1 00:00:00,180 --> 00:00:02,180 ¿Recordáis de qué son las ESCAPE? 2 00:00:02,180 --> 00:00:16,179 Son las bacterias multiresistentes más importantes que tenemos ahora, o sea, son como la emergencia número uno, las que hay que encontrar es primero antidiabético. 3 00:00:17,800 --> 00:00:24,719 Aquí tenéis los nombres, son Escherichia coli, Staphylococcus, a mí me suena más la... 4 00:00:24,719 --> 00:00:28,379 Flexiera, Cervinomax, Sonomonas y Enterococcus. 5 00:00:28,379 --> 00:00:29,379 Esta es de... 6 00:00:29,379 --> 00:00:32,979 básicamente estas son asesinas 7 00:00:32,979 --> 00:00:34,299 y estas no las vamos a traer aquí 8 00:00:34,299 --> 00:00:35,159 no las vamos a usar 9 00:00:35,159 --> 00:00:39,000 pero realmente 10 00:00:39,000 --> 00:00:41,200 sí que estamos buscando antibióticos 11 00:00:41,200 --> 00:00:43,079 para tratarlas 12 00:00:43,079 --> 00:00:47,450 es que justo esto 13 00:00:47,450 --> 00:00:48,750 es como 14 00:00:48,750 --> 00:00:49,789 dirigido hacia animales 15 00:00:49,789 --> 00:00:52,289 dice que los grupos de riesgo son 16 00:00:52,289 --> 00:00:54,270 animales inmunocomprometidos 17 00:00:54,270 --> 00:00:55,229 y animales hospitalizados 18 00:00:55,229 --> 00:00:56,149 también aplica a humanos 19 00:00:56,149 --> 00:00:58,950 son muy peligrosas 20 00:00:58,950 --> 00:01:06,109 Oh 21 00:01:06,109 --> 00:01:08,670 Vale 22 00:01:08,670 --> 00:01:11,409 Perdona, es que he preguntado 23 00:01:11,409 --> 00:01:12,829 si se puede pintar en la pizarra 24 00:01:12,829 --> 00:01:14,329 pero yo decía 25 00:01:14,329 --> 00:01:15,930 que soy muy antes del siglo XX 26 00:01:15,930 --> 00:01:16,930 y pensaba que sí 27 00:01:16,930 --> 00:01:24,390 Es guapo 28 00:01:24,390 --> 00:01:25,390 Gracias. 29 00:01:54,390 --> 00:01:55,849 No vamos a ver todas las noticias. 30 00:01:57,230 --> 00:01:58,450 Aquí os adjunte. 31 00:02:02,129 --> 00:02:03,250 Una noticia. 32 00:02:03,250 --> 00:02:06,430 ¿Qué era? 33 00:02:07,569 --> 00:02:07,930 Bueno. 34 00:02:10,449 --> 00:02:13,990 Era básicamente una noticia del diario donde decía 35 00:02:13,990 --> 00:02:17,150 Mujer sin tener infección bacteriana resistente, gracias por el coronavirus. 36 00:02:17,909 --> 00:02:21,870 Una mujer que estaba en el atentado de México o algo así. 37 00:02:21,870 --> 00:02:29,389 No sé, como que se hizo heridas y esas heridas acabaron infectándose en el hospital por una de estas bacterias muy preexistentes y varias. 38 00:02:30,430 --> 00:02:39,150 El caso es que se probaron algún tipo de antibióticos, tal y cual, nada funcionó y al final se utilizaron fagos. 39 00:02:39,530 --> 00:02:41,530 Fagos son virus que infectan a bacterias. 40 00:02:42,590 --> 00:02:49,050 Entonces, gracias a esos virus se pudieron meter en las bacterias y las bacterias acabaron guisadas, o sea, muertas y explotaron. 41 00:02:49,050 --> 00:02:59,889 Entonces, esto es solo para deciros que nosotros estamos intentando incorporar antibióticos, pero también hay otras alternativas, que son por ejemplo los virus, que no son antibióticos, pero también lo podemos utilizar. 42 00:03:06,650 --> 00:03:13,810 Nosotros no las hemos traído aquí, pero hemos traído otras cepas más seguras, que son más o menos parecidas, que son estas. 43 00:03:14,830 --> 00:03:16,810 Por ejemplo, vais a trabajar con... 44 00:03:16,810 --> 00:03:32,689 Bueno, la historia, no sé si tenéis alguna 45 00:03:32,689 --> 00:03:34,889 pregunta concreta de este tipo 46 00:03:34,889 --> 00:03:36,490 de bacterias, pero 47 00:03:36,490 --> 00:03:39,030 bueno, la historia es que 48 00:03:39,030 --> 00:03:40,710 a ver, para que no perdáis un poco 49 00:03:40,710 --> 00:03:42,969 el norte, estas bacterias 50 00:03:42,969 --> 00:03:44,569 genéticamente 51 00:03:44,569 --> 00:03:46,949 han ido acumulando, desarrollando 52 00:03:46,949 --> 00:03:51,889 os acordáis por aquellos procesos de transferencia horizontal de genes, etc., que veíamos el primer día, 53 00:03:52,270 --> 00:03:56,169 pero también por mutación de los genes que codifican las dienas de los antibióticos. 54 00:03:56,849 --> 00:04:02,750 Estas bacterias, este grupo escape, son una de las alertas que ha dado la Organización Mundial de la Salud 55 00:04:02,750 --> 00:04:09,069 de que ya no tenemos, en muchos casos, aparecen cepas o aislamientos en hospitales de estas especies 56 00:04:09,069 --> 00:04:15,169 que ya no podemos tratar. Entonces, por eso, en este proyecto estamos buscando nuevos antibióticos. 57 00:04:15,169 --> 00:04:18,089 pero bueno, como os decíamos 58 00:04:18,089 --> 00:04:20,750 también hay otras alternativas 59 00:04:20,750 --> 00:04:22,269 otras líneas de investigación 60 00:04:22,269 --> 00:04:24,149 y algunas muy muy famosas 61 00:04:24,149 --> 00:04:25,810 y probablemente leeréis sobre ellas 62 00:04:25,810 --> 00:04:27,069 y oiréis hablar sobre ellas 63 00:04:27,069 --> 00:04:28,250 que es la fagoterapia 64 00:04:28,250 --> 00:04:30,310 el uso de virus bacteriófagos 65 00:04:30,310 --> 00:04:31,970 igual que hay virus que nos fastidian a nosotros 66 00:04:31,970 --> 00:04:33,730 como el virus Marburg 67 00:04:33,730 --> 00:04:35,009 que ahora hay un brote en Ecuador 68 00:04:35,009 --> 00:04:37,250 o el ébola o el coronavirus 69 00:04:37,250 --> 00:04:38,649 o lo que sea, o la gripe 70 00:04:38,649 --> 00:04:41,930 pues también no hay ninguna célula 71 00:04:41,930 --> 00:04:43,810 ninguna especie celular 72 00:04:43,810 --> 00:04:44,790 en el planeta 73 00:04:44,790 --> 00:04:47,050 que no sufra el ataque de varias decenas 74 00:04:47,050 --> 00:04:49,089 de virus. O sea, cada ser 75 00:04:49,089 --> 00:04:51,069 en este planeta tiene los virus 76 00:04:51,069 --> 00:04:52,329 que le atacan. Pues igual estas. 77 00:04:52,870 --> 00:04:54,990 Entonces, bueno, pues hay investigadores que se dedican 78 00:04:54,990 --> 00:04:57,110 a aislar virus del entorno, pero virus 79 00:04:57,110 --> 00:04:59,189 bacteriófago, virus que matan a las bacterias 80 00:04:59,189 --> 00:05:01,009 para, sin 81 00:05:01,009 --> 00:05:02,990 alguna infección, no puede ya 82 00:05:02,990 --> 00:05:05,050 tratarse con antibióticos, utilizar 83 00:05:05,050 --> 00:05:06,750 esos virus como 84 00:05:06,750 --> 00:05:08,970 forma farmacéutica de alguna manera 85 00:05:08,970 --> 00:05:10,949 para tratar a esos pacientes. Lo cual 86 00:05:10,949 --> 00:05:13,170 es bastante difícil. Un antibiótico tú lo puedes 87 00:05:13,170 --> 00:05:18,709 dar en una pastilla, o meter en sangre, en un caso grave y tal, pero estos virus son 88 00:05:18,709 --> 00:05:23,370 más difíciles de manejar como fármacos, es más complicado. Pero hay varios casos 89 00:05:23,370 --> 00:05:28,689 de éxito, de hecho hay un chaval de Valencia que tiene fibrosis quística, que es un problema 90 00:05:28,689 --> 00:05:33,430 que no puede secuestrar a mocos, es una enfermedad de componente genético, pero eso le hace 91 00:05:33,430 --> 00:05:38,089 susceptible a sufrir infecciones precisamente por bacterias como pseudomonas y tal. Y tiene 92 00:05:38,089 --> 00:05:42,089 una micobacteria, la micobacteria es muy parecida a la tuberculosis, pero es una micobacteria 93 00:05:42,089 --> 00:05:43,709 que una persona normal no le hace nada 94 00:05:43,709 --> 00:05:45,670 pero él como tiene esas defensas alteradas 95 00:05:45,670 --> 00:05:47,410 y le están tratando con fagos 96 00:05:47,410 --> 00:05:48,850 y le han salvado la vida con fagos 97 00:05:48,850 --> 00:05:49,949 con virus bacteriófagos 98 00:05:49,949 --> 00:05:53,230 con un equipo de investigación que hay en Valencia 99 00:05:53,230 --> 00:05:55,930 aislando virus bacteriófagos en el laboratorio 100 00:05:55,930 --> 00:05:57,850 que saben que matan a esas bacterias 101 00:05:57,850 --> 00:05:59,629 seleccionándolos y utilizándolos 102 00:05:59,629 --> 00:06:02,370 por inhaladores para tratar su infección 103 00:06:02,370 --> 00:06:03,870 o sea que son otras alternativas 104 00:06:03,870 --> 00:06:06,089 lo que hacemos nosotros es buscar nuevos antibióticos 105 00:06:06,089 --> 00:06:07,689 pero también hay otras alternativas 106 00:06:07,689 --> 00:06:10,449 bueno, simplemente si alguien tiene curiosidad 107 00:06:10,449 --> 00:06:13,930 Tanto cinetobacter como pseudohormonas son bacterias ambientales 108 00:06:13,930 --> 00:06:18,569 Que existen en el ambiente, en el agua, en el campo, en todas partes 109 00:06:18,569 --> 00:06:20,550 Pero son naturalmente resistentes 110 00:06:20,550 --> 00:06:24,069 Y estas proceden de nuestra microbiota 111 00:06:24,069 --> 00:06:27,850 Esta glopopus está en la faringe, en las mucosas 112 00:06:27,850 --> 00:06:30,990 Este es de la caca, como dice aquí, paetium et de efe 113 00:06:30,990 --> 00:06:34,970 Este es del enterobacter, del intestino, del intestino grueso 114 00:06:34,970 --> 00:06:38,310 El enterocopus y el enterobacter, y no positivo o negativo 115 00:06:38,310 --> 00:06:40,009 Los dos son entéricos, etc. 116 00:06:40,449 --> 00:06:45,850 Entonces, claro, nosotros lo que hemos traído son unos primos suyos y ¿cómo vamos a trabajar? 117 00:06:46,470 --> 00:06:48,310 ¿Cómo vamos a trabajar en el laboratorio? 118 00:06:49,990 --> 00:06:54,509 Quería poneros otro vídeo para que entendierais otra cosa, pero bueno, luego os lo pongo y ya pasamos al laboratorio. 119 00:06:54,629 --> 00:06:56,910 Por eso había preguntado cómo pintar. Vamos a intentarlo. 120 00:06:59,350 --> 00:07:00,329 ¡Huevos de tránsito! 121 00:07:00,329 --> 00:07:06,430 bueno, vosotros 122 00:07:06,430 --> 00:07:08,569 vais a tener 123 00:07:08,569 --> 00:07:10,730 tres placas Petri que os vamos a dar 124 00:07:10,730 --> 00:07:13,110 y nuestra misión 125 00:07:13,110 --> 00:07:14,230 es 126 00:07:14,230 --> 00:07:15,410 buscar 127 00:07:15,410 --> 00:07:17,790 nuestra pregunta es 128 00:07:17,790 --> 00:07:20,350 ¿hay bacterias aquí de las que tengo ya aisladas 129 00:07:20,350 --> 00:07:22,329 en estas colonias, especialmente en las placas 130 00:07:22,329 --> 00:07:24,029 que tienen menos colonias, las más diluidas 131 00:07:24,029 --> 00:07:26,110 que vais a ver las colonias mejor y además no hay riesgo 132 00:07:26,110 --> 00:07:27,649 de que se os laven unas con otras 133 00:07:27,649 --> 00:07:29,350 paréntesis interesante 134 00:07:29,350 --> 00:07:31,970 mirar en las placas que hay mucho mogollón 135 00:07:31,970 --> 00:07:33,790 o si encontráis ya, hay algún 136 00:07:33,790 --> 00:07:35,709 fenómeno de antibiótico. Muchas veces hay 137 00:07:35,709 --> 00:07:37,709 una bacteria que lo está invadiendo todo y de repente 138 00:07:37,709 --> 00:07:39,629 es que frena porque 139 00:07:39,629 --> 00:07:41,490 una más pequeñita no la deja pasar. 140 00:07:41,730 --> 00:07:43,990 Esa pequeñita, esa probablemente 141 00:07:43,990 --> 00:07:45,850 está produciendo antibióticos. Estamos viendo 142 00:07:45,850 --> 00:07:47,509 en directo un fenómeno de antibióticos. Mirar 143 00:07:47,509 --> 00:07:49,250 todas nuestras placas en busca de esto porque 144 00:07:49,250 --> 00:07:51,850 esa promete. Las demás no sabemos, 145 00:07:52,009 --> 00:07:53,490 ya las probaremos, pero esa 146 00:07:53,490 --> 00:07:55,550 desde luego, picarla porque promete. 147 00:07:56,009 --> 00:07:57,750 Entonces, nuestra misión es 148 00:07:57,750 --> 00:08:00,250 enfrentar la mayor diversidad 149 00:08:00,250 --> 00:08:01,949 de microorganismos distintos 150 00:08:01,949 --> 00:08:04,069 de nuestra muestra de suelo, aparte de 151 00:08:04,069 --> 00:08:06,230 ver cómo es la diversidad del suelo que habéis elegido 152 00:08:06,230 --> 00:08:07,870 estudiar, que es curioso, ¿no? 153 00:08:07,870 --> 00:08:09,790 La diversidad microbiana, todos los bichos que han salido 154 00:08:09,790 --> 00:08:12,230 y comparar los vuestros con los de vuestros colegas 155 00:08:12,230 --> 00:08:14,129 para que veáis que hay diferencias, 156 00:08:14,269 --> 00:08:16,230 que hay bichos que tiene uno, que no tiene 157 00:08:16,230 --> 00:08:17,389 otro, etc. ¿Vale? 158 00:08:18,350 --> 00:08:19,990 Entonces, lo que vamos a hacer es 159 00:08:19,990 --> 00:08:21,490 coger estos escape, 160 00:08:21,889 --> 00:08:23,589 de hecho, Claudia nos ha preparado 161 00:08:23,589 --> 00:08:25,709 un experimento extra para 162 00:08:25,709 --> 00:08:30,490 el grupo de Aranjuez, que no están atiendo a otros grupos de Micromundo, por eso vais 163 00:08:30,490 --> 00:08:36,269 a tener tres placas distintas. En una de las placas vamos a sembrar un césped, y eso es 164 00:08:36,269 --> 00:08:42,409 lo que os voy a explicar ahora cómo hacer, de un césped gran positivo, que tenemos dos 165 00:08:42,409 --> 00:08:47,269 a elegir, los repartiremos por ahí a ver qué os toca. Uno es Cocuria, es un gran positivo 166 00:08:47,269 --> 00:08:51,389 que las colonias son de color naranja, entonces se verá muy bien el césped naranja, y si 167 00:08:51,389 --> 00:09:05,610 Y el otro es Bacillus subtilis. Bacillus subtilis es el gran positivo favorito de los investigadores que trabajan en gran positivos, en Bacillus gran positivos, organismo modelo en el que se ha hecho muchísima genética, muchísimas cosas, ¿vale? 168 00:09:05,610 --> 00:09:07,769 y tendremos 169 00:09:07,769 --> 00:09:10,250 ese va a ir a una placa, el gran positivo 170 00:09:10,250 --> 00:09:12,049 que dejáis, o que os demos 171 00:09:12,049 --> 00:09:14,309 en la otra placa va a ir un gran 172 00:09:14,309 --> 00:09:15,909 negativo, vamos a tener bien 173 00:09:15,909 --> 00:09:18,250 Acinetobacter baile, que es el 174 00:09:18,250 --> 00:09:20,509 primo inofensivo del terrible Acinetobacter 175 00:09:20,509 --> 00:09:22,029 baumani, que mata a muchísima gente 176 00:09:22,029 --> 00:09:23,029 en las UCI del mundo 177 00:09:23,029 --> 00:09:26,190 y vamos a tener Escherichia coli, pero no 178 00:09:26,190 --> 00:09:28,029 un Escherichia coli productor de resistencia 179 00:09:28,029 --> 00:09:29,870 sino uno de estos del laboratorio que utilizamos 180 00:09:29,870 --> 00:09:30,990 para biología molecular 181 00:09:30,990 --> 00:09:34,070 podemos coger uno 182 00:09:34,070 --> 00:09:39,429 de ellos y ese va a ser nuestro gram negativo. Por tanto, ¿cuál es el experimento que vamos 183 00:09:39,429 --> 00:09:45,210 a hacer? Ver si cada una de estas colonias distintas es capaz de inhibir el crecimiento 184 00:09:45,210 --> 00:09:53,929 de un césped de un gram positivo y de un gram negativo. Y la tercera placa es el experimento 185 00:09:53,929 --> 00:09:59,429 que nos ha preparado Claudia para ver si alguna de estas bacterias tiene también propiedades 186 00:09:59,429 --> 00:10:04,889 antifúngicas, es decir, es capaz de producir un antibiótico que sea capaz de inhibir no 187 00:10:04,889 --> 00:10:09,029 a una bacteria prokaryótica, gram positiva o gram negativa, que es lo que buscamos en 188 00:10:09,029 --> 00:10:14,750 el experimento general de micromundo, sino a un hongo patógeno. En este caso ha traído 189 00:10:14,750 --> 00:10:19,129 una cepa de cándida albarata, ahora se llama de otra manera, pero bueno, también es un 190 00:10:19,129 --> 00:10:24,850 organismo que causa infecciones en personas inmunodeprimidas, inmunocomprometidas. 191 00:10:24,850 --> 00:10:30,639 Entonces, ¿cómo vamos a proceder? 192 00:10:30,860 --> 00:10:32,919 Pues veréis que en primer lugar 193 00:10:32,919 --> 00:10:35,460 lo que tenéis que hacer es mirar la biodiversidad 194 00:10:35,460 --> 00:10:36,879 os vamos a dar rotuladores 195 00:10:36,879 --> 00:10:38,759 y vais a decir, venga, yo voy a elegir 196 00:10:38,759 --> 00:10:40,299 15 colonias, ¿no? 197 00:10:40,879 --> 00:10:42,639 Los voy a ir por detrás de mis placas 198 00:10:42,639 --> 00:10:44,679 y las que estén bien aisladitas y bien bonitas 199 00:10:44,679 --> 00:10:46,620 y vean que son distintas unas de otras, las voy a marcar 200 00:10:46,620 --> 00:10:48,419 Esta va a ser la 1, por detrás 201 00:10:48,419 --> 00:10:50,759 sin abrir la placa, cuanto menos se abra la placa mejor 202 00:10:50,759 --> 00:10:52,039 para no contaminarnos y tal 203 00:10:52,039 --> 00:10:54,700 por detrás con el rotulador hacéis un circulito 204 00:10:55,120 --> 00:10:56,580 Si tenéis aquí una colonia que mola, 205 00:10:57,159 --> 00:10:58,639 pues con el rotulador, con el rotulador, 206 00:10:58,720 --> 00:11:01,100 por detrás se hace un circulito y con el que esta va a ser la 1. 207 00:11:02,539 --> 00:11:03,139 Aquí esta, 208 00:11:03,279 --> 00:11:05,100 ¡uh! aquí me mola esta, ¡ba, ba, ba, ba! 209 00:11:05,200 --> 00:11:06,620 Esta va a ser la 2. 210 00:11:07,259 --> 00:11:08,700 Así, luego vais a otra placa y tal, 211 00:11:09,019 --> 00:11:11,240 así hasta que tengáis 15 más o menos marcadas. 212 00:11:11,399 --> 00:11:12,779 ¿Vale? Esas son las que vais a testar, 213 00:11:12,919 --> 00:11:14,759 a las que vais a interrogar, 214 00:11:14,879 --> 00:11:17,299 a hacer la pregunta, oye, ¿tú produces antibióticos 215 00:11:17,299 --> 00:11:18,720 que me maten al gran positivo, 216 00:11:18,720 --> 00:11:20,019 al gran negativo o al lombo? 217 00:11:20,519 --> 00:11:22,799 ¿Vale? Una vez que tenemos eso, 218 00:11:22,799 --> 00:11:25,080 Vamos a coger las placas 219 00:11:25,080 --> 00:11:27,159 Vírgenes, las placas estériles 220 00:11:27,159 --> 00:11:28,519 Las placas vacías que os traemos hoy 221 00:11:28,519 --> 00:11:30,340 Para hacer el ensayo de antibióticos 222 00:11:30,340 --> 00:11:32,840 Vuestro experimento de hoy es hacer un ensayo de antibióticos 223 00:11:32,840 --> 00:11:35,000 Y lo primero que vamos a hacer es crear el césped 224 00:11:35,000 --> 00:11:36,960 Para generar el césped 225 00:11:36,960 --> 00:11:39,000 Los compañeros 226 00:11:39,000 --> 00:11:40,059 En la facultad 227 00:11:40,059 --> 00:11:43,320 Os han preparado unas suspensiones 228 00:11:43,320 --> 00:11:44,419 De bacterias vivas 229 00:11:44,419 --> 00:11:46,200 O de la cándida viva 230 00:11:46,200 --> 00:11:48,940 La positiva, la negativa y la rara 231 00:11:48,940 --> 00:11:51,080 Entonces vosotros vais a tener que 232 00:11:51,080 --> 00:11:55,639 distribuir con mucho cuidado por la superficie de esa placa Petri, por la superficie de 233 00:11:55,639 --> 00:12:00,779 ese agar, esa suspensión de bacterias. Para lo cual, acordaros de esto, o nos recordaremos 234 00:12:00,779 --> 00:12:05,259 cuando estéis trabajando. Primero, agítese antes de usarse. En el viaje se nos habrán 235 00:12:05,259 --> 00:12:10,379 sedimentado y tal. Vamos a dar unos tubitos con las suspensiones, antes de abrirlo, agitarlo, 236 00:12:10,639 --> 00:12:14,139 porque si las bacterias no son móviles y están por ahí curulando, pues se habrán 237 00:12:14,139 --> 00:12:19,059 sedimentado. Entonces hay que agitarlo bien. Segundo, os vamos a dar torundas estériles. 238 00:12:19,059 --> 00:12:21,799 ¿Alguien sabe qué es una torunda? ¿O isopo? 239 00:12:22,659 --> 00:12:23,220 ¿No es isopo? 240 00:12:23,720 --> 00:12:25,679 Sí, tú, me han hecho la... 241 00:12:25,679 --> 00:12:27,620 Ya es que no se acuerda de lo del COVID, ¿no? 242 00:12:27,620 --> 00:12:29,240 Que se metían hasta la cocina y... 243 00:12:29,240 --> 00:12:31,080 Sí, bueno, 244 00:12:31,639 --> 00:12:33,899 la cosa para tomar la muestra para PCR 245 00:12:33,899 --> 00:12:35,299 o lo que viene en el kit 246 00:12:35,299 --> 00:12:36,679 de autodiagnóstico. 247 00:12:37,340 --> 00:12:39,539 Ese que parece el bastoncillo de los sabidos. 248 00:12:40,179 --> 00:12:40,580 Eso, 249 00:12:41,460 --> 00:12:43,019 antes de que todo el mundo lo conociera, 250 00:12:43,360 --> 00:12:45,980 en las farmacias, en los kits y tal, 251 00:12:46,419 --> 00:12:47,860 pues lo utilizábamos solo en los laboratorios 252 00:12:47,860 --> 00:12:50,019 de microbiología para tomar muestras de mucosas. 253 00:12:50,200 --> 00:12:51,919 Eso se llama isopo. Bueno, pues 254 00:12:51,919 --> 00:12:53,879 se utiliza precisamente para hacer 255 00:12:53,879 --> 00:12:55,820 antibiogramas y ensayos de antibiosis. 256 00:12:56,340 --> 00:12:57,840 No es más que un algodoncito 257 00:12:57,840 --> 00:12:59,860 estéril, ¿no? Cortáis un palo 258 00:12:59,860 --> 00:13:01,500 como el bastoncillo de los oídos, Rami. 259 00:13:01,740 --> 00:13:03,820 Entonces, lo que vais a hacer es mojarlo en la 260 00:13:03,820 --> 00:13:05,899 suspensión. O sea, imaginaos que esta 261 00:13:05,899 --> 00:13:07,820 placa va a ser vuestro gram 262 00:13:07,820 --> 00:13:09,700 negativo, ¿vale? Ponéis gram 263 00:13:09,700 --> 00:13:11,299 negativo y 264 00:13:11,299 --> 00:13:14,039 lo marcáis, pues, escherichia coli, 265 00:13:14,200 --> 00:13:15,840 lo ponéis con el rotulador por detrás, 266 00:13:15,840 --> 00:13:17,240 tal, tal, y 267 00:13:17,240 --> 00:13:19,000 con la torunda 268 00:13:19,000 --> 00:13:21,059 o hisopo, 269 00:13:21,679 --> 00:13:23,500 esta cosa, no pringáis 270 00:13:23,500 --> 00:13:25,299 en el tubo 271 00:13:25,299 --> 00:13:27,679 donde está la suspensión, que ponga 272 00:13:27,679 --> 00:13:29,620 el escribíquia coli, me parece que pone 273 00:13:29,620 --> 00:13:31,299 menos el ram negativo y luego 274 00:13:31,299 --> 00:13:33,340 F, escribíquia coli, ¿vale? 275 00:13:33,519 --> 00:13:34,799 Les diremos cuál es cada una. 276 00:13:35,519 --> 00:13:36,960 Pringáis aquí la torunda, 277 00:13:38,500 --> 00:13:39,659 la empapáis, 278 00:13:40,100 --> 00:13:41,059 la escurrís un poco 279 00:13:41,059 --> 00:13:43,580 al sacarla por el tubo, para que no vaya chorreando 280 00:13:43,580 --> 00:13:44,919 o goteando ahí bacterias que 281 00:13:44,919 --> 00:14:09,919 Y con mucho cuidadito y poniendo la torunda no así, sino así para aprovechar más, así como paralelo a la superficie, vais pasando esa torunda humedecida en la suspensión por toda la superficie con mucha paciencia, mucha paciencia, mucha paciencia, por toda la superficie de la placa. 282 00:14:09,919 --> 00:14:13,200 y cuando hayáis acabado de hacerlo en una dirección 283 00:14:13,200 --> 00:14:14,960 con la misma 284 00:14:14,960 --> 00:14:16,200 torunda, sin cambiar, podéis 285 00:14:16,200 --> 00:14:18,600 rotar un poco, dar la vuelta para aprovechar 286 00:14:18,600 --> 00:14:20,360 otra parte, cruzáis 287 00:14:20,360 --> 00:14:22,899 y en otra 288 00:14:22,899 --> 00:14:24,519 dirección perpendicular 289 00:14:24,519 --> 00:14:26,639 otra vez pasáis por 290 00:14:26,639 --> 00:14:28,620 toda, toda, toda, toda, toda 291 00:14:28,620 --> 00:14:30,179 la placa y por si fuera poco 292 00:14:30,179 --> 00:14:32,679 antes de tirar la torunda al bote con la 293 00:14:32,679 --> 00:14:34,100 bolsa de plástico que le vamos a poner 294 00:14:34,100 --> 00:14:36,620 lo hacéis en una tercera dirección 295 00:14:36,620 --> 00:14:38,539 pasando por toda, toda la placa 296 00:14:38,539 --> 00:14:44,559 de lado, de lado, de lado. ¿Qué hemos conseguido? Pues a ver, si en este tubo teníamos una suspensión 297 00:14:44,559 --> 00:14:49,139 con millones y millones de bacterias, pues lo poco que hemos primado, ahora, igual que 298 00:14:49,139 --> 00:14:53,600 hicimos en su día con las bolitas, pues ahora ayudándonos de la torunda, aprovechamos toda 299 00:14:53,600 --> 00:15:00,340 la superficie de la garra de esta placa para tener la bacteria por todas partes. Si hemos 300 00:15:00,340 --> 00:15:04,759 hecho bien las suspensiones, cuando incubemos esto, en lugar de tener colonias, vamos a 301 00:15:04,759 --> 00:15:09,059 tener un césped, es decir, colonias confluentes, unas con otras todo lleno de bacteria, ¿vale? 302 00:15:09,759 --> 00:15:15,080 Bien, ese es el primer paso solo, ¿vale? Porque esto lo vais a hacer con el gran positivo, 303 00:15:15,299 --> 00:15:20,879 con el gran negativo y con la nevadura, con cándida. Vais a tener tres placas, por supuesto 304 00:15:20,879 --> 00:15:25,899 cada una con una nevadura distinta, no mezcléis unos bichos con otros porque los microbiólogos 305 00:15:25,899 --> 00:15:31,500 siempre trabajamos en un cultivo puro, ¿ok? Una vez que tenéis esas placas marcadas con 306 00:15:31,500 --> 00:15:38,139 rango positivo, rango negativo y cándida, por ejemplo, las cogéis, les dais la vuelta 307 00:15:38,139 --> 00:15:42,080 y con el rotulador hacéis una cuadrícula de esta risa. 308 00:15:53,360 --> 00:15:58,500 4 por 4, 16. Con el rotulador por detrás, o sea, por aquí por el culo hago cha, cha, 309 00:15:58,500 --> 00:16:10,240 Ya tengo delimitados psicológicamente, en mi placa, 16 espacios en el agar para probar 310 00:16:10,240 --> 00:16:11,240 16 mixers. 311 00:16:11,240 --> 00:16:16,960 Que tenéis muchísimos si os venís arriba, podéis hacer una de 5x5 y probáis 25, pero 312 00:16:16,960 --> 00:16:24,259 yo creo que con 16, que en realidad son 15, ya probáis bastantes, ¿vale? 313 00:16:24,259 --> 00:16:32,440 Entonces, una vez hecho esto, los podéis numerar, si queréis, 1, 2, 3, 4, los estoy poniendo al revés, porque luego cuando dais la vuelta a la placa, 314 00:16:32,440 --> 00:16:40,220 en el ataque 1, que lo habéis puesto aquí, pues está el otro, ¿vale? Un poco para que sepáis dónde mover, ¿vale? 5, 6, 7, 8, ¿vale? 315 00:16:40,919 --> 00:16:48,460 Bien. Y en el último ponéis control, un acés de control. Bueno, el último sería este. 316 00:16:48,460 --> 00:17:00,830 Porque lo que vais a hacer es ahora iros a vuestro 1, 2, 3, 4, estos 15 bichos que habéis seleccionado aquí como 15 bichos distintos 317 00:17:00,830 --> 00:17:10,309 y con una herramienta de alta tecnología que se llama palillo de dientes, este es lo que utilizamos en biología molecular 318 00:17:10,309 --> 00:17:15,730 cuando rastreamos una genoteca, por ejemplo, en Escherichia coli, que representamos todos los genes de un organismo, 319 00:17:15,730 --> 00:17:21,549 los tenemos en colonias de coli como estas, y vamos, pica, tal, pica, pica, pica, imagínate, 320 00:17:21,670 --> 00:17:26,210 mucho mejor así que con una pipeta o con tal palillo de dientes, picas un clon único 321 00:17:26,210 --> 00:17:31,730 y lo rescatas, ¿vale? Pues eso es lo que vais a hacer, con un palillo de dientes, buscáis 322 00:17:31,730 --> 00:17:37,029 aquí vuestra colonia, la que habéis llamado número uno, la tocáis solo con la punta 323 00:17:37,029 --> 00:17:41,589 del palillo, o sea, no hace falta arrastrarla y lincharla y luego la clonar, con que toquéis 324 00:17:41,589 --> 00:17:44,490 con la punta del palillo 325 00:17:44,490 --> 00:17:46,509 la colonia 326 00:17:46,509 --> 00:17:48,349 la parte cremosita de la colonia 327 00:17:48,349 --> 00:17:49,329 estáis llevando 328 00:17:49,329 --> 00:17:50,529 no lo veis pero lo estáis llevando 329 00:17:50,529 --> 00:17:51,789 ya habéis visto cómo se ha formado la colonia 330 00:17:51,789 --> 00:17:53,990 millones de células idénticas y crónicas 331 00:17:53,990 --> 00:17:56,250 entonces esa punta del palillo 332 00:17:56,250 --> 00:17:58,809 venís aquí, abrís la placa 333 00:17:58,809 --> 00:18:00,450 y encima del cuadradito uno 334 00:18:00,450 --> 00:18:00,990 hacéis 335 00:18:00,990 --> 00:18:05,130 abajo 336 00:18:05,130 --> 00:18:06,450 abajo 337 00:18:06,450 --> 00:18:07,390 abajo 338 00:18:07,390 --> 00:18:10,170 hacéis 339 00:18:10,170 --> 00:18:13,779 solo 340 00:18:13,779 --> 00:18:16,220 acariciáis la superficie 341 00:18:16,220 --> 00:18:17,660 de la barra, en esa zona hacéis 342 00:18:17,660 --> 00:18:19,940 una rayita en el centro 343 00:18:19,940 --> 00:18:22,099 o un punto incluso en el centro 344 00:18:22,099 --> 00:18:22,420 así 345 00:18:22,420 --> 00:18:25,259 en el centro de la pasta 346 00:18:25,259 --> 00:18:26,740 ¿vale? 347 00:18:28,319 --> 00:18:29,480 tiráis ese palillo 348 00:18:29,480 --> 00:18:31,859 ¿por qué? porque ese palillo 349 00:18:31,859 --> 00:18:34,039 está contaminado 350 00:18:34,039 --> 00:18:35,619 con lo que hay en el césped 351 00:18:35,619 --> 00:18:38,000 con cándida, con cocuria, con el 352 00:18:38,000 --> 00:18:38,660 que hay que colir 353 00:18:38,660 --> 00:18:40,920 aparte de lo que ya habéis cogido 354 00:18:40,920 --> 00:18:43,759 Cogéis un palillo nuevo y volvéis a la colonia 1 355 00:18:43,759 --> 00:18:45,299 Que no os preocupéis, que aunque sea muy pequeña 356 00:18:45,299 --> 00:18:47,200 Seguís teniendo millones de cédulas 357 00:18:47,200 --> 00:18:49,980 La volvéis a tocar y os vais a la otra placa 358 00:18:49,980 --> 00:18:52,680 Si está en el gran positivo, pues al gran negativo 359 00:18:52,680 --> 00:18:53,539 Y al mismo sitio 360 00:18:53,539 --> 00:18:55,240 Diráis el palillo 361 00:18:55,240 --> 00:18:57,640 Al bote, cogéis otro palillo 362 00:18:57,640 --> 00:18:59,920 Y esa misma colonia, la número 1 363 00:18:59,920 --> 00:19:02,680 Al siguiente equivalente de la tercera placa 364 00:19:02,680 --> 00:19:03,640 La del hongo 365 00:19:03,640 --> 00:19:05,299 Por tanto, al final 366 00:19:05,299 --> 00:19:07,519 Vamos a tener tres placas iguales 367 00:19:07,519 --> 00:19:09,079 Cada una con un césped distinto 368 00:19:09,079 --> 00:19:10,900 Un gran positivo, un gran negativo y uno 369 00:19:10,900 --> 00:19:37,059 Pero lo que vamos a ir poniendo luego encima de ese césped, que todavía está sin crecer, claro, son las mismas 15 colonias en el mismo orden y al final el control que os lo vamos a dar nosotros, unas placas que hay por ahí circulando, unas placas que se ponen IA2, que ya os lo digo, es un pseudomonas entomófila que aislamos del río Manzanares, que tiene cierta actividad antibiótica, sobre todo frente a ramos positivos. 370 00:19:37,059 --> 00:19:40,559 siempre hay que poner un control positivo en los experimentos 371 00:19:40,559 --> 00:19:42,359 porque si ese no sale 372 00:19:42,359 --> 00:19:43,380 pues algo ha salido mal 373 00:19:43,380 --> 00:19:45,900 entonces no nos podemos fiar de los resultados 374 00:19:45,900 --> 00:19:47,420 ¿vale? 375 00:19:48,140 --> 00:19:49,799 entonces, repito 376 00:19:49,799 --> 00:19:51,200 testbed 377 00:19:51,200 --> 00:19:54,359 3 plazas distintas y luego replicar 378 00:19:54,359 --> 00:19:56,559 las mismas 15 colonias 379 00:19:56,559 --> 00:19:57,160 más 380 00:19:57,160 --> 00:19:59,400 el control 381 00:19:59,400 --> 00:20:02,339 y ya tenemos sembrado el experimento 382 00:20:02,339 --> 00:20:04,420 ¿ahora qué va a pasar? pues que vamos a llevar esto a incubar 383 00:20:04,420 --> 00:20:06,799 no veis nada, solo donde vais a pinchar 384 00:20:06,799 --> 00:20:10,500 con el palillo y poco más. Vamos a llevar esto a incubar. ¿Qué va a pasar? Pues que 385 00:20:10,500 --> 00:20:16,619 en 24-48 horas el césped va a crecer por todas partes. Y si aquí hemos pinchado un 386 00:20:16,619 --> 00:20:26,059 microorganismo que produce un antibiótico, va a inhibir en torno a ese crecimiento, va 387 00:20:26,059 --> 00:20:31,019 a generarse una zona en la que el propio césped no va a crecer. Es lo que se llama un halo 388 00:20:31,019 --> 00:20:38,160 de inhibición. Eureka, este microorganismo está inhibiendo al otro microorganismo, al 389 00:20:38,160 --> 00:20:42,180 del fondo. Este ensayo de antibióticos me ha dado positivo. Y este microorganismo es 390 00:20:42,180 --> 00:20:46,140 interesante, es interesante estudiar su química, estudiar por qué está inhibiendo al otro. 391 00:20:46,980 --> 00:20:53,339 Está produciendo un antibiótico, o una bacteriocina, o algo que inhibe al otro mismo. ¿Lo habéis 392 00:20:53,339 --> 00:20:59,079 pillado? ¿Sabéis más o menos lo que hay que hacer? Vale, pues todavía os quiero poner 393 00:20:59,079 --> 00:21:29,059 Antes de ir al laboratorio. 394 00:21:29,079 --> 00:21:51,819 el campus virtual 395 00:21:51,819 --> 00:21:53,920 de la universidad es un Moodle 396 00:21:53,920 --> 00:21:54,980 como lo que estáis usando 397 00:21:54,980 --> 00:21:55,720 es un Moodle 398 00:21:55,720 --> 00:21:58,599 vamos a ver 399 00:21:58,599 --> 00:22:01,259 el famoso experimento de Kishoni 400 00:22:01,259 --> 00:22:05,440 Kishoni Lab 401 00:22:05,440 --> 00:22:07,319 Kishoni es un investigador microbiólogo 402 00:22:07,319 --> 00:22:08,240 de la Universidad de Harvard 403 00:22:08,240 --> 00:22:11,700 y hizo un 404 00:22:11,700 --> 00:22:12,500 experimento en vivo 405 00:22:12,500 --> 00:22:14,680 con una bacteria 406 00:22:14,680 --> 00:22:17,039 que era sensible 407 00:22:17,039 --> 00:22:18,859 a un antibiótico 408 00:22:18,859 --> 00:22:19,579 en concreto 409 00:22:19,579 --> 00:22:22,259 entonces para que entendáis lo que va a pasar 410 00:22:22,259 --> 00:22:23,579 es lo que hace es 411 00:22:23,579 --> 00:22:26,279 hace una placa Petri como esta 412 00:22:26,279 --> 00:22:27,740 pero cuadrada, rectangular 413 00:22:27,740 --> 00:22:30,819 y lo que hace es incluir 414 00:22:31,259 --> 00:22:38,720 antibiótico dentro de la larga, pero no una concentración única, sino un gradiente, 415 00:22:39,200 --> 00:22:44,079 de tal manera que desde los lados al centro hay 0 microgramo mililitro de antibiótico, 416 00:22:44,339 --> 00:22:50,900 1 microgramo mililitro, 10, 100 y en el centro hay 1000, es decir, en el centro de la placa 417 00:22:50,900 --> 00:22:55,819 hay 1000 veces más antibiótico que en el centro. Lo que vamos a ver es lo mismo que 418 00:22:55,819 --> 00:23:00,519 hemos visto al principio, esa placa está en una cámara y esto es un timelapse, van 419 00:23:00,519 --> 00:23:07,599 sacando un fotograma pues cada 10 minutos entonces ahora lo que ha pasado en 11 días lo vemos en 30 420 00:23:07,599 --> 00:23:13,779 segundos y lo que vamos a ver es como esa bacteria que la siembra en los lagos donde 421 00:23:13,779 --> 00:23:18,759 no hay antibiótico crece hasta la frontera donde hay antibiótico y la pobre pues no puede seguir 422 00:23:18,759 --> 00:23:25,000 no puede seguir hasta que muta hasta que muta y entonces comienza a invadir la parte con antibiótico 423 00:23:25,000 --> 00:23:28,960 y se para donde empieza a haber 10 veces más antibióticos. 424 00:23:29,099 --> 00:23:31,039 Y que, ostras, con esto no puedo. Hasta que mudas. 425 00:23:31,599 --> 00:23:40,079 Entonces, sí, o sea, estáis viendo en vivo esa evolución albiniana de adaptación a la presión selectiva del medio 426 00:23:40,079 --> 00:23:46,319 de cómo la bacteria va mutando y se va haciendo delante de nuestros ojos resistente al antibiótico. 427 00:23:46,319 --> 00:23:50,019 Esto es la prueba de que si nosotros indicamos un antibiótico de manera más masiva, 428 00:23:50,380 --> 00:23:53,500 las bacterias hacen esto y al final no la podemos tratar con nada. 429 00:23:53,500 --> 00:24:26,970 A ver si me funciona. 430 00:24:26,990 --> 00:24:40,710 esto tiene sonido 431 00:24:40,710 --> 00:24:41,670 bueno, eso explica 432 00:24:41,670 --> 00:24:43,049 no se ve todo 433 00:24:43,049 --> 00:24:45,130 es que no sé si se puede poner en pantalla completa 434 00:24:56,990 --> 00:25:05,130 Finalmente, la banda central tiene mil veces más antibióticos, y luego a través del topo, por supuesto, de agar, las bacterias pueden moverse alrededor de ella. 435 00:25:05,710 --> 00:25:20,089 El fondo es negro porque es incoherente, y las bacterias, primero, se ven que se expanden en el área donde no hay antibióticos, hasta el punto en el que no podrían sobrevivir. 436 00:25:21,529 --> 00:25:29,890 Luego, un mutante aparece a la derecha, es resistente al antibiótico, se expande, hasta que comienza a competir con otros mutantes alrededor de él. 437 00:25:29,890 --> 00:25:41,059 Cuando estas mutaciones llegan a la siguiente frontera, también tienen que causar y desarrollar nuevas mutaciones para hacer que tengamos 10 veces más antibióticos. 438 00:25:44,980 --> 00:25:48,140 Y luego ves que las mutaciones diferentes repeten esto a 100. 439 00:25:51,759 --> 00:26:08,710 Y así podemos ver que con este proceso de acumulación de mutaciones sucesivas, 440 00:26:08,710 --> 00:26:17,710 que las bacterias que normalmente son sensibles a un antibiótico pueden evolucionar en resistencia a concentraciones extremadamente altas en un tiempo corto.