1 00:00:01,780 --> 00:00:12,300 Bien, pues vamos a ver esta parte del tema, muy importante en el análisis microbiológico de las aguas, que es la preparación de los medios de cultivo. 2 00:00:12,699 --> 00:00:18,660 Vamos a ver algunas generalidades de los medios de cultivo que más se utilizan especialmente para el cultivo de bacterias. 3 00:00:19,879 --> 00:00:23,160 Vamos a seguir este orden, que es el que tenemos en la presentación. 4 00:00:24,420 --> 00:00:31,460 Haré una pequeña introducción, sobre todo de algunos conceptos que son importantes, que tenemos que tener en cuenta. 5 00:00:31,780 --> 00:00:46,039 Y este segundo apartado es muy importante, cómo se clasifican los medios de cultivo según su composición, según el modo de preparación, su consistencia y su utilización. 6 00:00:46,039 --> 00:01:16,019 Bien, en el tercer apartado vamos a ver una descripción de los medios de cultivo que más se utilizan, más habituales, sobre todo en el cultivo de bacterias y haré especial hincapié, aunque lo veremos más adelante, cuáles son los medios de cultivo que se utilizan sobre todo para el recuento y para la identificación y detección de coliformes e indicadores microbiológicos de contaminación. 7 00:01:16,040 --> 00:01:37,040 fecal de las aguas, sobre todo las aguas de consumo, el consumo humano. Esta última parte es una parte de práctica más procedimental que está relacionada con las prácticas de laboratorio que ya estamos haciendo en el laboratorio de análisis microbiológico. 8 00:01:37,040 --> 00:01:53,799 Bien, pues vamos a comenzar. Fijaos, una fase muy importante del análisis microbiológico es poder, in vitro, en el laboratorio, crecer y cultivar los microorganismos que queremos detectar. 9 00:01:53,799 --> 00:02:09,599 Sabemos que los microorganismos crecen fácilmente, especialmente las bacterias, crecen con mucha facilidad siempre y cuando se den todas las condiciones necesarias para su crecimiento, para su división celular. 10 00:02:09,599 --> 00:02:34,240 Desde la atmósfera adecuada, presión parcial de oxígeno, humedad relativa, temperatura óptima, ya sabemos que hay bacterias que crecen a 37 grados, hay bacterias, que es la gran mayoría, pero hay bacterias, como veremos, las heterótrofas, que crecen a 22 grados, otras crecen a 26 grados, incluso las hay que crecen a 42 grados, etc. 11 00:02:34,240 --> 00:02:51,020 Hay que conocer muy bien la temperatura óptima de crecimiento para poder facilitar esas condiciones en el laboratorio. Y especialmente qué elementos y qué compuestos nutritivos necesitan esas bacterias, qué nutrientes necesitan esas bacterias para poder crecer. 12 00:02:52,020 --> 00:03:20,180 Una vez que establecemos el cultivo, las bacterias, a partir de una sola bacteria, una sola bacteria sobre el medio de cultivo, si las condiciones son las adecuadas, se van a generar por bipartición, por división mitótica, bueno, división mitótica no, por bipartición, la división celular prokaryota, se van a generar miles y miles de millones de individuos. 13 00:03:20,180 --> 00:03:28,360 individuos a partir de esa bacteria que cayó en ese punto del medio de cultivo. Estas células 14 00:03:28,360 --> 00:03:35,979 creciendo y acumulándose van a dar lugar a lo que ya conocemos como las colonias. Aquí tenemos 15 00:03:35,979 --> 00:03:43,219 varios ejemplos de colonias de diferentes bacterias. Ya veis que la morfología de las colonias, no 16 00:03:43,219 --> 00:03:48,960 tenemos tiempo de estudiarla, pero ya veis que en la morfología de las colonias ya se puede prever 17 00:03:48,960 --> 00:03:51,719 y sospechar qué bacteria es la que está creciendo. 18 00:03:52,699 --> 00:03:56,659 Daos cuenta que algunas, por ejemplo esta y esta, no tienen pigmentos. 19 00:03:56,960 --> 00:03:59,000 Estas colonias son pigmentadas. 20 00:04:00,180 --> 00:04:04,819 Estas además son colonias muy redonditas, con los bordes muy suaves. 21 00:04:05,199 --> 00:04:06,680 Además tienen un cierto brillo. 22 00:04:06,879 --> 00:04:09,039 Estas son mucho más planas, estas de aquí. 23 00:04:09,500 --> 00:04:12,400 Estas colonias son grandes, estas colonias son mucho más pequeñas. 24 00:04:13,340 --> 00:04:17,660 Pero la idea fundamental es que cualquiera de estas colonias que tenemos aquí 25 00:04:17,660 --> 00:04:33,959 Y procede de una única bacteria que cuando sembramos el medio de cultivo cayó en ese punto del medio de cultivo y a partir de ella se han generado miles de millones de individuos, ¿de acuerdo? 26 00:04:33,959 --> 00:04:48,519 Por lo tanto, son bacterias clónicas. Esto es importante que lo tengamos en cuenta. De ahí el nombre de colonia. Las llamamos colonias porque todas ellas genéticamente son clones que derivan de aquella bacteria. 27 00:04:48,519 --> 00:05:06,939 Muy bien. Esto es importante y me detengo un poquito porque ya veremos más adelante que para el recuento, para saber cuántas bacterias o cuántos coliformes, cuántos enterococos, por ejemplo, hay en una muestra de agua, tenemos que cuantificarlas. 28 00:05:06,939 --> 00:05:34,500 Y para poder cuantificarlas, vamos a contar colonias. ¿Y cómo es posible que contemos colonias y sabemos el número de bacterias? Porque sabemos que cada colonia procede de una sola bacteria. Si yo en el recuento cuento lo que llamamos 50 UFCs, 50 colonias, unidades formadoras de colonias, yo sé que en aquella muestra había 50 bacterias. Y de eso puedo estar totalmente seguro. 29 00:05:34,500 --> 00:05:39,019 ¿De acuerdo? Bien, este concepto de colonia es importante 30 00:05:39,019 --> 00:05:43,899 Bien, como ya fuimos viendo en temas anteriores 31 00:05:43,899 --> 00:05:46,379 bueno, en otras partes del tema 32 00:05:46,379 --> 00:05:48,560 la gran mayoría de las bacterias 33 00:05:48,560 --> 00:05:51,220 en este caso de interés clínico 34 00:05:51,220 --> 00:05:53,720 de interés clínico en microbiología clínica 35 00:05:53,720 --> 00:05:56,279 pero de interés clínico también en el análisis de agua 36 00:05:56,279 --> 00:06:00,139 porque si analizamos, hacemos un análisis microbiológico 37 00:06:00,139 --> 00:06:03,899 para poder detectar posibles patógenos de interés 38 00:06:03,899 --> 00:06:28,199 Todas ellas son quimio-heterótrofas desde un punto de vista nutricional. Por tanto, necesitan compuestos orgánicos y a partir de estos compuestos orgánicos van a obtener la energía y la fuente de carbono para todos los procesos que necesitan, procesos metabólicos y fisiológicos que necesitan para su crecimiento y expansión. 39 00:06:28,199 --> 00:06:46,920 Bien, ¿qué sería entonces un medio de cultivo? Pues un medio de cultivo lo podríamos definir como, ya decíamos, como una especie de disolución, un sustrato, una solución de nutrientes que permite el desarrollo de estos microorganismos. 40 00:06:46,920 --> 00:07:01,160 Si estos microorganismos necesitan compuestos orgánicos, pues hay que saber cuáles son todos estos compuestos orgánicos que necesitan, algunos son inorgánicos, para poder juntarlos todos y crear medios de cultivo. 41 00:07:01,160 --> 00:07:21,420 Por tanto, es como una mezcla, puede ser simple o puede ser más compleja, como veremos ahora, una mezcla de nutrientes, especialmente que aportan carbono, que necesitan las bacterias para la síntesis de sus compuestos orgánicos, nitrógeno, azufre y fósforo, ¿de acuerdo? 42 00:07:21,420 --> 00:07:25,860 Y faltaría aquí también el oxígeno, que es muy importante. 43 00:07:27,000 --> 00:07:31,420 Además de todos estos compuestos orgánicos, ya veremos que hay muchos más componentes. 44 00:07:32,079 --> 00:07:42,220 Necesitamos sales, por supuesto, algunos iones metálicos, calcio, magnesio, cofactores, es decir, algunas vitaminas, factores de crecimiento, etc. 45 00:07:43,100 --> 00:07:49,079 Por tanto, ¿qué es un medio de cultivo? No es ni más ni menos que una mezcla, una solución de nutrientes. 46 00:07:49,079 --> 00:07:57,779 que lo vamos a utilizar como sustrato y sobre ese sustrato van a poder crecer nuestras bacterias. 47 00:07:58,779 --> 00:08:02,600 Bien, ¿qué requisitos debe cumplir todo medio de cultivo? 48 00:08:05,839 --> 00:08:12,319 Por un lado, deben ser estériles, por supuesto, si están ya contaminados los medios de cultivo, 49 00:08:12,560 --> 00:08:17,100 entonces no puedo detectar si hay o no hay contaminación en la muestra que me llega al laboratorio. 50 00:08:17,100 --> 00:08:40,659 En segundo lugar, deben estar contenidos en recipientes adecuados, recipientes que mantengan la esterilidad y que sean de fácil manejo. Normalmente, como ya sabemos, o bien vamos a dispensarlo en tubos de cultivo microbiológico o bien en placas Petri. 51 00:08:40,659 --> 00:08:49,940 Tercero, deben poseer todos los nutrientes necesarios para el crecimiento de las bacterias que nos interesan 52 00:08:49,940 --> 00:08:56,659 Y por último, debe contener las condiciones fisicoquímicas adecuadas 53 00:08:56,659 --> 00:09:01,980 En cuanto a pH, en cuanto a humedad, en cuanto a presión osmótica 54 00:09:01,980 --> 00:09:05,080 Es decir, fuerza iónica, concentración de sales 55 00:09:05,080 --> 00:09:08,820 Todas estas condiciones son muy importantes 56 00:09:08,820 --> 00:09:13,820 todos los medios de cultivo deben cumplir estos cuatro requisitos. 57 00:09:15,019 --> 00:09:18,480 Bien, ¿qué tipos de medios de cultivo? 58 00:09:18,860 --> 00:09:20,879 Vamos a ir a las ideas importantes. 59 00:09:22,019 --> 00:09:24,320 Podemos clasificar los medios de cultivo de muchas maneras. 60 00:09:25,100 --> 00:09:27,559 Una primera clasificación es según su composición. 61 00:09:30,259 --> 00:09:32,620 Y según su composición tenemos, por un lado, 62 00:09:32,940 --> 00:09:36,620 lo que llamamos los medios complejos o naturales. 63 00:09:36,620 --> 00:09:53,340 Son los primeros medios de cultivo que se utilizaron. Y esta imagen no está por casualidad. Y es que eran caldos. Caldos hechos a base de extractos vegetales o extractos animales. 64 00:09:54,220 --> 00:10:03,980 Los primeros que se utilizaban eran, pues eso, a partir de carne o a partir de, aunque en mucha menos medida, de extractos vegetales. 65 00:10:04,299 --> 00:10:10,659 El gran problema que tenían estos medios es que es verdad que muchas bacterias podían crecer en estos medios de cultivo, 66 00:10:10,799 --> 00:10:17,639 pero su composición, por supuesto que no es definida, son medios indefinidos. 67 00:10:17,639 --> 00:10:41,039 No conocemos exactamente la concentración de glucosas, de carbohidratos, de lípidos, de proteínas. Por tanto, de un lote de medio complejo a otro lote que producíamos en el laboratorio, no había consistencia, ¿de acuerdo? Y por tanto, no era un método, digamos, muy riguroso. 68 00:10:41,039 --> 00:10:43,340 por tanto 69 00:10:43,340 --> 00:10:46,039 la reproducibilidad era el gran problema 70 00:10:46,039 --> 00:10:48,159 que tenía, claro, yo preparo un caldo 71 00:10:48,159 --> 00:10:49,799 y lo puedo utilizar para muchas veces 72 00:10:49,799 --> 00:10:52,480 porque lo puedo dosificar en alícuotas 73 00:10:52,480 --> 00:10:53,779 cuando se me acaba 74 00:10:53,779 --> 00:10:55,139 tengo que preparar un caldo nuevo 75 00:10:55,139 --> 00:10:58,139 la composición es completamente diferente seguramente 76 00:10:58,139 --> 00:10:59,200 por tanto no 77 00:10:59,200 --> 00:11:01,779 había muchos problemas en reproducir 78 00:11:01,779 --> 00:11:03,779 los resultados, de ahí 79 00:11:03,779 --> 00:11:06,240 que se empezaron a 80 00:11:06,240 --> 00:11:07,980 digamos a diseñar 81 00:11:07,980 --> 00:11:10,399 y a fabricar los medios sintéticos 82 00:11:10,399 --> 00:11:17,440 que son aquellos que contienen en su composición exclusivamente muchas moléculas 83 00:11:17,440 --> 00:11:20,659 y que son directamente asimilables por las bacterias. 84 00:11:20,799 --> 00:11:26,580 Por ejemplo, en lugar de poner proteínas de la carne, se pueden poner directamente los aminoácidos. 85 00:11:27,799 --> 00:11:33,720 La gran ventaja y la gran diferencia con los anteriores es que la composición está perfectamente definida 86 00:11:33,720 --> 00:11:38,279 porque yo peso y yo sé qué cantidad pongo. 87 00:11:38,279 --> 00:11:59,539 Por ejemplo, aquí tenéis un ejemplo, la composición del agarce trimida. Este medio de cultivo, el agarce trimida, se utiliza para el cultivo de pseudomonas, pseudomonas eruginosa, pseudomonas fluorescens, ¿de acuerdo? Tiene este aspecto de aquí. 88 00:11:59,539 --> 00:12:21,279 Y nosotros sabemos, cuando compramos un medio de cultivo de cetrimida, agar cetrimida, sabemos la composición exacta que tiene. Y además nos lo dice el fabricante. De hecho, yo podría comprar pectona, cetrimida, etcétera, etcétera, y fabricarlo yo en el laboratorio. Luego lo esterilizo y ya tendría yo mi medio de cultivo. 89 00:12:21,279 --> 00:12:27,399 Bien, y en tercer lugar tenemos los que llamamos los semisintéticos 90 00:12:27,399 --> 00:12:33,259 Cabe destacar que los anteriores, los sintéticos, son los que más se utilizan actualmente 91 00:12:33,259 --> 00:12:40,679 Sin embargo, algunas bacterias requieren algunos factores de crecimiento específicos, muy específicos 92 00:12:40,679 --> 00:12:43,620 ¿De acuerdo? Para poder desarrollarse in vitro 93 00:12:43,620 --> 00:12:48,159 Es por ello que existen medios que llamamos semisintéticos 94 00:12:48,159 --> 00:12:57,120 que aportan factores de crecimiento, pero tampoco de una forma definida, sino dentro de un extracto 95 00:12:57,120 --> 00:13:03,379 orgánico hidrolizado. Puede ser, por ejemplo, un extracto de levaduras, que no es ni más ni menos 96 00:13:03,379 --> 00:13:11,980 que células fúngicas, levaduras, son hongos unicelulares, machacados. Un extracto heliofilizado, 97 00:13:12,679 --> 00:13:17,600 ¿de acuerdo? O extracto de algunos tejidos, por ejemplo, o infusión, que lo vamos a ver, 98 00:13:17,600 --> 00:13:24,940 O las peptonas, las peptonas son, lo vamos a ver ahora después, bueno, son proteínas digeridas, ¿de acuerdo? 99 00:13:24,940 --> 00:13:28,679 Aquí tenemos un ejemplo del isovitálex, ¿de acuerdo? 100 00:13:29,059 --> 00:13:37,039 Entonces, en este caso, pues tenemos dos gramos de extracto de carne bovina, pero ese extracto, la composición exacta no sabemos muy bien, 101 00:13:37,159 --> 00:13:46,080 cuánta proteína, un hidrolizado ácido de caseína, que es una proteína, almidón sí que sabemos, cuánta hemoglobina ponemos también lo sabemos y cuánto agar. 102 00:13:46,080 --> 00:13:51,039 Pero aquí tenemos este extracto y este hidrolizado que la composición exacta no la sabemos. 103 00:13:51,559 --> 00:13:57,340 Estos son medios semisintéticos y se utilizan, digamos, como para usos muy concretos. 104 00:13:57,860 --> 00:13:59,000 ¿De acuerdo? Bien. 105 00:14:03,200 --> 00:14:07,960 Por último, hay algunas bacterias que no crecen bien en ningún tipo de medio de cultivo. 106 00:14:08,340 --> 00:14:10,860 Lo comento aquí porque es importante que lo conozcáis. 107 00:14:11,480 --> 00:14:16,440 En control de aguas no se utiliza mucho y no es necesario, 108 00:14:16,440 --> 00:14:43,799 Pero quiero que lo conozcamos porque me parece que es importante. Algunas bacterias son, sobre todo aquellas bacterias que son parásitos intracelulares. Son bacterias que no crecen en ningún medio de cultivo porque solo crecen dentro de células vivas. Por tanto, para poderlas cultivar necesitamos establecer un cultivo de células eucariotas e infectarlo. 109 00:14:43,799 --> 00:14:46,820 Este es el caso de las clamidias y las riquetsias 110 00:14:46,820 --> 00:14:50,500 Aquí os he puesto una imagen para que veáis, para poderlas cultivar 111 00:14:50,500 --> 00:14:56,279 Aquí, por ejemplo, tenemos una imagen de células que han sido infectadas con riquetsias 112 00:14:56,279 --> 00:14:58,879 que tienen esta forma de espiralada 113 00:14:58,879 --> 00:15:03,460 Como son parásitos intracelulares, infectamos las células 114 00:15:03,460 --> 00:15:06,559 y aquí dentro de las células las podemos cultivar en el laboratorio 115 00:15:06,559 --> 00:15:07,860 Si no, es imposible 116 00:15:07,860 --> 00:15:11,259 En este caso son clamidias, que son también intracelulares 117 00:15:11,259 --> 00:15:15,500 La siguiente clasificación es según el modo de preparación 118 00:15:15,500 --> 00:15:19,919 y es que podemos preparar el medio de cultivo directamente a partir de la fórmula 119 00:15:19,919 --> 00:15:27,320 Por ejemplo, si tenemos esta fórmula podemos comprar de forma individual todos los componentes 120 00:15:27,320 --> 00:15:31,299 pesar la cantidad adecuada y prepararlo en el laboratorio 121 00:15:31,299 --> 00:15:33,960 Esto no suele ser ya lo habitual 122 00:15:33,960 --> 00:15:41,340 actualmente se suelen comprar o bien los medios deshidratados, liofilizados 123 00:15:41,340 --> 00:15:43,500 tal y como los tenemos en el laboratorio 124 00:15:43,500 --> 00:15:46,980 y a partir de las indicaciones del fabricante 125 00:15:46,980 --> 00:15:49,460 lo preparamos en el laboratorio 126 00:15:49,460 --> 00:15:54,740 o bien ya comprar directamente los medios preparados y esterilizados 127 00:15:54,740 --> 00:15:56,240 en forma ya de placas 128 00:15:56,240 --> 00:15:59,779 y se pueden comprar pues eso, mangas 129 00:15:59,779 --> 00:16:03,840 una manga de 15 placas de agar sangre 130 00:16:03,840 --> 00:16:15,740 Por ejemplo, este sería agarsangre, medio de cultivo. Y ya viene preparado, viene esterilizado y lo único que tenemos que hacer es sembrarlo o sembrar la muestra, una alícuota de la muestra y ponerlo a cultivar. 131 00:16:17,600 --> 00:16:22,879 No suele ser muy habitual, a no ser que sea un laboratorio que mueve una gran cantidad de muestras. 132 00:16:23,580 --> 00:16:30,559 De tal manera que le sale rentable, puede salir rentable comprar ya las placas preparadas y esterilizadas. 133 00:16:30,559 --> 00:16:39,100 Bien, según la consistencia tenemos medios líquidos que clásicamente se les llama caldos 134 00:16:39,100 --> 00:16:46,570 En inglés son broth, lo veremos así como broth 135 00:16:46,570 --> 00:16:56,250 Es un caldo nutritivo, caldo nutritivo compuesto principalmente, la mayoría de ellos, de extracto de carne, peptona, que ya veremos qué es, y agua 136 00:16:56,250 --> 00:17:04,650 ¿Y para qué se suelen utilizar? Pues se suelen utilizar mucho para la obtención del tema 137 00:17:04,650 --> 00:17:13,769 Los medios sólidos, la gran diferencia con los caldos es sencillamente que le añadimos un agente gelificante 138 00:17:13,769 --> 00:17:19,509 Gelificante o solidificante, que nos ayuda a darle consistencia 139 00:17:20,210 --> 00:17:27,509 Los que más se utilizan son o bien la gelatina, esta es de origen animal, la gelatina procede del colágeno 140 00:17:27,750 --> 00:17:37,170 de muchos tejidos animales, especialmente huesos, tendones, ligamentos o el agar-agar. 141 00:17:37,529 --> 00:17:41,210 El que más se utiliza es el agar-agar, que es un polisacárido no ramificado 142 00:17:41,210 --> 00:17:43,710 que procede de algas marinas, etcétera, etcétera. 143 00:17:44,230 --> 00:17:50,349 Muy bien, si a un caldo le añadimos un agente gelificante, agar-agar, por ejemplo, o gelatina, 144 00:17:50,670 --> 00:17:51,849 ya tenemos un medio sólido. 145 00:17:51,849 --> 00:18:14,819 Además tenemos los medios semisólidos que se preparan normalmente a partir de los medios líquidos también y agregando una cantidad pequeña del agente solidificante o gelificante, entre 2 y 4 gramos por litro, muy poquito, de tal manera que no llegan a ser sólidos ni tampoco son líquidos, por supuesto. 146 00:18:14,819 --> 00:18:21,119 Y se estudian, o sea, se utilizan únicamente para el estudio de la movilidad de las bacterias. 147 00:18:21,740 --> 00:18:26,519 Tenemos aquí dos tubos con medio semisólido y los hemos sembrado en picadura. 148 00:18:27,099 --> 00:18:31,460 Aquí tenemos nuestro hilo de siembra, ¿recordáis? Con el hilo de siembra. 149 00:18:31,779 --> 00:18:43,720 Lo hemos esterilizado, cogemos una parte de la muestra, el inóculo, insisto que es el hilo de siembra, no es el asa de siembra, y sembramos por picadura. 150 00:18:43,720 --> 00:19:03,579 Lo introducimos aquí dentro. Si no hay movilidad, la bacteria no es flagelada, solo se observa crecimiento en esta parte donde yo he hecho la incisión. Si hay movilidad, lo que veo es que todo el medio es turbio. Eso significa que la bacteria tiene flagelos y movilidad. 151 00:19:03,579 --> 00:19:25,250 Según su utilización, esta es la clasificación más importante. Según su utilización tenemos medios comunes o generales. ¿Qué son los medios comunes o generales? Pues son medios que contienen los componentes mínimos básicos para que crezca la gran mayoría de las bacterias. 152 00:19:25,250 --> 00:19:47,250 Bacterias que llamamos, digamos, no exigentes, ¿de acuerdo? Que no necesitan requerimientos muy especiales. Un ejemplo es el agar nutritivo o agar común, ¿de acuerdo? Igual que está el agar nutritivo, tenemos el caldo nutritivo, que sería el agar nutritivo sin el agente gelificante. 153 00:19:47,250 --> 00:19:54,609 calificante. ¿Para qué utilizamos a veces estos, se utilizan estos medios? Pues para enriquecer una 154 00:19:54,609 --> 00:20:00,190 muestra y para hacer que las bacterias que hay en esa muestra puedan crecer sin problema y luego 155 00:20:00,190 --> 00:20:06,130 ya las estudiaremos a ver qué bacterias hay. Muy bien, cuando ya tenemos bacterias que son exigentes 156 00:20:06,130 --> 00:20:14,309 lo que necesitamos son medios enriquecidos. La gran mayoría de estos medios enriquecidos proceden 157 00:20:14,309 --> 00:20:19,650 de otros medios que son generales o comunes, a los cuales les hemos añadido una serie 158 00:20:19,650 --> 00:20:26,430 de factores críticos indispensables para el crecimiento de microorganismos, bacterias 159 00:20:26,430 --> 00:20:33,690 que son exigentes. Es decir, si no tienen esos factores, esas bacterias no pueden crecer. 160 00:20:34,450 --> 00:20:39,109 Este enriquecimiento se puede conseguir de muchas maneras. Por ejemplo, en algunos se 161 00:20:39,109 --> 00:20:46,730 pueden añadir suero, suero de la sangre, el suero de la sangre con todos los componentes 162 00:20:46,730 --> 00:20:54,369 y proteínas del suero, o leche, o huevo, un extracto de huevo, o bilis, o ácido tioglicólico. 163 00:20:55,170 --> 00:21:03,230 Todos estos factores, o sea, todos estos productos, muchos derivan de la sangre, pues aportan 164 00:21:03,230 --> 00:21:07,369 factores que son indispensables para muchos organismos, microorganismos que son exigentes. 165 00:21:07,369 --> 00:21:27,910 ¿De acuerdo? Además, a estos medios enriquecidos incluso hay veces que hay que añadirle suplementos artificiales. ¿De acuerdo? Por ejemplo, el agar chocolate, que es este de aquí abajo, y este es el agar sangre. El agar sangre y el agar chocolate añadimos sangre. ¿De acuerdo? 166 00:21:27,910 --> 00:21:49,769 Lo que más nos interesa no es la sangre en sí, es la hemoglobina, ¿de acuerdo? Y los factores de crecimiento que van en la sangre, ¿de acuerdo? Entonces, el agar sangre es porque añadimos sangre tal cual y sangre de carnero. Y el agar chocolate es porque la sangre va hidrolizada, desnaturalizada, ¿de acuerdo? 167 00:21:49,769 --> 00:22:20,190 Entonces, bueno, esto es un ejemplo de estos medios enriquecidos. Aquí, por ejemplo, pues en microbiología clínica, pues se utilizan mucho para el crecimiento de hemófilus. Hemófilus, influenza o para influenza, todas las especies o especies de hemófilus necesitan factores de la coagulación para poder crecer. El factor 5, el factor 10, ¿de acuerdo? Que están presentes en el plasma actual. 168 00:22:20,190 --> 00:22:23,150 medios selectivos 169 00:22:23,150 --> 00:22:24,410 ¿qué son los medios selectivos? 170 00:22:25,230 --> 00:22:26,930 pues los medios selectivos son medios 171 00:22:26,930 --> 00:22:28,869 en los cuales yo voy a poner 172 00:22:28,869 --> 00:22:30,930 componentes que van a 173 00:22:30,930 --> 00:22:32,869 favorecer el crecimiento 174 00:22:32,869 --> 00:22:35,069 de algunas bacterias respecto de otras 175 00:22:35,069 --> 00:22:36,529 por tanto 176 00:22:36,529 --> 00:22:39,170 en estos medios selectivos 177 00:22:39,170 --> 00:22:40,769 yo de alguna manera voy a 178 00:22:40,769 --> 00:22:45,740 seleccionar qué bacterias 179 00:22:45,740 --> 00:22:47,460 van a crecer y cuáles no 180 00:22:47,460 --> 00:22:49,500 muchos de estos 181 00:22:49,500 --> 00:22:51,819 componentes que se añaden a los medios selectivos 182 00:22:51,819 --> 00:22:55,240 facilitan el crecimiento de algunas bacterias 183 00:22:55,240 --> 00:22:58,880 e inhiben activamente el crecimiento de otras. 184 00:23:00,200 --> 00:23:00,960 ¿De acuerdo? 185 00:23:01,240 --> 00:23:04,960 Por ejemplo, un ejemplo es el caldo de selenito. 186 00:23:05,400 --> 00:23:08,240 El caldo de selenito tiene selenito de sodio. 187 00:23:08,740 --> 00:23:11,779 El selenito de sodio, que es una sal de selenio, 188 00:23:12,940 --> 00:23:15,319 inhibe el crecimiento de las gram positivas. 189 00:23:16,500 --> 00:23:19,000 Si yo quiero hacer un estudio de enterobacterias 190 00:23:19,000 --> 00:23:20,339 que son gram negativas, 191 00:23:20,339 --> 00:23:25,349 puedo utilizar el caldo de selenito 192 00:23:25,349 --> 00:23:26,630 pero cuando 193 00:23:26,630 --> 00:23:29,130 cuando quiero estudiar salmonella 194 00:23:29,130 --> 00:23:31,289 de todas las enterobacterias 195 00:23:31,289 --> 00:23:34,630 la única que es capaz de crecer es salmonella 196 00:23:34,630 --> 00:23:37,130 por tanto, el caldo de selenito 197 00:23:37,130 --> 00:23:40,650 me permite inhibir a las que son gran positivas 198 00:23:40,650 --> 00:23:44,589 e inhibir a todas las enterobacterias 199 00:23:44,589 --> 00:23:45,990 que son gran negativas 200 00:23:45,990 --> 00:23:48,349 a excepción de salmonella 201 00:23:48,349 --> 00:23:50,569 por tanto, el caldo de selenito 202 00:23:50,569 --> 00:23:52,809 es un medio selectivo para crecer salmonella. 203 00:23:54,009 --> 00:23:58,470 Otro ejemplo es el agar maconkey. 204 00:23:59,089 --> 00:24:03,309 El agar maconkey tiene una serie de colorantes 205 00:24:03,309 --> 00:24:07,690 que inhibe el crecimiento de los gram positivos. 206 00:24:07,849 --> 00:24:09,410 ¿Para qué se utiliza el agar maconkey? 207 00:24:09,410 --> 00:24:14,309 Para que puedan crecer específicamente las bacterias gram negativas 208 00:24:14,309 --> 00:24:17,250 y entre ellas las enterobacterias. 209 00:24:17,670 --> 00:24:19,509 El agar maconkey es un agar selectivo 210 00:24:19,509 --> 00:24:22,930 que se utiliza para el crecimiento de enterobacterias. 211 00:24:23,089 --> 00:24:25,910 Pero es que además es diferencial, 212 00:24:26,690 --> 00:24:29,109 que es el siguiente tipo de medios de cultivo. 213 00:24:29,470 --> 00:24:30,130 Y aquí lo vemos. 214 00:24:30,809 --> 00:24:33,109 Aquí se han crecido tres tipos de bacterias. 215 00:24:34,130 --> 00:24:35,650 Tres tipos de bacterias. 216 00:24:36,190 --> 00:24:38,910 Daís cuenta que la morfología del crecimiento es diferente. 217 00:24:39,630 --> 00:24:41,309 Todas ellas son gram-negativas. 218 00:24:41,309 --> 00:24:43,970 Si han crecido es porque son gram-negativas. 219 00:24:44,769 --> 00:24:47,430 Por tanto, todas ellas son enterobacterias. 220 00:24:47,430 --> 00:24:59,910 Pero, como veremos más adelante, además de inhibir el crecimiento de las gran positivas, las gran negativas, dependiendo de su metabolismo, dan un tipo de crecimiento diferente. 221 00:25:00,609 --> 00:25:11,990 Estas bacterias de aquí, que dan colonias o un crecimiento que es incoloro, son bacterias que pueden fermentar la lactosa. 222 00:25:11,990 --> 00:25:35,450 Son lactosa positivas. Y estas de aquí que dan colonia rosa son lactosa negativas. ¿De acuerdo? Esto es importante. Pero es que además dentro de las lactosa negativas, de estas bacterias que son con este crecimiento, si os dais cuenta, las de la derecha alrededor del crecimiento de las colonias, 223 00:25:35,450 --> 00:25:44,450 producen un pigmento que los secretan al medio de cultivo. 224 00:25:44,450 --> 00:25:56,809 Este pigmento que secretan es importante porque nos permite diferenciar dentro de las bacterias 225 00:25:56,809 --> 00:26:08,410 que son lac-negativas, nos permite diferenciar las que producen el pigmento de las que no producen el pigmento. 226 00:26:08,410 --> 00:26:14,609 Esta sería, por ejemplo, Klebsiella y esta de aquí sería E. coli, ¿de acuerdo? 227 00:26:15,250 --> 00:26:17,289 Bien, estos son medios selectivos. 228 00:26:17,289 --> 00:26:29,470 Medios diferenciales son aquellos que además ya nos permiten poner en evidencia características diferenciales dentro de grupos de bacterias 229 00:26:29,470 --> 00:26:34,650 Por ejemplo, vuelvo para atrás, el agar maconkey es un agar selectivo 230 00:26:34,650 --> 00:26:39,970 Porque selecciono las bacterias que crecen, solo las gram negativas 231 00:26:39,970 --> 00:26:46,970 Pero también es diferencial, porque dependiendo del tipo de colonias y del tipo de crecimiento 232 00:26:46,970 --> 00:26:50,289 me permite diferenciar dentro del grupo de las enterobacterias 233 00:26:50,289 --> 00:26:53,369 las que son lactosa positivas de las lactosa negativas. 234 00:26:53,970 --> 00:26:54,630 ¿De acuerdo? 235 00:27:01,069 --> 00:27:02,470 Perdón, esto lo he dicho mal. 236 00:27:03,250 --> 00:27:05,210 Estas son las lactosa positivas. 237 00:27:05,410 --> 00:27:07,029 Estas de aquí son las lactosa negativas. 238 00:27:07,509 --> 00:27:08,710 Perdón, ha habido aquí un error. 239 00:27:09,190 --> 00:27:10,890 Sí, sí, sí, sí. 240 00:27:11,210 --> 00:27:14,589 Las que dan la lactosa negativa son incoloras. 241 00:27:14,930 --> 00:27:17,170 Como no son capaces de fermentar la lactosa, 242 00:27:17,269 --> 00:27:19,789 no producen el pigmento, el pigmento que colorea. 243 00:27:19,789 --> 00:27:38,950 Por tanto, estas de aquí son lactosa negativas y estas de aquí son lactosa positivas, ¿de acuerdo? Pues solamente sembrando el MAC con K hemos seleccionado y hemos diferenciado. Dependiendo del tipo de colonias que aparezcan ya podemos saber si son lactosa positivas o lactosa negativas. 244 00:27:38,950 --> 00:27:47,809 Bien, normalmente ¿cómo se consigue esto? Pues añadiendo un montón de azúcares fermentables 245 00:27:47,809 --> 00:27:53,769 como sustratos, de tal manera que dependiendo de qué enzimas metabólicos tengan 246 00:27:53,769 --> 00:27:58,430 y qué azúcares sean capaces de fermentar y cuáles no 247 00:27:58,430 --> 00:28:03,930 van a dar una serie de pigmentaciones y características en las colonias y en el medio de cultivo 248 00:28:03,930 --> 00:28:05,829 que nos permite diferenciarlas 249 00:28:05,829 --> 00:28:10,970 Estos medios de cultivo también se les llaman medios de identificación 250 00:28:10,970 --> 00:28:16,589 Y muchos de estos medios selectivos y diferenciales se utilizan como pruebas de identificación 251 00:28:16,589 --> 00:28:23,509 ¿Qué bacteria está? Hay que identificarla con nombre y apellidos, género y especie, incluso subespecie y cepa 252 00:28:23,509 --> 00:28:27,470 Entonces eso lo veremos más adelante en las pruebas de identificación 253 00:28:27,470 --> 00:28:32,589 Muy bien, otros ejemplos de medios diferenciales son el agarclé 254 00:28:32,589 --> 00:28:47,470 El agar clet es un agar también que se utiliza, bueno, el agar clet se utiliza mucho, pero más en la clínica y permite diferenciar, se utiliza sobre todo para muestras de orina, infecciones urinarias, ¿de acuerdo? 255 00:28:47,470 --> 00:29:06,329 Tiene una serie de aminoácidos, tiene cistina y tiene lactosa como carbohidrato, ¿de acuerdo? Y nos permite diferenciar aquellas bacterias que son lactosa positivas, por tanto, lac positivas que la fermentan, de las que son lac negativas. 256 00:29:06,329 --> 00:29:29,230 ¿Por qué? Porque aquellas que son lactosa positivas dan unas colonias amarillentas, que serían estas de aquí. Incluso también amarillean el medio de cultivo. Mientras que aquellas que permanecen como verdosas y el medio de cultivo como azul verdoso son las que son negativas. 257 00:29:29,230 --> 00:29:53,950 ¿De acuerdo? Bien. O el caldo de etiosulfato sódico y citrato férrico. Esta es una mezcla que se utiliza mucho en el agar SS. El agar SS, que sería este de aquí, es un agar que nos permite diferenciar entre dos tipos de enterobacterias que son primas hermanas, que son Salmonella y Sigela. 258 00:29:53,950 --> 00:30:03,150 Salmonella produce unas colonias de color, bueno, ya veis, muy oscuras, estas de aquí 259 00:30:03,150 --> 00:30:10,950 Y sigela son como transparentes, más translúcidas y además el medio de cultivo no lo acidifica 260 00:30:10,950 --> 00:30:19,150 Aquí cambia el medio de cultivo de color porque salmonella en su fermentación de lactosa acidifica el medio 261 00:30:19,150 --> 00:30:23,269 ¿De acuerdo? Bueno, estos son medios de cultivo diferenciales 262 00:30:24,269 --> 00:30:26,869 Muchos de ellos son, ya digo, selectivos y diferenciales. 263 00:30:28,150 --> 00:30:31,849 Y por último tenemos los medios cromogénicos. 264 00:30:33,009 --> 00:30:37,569 Son medios que contienen además en su composición pigmentos. 265 00:30:38,990 --> 00:30:42,509 Y se utilizan mucho como medios diferenciales. 266 00:30:42,509 --> 00:30:47,029 Nosotros utilizaremos, o se utiliza mucho, un medio que es el cromagar, 267 00:30:47,029 --> 00:30:59,569 que permite diferenciar lo que son los coliformes en aguas de E. coli. 268 00:31:01,890 --> 00:31:05,569 Entonces, ¿cómo sabemos el número de coliformes? 269 00:31:05,710 --> 00:31:09,950 ¿Cómo sabemos el número de bacterias de la especie Escherichia coli? 270 00:31:10,730 --> 00:31:16,730 Al crecerlas en estos medios cromogénicos, dependiendo de qué bacteria es la que crece, 271 00:31:17,210 --> 00:31:19,569 las colonias son de un color diferente. 272 00:31:19,950 --> 00:31:22,170 Y esto es muy visible, a simple vista se ve. 273 00:31:24,329 --> 00:31:43,289 Veremos alguna plaquita de cromagar específico para análisis de agua y diferenciar coliformes, pero por ejemplo, en ese tipo se observan las colonias de coliformes de un color rosáceo y las de Escherichia coli se observan de un color violeta muy oscuro. 274 00:31:43,289 --> 00:32:07,029 Aquí, por ejemplo, tenemos tres tipos de bacterias que han crecido. Una bacteria ha dado colonias rojas, otras son incoloras y otras son claramente verdes. Pues en este medio de cultivo tenemos Escherichia coli, Proteus y Enterococcus fecalis. Estas dos de aquí tienen mucho interés en contaminación fecal de aguas. 275 00:32:07,029 --> 00:32:18,029 ¿De acuerdo? Podríamos utilizar, por ejemplo, este cromagar para sembrar y dependiendo del color de las colonias sabemos si son de Escherichia coli o de Enterococcus. 276 00:32:19,410 --> 00:32:24,069 Todos estos son medios de cultivo diferenciales. Muy bien. 277 00:32:25,960 --> 00:32:29,420 Por otro lado tenemos lo que llamamos los medios de multiplicación. 278 00:32:30,039 --> 00:32:37,019 Son medios que solamente se obtienen o se utilizan para obtener grandes cantidades de células. 279 00:32:37,019 --> 00:32:57,940 ¿De acuerdo? Estos se utilizan, por ejemplo, cuando nos llega la muestra y sospechamos que la contaminación es mínima, la contaminación microbiológica es mínima, lo que hacemos es cogemos una alícuota, lo metemos en estos medios de cultivo, que se suelen crecer en tubo o a veces incluso en Erlenmeyers, en gran volumen, 280 00:32:57,940 --> 00:33:18,059 Y lo único que hacemos es, las pocas bacterias que haya por aquí, ponerlas en mucho medio de cultivo, medio de multiplicación, para obtener enormes cantidades de bacterias. Esto en la clínica y en la industria farmacéutica se utiliza, por ejemplo, para obtener vacunas producidas por bacterias. 281 00:33:18,059 --> 00:33:37,769 Y un ejemplo es el caldo, el BHI, que es el caldo de infusión cerebro corazón, ¿de acuerdo? Y es un caldo clásico de infusión, se obtiene por infusión de un extracto de cerebro y de corazón de cordero, ¿de acuerdo? Y son medios de multiplicación. 282 00:33:37,769 --> 00:34:04,809 Los medios de conservación se utilizan para conservar las bacterias, cepas, en el laboratorio. Imaginaos que nos interesa mucho, yo qué sé, por ejemplo, oye, es que esta Escherichia coli queremos estudiarla más a fondo, porque puede ser de una cepa que es la ET, es enterotoxigénica, Escherichia coli enterotoxigénica, que produce unas colitis muy graves, muy graves. 283 00:34:04,809 --> 00:34:22,429 Y vamos a comprobarla y la queremos estudiar también más adelante. Pues la podemos congelar. Para ello, utilizamos crioviales, ¿de acuerdo? Que son con un medio de cultivo especial y aquí las congelamos. Y más adelante las podemos descongelar, volverlas a estudiar, etc. 284 00:34:22,429 --> 00:34:30,190 tráfico. Y los medios de transporte, los que más se utilizan son el Stuart Amis y 285 00:34:30,190 --> 00:34:36,110 el Caribler y normalmente ya vienen preparados con su torunda estéril, vienen dentro de 286 00:34:36,110 --> 00:34:41,429 estos tubos y el medio de transporte solo se utiliza para transportarlo. Y es cuando 287 00:34:41,429 --> 00:34:47,849 tenemos que hacer una toma de muestra in situ, donde hemos tomado la muestra, tenemos ya 288 00:34:47,849 --> 00:34:54,889 que coger ahí una muestra y hacer un análisis microbiológico de una muestra in situ, entonces 289 00:34:54,889 --> 00:35:03,070 con la torunda tomamos la muestra, introducimos la torunda dentro del tubo y en este medio 290 00:35:03,070 --> 00:35:10,289 de transporte se mantiene el microorganismo vivo hasta que llegamos al laboratorio, ¿de 291 00:35:10,289 --> 00:35:19,269 acuerdo? Bien, vamos a ver ahora algunos de los medios de cultivo que se utilizan y 292 00:35:19,269 --> 00:35:27,010 Y lo iré pasando un poquito rápido porque de todos los medios de cultivo nos interesan 7, 8 o 8. 293 00:35:27,389 --> 00:35:29,190 Uno de ellos es el agar nutritivo. 294 00:35:29,309 --> 00:35:30,869 El agar nutritivo es un agar común. 295 00:35:31,449 --> 00:35:38,550 Aquí ya veis, lo que han hecho ha sido sembrar una muestra polimicrobiana. 296 00:35:39,550 --> 00:35:43,650 Y decimos que es polimicrobiana porque después de crecerla 24 horas, 297 00:35:43,849 --> 00:35:46,989 imaginaos la cantidad de microorganismos diferentes que hay aquí. 298 00:35:47,969 --> 00:35:55,050 Esto solamente lo han hecho para que veamos que en este medio de cultivo, en agar nutritivo, que es un medio general, crecen un montón de microorganismos. 299 00:35:55,050 --> 00:36:00,050 Entre ellos, estos son hongos. Esto es una colonia de hongos filamentosos. 300 00:36:01,110 --> 00:36:06,269 Aquí está seguramente también. Pero estas de aquí, estas pequeñitas, seguramente son de bacterias. 301 00:36:06,710 --> 00:36:10,210 Pero habría que ver, habría que ver. ¿De acuerdo? Bien. 302 00:36:10,210 --> 00:36:26,710 Otro es el agar soja tripticasa o tripticasa soja, que este medio de cultivo es el que se suele suplementar con sangre para obtener medios enriquecidos con sangre. 303 00:36:26,710 --> 00:36:48,179 El agar soja triticasa. Bien. De enriquecidos ya hemos hablado. Hemos hablado del agar columbia o agar sangre. ¿De acuerdo? Ese agar columbia, CNA, al cual le hemos añadido un 5% de sangre de cordero. Esto es un medio enriquecido. 304 00:36:48,179 --> 00:37:11,179 En aguas no se utiliza. Aquí se utiliza mucho para diferenciar las especies de estafilococos, por ejemplo, que crecen, y de streptococos, los cocos, sobre todo los cocos granpositivos. ¿Por qué? Porque alrededor, si os dais cuenta, la colonia que ha crecido aquí, alrededor tiene un halo de hemólisis. 305 00:37:11,179 --> 00:37:14,539 digamos que ha digerido la sangre 306 00:37:14,539 --> 00:37:16,599 los eritrocitos de la sangre 307 00:37:16,599 --> 00:37:18,780 entonces la colonia es el punto central 308 00:37:18,780 --> 00:37:19,800 que se ve oscuro 309 00:37:19,800 --> 00:37:22,579 como de un color verdoso o marronoso 310 00:37:22,579 --> 00:37:25,000 y lo que hay alrededor ese halo blanquecino 311 00:37:25,000 --> 00:37:26,460 es una hemólisis 312 00:37:26,460 --> 00:37:28,840 y entonces esto nos permite diferenciar 313 00:37:28,840 --> 00:37:31,380 algunos que son alfa hemolíticos 314 00:37:31,380 --> 00:37:33,820 de los que son beta hemolíticos 315 00:37:33,820 --> 00:37:35,619 y de los que son gamma hemolíticos 316 00:37:35,619 --> 00:37:37,820 esto tiene mucha importancia en clínica 317 00:37:37,820 --> 00:37:39,019 en aguas no 318 00:37:39,019 --> 00:37:40,360 y el lagar chocolate 319 00:37:40,360 --> 00:37:48,059 Es muy parecido, lo único que le añadimos es sangre pero hidrolizada ya, ¿de acuerdo? 320 00:37:48,260 --> 00:37:55,519 Como hemolizada. Por eso la sangre tiene este aspecto marronoso y por eso se le llama, por este aspecto, agar chocolate. 321 00:37:56,059 --> 00:37:56,260 Bien. 322 00:37:58,360 --> 00:38:02,460 Medios enriquecidos. Agar clet, que además también es selectivo. 323 00:38:03,639 --> 00:38:07,500 ¿De acuerdo? El agar clet se utiliza para la clínica. 324 00:38:07,500 --> 00:38:16,780 En aguas no se suele utilizar. El agar Moller-Hinton se utiliza para hacer antibiogramas, también en la clínica. Tampoco nos interesa mucho. 325 00:38:17,300 --> 00:38:27,699 Vamos a ver ahora algunos de los que nos interesan. Por ejemplo, los que son medios selectivos y diferenciales a la vez, tenemos el agar McConkie. 326 00:38:27,699 --> 00:38:50,619 Este agar se utiliza específicamente para el cultivo de enterobacterias. Las enterobacterias, como veremos, son gram-negativas y dentro de las enterobacterias a nosotros nos interesa diferenciar muy bien las que son lactosa-positivas y las que son lactosa-negativas. 327 00:38:50,619 --> 00:39:03,320 Unas son las coliformes y las otras son enterobacterias no coliformes. Las coliformes ya sabemos que los utilizamos como indicadores de contaminación fecal de las aguas. 328 00:39:03,320 --> 00:39:10,960 El agar SS, que ya lo hemos visto, se utiliza como prueba confirmativa 329 00:39:10,960 --> 00:39:15,960 Sembramos en agar SS para saber realmente si la bacteria que hemos aislado es salmonella 330 00:39:15,960 --> 00:39:19,900 Si es salmonella tenemos que observar estas colonias que son negras 331 00:39:19,900 --> 00:39:25,860 Porque reducen el azufre, el ácido sulfídrico 332 00:39:25,860 --> 00:39:29,460 Y producen estas colonias de este color oscuro 333 00:39:29,460 --> 00:39:33,179 Si gela, produciría colonias transparentes 334 00:39:33,179 --> 00:39:57,199 Aquí cabe destacar que hay dos tipos de colonias. Las rositas y las transparentes. ¿De acuerdo? Unas son las positivas, las otras son las negativas. Bien. ¿Qué más? Ectoen. El agar ectoen es parecido al anterior, el SS, porque se utiliza también para salmonella y sigela. 335 00:39:57,199 --> 00:40:14,119 ¿Hay otro tipo de bacterias que crecen aquí? No, no crecen aquí. Entonces, dependiendo de qué tipo de colonias nos dan, si son negras sabemos que es salmonella, por ejemplo salmonella tifimorium, o si no, son sigela, si son como transparentes. 336 00:40:14,119 --> 00:40:16,539 el agar Levin 337 00:40:16,539 --> 00:40:18,679 preparado también en el laboratorio 338 00:40:18,679 --> 00:40:19,760 o EMB 339 00:40:19,760 --> 00:40:23,400 porque contiene eosina y azul de metileno 340 00:40:23,400 --> 00:40:25,400 eosin, metil en blue 341 00:40:25,400 --> 00:40:27,440 ambos colorantes 342 00:40:27,440 --> 00:40:29,519 eosina y azul de metileno 343 00:40:29,519 --> 00:40:31,099 inhiben el crecimiento 344 00:40:31,099 --> 00:40:33,420 de las gran positivas 345 00:40:33,420 --> 00:40:35,559 y favorecen el crecimiento 346 00:40:35,559 --> 00:40:37,179 de las gran negativas 347 00:40:37,179 --> 00:40:39,619 pero es que además tiene una serie de componentes 348 00:40:39,619 --> 00:40:41,019 que nos permite diferenciar 349 00:40:41,019 --> 00:40:43,639 las gran negativa enterobacterias que crecen 350 00:40:44,119 --> 00:41:04,420 Si os dais cuenta, hay aquí algunas bacterias que dan unas colonias que son negras y esta de aquí ha dado un crecimiento verde brillante metálico, metalizado. Estas colonias son de Escherichia coli, mientras que el resto son otro tipo de bacterias, enterobacterias. 351 00:41:04,420 --> 00:41:25,820 ¿De acuerdo? Bien. El lagartesei, el lagartesei lo hemos preparado también, está preparado, se prepara en el laboratorio y se utiliza también como prueba de identificación, prueba de identificación de enterobacterias. 352 00:41:25,820 --> 00:41:31,559 Como veremos en las pruebas de identificación, trataremos el lagartesei más adelante 353 00:41:31,559 --> 00:41:40,679 Pero ya veis que nosotros hemos sembrado cuatro tubos, tal cual, con cuatro bacterias diferentes 354 00:41:40,679 --> 00:41:45,139 Y ya veis que después de haberlo cultivado 24 horas, el aspecto es completamente diferente 355 00:41:45,139 --> 00:41:53,380 Tenemos todo el pico de flauta o el slant, aquí es amarillo, se ha acidificado, aquí es rojo, aquí es rojo, aquí es rojo también 356 00:41:53,380 --> 00:42:10,099 El fondo puede ser amarillento, puede ser rojo, puede haber o no gas, producción de gas, o puede ser negro. Esto sería salmonella, por ejemplo. Esto es Escherichia coli, como ya veremos. ¿De acuerdo? Bien. 357 00:42:10,099 --> 00:42:12,679 Agar chapman manitol 358 00:42:12,679 --> 00:42:14,860 Se utiliza para 359 00:42:14,860 --> 00:42:15,960 Estafilococcus 360 00:42:15,960 --> 00:42:20,480 Para crecer específicamente 361 00:42:20,480 --> 00:42:21,320 Estafilococcus 362 00:42:21,320 --> 00:42:23,820 Solo crecen estafilococcus porque son los únicos 363 00:42:23,820 --> 00:42:26,119 Que aguantan una concentración 364 00:42:26,119 --> 00:42:28,059 De 7,5% 365 00:42:28,059 --> 00:42:29,880 Peso 366 00:42:29,880 --> 00:42:30,519 Volumen 367 00:42:30,519 --> 00:42:32,960 De cloruro de sodio 368 00:42:32,960 --> 00:42:35,900 Son bacterias alófitas 369 00:42:35,900 --> 00:42:37,719 Por tanto es un medio 370 00:42:37,719 --> 00:42:40,480 El cloruro sódico al 7,5% 371 00:42:40,480 --> 00:42:44,519 7,5 gramos mililitro 372 00:42:44,519 --> 00:42:46,699 cada 100 mililitros 373 00:42:46,699 --> 00:42:49,199 este componente 374 00:42:49,199 --> 00:42:50,940 la alta concentración de sales 375 00:42:50,940 --> 00:42:53,739 es el compuesto que hace que sea selectivo 376 00:42:53,739 --> 00:42:55,519 y solamente crezca 377 00:42:55,519 --> 00:42:56,420 estafilococo 378 00:42:56,420 --> 00:42:59,219 pero además tiene manitol 379 00:42:59,219 --> 00:43:01,659 ¿por qué es importante el manitol? 380 00:43:02,000 --> 00:43:04,320 porque estafilococus aureus 381 00:43:04,320 --> 00:43:06,179 lo fermenta 382 00:43:06,179 --> 00:43:07,599 y acidifica el medio 383 00:43:07,599 --> 00:43:09,860 de tal manera que el medio después de cultivarlo 384 00:43:09,860 --> 00:43:16,840 aparece amarillento. Y Staphylococcus epidermidis, que es otro primo hermano, no fermenta el 385 00:43:16,840 --> 00:43:23,760 manitol. Por tanto, este medio es selectivo, sí, y es diferencial. Y se utiliza, uno, 386 00:43:24,420 --> 00:43:30,840 para crecer solamente Staphylococcus y dos, poder diferenciar si el Staphylococcus que 387 00:43:30,840 --> 00:43:38,119 está presente en la muestra es Staphylococcus aureus o epidermidis. Ambos, bueno, Staphylococcus 388 00:43:38,119 --> 00:44:00,510 son oportunistas, patógenos oportunistas. ¿De acuerdo? Bilis esculina. El bilis esculina se utiliza para enterococos. Para poder confirmar que la bacteria que hemos aislado es enterococo, se puede crecer en bilis esculina. 389 00:44:00,510 --> 00:44:21,730 Es un agar que tiene bilis, la bilis inhibe el crecimiento de los granpositivos, y tiene esculina. Solo los enterococos son capaces de fermentar la esculina. Y, bien, el Deneasa se utiliza para Staphylococcus también, ¿de acuerdo? Pero se utiliza en la clínica. Nosotros no lo vamos a ver. 390 00:44:21,730 --> 00:44:28,889 Otros medios selectivos, el agarce trimida, que lo hemos visto antes 391 00:44:28,889 --> 00:44:38,719 Se utiliza para crecer pseudomonas, especialmente aeruginosa 392 00:44:38,719 --> 00:44:45,690 Pseudomona es importante también en algunas contaminaciones de aguas 393 00:44:45,690 --> 00:44:51,010 Entonces se puede crecer en agarce trimida, que da este tipo de colonias verdes 394 00:44:51,010 --> 00:44:54,510 Y bueno, este tipo de crecimiento 395 00:44:54,510 --> 00:45:21,429 El campilosel no se utiliza porque es para campilobacter, no se utiliza en aguas. El BCI tampoco se utiliza porque es solamente para garnerela, ¿de acuerdo? En la clínica. Garnerela, infecciones de garnerela. El agar granada tampoco y el owestin jensen tampoco se utiliza en aguas. Así que los pasamos. Este es un medio de cultivo para micobacterias, ¿de acuerdo? 396 00:45:21,429 --> 00:45:34,559 El agar de Chadler, este es importante que lo conozcamos porque es un agar que se utiliza para el aislamiento y el crecimiento de aquellos que son anaerobos 397 00:45:34,559 --> 00:45:41,880 Y es el que más se utiliza, nosotros no lo utilizaremos en el laboratorio, pero es el que más se utiliza 398 00:45:41,880 --> 00:45:51,719 Y luego tenemos los medios cromogénicos, pues ya veis, este es el mismo medio, está cogido de la página web de la casa comercial 399 00:45:51,719 --> 00:46:17,780 el agar cromogénico UTI, que se utiliza para infecciones urinarias, este en concreto, nosotros utilizaríamos otro para aguas, y ya veis que el tipo de crecimiento es muy diferente, la coloración de las colonias, la pigmentación de las colonias, dependiendo de cuál es la pigmentación, nos identifica ya rápidamente cuál es el microorganismo que está creciendo, ¿de acuerdo? 400 00:46:17,780 --> 00:46:32,159 Si es escherichia coli, si es proteus, incluso si es una mezcla, ¿de acuerdo? O esclepsiela. Todos estos son enterobacterias, como ya veremos. Tenemos enterococcus y aquí también es estafilococcus, ¿de acuerdo? 401 00:46:32,159 --> 00:46:49,840 Bien, medios líquidos, los que más se utilizan son, ya hemos visto el caldo selenito que es selectivo y diferencial, el caldo de tioglicolato, digamos que es un caldo común, general, ¿de acuerdo? 402 00:46:49,840 --> 00:47:07,400 Igual que el caldo, el agua de peptona. El agua de peptona también es un caldo, también es un caldo que se utiliza de forma general en el que pueden crecer muchísimos microorganismos.