1
00:00:04,019 --> 00:00:27,920
Vale. Bueno, pues, vale. Entonces, el otro día ya terminamos de ver lo que era la replicación. Ya vimos todas las, lo que es el replicoma, todas las enzimas que se necesitan para la replicación.

2
00:00:27,920 --> 00:00:43,439
luego vimos la transcripción, la transcripción que es de ADN a ARN, al ARN mensajero

3
00:00:43,439 --> 00:00:53,630
y vimos como se necesitaba una ARN polimerasa que es la que va a ir copiando

4
00:00:53,630 --> 00:01:00,530
y ya vimos que aquí había que tener cuidado porque como es lo que se copia es de ADN a ARN

5
00:01:00,530 --> 00:01:08,370
y entonces aquí había que tener cuidado porque ya el ARN lo que tiene es en vez de timina tiene uracilo

6
00:01:08,370 --> 00:01:18,430
y las demás la adenina, la guanina y la citosina son iguales pero hay que tener cuidado aquí con el uracilo

7
00:01:18,430 --> 00:01:27,150
y también vimos que conforme se iba originando la cadena de ARN mensajero

8
00:01:27,150 --> 00:01:35,430
se iba separando de la doble cadena y al final esta doble cadena de ADN se vuelve a formar la hélice

9
00:01:35,430 --> 00:01:45,939
y también vimos en la transcripción que hay una etapa de maduración

10
00:01:45,939 --> 00:01:50,159
que solamente lo tienen las células eucariotas

11
00:01:50,159 --> 00:02:00,000
que estas células eucariotas tienen una serie de genes que se llaman, son una serie de fragmentos de secuencias que se llaman intrones

12
00:02:00,000 --> 00:02:04,900
y estos intrones no codifican a ninguna proteína.

13
00:02:04,900 --> 00:02:12,879
Por lo tanto hay una etapa en la transcripción que se llama maduración y que consiste en la eliminación de estos intrones

14
00:02:12,879 --> 00:02:18,900
y después se tienen que unir, los exones que quedan pues se unen.

15
00:02:18,900 --> 00:02:22,639
Eso solamente se da en eucariotas

16
00:02:22,639 --> 00:02:28,360
Y luego vimos la traducción

17
00:02:28,360 --> 00:02:31,180
La traducción que consiste ya en el último paso

18
00:02:31,180 --> 00:02:35,680
Que es de ARN mensajero a proteínas

19
00:02:35,680 --> 00:02:39,539
Y esto se hace ya fuera del núcleo

20
00:02:39,539 --> 00:02:43,159
Aquí en el núcleo tenemos el ADN

21
00:02:43,159 --> 00:02:47,639
Y fuera del núcleo, acordaros que teníamos los ribosomas

22
00:02:47,639 --> 00:02:56,960
y la cadena de ARN mensajero que sale del núcleo y el ribosoma que se coloca en la cadena.

23
00:02:57,800 --> 00:03:02,900
Y luego necesitábamos también unos ARN de transferencia que son estos de aquí.

24
00:03:02,900 --> 00:03:12,539
Y acordaros que estos ARN de transferencia tienen un aminoácido, cada ARN de transferencia tiene un aminoácido asociado

25
00:03:12,539 --> 00:03:34,139
Y cada ARN de transferencia tiene el anticodón del codón del ARN mensajero. En el ARN mensajero cada tres bases es lo que se denomina codón. Por ejemplo, aquí GAU, pues el anticodón sería el del ARN de transferencia.

26
00:03:34,139 --> 00:03:46,280
y el anticodón de este de GAU sería C de citosina, U de uracilo porque estamos también con ARN

27
00:03:46,280 --> 00:03:53,280
y aquí en vez de uracilo pues tendríamos adenina, es el anticodón.

28
00:03:53,280 --> 00:04:16,370
Y también vimos cómo se van uniendo los ARN de transferencia. Cada ARN de transferencia tiene un aminoácido asociado y según se van uniendo los ARN se va formando la proteína.

29
00:04:16,370 --> 00:04:35,069
Esto en colores serían los aminoácidos que se van uniendo uno tras otro y se va formando la proteína y la etapa de traducción termina cuando se llega a un codón que es el codón stop y aquí ya termina la etapa de traducción.

30
00:04:35,069 --> 00:04:58,839
Y entonces veíamos el código genético que cada tres bases equivalen a un aminoácido y también vimos que el código se dice que está degenerado porque hay varios tripletes que codifican para un mismo aminoácido.

31
00:04:58,839 --> 00:05:16,819
Eso lo podemos ver aquí, lo que os decía el otro día, por ejemplo, pues la serina, pues para la serina podemos tener esta secuencia, la UCU o UCC o UCA o UCG.

32
00:05:17,480 --> 00:05:24,680
Estos cuatro combinaciones de bases nitrogenadas nos van a formar la serina.

33
00:05:24,680 --> 00:05:34,009
Y bueno, esta es otra forma de ver el código genético

34
00:05:34,009 --> 00:05:37,790
Que sería, por ejemplo, aquí la serina que hemos dicho

35
00:05:37,790 --> 00:05:42,449
Pues por ejemplo sería la U, la C y luego puede tener otra U

36
00:05:42,449 --> 00:05:45,610
O U, C y otra C

37
00:05:45,610 --> 00:05:51,709
U, C, A, estas darían lugar a la serina

38
00:05:51,709 --> 00:06:16,350
Luego vimos como excepción del dogma central es la retrotranscripción. Al principio se pensaba que solo de ADN se podía formar ARN y de ARN proteínas, pero también se sabe que puede haber lo que se llama retrotranscripción.

39
00:06:16,350 --> 00:06:20,850
O sea, que de ARN mensajero se convierta a ADN.

40
00:06:26,410 --> 00:06:37,129
Vale, pues ahora vamos a pasar a ver las técnicas de extracción, purificación y cuantificación de los ácidos nucleicos.

41
00:06:38,569 --> 00:06:47,430
Entonces, bueno, lo que primero se hace para analizar, para hacer un estudio del ADN,

42
00:06:47,430 --> 00:06:53,970
pues lo primero que sería, había que obtenerlo, extraerlo de las células.

43
00:06:55,170 --> 00:06:58,310
Después lo que se hace es purificar ese ADN.

44
00:06:58,569 --> 00:06:59,709
¿Y cómo se puede purificar?

45
00:06:59,949 --> 00:07:06,209
Pues hay varios métodos que son precipitación, centrifugación o cromatografía.

46
00:07:07,250 --> 00:07:13,829
Y posteriormente se puede hacer una cuantificación mediante la técnica de espectrofotometría

47
00:07:13,829 --> 00:07:23,649
o se puede también hacer un análisis más detallado, una detección mediante electroforesis en gel de agarosa.

48
00:07:25,110 --> 00:07:28,829
Bueno, pues vamos a ver cada uno de estos pasos.

49
00:08:05,180 --> 00:08:13,839
Bueno, pues eso, lo que os comentaba, la extracción y purificación es la primera etapa para los estudios de biología

50
00:08:13,839 --> 00:08:23,319
y lo que nos interesa extraer y sobre todo purificar bien los ácidos nucleicos

51
00:08:23,319 --> 00:08:35,320
para luego analizar, hacer alguna de las técnicas como la PCR o la técnica del ADN recombinante.

52
00:08:35,320 --> 00:08:44,639
combinante. Entonces, elegir una técnica, la técnica más adecuada para extraer y purificar

53
00:08:44,639 --> 00:08:51,299
el ácido nucleico, pues depende de lo que se vaya a hacer, la técnica que se vaya a

54
00:08:51,299 --> 00:08:59,019
emplear después. También depende del ácido nucleico de interés del organismo fuente,

55
00:08:59,019 --> 00:09:06,120
de dónde vamos a obtener ese ADN, si el material de partida es un tejido, una hoja, unas semillas,

56
00:09:06,500 --> 00:09:14,860
un cultivo celular, si lo que queremos es una pureza alta, un alto rendimiento o si

57
00:09:14,860 --> 00:09:23,240
lo que necesitamos es analizar algo que tengamos con algo de urgencia y entonces no nos interesa

58
00:09:23,240 --> 00:09:28,840
tanto la pureza y, bueno, lo que os decía, luego lo que vamos a hacer posteriormente

59
00:09:28,840 --> 00:09:45,789
con ese ADN, qué técnica vamos a utilizar. Las técnicas de análisis del ADN nos pueden

60
00:09:45,789 --> 00:09:52,850
servir para determinar las secuencias de ADN, las secuencias de bases nitrogenadas, para

61
00:09:52,850 --> 00:10:01,090
hacer una clonación, para diagnosticar una enfermedad, para determinar si un organismo

62
00:10:01,090 --> 00:10:10,399
está modificado genéticamente o para pruebas ambientales. Como curiosidad, esto os ponen

63
00:10:10,399 --> 00:10:15,820
ahí en el documento, fijaros que el ADN de dos personas distintas solo se diferencia

64
00:10:15,820 --> 00:10:23,200
en un 0,1%, o sea, poquísimo. Dice, por tanto, en caso de personas sin parentesco,

65
00:10:23,200 --> 00:10:32,200
aproximadamente cada mil bases hay una letra cambiada, solamente una letra entre mil pares de bases.

66
00:10:33,039 --> 00:10:41,000
Pero sin embargo, esta simple diferencia en una letra, esta simple diferencia es suficiente para hacer una huella dactilar genética

67
00:10:41,000 --> 00:10:45,340
y que es una huella de cada uno.

68
00:10:48,700 --> 00:10:57,019
Y bueno, también nos comentan aquí que esta huella de acila se puede obtener con solamente 20 nanogramos de ADN.

69
00:10:59,879 --> 00:11:07,100
Pues para extraer los ácidos nucleicos lo que tenemos que hacer es primero un análisis celular,

70
00:11:07,100 --> 00:11:16,139
O sea, romper la célula, romper sobre todo la membrana que rodea la célula para poder obtener el ácido nucleico.

71
00:11:17,080 --> 00:11:21,080
Por otro lado, tenemos que inactivar las nucleasas celulares.

72
00:11:21,840 --> 00:11:25,700
Nucleasas, eso sonará a enzimas.

73
00:11:25,860 --> 00:11:30,679
¿Os acordáis que las enzimas se nombran comúnmente terminadas en asa?

74
00:11:30,679 --> 00:11:35,440
Pues las nucleasas son enzimas que degradan el ADN.

75
00:11:35,440 --> 00:11:38,039
Por lo tanto, las tenemos que inactivar.

76
00:11:39,220 --> 00:11:46,080
Y después lo que tendremos que hacer es separar esos ácidos nucleicos del resto de componentes de la célula.

77
00:11:47,460 --> 00:12:00,860
Entonces, para hacer un análisis celular, la técnica debe ser, por una parte, fuerte para que rompa el material, que rompa la membrana, que rompa el tejido.

78
00:12:00,860 --> 00:12:10,960
pero por otro lado tiene que ser suave para que no se nos rompa el ácido nucleico que estamos buscando, que queremos analizar.

79
00:12:13,590 --> 00:12:27,250
Para ello hay varios procedimientos, uno de ellos sería la rotura mecánica, puede ser simplemente por trituración en un mortero o puede ser por lisis hipotónica.

80
00:12:27,250 --> 00:12:41,350
Esto, si os acordáis de las proteínas, vimos algo parecido. Ponemos las células en una disolución de menor concentración y por osmosis la célula se va hinchando hasta que acaba rompiéndose.

81
00:12:41,350 --> 00:12:52,009
O puede ser también por congelación y descongelación con nitrógeno líquido. Eso sería rotura mecánica.

82
00:12:52,889 --> 00:13:08,250
Otra forma, pues mediante tratamiento químico, simplemente poner nuestro compuesto con detergentes, que puede ser con calor o sin calor, o con compuestos caotrópicos, sales caotrópicas.

83
00:13:08,250 --> 00:13:18,669
Las sales caotrópicas son la urea, la tiourea y estas sales lo que hacen es romper los puentes de hidrógeno y por lo tanto desnaturalizan.

84
00:13:19,850 --> 00:13:32,350
Y otra opción es hacer una digestión enzimática simplemente con enzimas, con proteínasa o lisuzima para obtener así el ADN.

85
00:13:32,350 --> 00:13:54,220
También es posible a la vez que rompemos la membrana celular, es posible a la vez inactivar las nucleasas

86
00:13:54,220 --> 00:14:04,299
Y esto se hace mediante una disolución estampón, disolución estampón de extracción que nos sirve para hacer las dos cosas

87
00:14:04,299 --> 00:14:17,679
Entonces, bueno, pues una disolución puede tener detergentes que solubilizan las membranas y además tener también sales caotrópicas que inactivan las enzimas.

88
00:14:18,000 --> 00:14:32,909
Una vez que ya hemos roto la célula, pues lo que podemos hacer es eliminar los restos de componentes de la célula simplemente pues filtrando o centrifugando.

89
00:14:32,909 --> 00:14:58,679
El ADN se precipita con alcohol, con alcohol muy frío y este alcohol puede ser o etanol o isopropanol o el alcohol isoamílico, porque los ácidos nucleicos son insolubles en los alcoholes y además también así conseguimos eliminar las sales.

90
00:14:58,679 --> 00:15:19,299
Y una vez que tenemos precipitado el ADN también podemos hacer una primera purificación y consiste en añadir, por ejemplo, proteasas, que lo que van a hacer las proteasas va a ser desnaturalizar las proteínas que están unidas al ADN, como por ejemplo las histonas.

91
00:15:19,299 --> 00:15:34,820
Si os acordáis en el ADN de células eucariotas, el ADN cuando se iba enrollando hasta formar los cromosomas, el ADN se une a histonas, a esas proteínas que se llaman histonas.

92
00:15:34,940 --> 00:15:49,120
Por lo tanto, para eliminar esas proteínas lo que podemos hacer es añadir unas enzimas que se llaman proteasas y esas enzimas van a desnaturalizar las proteínas que están unidas al ADN.

93
00:15:49,299 --> 00:16:11,279
Y por otro lado también se suele añadir un agente quelante que es el EDTA o igual a veces lo habéis visto como AEDT, que es un reactivo que se utiliza para captar protones, perdón, cationes de calcio o magnesio.

94
00:16:11,279 --> 00:16:23,539
Y si os acordáis, cuando vimos las enzimas, había algunas enzimas que necesitaban de un cofactor para poder funcionar.

95
00:16:23,539 --> 00:16:43,440
Pues entonces, si eliminamos estos cationes, pues las enzimas, como por ejemplo la adenasa, estas enzimas degradan el ADN, pues si eliminamos estos cationes, la enzima no va a poder funcionar, no va a poder degradar al ADN.

96
00:16:43,440 --> 00:17:12,039
Entonces cuando se hace la extracción del ADN normalmente se hace o por rotura mecánica o por tratamiento químico o por digestión enzimática y una vez que tenemos el ADN lo que hacemos es eliminar las proteínas que pueda haber y eliminamos también mediante el EDTA los cationes para que las enzimas que pueda haber como la adenasa no degraden el ADN.

97
00:17:12,039 --> 00:17:41,640
En el caso de si queremos extraer el ADN plasmídico, si os acordáis, las bacterias tienen el ADN genómico, pero luego hay algunas bacterias que tienen un ADN que es extracromosómico y que se llaman plasmidos.

98
00:17:41,640 --> 00:17:47,400
Pues si lo que queremos hacer es extraer el ADN plasmídico

99
00:17:47,400 --> 00:17:53,400
lo que podemos hacer es que como ese ADN plasmídico es más pequeño que el ADN genómico

100
00:17:53,400 --> 00:18:00,000
lo que se hace es primero una desnaturalización del ADN, de todo el ADN que haya

101
00:18:00,000 --> 00:18:07,420
y seguidamente se hace una renaturalización, es decir, se vuelven a desnaturalización

102
00:18:07,420 --> 00:18:13,619
acordaros que era romper los puentes de hidrógeno que había entre las bases nitrogenadas,

103
00:18:13,920 --> 00:18:20,359
o sea, separar las dos cadenas y después se puede hacer una renaturalización, o sea, unir otra vez esas dos cadenas.

104
00:18:21,180 --> 00:18:27,420
Entonces, como el ADN plasmídico es más pequeño, tarda más en renaturalizarse

105
00:18:27,420 --> 00:18:36,059
y por lo tanto el ADN genómico va a precipitar porque se va a formar en la doble hélice más rápida

106
00:18:36,059 --> 00:18:40,119
Y en cambio el plasmídico se nos queda en disolución.

107
00:18:41,440 --> 00:18:45,559
Y así podemos extraer el ADN plasmídico.

108
00:18:46,819 --> 00:18:55,480
Bueno, pues hay dos técnicas que simplemente es por la cantidad de muestra que se analiza.

109
00:18:56,440 --> 00:19:00,200
Una se llama la mini-prep y otra técnica es la maxi-prep.

110
00:19:01,200 --> 00:19:04,500
Entonces es la misma técnica, lo que pasa que esta a escala mayor.

111
00:19:04,500 --> 00:19:14,799
La mini-prep se utilizan 10-30 microgramos y la maxi-prep ya se utilizan cantidades mayores, entre 0,1 y 1 miligramos.

112
00:19:15,839 --> 00:19:27,880
Y ahí en el documento del aula virtual tenéis un poco cómo se haría esta extracción de ADN plasmídico.

113
00:19:27,880 --> 00:19:56,220
Y bueno, simplemente lo que os dicen es, pues se rompen las células del cultivo y aquí dicen mediante un choque alcalino y bueno, se toma un volumen de entre 2 y 5 mililitros de un cultivo

114
00:19:56,220 --> 00:20:02,779
y después se resuspende el pellet, se hace una centrifugación y se resuspende el pellet.

115
00:20:04,000 --> 00:20:10,680
Y se le añade una disolución de hidróxido de sodio y el SDS.

116
00:20:13,539 --> 00:20:19,119
Y entonces, después de esto, con esto se desnaturaliza el ADN

117
00:20:19,119 --> 00:20:24,880
y seguidamente se añade una mezcla de acetato potásico y ácido acético.

118
00:20:24,880 --> 00:20:34,500
genómico y esto provoca la renaturalización del ADN. El ADN plasmídico queda en suspensión

119
00:20:34,500 --> 00:20:42,680
y el ADN genómico y el resto de componentes precipitan. Entonces, después se centrifuga

120
00:20:42,680 --> 00:20:52,660
y en la disolución nos va a quedar el ADN plasmídico. Y lo siguiente, bueno, ahí tenéis

121
00:20:52,660 --> 00:21:00,079
también un vídeo, si queréis echar un vistazo sobre cómo se hace esta extracción del ADN

122
00:21:00,079 --> 00:21:07,500
plasmídico. Y lo siguiente que tenemos sería la extracción de ARN. La extracción de ARN

123
00:21:07,500 --> 00:21:14,400
es parecida a la extracción de ADN, lo único que tenemos que tener cuidado es que no tengamos

124
00:21:14,400 --> 00:21:23,519
las enzimas ARNASAS. Estas enzimas lo que hacen es degradar el ARN y para hacer esta

125
00:21:23,519 --> 00:21:32,599
extracción se suele hacer con cloroformo, pero el proceso es muy parecido al del ADN

126
00:21:32,599 --> 00:21:40,779
y actualmente hay kits para extraer tanto el ADN genómico como el plasmídico como

127
00:21:40,779 --> 00:22:12,700
El ARN. Bueno, esto ya es lo que os he contado antes. Una vez que se extrae el ADN, se precipita en alcohol. Lo del frío es muy importante, tenerlo en frío. Y bueno, esto ya es lo que os he comentado.

128
00:22:12,700 --> 00:22:24,640
Luego, para una primera purificación, se añaden las proteasas para eliminar las histonas y el EDTA que elimina los cationes de calcio y magnesio.

129
00:22:27,079 --> 00:22:35,559
Para trabajar con ácidos nucleicos hay que tener cuidado en el laboratorio y trabajar, por ejemplo, con guantes.

130
00:22:36,460 --> 00:22:40,480
Las muestras siempre hay que mantenerlas en hielo, esto es importante.

131
00:22:40,480 --> 00:22:45,200
Bueno, las muestras, las disoluciones tampón también

132
00:22:45,200 --> 00:22:49,019
Es mejor no usar vórtex en la extracción

133
00:22:49,019 --> 00:22:54,980
El vórtex es simplemente para agitar una disolución

134
00:22:54,980 --> 00:23:00,180
Prevenir al máximo las contaminaciones

135
00:23:00,180 --> 00:23:04,960
Y todos los extractos que obtengamos los tenemos que conservar

136
00:23:04,960 --> 00:23:08,839
O en agua o en una disolución tampón apropiada

137
00:23:08,839 --> 00:23:13,740
y a menos 20 grados centígrados, o sea, mejor en el congelador.

138
00:23:19,539 --> 00:23:31,440
Ahora, para purificar los ácidos nucleicos, pues se puede utilizar una de estas tres técnicas,

139
00:23:31,619 --> 00:23:34,119
pero normalmente lo que se hace es combinarlas.

140
00:23:36,000 --> 00:23:41,900
Entonces puede ser extracción-precipitación o una centrifugación o una cromatografía.

141
00:23:41,900 --> 00:23:53,960
Para hacer una extracción precipitación sería una extracción líquido-líquido en el que utilizaríamos disolventes como fenol cloroformo

142
00:23:53,960 --> 00:24:03,460
y así se eliminarían las proteínas y el ARN nos quedaría en la fase acusa y en la fase orgánica nos quedaría el ADN

143
00:24:03,460 --> 00:24:16,920
Sin embargo, esta técnica tiene como desventajas que el fenol y el cloroformo son reactivos peligrosos, son incómodos de utilizar y la extracción es un tanto laboriosa.

144
00:24:19,140 --> 00:24:26,779
Otra forma de purificarlo el ADN obtenido sería mediante centrifugación.

145
00:24:26,779 --> 00:24:40,500
Y la centrifugación se hace preparando una disolución de cloruro de cesio que va a tener diferentes zonas que van a tener diferente densidad.

146
00:24:41,839 --> 00:24:48,880
Entonces, el ADN o el ARN se van a separar en función de su densidad.

147
00:24:48,880 --> 00:25:14,910
O sea, simplemente es eso, preparar una disolución de cloruro de sodio que va a tener diferentes gradientes, diferentes tramos en la que tenemos diferentes densidades y ahí se va a quedar el ADN en un gradiente o en otro dependiendo de su densidad.

148
00:25:14,910 --> 00:25:24,309
densidad. Y por último tenemos la técnica de cromatografía que ya la vimos un poco en proteínas

149
00:25:24,309 --> 00:25:34,309
y esta técnica, os acordáis que teníamos una fase estacionaria y una fase móvil. Entonces hay

150
00:25:34,309 --> 00:25:41,029
diferentes tipos de cromatografía para ADN, tenemos cromatografía de exclusión molecular que se llama

151
00:25:41,029 --> 00:25:48,430
también permeación sobre gel, cromatografía de intercambio iónico y cromatografía de

152
00:25:48,430 --> 00:25:55,369
absorción. Vamos a verlas un poquito, aunque vamos a repasarlas, aunque ya vimos un poco

153
00:25:55,369 --> 00:26:03,990
en proteínas. Si os acordáis, la cromatografía de permeación sobre gel simplemente era que

154
00:26:03,990 --> 00:26:14,890
La fase estacionaria era una matriz, normalmente un polímero, y esa matriz, ese polímero, lo que tiene son como bolas que tienen poros,

155
00:26:14,890 --> 00:26:26,549
que tienen poros en los que se van quedando retenidas las moléculas de menor tamaño y las moléculas de mayor tamaño van a salir primero.

156
00:26:26,549 --> 00:26:35,410
Y así se van separando los componentes de nuestra muestra en función de la masa molecular.

157
00:26:36,869 --> 00:26:41,130
Entonces esto es exclusión molecular o permeación sobre gel.

158
00:26:42,470 --> 00:26:46,509
Después tenemos la técnica, la cromatografía de intercambio iónico.

159
00:26:47,170 --> 00:26:52,569
Si os acordáis de esta técnica, la matriz, que es la fase estacionaria, está cargada,

160
00:26:52,569 --> 00:26:57,029
que podía ser que estuviera cargada positivamente o negativamente

161
00:26:57,029 --> 00:27:01,950
y en función de la carga de los componentes de nuestra muestra

162
00:27:01,950 --> 00:27:06,450
pues se van uniendo a la matriz o van eluyendo.

163
00:27:08,150 --> 00:27:13,390
Bueno, pues aquí también podemos ir separando los ácidos nucleicos

164
00:27:13,390 --> 00:27:19,250
como tienen el grupo fosfato, tienen carga negativa

165
00:27:19,250 --> 00:27:24,869
y por lo tanto necesitaremos una matriz con carga positiva

166
00:27:24,869 --> 00:27:29,250
para que los ácidos nucleicos queden ahí unidos a la matriz

167
00:27:29,250 --> 00:27:35,829
y así separaríamos el resto de componentes que tengamos ahí en la disolución

168
00:27:35,829 --> 00:27:41,450
por si queda alguna proteína o algún otro reactivo

169
00:27:41,450 --> 00:27:44,910
y una vez que ya tenemos separados esos componentes

170
00:27:44,910 --> 00:27:53,670
pues ya solo nos quedaría sacar esos ácidos nucleicos que se han quedado unidos a la fase estacionaria,

171
00:27:53,829 --> 00:27:59,589
ya nos quedaría el huirlos, o sea, ya separarlos de la fase estacionaria.

172
00:28:02,140 --> 00:28:08,700
Y por último tendríamos la cromatografía de absorción, que en esta cromatografía como fase estacionaria

173
00:28:08,700 --> 00:28:16,380
se utiliza sílice o vidrio y en presencia de sales caotrópicas.

174
00:28:16,539 --> 00:28:35,519
Entonces los ácidos nucleicos se fijan a esta matriz de sílice o vidrio y lo mismo, una vez que ya tenemos separados los ácidos nucleicos pues los eluimos con agua o con otro tapón salino.

175
00:28:35,519 --> 00:29:00,740
Bueno, pues ya hemos extraído el ADN y hemos hecho una purificación, pues podemos haber hecho una centrifugación y luego una cromatografía o simplemente solo una cromatografía, normalmente se combinan las técnicas.

176
00:29:01,740 --> 00:29:11,039
Bien, pues ahora tenemos nuestro ADN, pero queremos saber cómo de puro tenemos esa muestra de ADN.

177
00:29:12,259 --> 00:29:17,579
Bueno, pues esto se analiza mediante espectrofotometría de luz ultravioleta.

178
00:29:19,180 --> 00:29:24,740
También se puede analizar por luz visible, pero ya se necesitan otro tipo de reactivos.

179
00:29:24,740 --> 00:29:38,369
activos. El ADN y el ARN y los oligonucleótidos, incluso los mononucleótidos pueden cuantificarse

180
00:29:38,369 --> 00:29:44,609
directamente en disoluciones acuosas, en forma diluida o sin diluir, midiendo la absorbancia

181
00:29:44,609 --> 00:29:54,630
de luz ultravioleta. Entonces, si la muestra es pura, pues vamos a medir la absorbancia,

182
00:29:54,630 --> 00:30:04,430
O sea, vamos a incidir a nuestra muestra con una luz ultravioleta y la muestra va a absorber parte de esa luz.

183
00:30:05,349 --> 00:30:09,890
Pues vamos a medir cuánto absorbe nuestra muestra a 260.

184
00:30:11,509 --> 00:30:14,309
Esta será la medida para los ácidos nucleicos.

185
00:30:16,309 --> 00:30:23,329
Y podemos medir la concentración de esa disolución que tenemos.

186
00:30:23,329 --> 00:30:31,289
podemos medir la concentración, midiendo la absorbancia a esta longitud de onda y comparando con un blanco.

187
00:30:32,390 --> 00:30:39,210
Normalmente los ácidos nucleicos se disuelven en una disolución tampón, acuosa, que es el TE.

188
00:30:40,210 --> 00:30:46,750
Esto que os suene, el TE, que es el Tris y el Ecta, el EDTA.

189
00:30:47,710 --> 00:30:51,190
Una disolución tampón, el TE.

190
00:30:51,190 --> 00:31:04,849
Entonces, sí, bueno este sería el espectrofotómetro y estas serían las cubetas que se utilizan para este tipo de espectrofotómetro

191
00:31:04,849 --> 00:31:16,329
que son un tipo de cubetas especiales, son diferentes a las cubetas que se utilizan normalmente en ultravioletas, tienen menor capacidad

192
00:31:16,329 --> 00:31:28,430
Y aquí en este instrumento lo que vamos a tener es, nos va a dar la absorbancia y nos va a dar también la relación de absorbancias.

193
00:31:29,230 --> 00:31:33,750
Ahora vamos a ver lo de la relación de absorbancias. Vamos a mirar primero la absorbancia.

194
00:31:34,490 --> 00:31:44,509
Entonces, si el paso de luz es de 10 milímetros, el paso de luz se refiere al tamaño de la cubeta, que normalmente suele ser de 10 milímetros.

195
00:31:44,509 --> 00:32:00,349
Y si la longitud de onda que estamos midiendo es a 260, pues si la absorbancia nos sale 1, esto quiere decir que tenemos como alrededor de 50 microgramos por mililitro de ADN de doble cadena.

196
00:32:02,250 --> 00:32:12,369
Si lo que tenemos es una sola cadena de ADN, pues si la absorbancia nos da 1, tendríamos 37 microgramos mililitro.

197
00:32:12,369 --> 00:32:25,869
Si lo que tenemos es ARN, pues entonces nos va a dar, si la absorbancia nos sale 1, tendríamos una concentración de 40 microgramos por mililitro

198
00:32:25,869 --> 00:32:34,869
Y si son oligonucleótidos y la absorbancia nos sale 1, pues tendremos una concentración de 30 microgramos por mililitro

199
00:32:34,869 --> 00:32:41,069
O sea que podemos cuantificar qué cantidad de ADN tenemos

200
00:32:41,069 --> 00:32:51,589
Eso por un lado. Y por otro lado, lo que podemos hacer es saber cuánto de puro tenemos, cuál es la pureza de nuestro ADN que hemos aislado.

201
00:32:52,750 --> 00:33:02,490
Si os acordáis cuando vimos proteínas, también vimos que la absorción de las proteínas era a 260 nanómetros.

202
00:33:02,490 --> 00:33:24,769
Por lo tanto, si medimos a 260 y medimos a 280 nanómetros y dividimos esas dos absorciones de 260 entre 280, si el valor que nos sale es alrededor de 1,8 o 2, pues eso nos está indicando que tenemos el ADN o el ARN puros.

203
00:33:24,769 --> 00:33:46,700
Ahora, si esa relación nos saliera bastante menor de 1,8 y 2, pues esto nos está indicando que el ADN puede que contenga proteínas, que ya no está tan puro.

204
00:33:46,700 --> 00:34:09,519
Por otro lado, si medimos a 230 y nos sale absorción a 230 nanómetros, esto va a querer decir que la muestra está contaminada, pues puede estar contaminada por hidratos de carbono, por péptidos, por fenoles, por compuestos aromáticos, por otras sustancias.

205
00:34:09,519 --> 00:34:26,239
Y si medimos la relación entre la absorbancia a 260 y la de 230, si esta relación es de 2,2, esto quiere decir que tenemos muestras puras.

206
00:34:26,239 --> 00:34:49,710
Y ya por último, si medimos a 325 y sale absorbancia, si la muestra absorbe aquí a 325 nanómetros, eso nos va a estar indicando que tenemos restos en la disolución o que podemos tener suciedad en la cubeta.

207
00:34:49,710 --> 00:35:05,320
Vale, entonces esto sería para saber qué grado de pureza tiene nuestro ADN.

208
00:35:05,940 --> 00:35:13,679
El más importante es la relación entre la absorbancia 260 y la de 280.

209
00:35:14,940 --> 00:35:19,519
Acordaros que la de 280 sería la absorción de proteínas.

210
00:35:19,519 --> 00:35:27,780
Si nos sale cerca de 1,8 o 2, esto quiere decir que tenemos el ADN bastante puro o el ARN.

211
00:35:34,019 --> 00:35:40,760
Entonces, este instrumento en realidad es un espectrofotómetro.

212
00:35:40,760 --> 00:35:59,539
Para los que vinisteis a prácticas, que medimos la caseína, ¿os acordáis que teníamos unas cubetas? Pues esto simplemente es colocar aquí la cubeta y lo que estamos haciendo es una espectrofotometría.

213
00:35:59,539 --> 00:36:11,280
Hacemos incidir nuestra muestra con una luz ultravioleta y lo que vamos a ver es lo que absorbe, qué cantidad absorbe nuestra muestra

214
00:36:11,280 --> 00:36:23,909
Y el instrumento también nos da directamente la relación de absorbancias, de 260 a 280 también nos lo da directamente

215
00:36:28,079 --> 00:36:48,519
Bueno, pues por último vamos a ver, una vez que tenemos nuestro ADN, el ADN como es una macromolécula, es una molécula muy grande, muchas veces lo que se hace es partir, fragmentarlo, fragmentar el ADN para poder luego analizarlo.

216
00:36:48,519 --> 00:37:00,519
Ya vamos a ver cómo se fragmenta en el próximo día y veremos luego otras técnicas que se utilizan.

217
00:37:02,519 --> 00:37:14,519
Entonces, una vez que tenemos fragmentado el ADN, muchas veces lo que queremos ver es en qué fragmento se ha dividido ese ADN y qué masa molecular tiene ese ADN.

218
00:37:14,519 --> 00:37:34,900
Pues si os acordáis cuando vimos las proteínas que hacíamos también una electroforesis pero aquella era en gel de poliacrilamida y bueno pues esto es algo parecido lo que pasa que aquí el gel que se prepara es un gel de agarosa.

219
00:37:34,900 --> 00:37:40,380
La agarosa es un polisacárido que se obtiene de las algas

220
00:37:40,380 --> 00:37:50,340
y cuando preparamos este gel, lo que ocurre es que este gel va a tener agujerillos,

221
00:37:50,340 --> 00:37:57,559
como pocillos, por los que va a tener que pasar nuestro ADN.

222
00:37:57,559 --> 00:38:10,059
Por lo tanto los ADN que sean de mayor masa molecular pues les va a costar más pasar por esos agujerillos y entonces se van a quedar más retenidos.

223
00:38:10,059 --> 00:38:31,159
Y en cambio los fragmentos de ADN que sean más pequeños, que tengan menor masa molecular, pues van a traspasar fácilmente el gel y van a pasar más rápido que los de mayor masa molecular que se quedan más retenidos.

224
00:38:31,159 --> 00:38:50,940
En este caso, si os acordáis, en el gel de poliacrilamida las cubetas eran verticales. Pues en este caso las cubetas son verticales. Simplemente es una cubeta y lo que vamos a hacer es, bueno, lo primero que se hace es preparar el gel.

225
00:38:50,940 --> 00:39:00,099
simplemente se prepara disolviendo la agarosa, disolviéndola en un tampón, en una disolución tampón adecuada

226
00:39:00,099 --> 00:39:11,900
que puede ser el TAE, la T es del Tris, la A es de ácido acético y la E es del EDTA.

227
00:39:12,639 --> 00:39:17,699
Es otra disolución tampón que se utiliza para preparar estos geles.

228
00:39:17,699 --> 00:39:29,340
y se disuelve la cantidad correspondiente y como la agarosa es líquida a más de 50 grados,

229
00:39:30,000 --> 00:39:40,480
pues la dejamos enfriar directamente en una cubeta, la dejamos enfriar y ahí se nos formará el gel sólido,

230
00:39:40,480 --> 00:39:51,739
se nos quedará un gel sólido. Y antes de que se enfríe, tenemos que poner un peine para que se nos generen ahí unos pocillos.

231
00:39:52,760 --> 00:40:01,980
El gel, imaginaros que este es el gel, pues lo que tenemos que hacer es generar unos pocillos, unos pocillos aquí,

232
00:40:01,980 --> 00:40:07,579
por los que vamos a introducir nuestra muestra.

233
00:40:10,690 --> 00:40:15,429
Entonces, lo que os decía, esos pocillos se generan antes de que se enfríe el gel,

234
00:40:16,030 --> 00:40:21,750
tendríamos que meter aquí un peine para que luego se generen esos pocillos.

235
00:40:22,710 --> 00:40:28,610
Una vez que ya tenemos el gel, lo que se hace es introducir las muestras con una pipeta,

236
00:40:28,610 --> 00:40:31,530
con una micropipeta, se van introduciendo las muestras

237
00:40:31,530 --> 00:40:36,050
y lo que se hace después es aplicar un campo eléctrico.

238
00:40:36,050 --> 00:40:43,050
Esto es como en la electroforesis con gel de poliacrilamida.

239
00:40:45,429 --> 00:40:53,010
Pues aquí como el ADN tiene carga negativa, porque el ADN como tiene los grupos fosfato,

240
00:40:53,670 --> 00:40:56,550
esos grupos fosfato van a aportar carga negativa.

241
00:40:56,550 --> 00:41:11,909
Por lo tanto el ADN cuando le apliquemos un campo eléctrico lo que va a hacer es desplazarse hacia el polo positivo. Todos los fragmentos de ADN se van a desplazar hacia el polo positivo.

242
00:41:12,389 --> 00:41:24,510
Los que tengan mayor masa molecular pues quedarán más retenidos en el gel y los que tengan menor masa molecular pasan a través del gel y aparecen más tarde.

243
00:41:24,510 --> 00:41:36,510
Y aquí lo que se hace también es, igual que en el gel de poliacrilamida, lo que se hace es poner un marcador de masas moleculares.

244
00:41:37,510 --> 00:41:49,489
Un marcador de masas moleculares es una mezcla de fragmentos de ADN de la que conocemos sus masas moleculares y esto nos va a servir como referencia.

245
00:41:49,489 --> 00:41:59,059
Entonces, en este caso tendríamos aquí, este sería el marcador de masas moleculares

246
00:41:59,059 --> 00:42:01,980
Y luego tendríamos nuestra muestra

247
00:42:01,980 --> 00:42:06,199
Aquí serían, hemos cargado aquí una muestra y aquí otra

248
00:42:06,199 --> 00:42:12,300
Entonces, una vez que ya tenemos, hemos aplicado el campo eléctrico

249
00:42:12,300 --> 00:42:15,340
Y ya ha terminado de correr el ADN en el gel

250
00:42:15,340 --> 00:42:20,900
Pues lo que se hace es aplicarle un tinte a nuestro gel

251
00:42:20,900 --> 00:42:22,840
para ver las bandas

252
00:42:22,840 --> 00:42:24,980
bueno pues

253
00:42:24,980 --> 00:42:26,699
antiguamente se utilizaba

254
00:42:26,699 --> 00:42:29,000
el bromuro de etirium

255
00:42:29,000 --> 00:42:30,199
pero

256
00:42:30,199 --> 00:42:33,099
ya casi no se utiliza

257
00:42:33,099 --> 00:42:35,139
porque es un reactivo

258
00:42:35,139 --> 00:42:36,239
que es mutagénico

259
00:42:36,239 --> 00:42:39,099
entonces ahora se ha cambiado por otros

260
00:42:39,099 --> 00:42:40,940
reactivos como por ejemplo hay uno

261
00:42:40,940 --> 00:42:42,199
que se llama el cybergreen

262
00:42:42,199 --> 00:42:45,179
y lo que hace este reactivo

263
00:42:45,179 --> 00:42:46,760
se introduce entre las

264
00:42:46,760 --> 00:42:48,820
la doble hélice de ADN

265
00:42:48,820 --> 00:42:56,519
Y después con una lámpara de luz ultravioleta podemos ver las franjas de ADN que se han ido formando.

266
00:43:01,570 --> 00:43:13,030
Y lo siguiente que tendríamos que hacer es, con nuestra muestra patrón, lo que tenemos que hacer es representar la distancia que han recorrido en el gel,

267
00:43:13,030 --> 00:43:24,550
La distancia que ha recorrido nuestra muestra patrón frente al logaritmo de la longitud del ADN, que esta la conocemos, ¿vale?

268
00:43:24,550 --> 00:43:38,389
Nosotros tendríamos esta muestra patrón que tiene estas, estas serían BP, son pares de bases, por lo tanto sabemos que mediríamos la distancia de aquí hasta aquí

269
00:43:38,389 --> 00:43:48,170
Y esta sería la de 2.000 pares de bases. La siguiente distancia correspondería a 1.500 pares de bases.

270
00:43:48,269 --> 00:43:59,030
La siguiente a 1.000 pares de bases. Así que representaríamos la distancia a la que aparecen en el gel frente a la longitud de este valor.

271
00:43:59,030 --> 00:44:03,889
la distancia que recorren en el gel

272
00:44:03,889 --> 00:44:06,929
la distancia en la que aparece el fragmento

273
00:44:06,929 --> 00:44:10,929
frente al logaritmo del valor

274
00:44:10,929 --> 00:44:15,389
que nos dan de ADN, que en este caso es valor de

275
00:44:15,389 --> 00:44:19,869
pares de bases, por lo tanto haríamos

276
00:44:19,869 --> 00:44:24,070
esa representación que nos tiene que dar una recta dependiente negativa

277
00:44:24,070 --> 00:44:27,670
aquí es un menos 59,8 por x

278
00:44:27,670 --> 00:44:53,630
Y ahora en nuestra muestra, la muestra que midamos, pues mediríamos qué distancia ha recorrido y lo pondríamos en nuestra recta y así calcularíamos el valor, no sé, nos saldría el valor de la longitud, o sea del logaritmo de la longitud del ADN.

279
00:44:53,630 --> 00:44:58,949
Y de ahí tendríamos que despejar lo que es el ADN.

280
00:44:58,949 --> 00:45:34,570
Vale, bueno, en el documento del aula virtual tenéis un ejercicio, tenéis una autoevaluación y si queréis os dejo esta semana para que lo intentéis hacer y ya el próximo día lo podemos corregir.

281
00:45:34,570 --> 00:45:56,510
Y en principio no es muy difícil. Primero identificar las bandas, a qué corresponde cada banda y luego sería hacer la representación esta. Haríamos la representación y nos saldría una recta.

282
00:45:56,510 --> 00:46:10,389
Y a partir de esa recta nos hacen la pregunta, pues si tuviésemos un fragmento de ADN que aparece a tanta distancia, ¿cuál sería el tamaño de ese fragmento de ADN?

283
00:46:10,849 --> 00:46:20,030
Pues entonces tendríamos que medir la distancia y poner aquí ese valor que nos salga y de ahí ya sacaríamos el logaritmo.

284
00:46:20,030 --> 00:46:26,550
Aquí hay que tener cuidado porque lo que sacamos es el logaritmo y de ahí tendríamos que despejar el tamaño de ese ADN.

285
00:46:27,710 --> 00:46:35,030
Bueno, pues este ejercicio os lo dejo para que lo hagáis en casa. Si no sabéis ya, el próximo día ya lo corregimos.

286
00:46:42,440 --> 00:46:48,619
Vale, y entonces ahora, ¿aquí ya terminaría este tema, el tema 3?

287
00:46:49,699 --> 00:46:51,500
Profe, perdone, tengo una pregunta.

288
00:46:51,500 --> 00:46:52,280
Sí, dime.

289
00:46:53,679 --> 00:46:56,079
la X

290
00:46:56,079 --> 00:46:57,980
que dice logaritmo

291
00:46:57,980 --> 00:46:59,659
de la longitud del ADN

292
00:46:59,659 --> 00:47:01,320
viene a ser

293
00:47:01,320 --> 00:47:04,079
el logaritmo de esas bases

294
00:47:04,079 --> 00:47:04,760
de pares

295
00:47:04,760 --> 00:47:07,519
de los pares de bases

296
00:47:07,519 --> 00:47:11,880
el logaritmo de eso es lo que está

297
00:47:11,880 --> 00:47:13,659
trasladado aquí, el logaritmo

298
00:47:13,659 --> 00:47:14,500
en la X

299
00:47:14,500 --> 00:47:17,119
no, no, no

300
00:47:17,119 --> 00:47:19,760
esta X sí que es

301
00:47:19,760 --> 00:47:22,579
en la gráfica

302
00:47:22,579 --> 00:47:25,400
¿Cómo llego yo a esos valores de X?

303
00:47:26,260 --> 00:47:28,840
De 2.2, 2.4, 2.6.

304
00:47:28,860 --> 00:47:31,920
Porque tienes que hacer el logaritmo de...

305
00:47:31,920 --> 00:47:33,199
El logaritmo de...

306
00:47:33,199 --> 00:47:36,760
Sí, el logaritmo de 250, el logaritmo de 500, sí.

307
00:47:37,300 --> 00:47:38,360
Vale, vale, vale, vale.

308
00:47:38,460 --> 00:47:38,840
Ya, ya.

309
00:47:39,960 --> 00:47:40,440
Listo.

310
00:47:40,440 --> 00:47:44,989
Vale, pues entonces, eso.

311
00:47:45,190 --> 00:47:48,030
Aquí terminaríamos el tema 3.

312
00:47:49,650 --> 00:47:53,130
Y, bueno, no sé, ¿tenéis alguna duda más?

313
00:47:56,010 --> 00:47:56,289
No.

314
00:47:56,349 --> 00:48:11,949
Bueno, pues vamos a volver a los problemas que empezamos el otro día y vamos a corregir a ver los que nos dé tiempo. Voy a buscarlos, creo que están aquí.

315
00:48:11,949 --> 00:48:40,119
Sí, vale. Bueno, el otro día hicimos el 11, el 12, no, el 10. El 10 no lo hicimos, ¿no? Yo creo que hicimos el 11, el 12 y el 22.

316
00:48:41,780 --> 00:48:43,059
Exacto, es por lo que sí.

317
00:48:43,059 --> 00:48:59,440
Sí. Bueno, el primero, el 10, es que es fácil. Dice, si un polipeptido tiene 450 aminoácidos, indique cuántos ribonucleótidos tendrá el fragmento de ARN mensajero que codifica esos aminoácidos.

318
00:49:01,199 --> 00:49:04,059
Perdón, el profe no está compartiendo los ejercicios.

319
00:49:05,199 --> 00:49:06,000
Ah, ¿no lo veis?

320
00:49:07,659 --> 00:49:08,019
No.

321
00:49:08,019 --> 00:49:15,119
Ah, vale, pues a ver. Bueno, le voy a dar a detener.

322
00:49:15,840 --> 00:49:58,440
Y luego voy a volver a la pantalla. ¿Ahora? Ahora sí. Vale. Vale, pues el primero decía, si un polipeptido tiene 450 aminoácidos y en cuanto a ribonucleótidos tendrá el fragmento de ARN mensajero que codifica esos aminoácidos.

323
00:49:58,440 --> 00:50:24,420
Pues como vimos que cada tres bases codifican a un aminoácido, pues tendría que ser 450 por 3, que son 1.350. Serían 1.350 ribonucleótidos que tendría ese fragmento de ARN mensajero.

324
00:50:25,599 --> 00:50:26,679
¿Lo veis?

325
00:50:32,050 --> 00:50:32,309
Sí.

326
00:50:37,179 --> 00:50:42,820
Bueno, vamos a ir por orden.

327
00:50:42,820 --> 00:51:00,739
El 23, teniendo en cuenta la tabla de correspondencias entre tripletes y aminoácidos, indique una secuencia de ADN que codifique el péptido, leucina, lanina, prolina, serina, ginina, ginina, valina.

328
00:51:00,739 --> 00:51:23,880
Entonces esto sería buscar en la tabla, que creo que tenemos por aquí, sí, sería ir buscando en la tabla, sería ir buscando pues la leucina, aquí podéis poner cualquiera de estos tripletes, luego pues la prolina, pues cualquiera de estos, vale, aquí se pueden poner cualquiera de esos.

329
00:51:23,880 --> 00:51:55,760
Entonces, pues podría ser, por ejemplo, yo lo que he puesto es… a ver, estoy pensando que igual voy a compartir también las soluciones para que lo veamos, porque si no, así dicho de palabra, yo creo que es peor.

330
00:51:55,760 --> 00:52:47,409
Un segundo que voy a grabarlo. Voy a detener esto. Un momentito que detengo esto y cierro aquí.

331
00:52:47,409 --> 00:54:23,579
¿Veis ahora los ejercicios?

332
00:54:29,760 --> 00:54:30,059
Sí

333
00:54:30,059 --> 00:54:30,739
Vale

334
00:54:30,739 --> 00:54:35,679
Bueno, pues eso, estábamos en el 23

335
00:54:35,679 --> 00:54:38,099
que dice, teniendo en cuenta la tabla de correspondencias

336
00:54:38,099 --> 00:54:39,820
entre tripletes y aminoácidos

337
00:54:39,820 --> 00:54:42,639
indique una secuencia de ADN

338
00:54:42,639 --> 00:54:44,900
hay que tener en cuenta que es ADN

339
00:54:44,900 --> 00:54:46,460
que codifique el péptido

340
00:54:46,460 --> 00:54:59,659
este leucina, alanina, valina, entonces tendríamos que buscar primero en el código genético los tripletes de cada aminoácido,

341
00:55:00,760 --> 00:55:13,139
entonces por ejemplo para leucina pues yo he puesto AUG, pero ya habéis visto que puede haber varios, alanina, CUU, trolina, GCU, serina, CCU,

342
00:55:13,139 --> 00:55:28,900
Así cada uno, pero ese sería el ARN mensajero, o sea, tenemos que ir como hacia atrás. Desde la proteína tenemos que pasar por el ARN mensajero y del ARN mensajero al ADN.

343
00:55:28,900 --> 00:55:49,019
Y entonces, en el ARN mensajero, tened cuidado que hay que poner uracilo, bueno, eso ya como en la tabla ya nos aparece el código genético, o sea, sí, en la tabla del código genético ya nos aparece, ¿dónde está? Aquí, ¿vale?

344
00:55:49,019 --> 00:56:03,389
Entonces, sería buscar ahí en la tabla y a partir de este ARN mensajero, obtener el ADN.

345
00:56:04,030 --> 00:56:06,690
Entonces, el ADN tiene que ser el complementario.

346
00:56:07,550 --> 00:56:11,849
Si hemos puesto aquí adenina, pues aquí tiene que ser timina.

347
00:56:12,550 --> 00:56:15,250
Si hemos puesto uracilo, será adenina.

348
00:56:15,829 --> 00:56:17,329
Guanina, citosina.

349
00:56:18,190 --> 00:56:19,489
Citosina, guanina.

350
00:56:20,110 --> 00:56:21,389
Uracilo, adenina.

351
00:56:21,389 --> 00:56:25,449
uracilo, adenina, guanina, citosina, citosina, guanina

352
00:56:25,449 --> 00:56:28,909
uracilo, adenina, y así sucesivamente

353
00:56:28,909 --> 00:56:33,809
¿vale? ¿lo veis? aquí por ejemplo tenemos uracilo, pues adenina

354
00:56:33,809 --> 00:56:37,010
y aquí adenina, en este caso es timina

355
00:56:37,010 --> 00:56:41,449
porque es ADN, adenina, timina también, que tenemos

356
00:56:41,449 --> 00:56:45,110
ADN, y esta es la cadena 5', 3'

357
00:56:45,110 --> 00:56:49,349
que es el ARN mensajero, el ARN mensajero

358
00:56:49,349 --> 00:56:55,489
siempre va a ser esta, ¿vale? Cinco prima, tres prima. Y de la cadena de la que proviene

359
00:56:55,489 --> 00:57:05,280
es la complementaria, que es la tres prima, cinco prima, el ADN. ¿Alguna duda de esto?

360
00:57:09,400 --> 00:57:14,099
Yo lo que iba a preguntar es que siempre que nos hablen de la secuencia ADN, primero tenemos

361
00:57:14,099 --> 00:57:15,539
que ser la de ARN

362
00:57:15,539 --> 00:57:18,239
ARN mensajero y posteriormente

363
00:57:18,239 --> 00:57:19,099
la de ADN

364
00:57:19,099 --> 00:57:20,519
si nos hablan

365
00:57:20,519 --> 00:57:23,619
si nos hablan de

366
00:57:23,619 --> 00:57:26,079
si nos dicen a partir

367
00:57:26,079 --> 00:57:27,219
de esta proteína

368
00:57:27,219 --> 00:57:28,980
que ADN

369
00:57:28,980 --> 00:57:31,900
o sea a partir de que ADN se ha formado

370
00:57:31,900 --> 00:57:34,079
esta proteína, sí, tenemos que

371
00:57:34,079 --> 00:57:35,880
ir eso, paso a paso

372
00:57:35,880 --> 00:57:37,400
¿vale? porque

373
00:57:37,400 --> 00:57:38,440
si fuera

374
00:57:38,440 --> 00:57:41,940
o sea lo normal es que

375
00:57:41,940 --> 00:57:43,360
a partir de este ADN

376
00:57:43,360 --> 00:57:52,820
De este ADN con la transcripción se obtiene este ARN mensajero y con la traducción se obtiene esta proteína.

377
00:57:53,420 --> 00:58:04,300
Eso sería el paso normal, de ADN se obtienen las proteínas, pero aquí en este ejercicio nos dicen como que ir hacia atrás.

378
00:58:04,300 --> 00:58:09,039
entonces a partir de esta proteína tenemos que buscar el ARN mensajero

379
00:58:09,039 --> 00:58:13,679
y del ARN mensajero tenemos que ir como hacia atrás y buscar el ADN

380
00:58:13,679 --> 00:58:17,000
pero luego puede haber un ejercicio en el que simplemente nos digan

381
00:58:17,000 --> 00:58:21,019
pues a partir de este ADN que ARN mensajero se forma

382
00:58:21,019 --> 00:58:22,800
entonces dependiendo del ejercicio

383
00:58:22,800 --> 00:58:27,860
pero en este caso si tenemos que buscar primero el ARN

384
00:58:27,860 --> 00:58:32,079
bueno, lo podríais hacer directamente haber puesto el ADN

385
00:58:32,079 --> 00:58:38,320
pero bueno, es más fácil hacer el ARN mensajero con la tabla del código genético

386
00:58:38,320 --> 00:58:40,559
y luego a partir de ahí el ADN.

387
00:58:45,460 --> 00:58:47,460
¿Y AUG no es de la medicina?

388
00:58:48,340 --> 00:58:49,780
A ver, que no te oigo bien.

389
00:58:51,679 --> 00:58:59,360
Estaba viendo la tabla y las tres primeras bases AUG no corresponden a la metionina.

390
00:59:01,000 --> 00:59:01,940
¿Cómo lo conté?

391
00:59:03,219 --> 00:59:03,900
A ver.

392
00:59:03,900 --> 00:59:06,860
A lo mejor no está bien

393
00:59:06,860 --> 00:59:14,630
El primero era

394
00:59:14,630 --> 00:59:15,670
Sí, es verdad

395
00:59:15,670 --> 00:59:21,000
Debería ser uno de estos

396
00:59:21,000 --> 00:59:23,000
La leucina es el primero

397
00:59:23,000 --> 00:59:24,940
Ah, pues sí

398
00:59:24,940 --> 00:59:29,159
Sí, pues eso

399
00:59:29,159 --> 00:59:31,679
No sé, vale, eso lo miro

400
00:59:31,679 --> 00:59:35,480
Y luego los otros están bien

401
00:59:35,480 --> 00:59:43,760
A ver, ¿dónde está?

402
00:59:43,900 --> 00:59:45,320
El siguiente es a la nina

403
00:59:45,320 --> 00:59:46,039
Que es T.U.

404
00:59:46,440 --> 00:59:49,320
Ah, vale, sí, ya sé por qué está puesto así

405
00:59:49,320 --> 01:00:03,639
El CU es la leucina.

406
01:00:03,639 --> 01:00:13,119
Es que está puesto así porque como normalmente se empieza por la metionina, pues he añadido ese, pero no haría falta.

407
01:00:13,119 --> 01:00:20,559
Este primero de aquí, os acordáis que el otro día en la traducción vimos que siempre se empezaba por la metionina

408
01:00:20,559 --> 01:00:24,599
Y la metionina corresponde a este, al AUG

409
01:00:24,599 --> 01:00:30,679
Y por eso he puesto este, el AUG, pero bueno, no haría falta poner este

410
01:00:30,679 --> 01:00:34,360
Y luego ya la leucina sí que se corresponde con el CUU

411
01:00:34,360 --> 01:00:38,300
Y la alanina debería ser GCU

412
01:00:38,300 --> 01:00:51,389
¿Y al final también has puesto uno de más?

413
01:00:53,170 --> 01:01:05,889
Sí, a ver un momento, la alanina es GC1.

414
01:01:05,889 --> 01:01:19,989
Claro, luego estaría la prolina, este sería la serina, la arginina, otra arginina, la valina y luego he puesto el de terminación, el stop, que sería UAA.

415
01:01:20,769 --> 01:01:25,769
Pero bueno, que esto si no lo ponéis no pasa nada, está un poco de más.

416
01:01:25,769 --> 01:01:40,489
Por eso ahí está el AUG, que es el que inicia, que es la metionina, y el que termina es el UAA, que es uno de ellos un triple testop. Pero si ponéis solamente estos estaría bien.

417
01:01:40,489 --> 01:01:56,489
Luego el 24 dice, exponga razonadamente si el ADN de una célula de la piel de un individuo contendrá la misma información genética que una célula del hígado

418
01:01:56,489 --> 01:02:02,130
Sintetiza las dos células las mismas proteínas, razone la respuesta

419
01:02:04,849 --> 01:02:13,469
¿Creéis que el ADN de la célula de la piel contiene la misma información que una célula del hígado?

420
01:02:14,389 --> 01:02:34,670
Bueno, la información del ADN sí que es la misma, lo que pasa que la va a codificar a diferentes proteínas dependiendo si es la célula de un hígado o la célula de la piel.

421
01:02:34,670 --> 01:02:43,969
Entonces se sintetizan proteínas diferentes, pero lo que es el ADN, lo que es la información genética sí que es igual en las dos células.

422
01:02:44,789 --> 01:02:48,750
Lo único es que se codifican proteínas diferentes.

423
01:02:49,610 --> 01:03:01,519
Luego este es parte de la secuencia de aminoácidos de una proteína

424
01:03:01,519 --> 01:03:05,179
Está indicada en la fila superior de este cuadro

425
01:03:05,179 --> 01:03:09,019
Tenemos leucina, serina, lanina, glicina y glutámico

426
01:03:09,019 --> 01:03:15,039
Copie la siguiente tabla y complete los espacios en blanco con los tripletes correspondientes

427
01:03:15,039 --> 01:03:21,760
Bueno pues aquí por ejemplo en el primero nos daban la leucina y nos dan el ADN molde

428
01:03:21,760 --> 01:03:24,280
que es el AAC

429
01:03:24,280 --> 01:03:28,500
pues entonces a partir de aquí

430
01:03:28,500 --> 01:03:30,900
del ADN molde tendríamos que

431
01:03:30,900 --> 01:03:33,519
poner el ARN mensajero

432
01:03:33,519 --> 01:03:36,900
como es el complementario sería uracilo

433
01:03:36,900 --> 01:03:39,079
uracilo y

434
01:03:39,079 --> 01:03:42,199
citosina guanina

435
01:03:42,199 --> 01:03:45,500
UUG, este sería el ARN

436
01:03:46,179 --> 01:03:48,699
mensajero y luego el ARN

437
01:03:48,699 --> 01:03:51,579
de transferencia pues sería AAC

438
01:03:51,579 --> 01:03:56,719
sería el complementario a este ARN mensajero, el AAC.

439
01:03:58,360 --> 01:04:04,000
En la siguiente tabla nos dan la serina y aquí nos dan el ARN mensajero.

440
01:04:04,840 --> 01:04:09,980
Pues el ADN molde del que proviene, que será el complementario,

441
01:04:10,679 --> 01:04:14,159
en vez de uracilo tenemos adenina, en vez de citosina, guanina,

442
01:04:14,159 --> 01:04:16,900
en vez de uracilo, adenina.

443
01:04:16,900 --> 01:04:36,179
Y el ARN de transferencia es igual, que es adenina también, AGA. Aquí, por ejemplo, hay que tener cuidado aquí con la glicina. Con la glicina nos dan el ARN de transferencia, que es CCU.

444
01:04:36,179 --> 01:04:55,360
Luego, este ARN de transferencia es el anticodón, acordaros que el nombre es anticodón, del codón este que es del ARN mensajero, entonces citosina, guanina, citosina, guanina, uracilo, adenina.

445
01:04:55,360 --> 01:05:11,519
Y el ADN molde sería CCT. Fijaros que aquí el ADN molde es CCT y el ARN de transferencia CCU. Fijaros que no siempre es igual el ARN de transferencia que el ADN molde.

446
01:05:11,519 --> 01:05:33,159
Aquí lo mismo, aquí el ADN molde es CCT, luego el ARN de transferencia sería el complementario GAA y el ARN mensajero GAA y el ARN de transferencia es CUU, porque como es ARN tiene que tener puracilo.

447
01:05:33,159 --> 01:05:47,190
En cambio aquí el ADN tiene timina. Bueno, yo creo que esto sí que lo veis, es cuestión un poco de práctica y es fácil yo creo.

448
01:05:50,409 --> 01:05:59,969
El 31 nos dice, ¿cuáles serán los anticodones de los ARN de transferencia o transferentes correspondientes a la molécula de ARN mensajero?

449
01:05:59,969 --> 01:06:09,449
Bueno, pues esto también es ir haciendo de cada, por cada tres bases nitrogenadas, pues hacer el anticodón

450
01:06:09,449 --> 01:06:15,010
Pues el primero es GAU, pues el anticodón sería CUA

451
01:06:15,010 --> 01:06:26,150
Bueno, este no, como ya casi es la hora, ya si tenéis alguna duda, ya el próximo día ya los terminamos de corregir

452
01:06:26,150 --> 01:06:42,550
Y, a ver, vamos a hacer, bueno, este por ejemplo, tenemos dos moléculas de ADN, la 1 y la 2, de doble cadena y de la misma longitud.

453
01:06:43,730 --> 01:06:51,230
Sometemos a ambas a altas temperaturas y observamos que el ADN 1 se desnaturaliza antes que el ADN 2.

454
01:06:51,230 --> 01:06:57,389
Y explique este resultado. ¿Cuál de las dos moléculas de ADN tendrá mayor cantidad de guanina?

455
01:06:57,969 --> 01:07:10,650
Bueno, pues como el ADN1 se desnaturaliza antes, pues esto nos da a entender que el ADN1 tiene que tener menos cantidad de guanina.

456
01:07:10,949 --> 01:07:25,630
Si os acordáis, las puentes de hidrógeno entre las bases nitrogenadas, entre adenina y timina había dos puentes de hidrógeno y entre citosina y guanina había tres puentes de hidrógeno.

457
01:07:25,630 --> 01:07:46,369
Por lo tanto, para desnaturalizar, como en la desnaturalización lo que se hace es romper esos puentes de hidrógeno, pues si tenemos más cantidad de guanina y citosina nos va a costar más romper esos puentes de hidrógeno, se necesita más tiempo para romper esos puentes de hidrógeno.

458
01:07:46,369 --> 01:07:54,989
Por lo tanto, el ADN1 tiene menor proporción de pares de bases guanina-citosina.

459
01:07:59,809 --> 01:08:08,429
Bueno, pues yo creo que ya como son las 7 menos cuarto, lo dejamos aquí y el próximo día hacemos como hoy,

460
01:08:08,550 --> 01:08:14,050
explico un poquito de teoría y terminamos de corregir estos problemas.

461
01:08:15,789 --> 01:08:16,350
Vale.

462
01:08:16,350 --> 01:08:20,609
Profe, ¿esos problemas los va a colgar en el aula virtual?

463
01:08:21,069 --> 01:08:23,930
Para los que no podemos entrar a clase la próxima semana

464
01:08:23,930 --> 01:08:26,449
Sí, los pongo en el aula virtual

465
01:08:26,449 --> 01:08:28,270
Pero ya la próxima semana

466
01:08:28,270 --> 01:08:31,149
Para que los intentéis

467
01:08:31,149 --> 01:08:34,270
Los que no hayáis podido los termináis de hacer

468
01:08:34,270 --> 01:08:38,149
Y los corregimos