis que saber lo que es el concepto.

240
00:37:44,320 --> 00:37:53,980
O sea, separamos las proteínas y las separamos mediante aplicación de un campo eléctrico.

241
00:37:54,579 --> 00:38:13,340
Entonces, tenéis que saber, por una parte, cómo la fase sólida de esta técnica sería el gel de poliacrilamida.

242
00:38:14,320 --> 00:38:39,960
Entonces tenéis que saber cómo se prepara este gel de poliacrilamida, pues a ver por ejemplo la función del TEMED, acordaros que este era el catalizador y luego teníamos el persulfato, que por aquí ahora no lo veo, aquí, el persulfato y el TEMED,

243
00:38:39,960 --> 00:38:56,780
Estos son los que van a iniciar y aceleran el proceso, el persulfato y el temen. Estos son los que van a hacer que la acrilamida, si os acordáis, de acrilamida pasemos a poliacrilamida.

244
00:38:56,780 --> 00:39:06,119
Y luego teníamos la bisacrilamida, que es la que va a unir esas cadenas de poliacrilamida.

245
00:39:08,559 --> 00:39:14,159
Entonces tenéis que saber cómo se forma el gel de poliacrilamida.

246
00:39:23,960 --> 00:39:30,000
También saber que la acrilamida y la bisacrilamida son neurotóxicos,

247
00:39:30,000 --> 00:39:35,980
entonces que hay que trabajar en campana, con guantes, mascarilla, etc.

248
00:39:36,280 --> 00:39:43,420
Y luego ya una vez que se forma ya el polímero, ya el polímero ya no es neurotóxico,

249
00:39:43,980 --> 00:39:49,260
lo único que hay que tener cuidado pues si acaso queda algún monómero por ahí libre.

250
00:39:55,000 --> 00:40:03,559
De esta electroforesis también saber que una vez que, o sea, por un lado preparamos el gel de poliacrilamida

251
00:40:03,559 --> 00:40:39,099
Y ahora, por otro lado, teníamos que añadir el SDS para cargar a la proteína.

252
00:41:02,400 --> 00:41:21,380
Vale, pues aquí se ha quedado esto atascado, a ver, sí, ahora.

253
00:41:22,699 --> 00:41:28,619
Vale, entonces lo que hacíamos era utilizar un reactivo que se llamaba el SDS

254
00:41:28,619 --> 00:41:34,980
y este reactivo lo que hacía era primero desnaturalizar la proteína,

255
00:41:34,980 --> 00:41:39,719
es decir, se nos va a quedar la proteína con la estructura primaria

256
00:41:39,719 --> 00:41:45,639
y aparte de eso, lo que hace es cargar a la proteína con carga negativa.

257
00:41:47,179 --> 00:41:53,380
Por lo tanto, todas las proteínas se van a desplazar cuando nosotros apliquemos el campo eléctrico,

258
00:41:53,980 --> 00:41:57,260
todas las proteínas se van a desplazar hacia el polo positivo

259
00:41:57,260 --> 00:42:04,599
y se van a desplazar unas más que otras dependiendo de su masa molecular.

260
00:42:04,599 --> 00:42:24,579
Por lo tanto, cuando nosotros estamos haciendo una electroforesis en condiciones desnaturalizantes, es decir, utilizamos el SDS para desnaturalizar la proteína y para cargarla negativamente, lo que hacemos es separar a estas proteínas por su masa molecular.

261
00:42:24,579 --> 00:42:31,119
y ¿cuál es la diferencia? O sea, ¿cuáles se van a mover más o menos?

262
00:42:31,860 --> 00:42:38,800
Pues como el gel de poliacrilamida es un gel que tiene una serie de orificios,

263
00:42:39,500 --> 00:42:46,360
las que tengan menor masa molecular pues van a pasar a través del gel y van a aparecer más abajo

264
00:42:46,360 --> 00:42:51,800
y las que tengan mayor masa molecular van a quedar más retenidas y quedarán más arriba.

265
00:42:54,130 --> 00:43:00,849
Además, en este gel de poliacrilamida lo que hacemos es poner un patrón, un patrón de proteínas,

266
00:43:00,849 --> 00:43:10,829
del que tenemos varias proteínas con diferentes masas moleculares y que se van a ir moviendo también cuando apliquemos el campo eléctrico

267
00:43:10,829 --> 00:43:13,849
y que luego vamos a ver como una serie de bandas.

268
00:43:13,849 --> 00:43:41,250
Ahora, con estas bandas que nos aparecen aquí, lo que hacemos es representar el logaritmo de la masa molecular frente a la distancia que recorren.

269
00:43:41,250 --> 00:43:52,840
Y así, comparando, pues vamos a saber, por ejemplo, esta proteína, ¿qué masa molecular tiene?

270
00:43:55,000 --> 00:43:56,940
Esta es la electroforesis.

271
00:43:57,659 --> 00:44:02,400
Importante, los reactivos que se necesitan para formar el gel de poliacrilamida.

272
00:44:04,639 --> 00:44:11,719
Y luego, para las proteínas, que hay que cargarlas con carga negativa, que se utiliza el SDS.

273
00:44:11,719 --> 00:44:17,800
y cómo se mueven del polo negativo hacia el polo positivo cuando se aplica el campo eléctrico.

274
00:44:22,320 --> 00:44:24,420
Pues esta sería la electroforesis.

275
00:44:26,179 --> 00:44:31,639
Y luego ya tendríamos los puntos que vimos el otro día de identificación.

276
00:44:32,440 --> 00:44:35,559
Ya tenemos nuestras proteínas, ahora queremos identificarlas.

277
00:44:36,920 --> 00:44:40,599
Este método de Edman, este no lo estudiéis.

278
00:44:40,599 --> 00:44:43,940
Este no lo he explicado, así que este no va a entrar.

279
00:44:44,960 --> 00:44:47,320
El que sí que es importante es el MALDITOF.

280
00:44:48,420 --> 00:44:53,920
Si os acordáis, está basado en una técnica de espectrometría de masas.

281
00:44:53,920 --> 00:45:01,300
Y lo que hacíamos era aplicar un láser a nuestra muestra y hacer que nuestra muestra se cargue positivamente.

282
00:45:01,820 --> 00:45:03,599
Y luego se analizan estos iones.

283
00:45:09,360 --> 00:45:22,449
Y luego teníamos la identificación de antígenos y anticuerpos.

284
00:45:22,449 --> 00:45:36,869
anticuerpos, acordaros que eran los ensayos inmunológicos, acordaros que la reacción

285
00:45:36,869 --> 00:45:45,670
antígeno-anticuerpo es específica, cada antígeno reacciona con un anticuerpo y la

286
00:45:45,670 --> 00:46:04,030
La técnica más importante de hacer estos ensayos inmunológicos es la técnica ELISA, que es una técnica en la que tenemos varios tipos.

287
00:46:04,030 --> 00:46:08,110
teníamos el ISA directo, el ISA indirecto

288
00:46:08,110 --> 00:46:09,190
y el ISA sandwich

289
00:46:09,190 --> 00:46:13,070
y lo que es importante

290
00:46:13,070 --> 00:46:16,449
vale, aquí ya está

291
00:46:16,449 --> 00:46:19,329
bueno, esta sería la reacción que se especifica

292
00:46:19,329 --> 00:46:21,230
antígeno, anticuerpo

293
00:46:21,230 --> 00:46:23,449
importante

294
00:46:23,449 --> 00:46:26,849
eso que hay cuatro tipos

295
00:46:26,849 --> 00:46:31,030
no, cuatro no, tres tipos

296
00:46:31,030 --> 00:46:33,269
directa, indirecta

297
00:46:33,269 --> 00:46:52,550
Y sandwich, importante, pues que lo que se hace es que al anticuerpo se le une una enzima y a esa enzima luego se le va a adicionar un sustrato que va a reaccionar con esa enzima y va a dar un compuesto coloreado.

298
00:46:52,550 --> 00:46:57,590
Y este compuesto coloreado es el que se va a determinar mediante espectrofotometría.

299
00:46:57,590 --> 00:47:08,590
Entonces, la técnica Malditov es la técnica de espectrometría de masas y, en cambio, en la técnica Elisa se utiliza la espectrofotometría.

300
00:47:16,059 --> 00:47:28,139
Y luego, acordaros también en el Bradford, Lowry y el espectrofotométrico, en esos la técnica que se utiliza es la espectrofotometría también.

301
00:47:28,139 --> 00:47:38,820
Vale, pues esto sería así lo más importante de proteínas.

302
00:47:43,539 --> 00:47:49,110
Bueno, luego tenéis también aquí la bioinformática.

303
00:47:51,469 --> 00:47:56,110
De aquí, pues importante saber que la página está del NCBI.

304
00:47:56,110 --> 00:48:21,389
NCBI, National Center for Biotechnology Information y importante que suene este, el BLAST, que es para comparar secuencias de una proteína que hemos obtenido, pues para compararlas con una base de datos.