1 00:00:00,000 --> 00:00:07,059 Vale, pues ya le he dado para la grabación, para que, como siempre, voz o fotos ya van saliendo. 2 00:00:07,240 --> 00:00:11,779 Quería hacer un poco de repaso de toda la parte de calibración metodológica. 3 00:00:12,220 --> 00:00:17,379 Acordaros que cuando nosotros vamos al laboratorio, en la parte de análisis instrumental, 4 00:00:18,019 --> 00:00:24,539 se utilizan siempre técnicas relativas, de forma que nosotros, para calcular la concentración de una muestra problema, 5 00:00:24,539 --> 00:00:33,600 no podemos hacer una medida directa ni suponer que hay una relación directa de proporcionalidad respecto a un gasto, respecto a una señal. 6 00:00:34,000 --> 00:00:43,100 Siempre hay alguna fluctuación, algún error que nos va a permitir esa desviación o que va a dar esa desviación. 7 00:00:43,619 --> 00:00:52,179 Si es verdad que en análisis químico la haya pasado o en muestreo, pues sí podéis mantener esa relación de peso frente al agua evaporada 8 00:00:52,179 --> 00:00:56,119 para las humedades o volumen gastado frente a los moles, 9 00:00:56,420 --> 00:01:03,259 hacíamos una equivalencia entre los moles gastados y los moles que hay en la propia muestra 10 00:01:03,259 --> 00:01:06,760 y ahí podíamos establecer una relación y calcular la concentración, 11 00:01:07,500 --> 00:01:13,319 porque nos fijamos en la estequimetría que si no nos da esa relación de proporcionalidad directa. 12 00:01:13,500 --> 00:01:18,780 ¿Errores? Pues sí, el error de la bureta, el error del instrumental que utilicemos 13 00:01:18,780 --> 00:01:23,819 o del técnico que esté trabajando, pero de ahí ya no sale. 14 00:01:24,319 --> 00:01:29,219 En las técnicas instrumentales necesitamos comparar con otras cosas, 15 00:01:29,400 --> 00:01:34,340 porque nosotros medimos la conductividad directamente y, por ejemplo, ahora que estaba haciendo yo una práctica, 16 00:01:34,920 --> 00:01:40,239 íbamos a medir la conductividad de una muestra de agua para calcular su concentración en sal. 17 00:01:40,760 --> 00:01:44,780 Pues si nosotros medimos la conductividad, nos va a decir que la conductividad es 80 microsiemens 18 00:01:44,780 --> 00:02:02,500 Y con eso tenemos que saber qué hacer. No podemos decir, bueno, pues 80 microsiemens, alas, son 3 gramos por litro. Pues esa forma no la podemos establecer, ¿vale? Aunque, bueno, con la conductividad, por ejemplo, no tenemos una fórmula en la ultravioleta visible. 19 00:02:02,500 --> 00:02:19,080 Si podríamos tener la ley de Lambert-Beer que decimos, bueno, pues a partir de la concentración la podemos calcular según la señal que hayamos tenido, pero hay otros parámetros que sí necesitamos, tipo el coeficiente de distinción molar o la distancia de la cubeta. 20 00:02:19,080 --> 00:02:44,060 Con las técnicas instrumentales al trabajar con ellas siempre vamos a hacer una recta de calibrado en la que nosotros vamos a preparar disoluciones patrón, disoluciones de concentración conocida y nos va a permitir a partir de ahí establecer una relación entre la propiedad que estamos midiendo nosotros, bien sea la conductividad, sea el voltaje, sea la absorbancia o sea el área de una determinada muestra y le vamos a relacionar con la concentración. 21 00:02:44,060 --> 00:02:50,060 Y a partir de esa comparación vamos a conseguir la concentración de nuestra muestra que es desconocida. 22 00:02:50,879 --> 00:02:57,539 Ahora en el laboratorio sí es verdad que se pueden dar diferentes situaciones en función de la muestra que tengamos y el equipo que estemos utilizando. 23 00:02:58,000 --> 00:03:02,099 ¿Qué pasa o qué prácticas habéis hecho vosotros aquí que nos hayan permitido hacer eso? 24 00:03:02,520 --> 00:03:11,439 Bueno, pues la del HPLC la hicisteis, que estuvimos haciendo una medida de las áreas, una interpolación, una integración de las áreas 25 00:03:11,439 --> 00:03:18,000 y nuestra señal, por mucho que nosotros tuviéramos un detector ultravioleta, un detector visible, un detector de infrarrojo, 26 00:03:18,400 --> 00:03:24,919 nuestra señal que nosotros mantenemos va a ser el área, ya que el área va a ser proporcional a la concentración. 27 00:03:25,280 --> 00:03:33,360 Algo parecido veíamos el otro día con la normalización de las áreas, que no tenemos en cuenta la absorbancia o el índice de retracción o lo que sea, 28 00:03:33,780 --> 00:03:37,379 sino que nuestra señal va a ser el área y ahí establecíamos la relación. 29 00:03:37,379 --> 00:03:41,599 en la que hicimos del cobre, en la que hicimos de los fosfatos 30 00:03:41,599 --> 00:03:43,860 pues ahí tenemos en cuenta la absorbancia 31 00:03:43,860 --> 00:03:49,120 en infrarrojo no estuvimos viendo la parte cuantitativa 32 00:03:49,120 --> 00:03:51,180 solo vimos la parte cualitativa 33 00:03:51,180 --> 00:03:54,840 pero bueno, si quisiéramos analizar algo cuantitativamente también podemos 34 00:03:54,840 --> 00:03:57,879 veíamos unos picos y nosotros podemos ver la intensidad del pico 35 00:03:57,879 --> 00:04:01,860 y relacionarla con la concentración de la muestra que tenemos 36 00:04:01,860 --> 00:04:04,620 y también hicimos las de pH y conductividad 37 00:04:04,620 --> 00:04:27,139 En las valoraciones de pH y conductividad nosotros lo utilizamos como si fuese una técnica de análisis clásico, es decir, no aprovechamos esa parte de técnicas relativas que estamos diciendo que tienen las técnicas instrumentales, sino que hicimos una valoración como las que decíais el año pasado en análisis químico y en vez de fijarnos en un cambio de color nos sigamos fijando en una propiedad física. 38 00:04:27,139 --> 00:04:30,759 le decimos, vale, no estoy comparando con otros patrones 39 00:04:30,759 --> 00:04:33,699 bueno, pero nosotros estamos viendo la evolución que tiene la muestra 40 00:04:33,699 --> 00:04:37,399 a lo largo de un recorrido, a lo largo de un avance de la reacción 41 00:04:37,399 --> 00:04:39,459 y nos estamos fijando en la propiedad 42 00:04:39,459 --> 00:04:41,579 por eso que la parte de las técnicas instrumentales 43 00:04:41,579 --> 00:04:44,620 pues sí, tenemos esa parte de que son técnicas relativas 44 00:04:44,620 --> 00:04:48,199 pero también que nos fijamos en las propiedades físico-químicas de la muestra 45 00:04:48,199 --> 00:04:51,759 no en las propiedades químicas como hacíamos en análisis químico 46 00:04:51,759 --> 00:04:54,699 que veíamos la reacción y veíamos que iba mol a mol 47 00:04:54,699 --> 00:05:07,180 Bueno, aquí vamos viendo cómo cambia esa propiedad físico-química que estábamos midiendo, que es el potencial eléctrico, y vamos viendo cómo cambia a lo largo de una reacción o unas alteraciones que estoy haciendo yo en la muestra. 48 00:05:07,699 --> 00:05:11,459 Y es esa propiedad la que utilizamos para determinar la concentración final. 49 00:05:12,000 --> 00:05:13,759 En conductividad, pues pasaba lo mismo. 50 00:05:14,699 --> 00:05:19,579 Hacíamos una valoración y, bueno, dio tiempo de hecho a hacer dos diferentes. 51 00:05:19,899 --> 00:05:23,800 Hicisteis una con un ácido fuerte-base fuerte y luego otra con una mezcla de ácidos. 52 00:05:23,800 --> 00:05:26,680 que estuvimos practicando las tres rectas 53 00:05:26,680 --> 00:05:28,860 entonces aprovechamos esas propiedades 54 00:05:28,860 --> 00:05:30,620 de qué pasa con los iones 55 00:05:30,620 --> 00:05:32,500 que hay en esa muestra, cómo van cambiando 56 00:05:32,500 --> 00:05:34,379 en función del avance de la reacción 57 00:05:34,379 --> 00:05:36,500 lo que tenemos que tener claro 58 00:05:36,500 --> 00:05:38,600 siempre es cuál es el objetivo 59 00:05:38,600 --> 00:05:40,259 de lo que yo quiero determinar 60 00:05:40,259 --> 00:05:42,459 para plantearme la forma en la que voy a 61 00:05:42,459 --> 00:05:44,399 trabajar, acordaros que si es un 62 00:05:44,399 --> 00:05:45,899 más o menos lo que voy a hacer yo 63 00:05:45,899 --> 00:05:48,480 no es necesario que trabajemos 64 00:05:48,480 --> 00:05:49,939 de forma exacta y precisa 65 00:05:49,939 --> 00:05:52,240 si yo simplemente quiero ver ausencia 66 00:05:52,240 --> 00:06:00,399 o presencia, como decíamos en el análisis de infrarrojo, pues no necesitamos saber exactamente 67 00:06:00,399 --> 00:06:04,839 cuánto hemos añadido de muestra, cuánto hemos añadido del bromuro de potasio, cogíamos 68 00:06:04,839 --> 00:06:10,100 un poquillo lo que saliera en la pastilla que hicimos o las muestras de plástico que 69 00:06:10,100 --> 00:06:13,420 teníamos, pues bueno, nosotros poníamos el plástico ahí y no sabemos si hemos cogido 70 00:06:13,420 --> 00:06:18,860 un 1% de la bolsa de basura que teníamos o un 50% de la bolsa, entonces es por eso 71 00:06:18,860 --> 00:06:22,540 que en función de la información que yo quiera saber o que yo quiera obtener, tengo 72 00:06:22,540 --> 00:06:28,459 que ver cómo voy a trabajar en el laboratorio. Una vez que ya lo sabemos, pues preparamos 73 00:06:28,459 --> 00:06:32,500 la técnica, preparamos el equipo y vemos cuáles son las condiciones. Entonces lo que 74 00:06:32,500 --> 00:06:37,000 digo que vosotros en el laboratorio al final lo que os interesa es saber interpretar los 75 00:06:37,000 --> 00:06:41,279 procedimientos, es decir, cuando me dan un procedimiento yo tengo que ya ahí saber si 76 00:06:41,279 --> 00:06:45,680 me está hablando exactamente o no exactamente, si me está pidiendo información cualitativa 77 00:06:45,680 --> 00:06:50,500 o cuantitativa, el material que necesito, el tiempo que tengo, todos los tecnicismos, 78 00:06:50,560 --> 00:06:59,079 lo que necesito preparar y en qué condiciones estoy. Para la parte de la calibración metodológica 79 00:06:59,079 --> 00:07:04,720 nos va a hablar de eso, de cómo preparar esa relación que hay entre la concentración 80 00:07:04,720 --> 00:07:10,459 y la señal que yo esté midiendo, qué tipo de relación se establece. Normalmente si 81 00:07:10,459 --> 00:07:19,860 es una relación proporcional, directa o inversa, puede ser de los dos, en la parte del potencial 82 00:07:19,860 --> 00:07:25,319 suele ser inversa, vamos viendo que va disminuyendo al aumentar la concentración, puede ir disminuyendo 83 00:07:25,319 --> 00:07:35,420 el potencial, esa no la hicisteis, pero algún ejercicio de floruros y todo eso sí que hemos 84 00:07:35,420 --> 00:07:40,459 hecho. Ahora, cuando estamos en el laboratorio, lo que digo, que nosotros podemos estar en 85 00:07:40,459 --> 00:07:45,480 un punto en el que no tenemos ningún tipo de interferente, es decir, yo he conseguido 86 00:07:45,480 --> 00:07:51,540 aislar totalmente la muestra que yo tenía de la matriz que tuviera, ¿vale? O que lo 87 00:07:51,540 --> 00:07:56,620 que tengo en la matriz, pues a mí no me interfiere en la propiedad a la que yo esté mirando, 88 00:07:57,040 --> 00:08:01,639 ¿vale? Pues por ejemplo, si yo estoy mirando la luz ultravioleta, pues no va a absorber 89 00:08:01,639 --> 00:08:09,120 a la misma longitud de onda los nitritos que absorben la zona del ultravioleta, los nitritos 90 00:08:09,120 --> 00:08:13,959 que absorben la zona del visible, que los nitratos que absorben la zona del ultravioleta. 91 00:08:14,220 --> 00:08:19,100 Por mucho que estén juntos un suelo, una muestra de suelo o una muestra de agua, no 92 00:08:19,100 --> 00:08:27,920 van a interferir. En la conductividad no tenemos esa parte de selectividad o de exclusividad, 93 00:08:27,920 --> 00:08:33,759 ya que la conductividad es una técnica en la que se van a mirar todos los guiones que haya en la disolución. 94 00:08:34,340 --> 00:08:38,960 Entonces, bueno, pues sí podemos hacer referencia al que sea más mayoritario, si sabemos de qué va, 95 00:08:39,360 --> 00:08:43,519 pero tenemos que tener en cuenta que ahí se están midiendo todos los guiones que hay. 96 00:08:44,360 --> 00:08:48,240 Entonces, primero tenemos que saber en qué condiciones estamos trabajando y qué tipo de muestra tenemos. 97 00:08:48,899 --> 00:08:56,559 Si no tenemos ningún tipo de interferente, lo que se suele hacer es una recta por calibración externa o por patrón externo. 98 00:08:56,559 --> 00:09:21,460 Ahí nosotros preparamos los patrones utilizando una disolución madre cuyo componente sea el analito de interés o el analito objetivo mío, el analito que yo voy buscando y preparo unos patrones de concentración conocida y mido la señal, ya lo digo que sea potencial, sea conductividad, si lo puedo aislar, sea la absorbancia de la luz, lo que sea. 99 00:09:21,460 --> 00:09:26,120 y luego ya pues cojo la muestra y la mido en las mismas condiciones que los patrones 100 00:09:26,120 --> 00:09:28,340 entonces no tenemos ningún tipo de interferente 101 00:09:28,340 --> 00:09:32,379 ni hay nada que pueda hacer que se desvíe la señal que yo esté midiendo 102 00:09:32,379 --> 00:09:37,740 por lo que diríamos que si es sencilla y suele ser bastante exacta y precisa 103 00:09:37,740 --> 00:09:40,480 ahora eso no siempre es así 104 00:09:40,480 --> 00:09:42,340 como decía es el caso de la conductividad 105 00:09:42,340 --> 00:09:44,740 o muestras que es que no podemos separarlo 106 00:09:44,740 --> 00:09:49,879 porque bueno si yo tengo una disolución que tiene muchos iones 107 00:09:49,879 --> 00:09:55,320 pues puedo hacer una cromatografía con una columna de intercambio iónico 108 00:09:55,320 --> 00:09:59,179 que separe por los iones y al final tener un detector de conductividad. 109 00:09:59,840 --> 00:10:03,139 Bueno, pues ahí podría medir la conductividad y tengo los iones que yo quiero, 110 00:10:03,279 --> 00:10:04,220 entonces es más selectivo. 111 00:10:04,759 --> 00:10:08,840 Pero hay otras veces que tengo una disolución de sales y yo no sé qué es, 112 00:10:09,179 --> 00:10:14,340 o una disolución del cloruro de sodio y yo solamente quiero ver cuánto es el cloruro. 113 00:10:14,840 --> 00:10:17,779 Pues sé que la conductividad que estoy midiendo va a ser la de los dos, 114 00:10:17,779 --> 00:10:19,659 o sea que están ahí interfiriendo los dos. 115 00:10:19,879 --> 00:10:40,960 Entonces, siempre que haya algún tipo de interferente, nosotros tenemos que tenerlo en cuenta, ya que cuando yo prepare las muestras, van a tener todo, la preparación de la muestra o la muestra, aunque no tenga preparación, pero cuando yo tenga que analizar la muestra, ahí van a tener todo lo que tenga la matriz, ¿vale? Todos los interferentes y el analito que a mí me interesa. 116 00:10:40,960 --> 00:10:43,759 Y yo cuando mida la señal, va a medir la de todo eso. 117 00:10:44,480 --> 00:10:46,480 ¿Qué pasa cuando yo preparo los patrones? 118 00:10:46,639 --> 00:10:51,639 Que yo los patrones los voy a preparar con un reactivo que hay en el laboratorio. 119 00:10:51,860 --> 00:10:57,720 Entonces, los reactivos que hay en el laboratorio, la cantidad de impurezas que hay, la cantidad de interferentes es mínima. 120 00:10:58,059 --> 00:11:04,360 Ya habéis visto que la pureza siempre es entre el 98% y el 102%, o el 99% y el 101%. 121 00:11:04,360 --> 00:11:06,860 Entonces, interferentes no tenemos casi. 122 00:11:06,860 --> 00:11:14,259 Entonces los patrones no tendrían interferentes y la muestra sí, y no estamos en las mismas condiciones, no podemos comparar en las mismas condiciones. 123 00:11:14,779 --> 00:11:28,539 Entonces para intentar ir a las mismas condiciones lo que hacemos es que para preparar los patrones a todos les añadimos una cantidad de muestra, la misma, 5 mililitros, 6 mililitros, 10 mililitros, lo que queramos nosotros. 124 00:11:28,539 --> 00:11:43,919 De forma que si esos interferentes actúan, nosotros vamos a tener una señal que va a ser aumentada. ¿Por qué? Porque el patrón lo que va a tener es disolución madre y va a tener muestra. 125 00:11:43,919 --> 00:11:49,399 de forma que la señal que se va a medir va a ser la del analito objeto de estudio 126 00:11:49,399 --> 00:11:54,539 que está en la alícuota procedente de la disolución madre 127 00:11:54,539 --> 00:11:56,759 que es la que tenemos con el reactivo de laboratorio 128 00:11:56,759 --> 00:11:59,899 y la que hay con la muestra que tengamos 129 00:11:59,899 --> 00:12:01,820 que ahí está nuestro analito objeto de estudio 130 00:12:01,820 --> 00:12:04,259 y todos los interferentes que pueda haber 131 00:12:04,259 --> 00:12:09,899 ¿qué pasa? que si nosotros añadimos a todos los patrones la misma cantidad de muestra 132 00:12:09,899 --> 00:12:14,419 todos se van a ver aumentada su señal de la misma manera 133 00:12:14,419 --> 00:12:19,019 es decir, si la señal de la muestra con analito y sus interferentes 134 00:12:19,019 --> 00:12:21,559 da una absorbancia de 0,7 135 00:12:21,559 --> 00:12:26,080 pues todos los patrones van a ver aumentada su señal 0,7 136 00:12:26,080 --> 00:12:31,100 y luego ya le añadimos lo que toque de disolución madre 137 00:12:31,100 --> 00:12:37,100 pues el patrón 0 en el blanco tiene 0 de disolución madre 138 00:12:37,100 --> 00:12:38,720 pues su señal será 0,7 139 00:12:38,720 --> 00:12:47,820 Que en el patrón 1 tiene 3 miligramos litro de disolución madre, pues tendrá la señal que corresponda a eso más el 0,7 que teníamos antes. 140 00:12:48,200 --> 00:13:00,440 Y así nos permite comparar los patrones teniendo en cuenta que sería solamente la señal debida a la disolución madre, porque el resto lo tienen todos por igual. 141 00:13:00,440 --> 00:13:08,740 Entonces, los aumentos a las diferencias que hay entre cada uno de los patrones son debidas a la disolución madre que yo he añadido. 142 00:13:09,240 --> 00:13:16,539 En este caso, no tendríamos un patrón o un matraz con la muestra solamente, o no prepararíamos un matraz con la muestra, 143 00:13:16,879 --> 00:13:18,840 porque no tenemos disolución madre que añadirle. 144 00:13:18,980 --> 00:13:23,480 O sea, sería la muestra y no se puede ver aumentada por nada más, no podemos añadirle otro poquito de muestra. 145 00:13:24,059 --> 00:13:29,200 Entonces, bueno, ahí la que se parecería más a la muestra sería la del patrón 0, que os digo. 146 00:13:29,200 --> 00:13:32,759 que llevaría cero de disolución madre y un poquito de muestra. 147 00:13:33,120 --> 00:13:38,659 En estos casos, en la adición estándar o en la adición patrón, que es esta cuando añadimos la muestra, 148 00:13:39,159 --> 00:13:42,500 sí es verdad que nosotros podemos hacer dos blancos. 149 00:13:42,960 --> 00:13:47,500 Un blanco que no lleva disolución madre ni lleva muestra, 150 00:13:47,639 --> 00:13:51,759 simplemente lleva agua y todos los reactivos auxiliares que necesitemos nosotros 151 00:13:51,759 --> 00:13:56,360 y un blanco que lleva muestra pero no lleva disolución madre, 152 00:13:56,360 --> 00:13:59,259 que es lo que hicimos en las prácticas con los forfatos 153 00:13:59,259 --> 00:14:00,980 ¿vale? entonces ahí 154 00:14:00,980 --> 00:14:03,460 para hacer el punto 0, el 0,0 155 00:14:03,460 --> 00:14:05,220 para calibrar el equipo 156 00:14:05,220 --> 00:14:07,159 y todo eso, utilizaríamos el blanco 157 00:14:07,159 --> 00:14:08,639 que no lleva ni disolución madre 158 00:14:08,639 --> 00:14:11,000 ni muestra y luego ya 159 00:14:11,000 --> 00:14:13,179 el blanco que lleva muestra pero no 160 00:14:13,179 --> 00:14:15,139 lleva disolución madre, lo pondríamos en la 161 00:14:15,139 --> 00:14:16,659 recta de calibrado como un punto más 162 00:14:16,659 --> 00:14:19,320 ¿vale? sería el punto 0 pero ya no es el 0,0 163 00:14:19,320 --> 00:14:21,279 sino que sería el 0,7 164 00:14:21,279 --> 00:14:22,460 que habíamos dicho antes 165 00:14:22,460 --> 00:14:25,100 entonces debido a interferentes 166 00:14:25,100 --> 00:14:26,899 que hay en la matriz, es decir, el patrón interno 167 00:14:26,899 --> 00:14:29,039 se utiliza debido a interferentes que hay en la matriz 168 00:14:29,039 --> 00:14:30,600 y luego tendríamos 169 00:14:30,600 --> 00:14:32,659 la parte en la que hay fluctuaciones 170 00:14:32,659 --> 00:14:34,580 debidas al equipo, lo que digo 171 00:14:34,580 --> 00:14:36,759 que temperatura de la llama en la parte 172 00:14:36,759 --> 00:14:37,779 de espectroscopía 173 00:14:37,779 --> 00:14:40,799 atómica, que nosotros no podemos regular 174 00:14:40,799 --> 00:14:42,860 la altura de la llama, la fuerza de la llama, la temperatura 175 00:14:42,860 --> 00:14:44,860 de la llama y puede que no lleguen con la misma 176 00:14:44,860 --> 00:14:46,840 temperatura todos los patrones 177 00:14:46,840 --> 00:14:48,720 en el HPLC debido 178 00:14:48,720 --> 00:14:50,940 a burbujas que haya, cuando habéis visto 179 00:14:50,940 --> 00:14:53,220 los que habéis estado aquí haciendo las prácticas 180 00:14:53,220 --> 00:14:54,899 pues ya visteis que nos costó 181 00:14:54,899 --> 00:15:00,820 al principio, ponerlo mucho a punto porque había burbujas y íbamos viendo el camino 182 00:15:00,820 --> 00:15:04,960 cuando iba por la parte de desechos, pues que en algún momento sí se veía una burbujilla. 183 00:15:05,620 --> 00:15:09,519 Eso no podemos controlar a nosotros, al igual que la inyección. Cuando nosotros hagamos 184 00:15:09,519 --> 00:15:13,340 la inyección, la presión con la que entra la inyección, si es inyección manual, no 185 00:15:13,340 --> 00:15:17,799 podemos controlarla. Y aunque sea del equipo y esté todo muy automatizado, hay algo que 186 00:15:17,799 --> 00:15:23,279 sí puede cambiar. Entonces, las frustraciones debidas al equipo las tendremos que ir corrigiendo. 187 00:15:23,279 --> 00:15:26,279 Para eso utilizamos el patrón interno 188 00:15:26,279 --> 00:15:31,419 Entonces nosotros preparamos un matraz en el que tiene disolución madre 189 00:15:31,419 --> 00:15:35,519 Debido a que contenga nuestro analito objeto de estudio 190 00:15:35,519 --> 00:15:38,820 Y luego le añadimos una cantidad de patrón interno 191 00:15:38,820 --> 00:15:44,980 El patrón interno se va a añadir en la misma concentración a todos los patrones y a la muestra 192 00:15:44,980 --> 00:15:47,980 Para que nosotros podamos ver la fluctuación que hay 193 00:15:47,980 --> 00:15:51,159 Y luego a la hora de hacer la recta de calibrado 194 00:15:51,159 --> 00:15:55,240 en lugar de representar la concentración frente a la señal 195 00:15:55,240 --> 00:15:58,720 representamos la relación de señales 196 00:15:58,720 --> 00:16:00,419 frente a la relación de concentraciones 197 00:16:00,419 --> 00:16:02,399 relación de señales en el eje de la Y 198 00:16:02,399 --> 00:16:04,879 relación de concentraciones en el eje de la X 199 00:16:04,879 --> 00:16:08,679 y de esa manera sí podemos eliminar esa pequeña fluctuación 200 00:16:08,679 --> 00:16:10,899 porque se va a dar en los dos patrones 201 00:16:10,899 --> 00:16:13,259 tanto en el patrón objeto de estudio 202 00:16:13,259 --> 00:16:15,360 en el patrón analito como en el patrón interno 203 00:16:15,360 --> 00:16:17,799 si ha habido una burbuja va a afectar a los dos 204 00:16:17,799 --> 00:16:20,340 y la señal se va a ver en los dos de la misma manera 205 00:16:20,340 --> 00:16:28,000 Entonces, al dividir las dos señales, pues podemos eliminar esa desviación que ha habido 206 00:16:28,000 --> 00:16:31,460 ¿Vale? Así un poco de forma general 207 00:16:31,460 --> 00:16:36,139 Ahora, aquí en los ejercicios, pues he puesto un ejercicio de cada 208 00:16:36,139 --> 00:16:40,960 Y más o menos en el orden que, creo que lo he puesto en el orden que lo hemos visto 209 00:16:40,960 --> 00:16:44,620 ¿Vale? Para, para que, sí, en el orden que lo hemos visto 210 00:16:44,620 --> 00:16:47,340 Vale, entonces empezaríamos 211 00:16:47,340 --> 00:16:52,340 primero, dice que queremos determinar la concentración de cobre en una muestra de agua de mar 212 00:16:52,340 --> 00:16:55,600 entonces para eso se va a llevar a cabo una técnica instrumental 213 00:16:55,600 --> 00:16:59,879 ya hicisteis aquí una, que era la de espectroscopía ultravioleta visible 214 00:16:59,879 --> 00:17:03,039 y bueno, pues es una de las que funciona bastante bien 215 00:17:03,039 --> 00:17:04,980 ya visteis los resultados, cómo se obtenían 216 00:17:04,980 --> 00:17:08,160 y las rectas pues que creo que han salido bien 217 00:17:08,160 --> 00:17:12,079 bueno, no era difícil la preparación ni nada de eso 218 00:17:12,079 --> 00:17:17,319 luego, para eso, pues nos dice que tenemos que preparar una batería de patrón 219 00:17:17,319 --> 00:17:26,819 Y los patrones se van a preparar a partir de una disolución madre con una concentración de 1,0 gramos litro, que es la misma que hicimos en las prácticas. 220 00:17:27,380 --> 00:17:34,099 Después nos dice cuánto tendremos que trasvasar a los patrones para su preparación y de qué volumen tienen que ser los patrones. 221 00:17:34,559 --> 00:17:37,960 Y ya enrasamos con agua. Aquí nos dice que añadamos nada más. 222 00:17:38,480 --> 00:17:44,099 En las prácticas sí es verdad que añadimos un reactivo auxiliar, que el reactivo auxiliar era el amoníaco. 223 00:17:44,099 --> 00:17:47,019 eso era porque el amoníaco se juntaba con el cobre 224 00:17:47,019 --> 00:17:48,460 y se formaba un complejo 225 00:17:48,460 --> 00:17:50,380 que daba esa intensidad de color 226 00:17:50,380 --> 00:17:53,099 el amoníaco actuaba como si fuera un oxocrón 227 00:17:53,099 --> 00:17:54,640 porque la del cobre 228 00:17:54,640 --> 00:17:56,220 poco a poco se iba perdiendo el color 229 00:17:56,220 --> 00:17:57,460 o no se veía muy bien 230 00:17:57,460 --> 00:17:59,940 y al añadir el amoníaco ya era el azul intenso 231 00:17:59,940 --> 00:18:01,599 que es más o menos como este 232 00:18:01,599 --> 00:18:03,859 donde pone aquí lo de dejar de compartir 233 00:18:03,859 --> 00:18:07,359 medíamos la absorbancia de cada uno de los patrones 234 00:18:07,359 --> 00:18:09,339 y con eso ya hacíamos la recta de calibrado 235 00:18:09,339 --> 00:18:10,660 y luego vemos la muestra 236 00:18:10,660 --> 00:18:13,359 ¿qué pasa cuando nosotros hagamos los patrones? 237 00:18:13,359 --> 00:18:41,420 Pues acordaros que tanto los patrones como la muestra tienen que estar en las mismas condiciones, entonces si yo añado agua a un patrón, tengo que añadir agua a todos y tiene que ser del mismo bote o del mismo bidón que estemos utilizando, si yo añado un grupo ácido o añado amoníaco, si lo tengo que añadir a todos, hay más condiciones, tanto patrones como muestra, porque si el amoníaco da un poco de color, pues que vayan todos con ese poco de color y hay más condiciones, ¿vale? 238 00:18:41,420 --> 00:18:44,420 ahora, para hacer 239 00:18:44,420 --> 00:18:46,619 los patrones, si es verdad 240 00:18:46,619 --> 00:18:47,799 que hay una regla 241 00:18:47,799 --> 00:18:50,240 para evitar que haya 242 00:18:50,240 --> 00:18:52,799 cierto error, pues que la dilución 243 00:18:52,799 --> 00:18:54,420 máxima que se pueda hacer 244 00:18:54,420 --> 00:18:55,920 sea de 1 en 50, es decir 245 00:18:55,920 --> 00:18:58,299 que yo no puedo hacer una dilución superior 246 00:18:58,299 --> 00:19:00,599 a 1 en 50, por ejemplo, 1 en 100 247 00:19:00,599 --> 00:19:01,640 no podríamos hacerlo 248 00:19:01,640 --> 00:19:04,440 porque vamos a cometer mucho error 249 00:19:04,440 --> 00:19:07,099 al tener esa dilución y esos volúmenes 250 00:19:07,099 --> 00:19:08,200 pues se considera que 251 00:19:08,200 --> 00:19:10,319 1 en 50 sea lo que 252 00:19:10,319 --> 00:19:14,160 se ha permitido como máximo. Entonces, bueno, tenemos que tenerlo en cuenta a la hora de 253 00:19:14,160 --> 00:19:18,140 preparar nuestros patrones. ¿Qué no nos funciona con eso? Bueno, pues entonces tendríamos 254 00:19:18,140 --> 00:19:24,259 que hacer una dilución intermedia para poder preparar los patrones. En este caso, pues 255 00:19:24,259 --> 00:19:30,099 tenemos los patrones, este sería patrón externo porque no hemos añadido nada raro 256 00:19:30,099 --> 00:19:34,519 a ninguno de los dos. Tenemos solamente la disolución madre, que es de un gramo litro, 257 00:19:34,519 --> 00:19:37,359 lo que tenemos que trasvasar de cada una de las alícuotas 258 00:19:37,359 --> 00:19:41,140 y la señal de cada una de las alícuotas, 259 00:19:41,299 --> 00:19:43,099 o sea, de los patrones que hayamos nosotros preparado. 260 00:19:43,500 --> 00:19:45,640 Con eso podríamos hacer la recta de calibrado. 261 00:19:46,559 --> 00:19:47,500 ¿Qué tenemos que hacer? 262 00:19:47,640 --> 00:19:50,740 Pues lo primero tendríamos que calcular la concentración de los patrones 263 00:19:50,740 --> 00:19:54,079 porque a nosotros nos está diciendo que hay una... 264 00:19:54,079 --> 00:19:55,680 nos dice cuánto tenemos que trasvasar, 265 00:19:56,119 --> 00:19:58,059 pero nosotros cuando hagamos la recta de calibrado, 266 00:19:58,539 --> 00:20:00,599 pues acordaros que nosotros en la recta de calibrado 267 00:20:00,599 --> 00:20:02,900 tenemos que representar la señal, 268 00:20:02,900 --> 00:20:10,099 que en nuestro caso sería la absorbancia, frente a la concentración, en la parte del patrón externo. 269 00:20:10,640 --> 00:20:14,000 Y nosotros tenemos la recta y es igual a A más BX. 270 00:20:14,460 --> 00:20:20,700 Para calcular la concentración de los patrones, pues acordaros, concentración de la madre por el volumen de la alícuota 271 00:20:20,700 --> 00:20:24,960 es igual a la concentración del patrón por el volumen donde preparo el patrón. 272 00:20:24,960 --> 00:20:43,960 Entonces la concentración del patrón sería un gramo litro que era la madre por el volumen de la alícuota, pues en el primer caso serían 0 mililitros entre el volumen en el que yo preparo el patrón, que yo los preparo en 50 mililitros. 273 00:20:43,960 --> 00:20:48,799 Haciendo eso, en este caso, saldría una concentración de 0 gramos litro. 274 00:20:49,140 --> 00:20:55,680 Si estaría bien que pusierais las unidades en cada operación que hagáis, por si acaso. 275 00:20:56,859 --> 00:21:02,279 La concentración del siguiente, pues igual, tendríamos 1 gramo litro de disolución madre, 276 00:21:02,779 --> 00:21:15,109 por, en este caso, se trasvasan 5 mililitros, y lo paso a un volumen final de 50 mililitros. 277 00:21:15,109 --> 00:21:17,670 aquí como es mililitro con mililitro 278 00:21:17,670 --> 00:21:19,529 si se va, por eso aunque 279 00:21:19,529 --> 00:21:20,990 las unidades del sistema internacional 280 00:21:20,990 --> 00:21:23,150 dicen que tiene que ser en litro 281 00:21:23,150 --> 00:21:25,450 pero bueno, ahí como se van, pues lo he 282 00:21:25,450 --> 00:21:27,549 dejado y no pasa nada 283 00:21:27,549 --> 00:21:29,549 y tendríamos una 284 00:21:29,549 --> 00:21:31,930 concentración de 0,1 gramo 285 00:21:31,930 --> 00:21:33,630 litro, para el siguiente 286 00:21:33,630 --> 00:21:37,779 patrón, entonces esto 287 00:21:37,779 --> 00:21:39,660 lo tenemos que ir haciendo con todos los patrones 288 00:21:39,660 --> 00:21:41,400 y la parte que sustituimos 289 00:21:41,400 --> 00:21:43,579 es el volumen que estamos 290 00:21:43,579 --> 00:21:45,180 añadiendo, esto lo sustituimos 291 00:21:45,180 --> 00:21:47,579 por 5, por 10, por 15 292 00:21:47,579 --> 00:21:48,859 por 20, por 25 293 00:21:48,859 --> 00:21:50,660 vale, haciendo 294 00:21:50,660 --> 00:21:53,079 una tablita 295 00:21:53,079 --> 00:21:54,680 en la que nosotros tenemos 296 00:21:54,680 --> 00:21:56,279 por un lado 297 00:21:56,279 --> 00:22:00,000 la señal 298 00:22:00,000 --> 00:22:01,299 y por otro lado la concentración 299 00:22:01,299 --> 00:22:02,259 el primero 300 00:22:02,259 --> 00:22:05,400 la concentración del patrón 301 00:22:05,400 --> 00:22:06,400 y aquí la señal 302 00:22:06,400 --> 00:22:09,440 era 0,014 303 00:22:15,180 --> 00:22:32,640 0,4910 304 00:22:32,640 --> 00:22:34,759 y eso es lo que nosotros tenemos que poner 305 00:22:34,759 --> 00:22:36,339 en la recta de calibrado 306 00:22:36,339 --> 00:22:38,940 la calculadora ya 307 00:22:38,940 --> 00:22:40,619 yo creo que si la controláis 308 00:22:40,619 --> 00:22:43,980 vale, ahora de hacer la recta de calibrado 309 00:22:43,980 --> 00:22:46,039 que si la habéis preguntado alguna vez 310 00:22:46,039 --> 00:22:49,079 que hago con el blanco 311 00:22:49,079 --> 00:22:51,240 yo resto la señal del blanco 312 00:22:51,240 --> 00:22:52,980 a todos los patrones 313 00:22:52,980 --> 00:22:54,299 y a la muestra 314 00:22:54,299 --> 00:22:55,880 o lo dejo así como está 315 00:22:55,880 --> 00:22:57,480 Da lo mismo, ¿vale? 316 00:22:57,519 --> 00:22:59,660 Si nosotros lo ponemos aumentado 317 00:22:59,660 --> 00:23:01,579 No sale la misma recta, evidentemente 318 00:23:01,579 --> 00:23:03,900 Pero van a verse todas las señales aumentadas 319 00:23:03,900 --> 00:23:05,160 Esa misma cantidad 320 00:23:05,160 --> 00:23:07,599 Entonces podéis hacerlo de la manera que queráis 321 00:23:07,599 --> 00:23:09,079 Poner el punto 0, 0 322 00:23:09,079 --> 00:23:11,819 O dejarlo como 0, 0, 0, 14 323 00:23:11,819 --> 00:23:14,420 Y dejar las señales de la misma manera 324 00:23:14,420 --> 00:23:16,500 ¿Vale? Al final tiene que salir lo mismo 325 00:23:16,500 --> 00:23:18,359 Si se lo restáis, se lo restáis 326 00:23:18,359 --> 00:23:20,779 Tanto a los patrones como a la muestra 327 00:23:20,779 --> 00:23:23,059 ¿Vale? Tiene que ir restado a todo 328 00:23:23,059 --> 00:23:24,039 ¿Vale? 329 00:23:24,539 --> 00:23:25,740 En los equipos, si es verdad 330 00:23:25,740 --> 00:23:29,720 que nosotros cuando trabajamos 331 00:23:29,720 --> 00:23:30,500 hacemos el blanco 332 00:23:30,500 --> 00:23:32,940 y ya lo hace la resta directamente 333 00:23:32,940 --> 00:23:35,519 entonces, bueno, si estáis acostumbrados 334 00:23:35,519 --> 00:23:36,859 a trabajar con el punto 0,0 335 00:23:36,859 --> 00:23:39,059 no importa, ¿vale? 336 00:23:39,099 --> 00:23:40,500 pero no cambiéis cosas nuevas 337 00:23:40,500 --> 00:23:43,359 ahora a mitad de, o al final de curso 338 00:23:43,359 --> 00:23:46,539 si yo hago esto 339 00:23:46,539 --> 00:23:51,440 tendría que la resta 340 00:23:51,440 --> 00:23:53,940 sale que y es igual 341 00:23:53,940 --> 00:24:01,509 O sea, que si yo no agrego el 0 en la calculadora 342 00:24:01,509 --> 00:24:03,529 No tengo que luego estar restándolo, ¿no? 343 00:24:05,569 --> 00:24:07,769 A ver, una cosa es que te saltes un punto 344 00:24:07,769 --> 00:24:09,009 Y otra cosa es que 345 00:24:09,009 --> 00:24:11,569 Que no, o sea, que cambies 346 00:24:11,569 --> 00:24:14,369 O sea, tú puedes hacer 0, 0,014 347 00:24:14,369 --> 00:24:16,089 0,1, 0,1007 348 00:24:16,089 --> 00:24:17,569 0,2, déjalo como está 349 00:24:17,569 --> 00:24:20,049 O hacer la resta 350 00:24:20,049 --> 00:24:21,109 ¿Vale? Si no, a ver 351 00:24:21,109 --> 00:24:23,109 Si lo quitas, pues has quitado un punto del medio 352 00:24:23,109 --> 00:24:24,789 Y en vez de tener una resta con 6 puntos 353 00:24:24,789 --> 00:24:26,710 Pues tienes una resta con 5 puntos 354 00:24:26,710 --> 00:24:29,670 es la única diferencia que hay 355 00:24:29,670 --> 00:24:31,529 al final lo que digo 356 00:24:31,529 --> 00:24:33,650 que son puntos en una recta 357 00:24:33,650 --> 00:24:35,730 que a lo mejor pasan por tu zona 358 00:24:35,730 --> 00:24:37,250 y te interesa ese punto 359 00:24:37,250 --> 00:24:39,190 o a lo mejor es un punto que se desvía 360 00:24:39,190 --> 00:24:40,369 y lo tienes que quitar del medio 361 00:24:40,369 --> 00:24:41,490 entonces 362 00:24:41,490 --> 00:24:45,589 se va a desviar un poco 363 00:24:45,589 --> 00:24:47,369 a lo real 364 00:24:47,369 --> 00:24:49,049 pero a lo mejor se te mejora 365 00:24:49,049 --> 00:24:51,190 muchas veces si hemos dicho este punto se aleja 366 00:24:51,190 --> 00:24:52,390 lo quito del medio 367 00:24:52,390 --> 00:24:55,190 y no hemos utilizado un punto porque se iba 368 00:24:55,190 --> 00:24:59,009 Pero bueno, yo es o dejarlo como está 369 00:24:59,009 --> 00:25:01,130 O restar tanto a los patrones como a la muestra 370 00:25:01,130 --> 00:25:02,789 ¿Vale? 371 00:25:02,869 --> 00:25:05,009 O sea, atártelos ya es cuando veas que es ese punto 372 00:25:05,009 --> 00:25:07,549 El que hace que no vayas bien 373 00:25:07,549 --> 00:25:12,910 Es 3,6 por 10 elevado a menos 3 374 00:25:12,910 --> 00:25:19,160 Más 0,98x 375 00:25:19,160 --> 00:25:21,240 Y la R cuadrado 376 00:25:21,240 --> 00:25:24,420 Sale de 0,2975 377 00:25:24,420 --> 00:25:29,640 entonces la R cuadrada 378 00:25:29,640 --> 00:25:30,319 sale buena 379 00:25:30,319 --> 00:25:32,839 vale, mirad porque 380 00:25:32,839 --> 00:25:35,339 si no os coincide, firme, que es que no sé por qué 381 00:25:35,339 --> 00:25:37,420 la he hecho cuatro veces la recta 382 00:25:37,420 --> 00:25:41,359 vale, entonces ya nosotros tendríamos esos patrones 383 00:25:41,359 --> 00:25:43,299 ya los tendríamos hechos, si es verdad que 384 00:25:43,299 --> 00:25:45,500 en muchos sitios dejan los patrones hechos 385 00:25:45,500 --> 00:25:47,680 una semana y van poniendo 386 00:25:47,680 --> 00:25:49,400 todas las muestras y siguen utilizando 387 00:25:49,400 --> 00:25:51,680 la misma recta de calibrado, eso va a depender 388 00:25:51,680 --> 00:25:53,420 de la precisión y exactitud 389 00:25:53,420 --> 00:25:54,579 con la que necesitáis trabajar 390 00:25:54,579 --> 00:25:57,400 que hay muchas veces que se quedan ahí puestos y luego ya 391 00:25:57,400 --> 00:26:02,019 sustituye si me de sólo la muestra y hay veces que toca preparar los patrones cada vez que vayas 392 00:26:02,019 --> 00:26:07,059 a trabajar ahora nos dice que para preparar la muestra se trasvasan 10 mililitros del agua de 393 00:26:07,059 --> 00:26:12,519 mar que es nuestra agua de muestra y se llevan un matraz de 50 mililitros y medimos la absorbancia 394 00:26:12,519 --> 00:26:22,660 que nos da un valor de 0 3461 pues ahora nosotros sustituimos aquí y ponemos la señal que nos ha 395 00:26:22,660 --> 00:26:38,720 a la muestra, que era 0,3461 y nos quedaría que 0,3461 es igual a 7,36 por 10 elevado 396 00:26:38,720 --> 00:26:54,309 a menos 3 más 0,98X y ya sustituimos la X. Entonces, haciendo eso, 0,345 en gramos litro, 397 00:26:54,309 --> 00:26:59,650 Porque es en las mismas unidades que habíamos operado nosotros la disolución. 398 00:27:01,210 --> 00:27:12,470 Aquí acordaros que cuando nosotros hacemos X, cuando calculamos X, en X siempre está lo que hayamos puesto nosotros en el patrón que hayamos analizado. 399 00:27:12,990 --> 00:27:19,549 En este caso X era en gramo litro que era la concentración, aquí tendríamos la absorbancia, que serían los patrones de cobre. 400 00:27:19,549 --> 00:27:33,049 Pero lo que yo he analizado no es la muestra de verdad, yo tenía una cantidad de muestra en un vaso y de aquí cogimos 10 mililitros y lo hemos llevado a un matraz de 50 y esto es lo que yo analizo. 401 00:27:33,049 --> 00:28:01,970 Por tanto, este matraz tiene una concentración de 0,345, este matraz, este de aquí es 0,345 gramos litro, pero este no es el agua de mar de verdad, para eso tengo que ir hacia acá, entonces para eso, pues como queráis, concentración por volumen, concentración por volumen otra vez con la regla de las diluciones, sino sería multiplicar por la inversa del factor de dilución, ¿vale? 402 00:28:01,970 --> 00:28:15,869 Al final digo que las cuentas son, y como queráis, 0,345 por 50 entre 10, que sería, esa sería la concentración real del agua de mar. 403 00:28:16,190 --> 00:28:17,950 Y ahí sale 1,73. 404 00:28:19,069 --> 00:28:22,789 Entonces el agua de mar que está aquí sería 1,73. 405 00:28:22,789 --> 00:28:29,799 nos decía calcular la concentración 406 00:28:29,799 --> 00:28:30,720 en cobre 407 00:28:30,720 --> 00:28:33,599 en gramo litro 408 00:28:33,599 --> 00:28:35,279 de la muestra de agua de mar que es 1,73 409 00:28:35,279 --> 00:28:38,220 ¿el resultado es fiable? 410 00:28:38,799 --> 00:28:39,559 pues en nuestro caso 411 00:28:39,559 --> 00:28:41,380 si es fiable porque 412 00:28:41,380 --> 00:28:43,839 la R o la R cuadrado 413 00:28:43,839 --> 00:28:45,900 que hemos obtenido es apta 414 00:28:45,900 --> 00:28:47,799 si nos llega a salir una R cuadrado 415 00:28:47,799 --> 00:28:49,799 de 0,95 el resultado 416 00:28:49,799 --> 00:28:50,779 no sería fiable 417 00:28:50,779 --> 00:28:53,619 entonces para ver la fiabilidad del método 418 00:28:53,619 --> 00:28:55,339 de la calibración que hemos puesto nosotros 419 00:28:55,339 --> 00:29:03,900 nos basamos en la r o la r cuadrada, acordaros, r 0,999 y r cuadrado 0,99, ¿vale? Si cumple 420 00:29:03,900 --> 00:29:09,579 esos parámetros, damos fiabilidad. Ahora nos dice, si el resultado esperado es 1,04, 421 00:29:10,059 --> 00:29:16,359 pues el método sería exacto, nos ha salido 1,73, pues tenemos, bueno, ahí yo lo haría 422 00:29:16,359 --> 00:29:17,319 por ejemplo por 423 00:29:17,319 --> 00:29:19,259 calculando el error 424 00:29:19,259 --> 00:29:21,660 el error relativo 425 00:29:21,660 --> 00:29:24,099 me sale un error 426 00:29:24,099 --> 00:29:25,279 del 66% 427 00:29:25,279 --> 00:29:28,319 si, es que esto también nos pasaba en las prácticas 428 00:29:28,319 --> 00:29:29,460 que nos daba bastante error 429 00:29:29,460 --> 00:29:32,079 si, pues entonces el método 430 00:29:32,079 --> 00:29:33,779 no es exacto 431 00:29:33,779 --> 00:29:35,920 el error permitido suele ser 432 00:29:35,920 --> 00:29:37,980 de un 5%, tenemos 433 00:29:37,980 --> 00:29:39,279 10 veces más de error 434 00:29:39,279 --> 00:29:42,220 entonces bueno, por muy fiable que haya sido 435 00:29:42,220 --> 00:29:44,220 el método, no ha sido exacto 436 00:29:44,220 --> 00:29:45,500 porque nos desviamos 437 00:29:45,500 --> 00:29:47,720 del parámetro que estábamos buscando 438 00:29:47,720 --> 00:29:49,259 entonces bien, o la muestra 439 00:29:49,259 --> 00:29:51,180 está mal medida por lo que sea 440 00:29:51,180 --> 00:29:53,440 o está contaminada o hemos hecho 441 00:29:53,440 --> 00:29:54,960 el procedimiento mal 442 00:29:54,960 --> 00:29:57,359 o el procedimiento no es el que más se ajusta a esto 443 00:29:57,359 --> 00:30:00,690 ¿vale? 444 00:30:01,690 --> 00:30:03,069 entonces aquí sería un error alto 445 00:30:03,069 --> 00:30:04,289 en las prácticas 446 00:30:04,289 --> 00:30:06,609 yo creo que eran las de 447 00:30:06,609 --> 00:30:09,650 las de pH y conductividad donde salía mucho error 448 00:30:09,650 --> 00:30:11,750 pero eso es por la muestra 449 00:30:11,750 --> 00:30:13,809 que decía 450 00:30:13,809 --> 00:30:15,369 1 molar y era 451 00:30:15,369 --> 00:30:16,309 1,2 molar 452 00:30:16,309 --> 00:30:18,210 un clorhídrico creo que era 453 00:30:18,210 --> 00:30:19,490 el que estaba preparado 454 00:30:19,490 --> 00:30:21,549 pero bueno, eso era para que saliera 455 00:30:21,549 --> 00:30:23,569 un error alto también 456 00:30:23,569 --> 00:30:26,430 ¿vale? porque estaba mal etiquetado 457 00:30:26,430 --> 00:30:27,130 a breve 458 00:30:27,130 --> 00:30:29,930 ¿vale? pero bueno, lo permitido 459 00:30:29,930 --> 00:30:31,930 yo creo que lo estáis viendo en calidad también 460 00:30:31,930 --> 00:30:33,710 que más o menos un 5% 461 00:30:33,710 --> 00:30:35,849 es lo que se suele permitir 462 00:30:35,849 --> 00:30:37,730 de error ¿vale? para trabajar 463 00:30:37,730 --> 00:30:39,930 con el 95% de confianza 464 00:30:41,130 --> 00:30:43,910 pues con un 66% y se permite 465 00:30:43,910 --> 00:30:45,690 un 5% pues se desvía 466 00:30:45,690 --> 00:30:52,670 bastante. Esa sería la justificación. El siguiente ejercicio nos dice que tenemos en 467 00:30:52,670 --> 00:30:57,529 el laboratorio una muestra que está contaminada con dicromato potásico y tenemos que calcular 468 00:30:57,529 --> 00:31:01,730 la concentración del dicromato potásico que esté presente en la muestra. Entonces 469 00:31:01,730 --> 00:31:06,089 nos dan los pasos. Seguimos siguiendo una técnica instrumental y nos dice que preparamos 470 00:31:06,089 --> 00:31:11,210 una disolución madre de 0,03 molar del dicromato porque es nuestro analito objeto de estido. 471 00:31:11,210 --> 00:31:20,849 Después que trasvasemos lo que sea necesario a cada patrón para obtener unas concentraciones entre 6 por 10 a la menos 4 y 3 por 10 a la menos 3. 472 00:31:21,630 --> 00:31:23,930 Habría que calcular cuánto trasvasamos de la ley cuota. 473 00:31:24,470 --> 00:31:32,150 Los procedimientos, si es verdad que dependiendo del procedimiento que sea, dan más margen para que calcules tú cuál es la concentración de los patrones 474 00:31:32,150 --> 00:31:38,390 y te dan el volumen o te dicen un rango y ya te apañas tú con ese rango o al revés. 475 00:31:38,390 --> 00:32:01,710 Te dice, esta es la concentración, pues prepara la disolución madre que necesites y trasvasa la cantidad que necesites, ¿vale? Hay que ajustarse un poco al método con el que estemos trabajando, ¿vale? A lo que diga. Por eso también intento poner de las dos cosas, ¿vale? Una vez que tenemos preparados los patrones, tenemos que añadir a cada uno de los matraces 15 mililitros de la muestra de agua problema, del agua que estaba contaminada. 476 00:32:01,710 --> 00:32:04,630 y luego ya enrasamos a 50 mililitros 477 00:32:04,630 --> 00:32:08,410 y una vez que hemos enrasado a 50 mililitros 478 00:32:08,410 --> 00:32:10,769 pues medimos la señal de cada uno de los patrones 479 00:32:10,769 --> 00:32:13,650 y este sería el resultado que nos da 480 00:32:13,650 --> 00:32:17,369 hemos medido y ya está 481 00:32:17,369 --> 00:32:19,549 da igual la señal que sea, seguramente sea 482 00:32:19,549 --> 00:32:23,589 ultravioleta visible, pero no os preocupéis 483 00:32:23,589 --> 00:32:25,789 porque a nosotros no nos da igual en qué haya medido 484 00:32:25,789 --> 00:32:29,589 y nos dice que calculemos la concentración de dicromato 485 00:32:29,589 --> 00:32:33,269 en la muestra de agua, según la tabla de resultados que tengamos. 486 00:32:34,170 --> 00:32:38,490 Pues para hacer la recta de calibrado y para hacer el problema, 487 00:32:39,009 --> 00:32:44,329 no hace falta que nosotros calculemos cuál es la alícuota que hemos tenido que trasvasar, 488 00:32:44,750 --> 00:32:48,569 simplemente con el cuadro que tenemos ya podríamos hacer algo. 489 00:32:48,569 --> 00:32:51,829 Si estamos haciendo un esquema y necesitamos trabajar en el laboratorio, 490 00:32:52,069 --> 00:32:55,589 pues evidentemente sí tenemos que saber cuánto tenemos que trasvasar. 491 00:32:55,950 --> 00:32:58,410 Pero para hacer la recta de calibrado, para hacer este ejercicio, 492 00:32:58,410 --> 00:33:04,349 no hace falta que nosotros sepamos cuál es la alícuota, porque acordaros que en el eje de coordenadas 493 00:33:04,349 --> 00:33:12,289 nosotros vamos a poner la concentración frente a la señal, entonces ya concentración ya las tengo, ¿vale? 494 00:33:12,509 --> 00:33:17,390 Entonces con esto yo puedo ir empezando, que luego tenemos que trabajar en el laboratorio, pues sí, 495 00:33:17,470 --> 00:33:21,890 claro, tenemos que saber cuánto es, ¿vale? Y, vale, digo que no me vaya yo que lo pida el logo. 496 00:33:21,890 --> 00:33:25,130 entonces vamos a ir directamente con esto 497 00:33:25,130 --> 00:33:29,250 bueno, voy a hacer esquema, aunque no pongamos la alicueta 498 00:33:29,250 --> 00:33:33,369 pero para que tengamos en cuenta lo que estamos haciendo 499 00:33:33,369 --> 00:33:36,630 entonces nosotros teníamos una disolución madre 500 00:33:36,630 --> 00:33:40,849 que la tenemos aquí y preparamos una serie de patrones 501 00:33:40,849 --> 00:33:44,609 como me está diciendo que yo tengo que trasvasar 502 00:33:44,609 --> 00:33:49,190 cantidades de disolución madre y que lo añada 15 ml de muestra 503 00:33:49,190 --> 00:33:55,670 ya nos tiene que dar un aviso de que no puede ser un patrón externo 504 00:33:55,670 --> 00:33:56,910 sino que va a ser otro 505 00:33:56,910 --> 00:34:00,930 aparte no tenemos un matraz de la muestra como antes que nos dijera 506 00:34:00,930 --> 00:34:05,369 coge 10 mililitros y enrasa hasta el 50 o hasta el 100 o hasta lo que sea 507 00:34:05,369 --> 00:34:08,389 sino que añadimos muestra a todos los matraces 508 00:34:08,389 --> 00:34:10,570 como añadimos muestra a todos los matraces 509 00:34:10,570 --> 00:34:16,570 pues se trata de la adición patrón o la adición estándar 510 00:34:16,570 --> 00:34:35,500 Entonces nosotros tendríamos aquí todos los patrones en matraces aforados, siempre que trabajemos con la parte de instrumental va en matraces aforados. 511 00:34:37,300 --> 00:34:56,260 Y las cantidades que sean, que sea rosa la madre y aquí no teníamos una que fuera cero, sino que en todas teníamos algo de solución madre, pues ahí no ha hecho el cero. 512 00:34:56,260 --> 00:34:59,900 entonces la concentración de disolución madre 513 00:34:59,900 --> 00:35:01,280 es creciente 514 00:35:01,280 --> 00:35:02,659 vale, van todas 515 00:35:02,659 --> 00:35:06,179 vale, aquí evidentemente no me sale a escala 516 00:35:06,179 --> 00:35:09,739 pero bueno, se ve que va 517 00:35:09,739 --> 00:35:12,280 se ve que va creciendo 518 00:35:12,280 --> 00:35:14,099 y luego tenemos 519 00:35:14,099 --> 00:35:15,760 una muestra 520 00:35:15,760 --> 00:35:18,119 en la que hemos cogido 521 00:35:18,119 --> 00:35:18,639 nosotros 522 00:35:18,639 --> 00:35:22,239 el matraz o el vaso 523 00:35:22,239 --> 00:35:24,059 o lo que sea, me da igual cuanto tenga 524 00:35:24,059 --> 00:35:25,179 de muestra para 525 00:35:25,179 --> 00:35:29,119 para corregirlo, o sea para llenarlo 526 00:35:29,119 --> 00:35:30,579 aquí tengo una muestra de agua 527 00:35:30,579 --> 00:35:33,420 y de ahí voy a ir cogiendo 528 00:35:33,420 --> 00:35:35,039 y tenemos que añadir 529 00:35:35,039 --> 00:35:36,579 a todo la misma cantidad 530 00:35:36,579 --> 00:35:38,340 a todo le vamos a añadir 531 00:35:38,340 --> 00:35:41,280 15 mililitros 532 00:35:41,280 --> 00:35:44,570 vale 533 00:35:44,570 --> 00:35:46,329 la misma cantidad en todos 534 00:35:46,329 --> 00:35:47,929 que eso es muy importante 535 00:35:47,929 --> 00:35:51,329 que pongamos la misma cantidad en todos los patrones 536 00:35:51,329 --> 00:35:53,289 para que ese aumento 537 00:35:53,289 --> 00:35:55,130 de señal sea igual 538 00:35:55,130 --> 00:35:55,889 en todos 539 00:35:55,889 --> 00:35:59,889 entonces aquí entonces pues yo pongo así 540 00:35:59,889 --> 00:36:01,130 un poquito 541 00:36:01,130 --> 00:36:04,230 ¿vale? y tendríamos 542 00:36:04,230 --> 00:36:06,489 en todo la misma cantidad los 15 mililitros 543 00:36:06,489 --> 00:36:07,230 que me ha pedido 544 00:36:07,230 --> 00:36:10,849 y ya enrasamos con agua a 50 mililitros 545 00:36:10,849 --> 00:36:12,030 ¿vale? 546 00:36:12,070 --> 00:36:14,269 eso no lo pongo para no poner tanto color 547 00:36:14,269 --> 00:36:16,329 ¿vale? para ir un poquillo 548 00:36:16,329 --> 00:36:16,829 más rápido 549 00:36:16,829 --> 00:36:20,289 entonces ya enrasamos todos a 50 550 00:36:20,289 --> 00:36:22,369 que es lo que nos dice 551 00:36:22,369 --> 00:36:24,090 para tener controlada 552 00:36:24,090 --> 00:36:26,230 la concentración que yo estoy poniendo 553 00:36:26,230 --> 00:36:27,429 y el volumen que estoy poniendo 554 00:36:27,429 --> 00:36:30,110 ¿cuánto he añadido de muestra? me da igual 555 00:36:30,110 --> 00:36:31,869 porque, a ver, me da igual 556 00:36:31,869 --> 00:36:34,090 todos tienen la misma muestra, pero no me va a 557 00:36:34,090 --> 00:36:36,030 influir en las concentraciones de disolución 558 00:36:36,030 --> 00:36:38,010 madre, es decir, yo he añadido lo que tenga 559 00:36:38,010 --> 00:36:39,869 que añadir, que es la licuota que va 560 00:36:39,869 --> 00:36:41,989 variando, pero ese volumen yo lo conozco 561 00:36:41,989 --> 00:36:43,769 y va a un volumen final de 50 562 00:36:43,769 --> 00:36:45,969 entonces, lo que haya entre medias 563 00:36:45,969 --> 00:36:47,969 yo haya añadido un auxiliar o haya 564 00:36:47,969 --> 00:36:49,809 añadido muestra o haya añadido 565 00:36:49,809 --> 00:36:51,750 agua solamente, me da igual 566 00:36:51,750 --> 00:36:54,030 yo tengo que tener en cuenta la licuota que yo he puesto 567 00:36:54,030 --> 00:36:57,510 y el volumen final. 568 00:36:58,289 --> 00:36:59,349 ¿Qué vamos a hacer aquí? 569 00:37:00,309 --> 00:37:04,510 Nosotros vamos a representar la concentración añadida, 570 00:37:05,010 --> 00:37:10,030 porque la real no puedo ponerla, porque la real será la añadida más lo que tenga de muestra. 571 00:37:10,130 --> 00:37:14,309 Como lo de muestra no tengo lo que es, sería todo 6 por 10 a la menos 3 más X. 572 00:37:14,610 --> 00:37:17,710 Entonces, para evitar tener ecuaciones dentro de la recta de calibrado, 573 00:37:18,210 --> 00:37:19,869 ponemos solamente la concentración añadida. 574 00:37:20,289 --> 00:37:22,110 Y aquí la señal, que es lo que tenemos. 575 00:37:22,110 --> 00:37:44,389 Se va a ver aumentado todo, no tenemos una que sea cero, pues la ponemos por aquí, se va a ver todo aumentado y lo que tenemos que hacer nosotros es una extrapolación, me salgo de la recta de calibrado y voy a ver cuánto es al cruzarse con I0, ¿vale? 576 00:37:44,389 --> 00:37:49,190 ¿Cuánto sería la concentración si la señal fuese exceso? 577 00:37:49,389 --> 00:37:49,650 Cero. 578 00:37:50,210 --> 00:37:52,090 Más o menos habría que ver ahí. 579 00:37:52,230 --> 00:37:53,929 ¿Cuánto se me está aumentando todo? 580 00:37:54,289 --> 00:37:56,409 Que sería, ¿cuánto se me está aumentando todo? 581 00:37:56,829 --> 00:37:59,030 ¿A qué concentración se debe este aumento? 582 00:37:59,469 --> 00:38:00,309 Esa es la de la muestra. 583 00:38:00,489 --> 00:38:03,250 Entonces podemos saber cuál es la concentración de la muestra. 584 00:38:03,690 --> 00:38:07,710 Entonces hacemos la recta de calibrado con los puntos que vienen aquí en la tabla. 585 00:38:07,710 --> 00:38:11,309 En esta no tenemos que hacer ningún tipo de modificación, 586 00:38:11,889 --> 00:38:13,829 sino que son esos mismos que vienen ahí. 587 00:38:14,389 --> 00:38:52,409 vale, entonces vamos a hacerla, y es igual a menos 0,023 más 386,13x, en este caso vamos a, bueno no nos dice nada, pues vamos a suponer que el blanco se ha puesto a un punto 0,0, porque no dice nada, 588 00:38:52,409 --> 00:39:02,610 Hay veces que te dicen, el blanco es 0,030, pues entonces ahí tenemos igual que antes, la opción el blanco blanco que no lleva ni madre ni muestra. 589 00:39:03,230 --> 00:39:07,329 Tenemos la opción de restar otra vez todo o de dejarlo igual. 590 00:39:07,550 --> 00:39:12,969 Si lo dejamos igual, esta I en vez de ser 0, sería el 0,030 ese que ha salido, ¿vale? 591 00:39:12,969 --> 00:39:20,170 Esta I en la parte de adición estándar se sustituye por la lectura del blanco blanco, ¿vale? 592 00:39:20,170 --> 00:39:36,510 el blanco que no tiene ni madre ni muestra. Si hacemos eso, pues quedaría, aquí tendríamos 593 00:39:36,510 --> 00:39:54,349 que 0 más 0,023 entre 386,13 es igual a X. Y X es igual a 6,06 por 10 a la menos 5, 6,07. 594 00:39:54,349 --> 00:40:09,460 esta concentración de 6,07 es la que hay en lo que yo analizo 595 00:40:09,460 --> 00:40:11,940 que son estos patrones en cualquiera de ellos 596 00:40:11,940 --> 00:40:15,460 porque la cantidad que hay de muestra en cualquiera es la misma 597 00:40:15,460 --> 00:40:17,239 están enrasados todo a lo mismo 598 00:40:17,239 --> 00:40:23,519 así que la concentración de muestra en cualquiera de los patrones es 6,07 por 10 elevado a menos 3 599 00:40:23,519 --> 00:40:29,519 pero en la muestra original en esta de aquí verde no es 6,07 600 00:40:29,519 --> 00:40:45,659 sino que tenemos que quitar la dilución, entonces igual que antes tendríamos que hacer el 6,07 por 10 elevado a menos 5 molar 601 00:40:45,659 --> 00:40:53,239 por la inversa del factor de dilución, que en nuestro caso era 50 entre 15, que es lo que habíamos añadido nosotros. 602 00:40:54,480 --> 00:41:01,119 Entonces aquí la concentración es 2,02 por 10 elevado a menos 4. 603 00:41:03,079 --> 00:41:14,539 ¿Vale? La que hay aquí y aquí dentro, que es la muestra original, ¿vale? Ya sin nada de diluciones ni nada de eso. 604 00:41:15,059 --> 00:41:17,599 Aquí es 2,02 por 10 elevado a menos 4. 605 00:41:19,400 --> 00:41:30,539 ¿Que no queréis hacerlo multiplicando por la inversa del volumen este que estoy haciendo yo y queréis hacerlo con la regla de las diluciones? 606 00:41:30,539 --> 00:41:32,420 Pues estamos en las mismas. 607 00:41:33,119 --> 00:41:38,099 Vosotros sabéis que la concentración de la muestra por el volumen de la alícota 608 00:41:38,099 --> 00:41:42,960 es igual a la concentración de la dilución por el volumen de la dilución. 609 00:41:42,960 --> 00:41:46,860 Entonces, la concentración de la muestra, para que no se confunda con la madre, 610 00:41:48,940 --> 00:41:55,380 sería igual a concentración de la dilución por el volumen de la dilución 611 00:41:55,380 --> 00:42:00,139 entre el volumen de la alícota, 612 00:42:00,139 --> 00:42:18,860 Que en nuestro caso la concentración de la muestra sería igual a la concentración de la dilución 6,07 por 10 elevado a menos 5 molar por el volumen que yo he preparado que son 50 mililitros entre 15 mililitros que estoy preparando. 613 00:42:18,860 --> 00:42:20,900 entonces veis que al final queda igual 614 00:42:20,900 --> 00:42:21,880 quedaría 615 00:42:21,880 --> 00:42:25,760 2,02 por 10 elevado a menos 4 616 00:42:25,760 --> 00:42:34,480 ¿vale? por eso que para hacerla 617 00:42:34,480 --> 00:42:37,199 al final es igual, es aplicar sin fórmula 618 00:42:37,199 --> 00:42:38,179 aplicar directamente 619 00:42:38,179 --> 00:42:40,780 esta parte de aquí 620 00:42:40,780 --> 00:42:45,059 ¿vale? que multiplicar por la inversa del factor de ilusión 621 00:42:45,059 --> 00:42:46,340 viene de 622 00:42:46,340 --> 00:42:48,179 de esto de aquí 623 00:42:48,179 --> 00:42:54,480 y eso es para cualquiera 624 00:42:54,480 --> 00:42:56,280 que estamos haciendo, no solamente para esta 625 00:42:56,280 --> 00:42:59,300 María José 626 00:42:59,300 --> 00:42:59,659 dime 627 00:42:59,659 --> 00:43:02,860 perdona que yo me lío, esto lo entendí todo 628 00:43:02,860 --> 00:43:05,119 pero si yo aquí tuviera los dos blancos 629 00:43:05,119 --> 00:43:06,260 vale 630 00:43:06,260 --> 00:43:09,159 vamos a ponerlo 631 00:43:09,159 --> 00:43:09,820 pues acaso 632 00:43:09,820 --> 00:43:11,119 sí, por favor 633 00:43:11,119 --> 00:43:14,559 imaginar 634 00:43:14,559 --> 00:43:15,079 vale 635 00:43:15,079 --> 00:43:15,960 que 636 00:43:15,960 --> 00:43:19,239 tengo 637 00:43:19,239 --> 00:43:23,800 y aquí tenemos las señales 638 00:43:23,800 --> 00:43:26,099 la señal 639 00:43:26,099 --> 00:43:27,800 la concentración arriba 640 00:43:27,800 --> 00:43:31,969 y la señalada 641 00:43:31,969 --> 00:43:33,730 nosotros cuando tengamos 642 00:43:33,730 --> 00:43:36,590 estos que estamos poniendo 643 00:43:36,590 --> 00:43:37,730 los patrones 644 00:43:37,730 --> 00:43:40,909 esta parte de aquí 645 00:43:40,909 --> 00:43:42,789 vale 646 00:43:42,789 --> 00:43:43,590 ya hemos puesto 647 00:43:43,590 --> 00:43:45,969 la disolución madre 648 00:43:45,969 --> 00:43:48,849 está puesta de rosa 649 00:43:48,849 --> 00:43:50,650 y la muestra 650 00:43:50,650 --> 00:43:51,849 está puesta de verde 651 00:43:51,849 --> 00:44:35,699 entonces 652 00:44:35,699 --> 00:44:46,179 Aquí habíamos dicho que aquí hayamos metido disolución madre que iba en crecimiento. 653 00:44:50,139 --> 00:45:03,940 Y la muestra que era en verde, ahí hemos añadido a todos un poquito, ¿vale? 654 00:45:03,980 --> 00:45:05,780 Y a todos la misma cantidad, ¿vale? 655 00:45:05,840 --> 00:45:10,860 Eso es lo que tiene que quedar claro, que la muestra se añade a todos en la misma cantidad. 656 00:45:11,559 --> 00:45:13,800 15 mililitros 657 00:45:13,800 --> 00:45:25,039 y ahí he dejado dos matraces 658 00:45:25,039 --> 00:45:26,760 ahí raros y nada 659 00:45:26,760 --> 00:45:28,639 entonces uno es el que os digo yo 660 00:45:28,639 --> 00:45:29,639 que es el blanco blanco 661 00:45:29,639 --> 00:45:31,300 que no lleva nada 662 00:45:31,300 --> 00:45:32,380 ni madre 663 00:45:32,380 --> 00:45:34,760 ni disolución muestra 664 00:45:34,760 --> 00:45:36,539 y luego está este blanco 665 00:45:36,539 --> 00:45:37,880 que no lleva madre 666 00:45:37,880 --> 00:45:39,280 pero si lleva muestra 667 00:45:39,280 --> 00:45:41,079 lleva aquí los 15 668 00:45:41,079 --> 00:45:47,079 entonces con este de aquí 669 00:45:47,079 --> 00:45:51,099 se suele hacer el punto 0,0 670 00:45:51,099 --> 00:45:54,159 este de aquí se suele utilizar 671 00:45:54,159 --> 00:45:56,079 para hacer el punto 0,0 672 00:45:56,079 --> 00:45:58,480 entonces yo puedo tener 0 y 0 673 00:45:58,480 --> 00:46:00,460 que por eso hacemos el i igual a 0 674 00:46:00,460 --> 00:46:02,699 y este pues a veces da señal 675 00:46:02,699 --> 00:46:03,900 suele dar un poco de señal 676 00:46:03,900 --> 00:46:05,280 yo en este caso no lo he preparado 677 00:46:05,280 --> 00:46:07,360 entonces este de aquí 678 00:46:07,360 --> 00:46:11,750 también sería 679 00:46:11,750 --> 00:46:13,329 un 0 680 00:46:13,329 --> 00:46:15,630 pero luego tendríamos pues 681 00:46:15,630 --> 00:46:18,210 0,147 682 00:46:18,210 --> 00:46:18,809 por ejemplo 683 00:46:18,809 --> 00:46:23,010 cuando yo vaya a hacer la recta de calibrado 684 00:46:23,010 --> 00:46:24,650 claro, si yo pongo dos ceros 685 00:46:24,650 --> 00:46:26,630 me va a decir la calculadora que es esto 686 00:46:26,630 --> 00:46:28,969 entonces, este cero de aquí 687 00:46:28,969 --> 00:46:30,110 no lo incluyo 688 00:46:30,110 --> 00:46:33,050 yo el cero cero, el que da cero cero 689 00:46:33,050 --> 00:46:35,150 no lo incluyo en la recta de calibrado 690 00:46:35,150 --> 00:46:37,050 yo hago la recta de calibrado con los demás 691 00:46:37,050 --> 00:46:39,110 ¿vale? este no se incluye 692 00:46:39,110 --> 00:46:41,110 en la recta de calibrado y haría la recta de calibrado 693 00:46:41,110 --> 00:46:42,530 con estos para allá 694 00:46:42,530 --> 00:46:44,929 si yo hago esa recta de calibrado nueva 695 00:46:44,929 --> 00:46:47,110 que he incluido, pues añadimos 696 00:46:47,110 --> 00:47:06,599 el punto y es igual a 0,05199 y 346. Y yo aquí igual, como este rojo me ha dado el 697 00:47:06,599 --> 00:47:14,099 punto 00, pues yo aquí sustituyo por 0, ¿vale? Y ya el resto lo hago igual. ¿Qué pasa si 698 00:47:14,099 --> 00:47:25,800 este punto no me da el 0,0 y me da por ejemplo 0,09, yo hago lo mismo, la recta de calibrado 699 00:47:25,800 --> 00:47:33,119 que sale es esta de aquí, porque este punto sigo sin incluirlo en la recta, veis que no 700 00:47:33,119 --> 00:47:37,900 lleva ni madre ni muestra y este lo único que no lleva es madre pero si lleva muestra, 701 00:47:38,480 --> 00:47:43,579 este de aquí yo sigo sin incluirlo en la recta, se suele utilizar para hacer el punto 702 00:47:43,579 --> 00:47:48,139 0,0, que es lo que se hace en el laboratorio, lo que estoy haciendo aquí sería sobre el 703 00:47:48,139 --> 00:47:53,880 papel porque en el laboratorio no se suele hacer, que dé el 0,09 y dejarlo así, entonces 704 00:47:53,880 --> 00:47:58,800 si yo lo dejase así, por lo que sea, porque no puedo restarlo, en vez de sustituir esta 705 00:47:58,800 --> 00:48:08,679 y por 0, la tengo que sustituir por 0,09 y ya despejar la x para ver que sale, la otra 706 00:48:08,679 --> 00:48:17,340 Otra opción que sería, sería restar a todos estos 0,09 y luego sustituir por i igual a 0, ¿vale? 707 00:48:17,360 --> 00:48:20,380 Porque se lo estoy quitando a todos, el 0,09. 708 00:48:20,679 --> 00:48:22,659 Se lo estoy quitando a todos, entonces ya sustituyo. 709 00:48:24,099 --> 00:48:25,679 No sé, Alicia, si... 710 00:48:26,320 --> 00:48:27,880 Sí, perfecto, gracias. 711 00:48:28,579 --> 00:48:28,920 Vale. 712 00:48:29,619 --> 00:48:31,400 Pero digo que esto es raro. 713 00:48:31,579 --> 00:48:38,179 Normalmente se parte del 0,0 que el blanco se hace para eso, para que tengamos el punto 0,0 y ya está. 714 00:48:38,179 --> 00:48:40,500 el 0-0 no queremos incluir la recta 715 00:48:40,500 --> 00:48:42,780 porque la forzamos y nos sale una R menor 716 00:48:42,780 --> 00:48:43,920 es otro punto 717 00:48:43,920 --> 00:48:47,760 aquí yo tengo 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 puntos 718 00:48:47,760 --> 00:48:49,460 pues entre 7 y 6 puntos 719 00:48:49,460 --> 00:48:50,420 tampoco pasa nada 720 00:48:50,420 --> 00:48:51,719 para tener una recta que la he grabado 721 00:48:51,719 --> 00:48:53,280 por lo menos 4 puntos 722 00:48:53,280 --> 00:48:55,500 que tenga uno más 723 00:48:55,500 --> 00:48:56,579 pues va a ser más fiable 724 00:48:56,579 --> 00:48:58,840 más que más fiable va a ser más exacta 725 00:48:58,840 --> 00:49:01,559 se va a asemejar más a los datos reales 726 00:49:01,559 --> 00:49:03,280 pero si yo tengo que quitar un punto 727 00:49:03,280 --> 00:49:04,960 porque se me va la recta 728 00:49:04,960 --> 00:49:06,900 un montonazo, pues quito el punto 729 00:49:06,900 --> 00:49:08,599 porque ha salido mal ese patrón 730 00:49:08,599 --> 00:49:11,139 y ya está, no hay más complicación 731 00:49:11,139 --> 00:49:14,300 Sí, dime, perdón 732 00:49:14,300 --> 00:49:17,960 Yo pensaba que esta y siempre salía negativa 733 00:49:17,960 --> 00:49:20,579 No, a ver 734 00:49:20,579 --> 00:49:22,539 hay veces que sí y hay veces que no 735 00:49:22,539 --> 00:49:23,800 no siempre sale negativa 736 00:49:23,800 --> 00:49:26,820 pero sí es verdad que la mayor parte de las veces sale negativa 737 00:49:26,820 --> 00:49:29,280 entonces si nosotros queremos despejar 738 00:49:29,280 --> 00:49:31,480 x es igual al valor absoluto 739 00:49:31,480 --> 00:49:33,099 de y menos a 740 00:49:33,099 --> 00:49:34,039 entre b 741 00:49:34,039 --> 00:49:36,719 y lo cogemos en valor absoluto 742 00:49:36,719 --> 00:49:45,860 Porque sí, como estás diciendo, que cuando nosotros hacemos la recta de calibrado, si sale así, al venirnos para acá, nos estamos viniendo a la parte negativa. 743 00:49:46,360 --> 00:49:47,400 Esto sería la parte negativa. 744 00:49:47,880 --> 00:49:49,440 Entonces, lo cogemos en valor absoluto. 745 00:49:51,599 --> 00:49:51,739 Vale. 746 00:49:52,280 --> 00:49:55,460 Aquí vamos a hacer la concentración de cafeína. 747 00:49:55,579 --> 00:49:59,300 Esta es muy parecida también al que hicimos en el laboratorio y las prácticas. 748 00:49:59,820 --> 00:50:01,920 Mediante una determinación por HPLC. 749 00:50:02,219 --> 00:50:04,300 Entonces, vamos a preparar la disolución madre. 750 00:50:04,739 --> 00:50:07,619 Y la disolución madre tiene una concentración de 5 gramos litro. 751 00:50:08,039 --> 00:50:15,480 Y a partir de ahí preparamos los patrones y nos dice lo que tenemos que trasvasar, 1, 2, 5, 10 y 15 mililitros a matraces de 50. 752 00:50:15,579 --> 00:50:26,019 Ya sabéis que luego sobra la mitad y más, pero bueno, para poder enrasar y tener cierta actitud en el enrase y no perder esa actitud de precisión, a matraces de 50. 753 00:50:26,619 --> 00:50:37,059 Además de esa cafeína, a los patrones se les añade 10 mililitros de una disolución patrón de ácido acetil salicílico, que tiene una concentración de 140 partes por millón. 754 00:50:37,059 --> 00:50:39,760 para controlar las posibles fluctuaciones del equipo. 755 00:50:40,000 --> 00:50:44,280 Aquí ya nos dice fluctuaciones del equipo, ya nuestra cabeza tiene que ir a patrón interno. 756 00:50:45,179 --> 00:50:47,199 Ya lo tenemos con el patrón interno asociado. 757 00:50:47,699 --> 00:50:51,219 Patrón interno, relación de concentraciones frente a relación de señales. 758 00:50:51,980 --> 00:50:54,860 Ahora, los patrones se enrasan una vez que ya hemos añadido las cosas 759 00:50:54,860 --> 00:50:58,260 y enrasamos con la propia fase móvil, que era centilitrilo y agua. 760 00:50:58,420 --> 00:51:04,659 Si os acordáis, teníamos centilitrilo-agua o metanol-agua según lo que estemos trabajando. 761 00:51:04,659 --> 00:51:08,400 luego cogemos la muestra y tomamos 10 mililitros de café 762 00:51:08,400 --> 00:51:11,940 y lo que llevamos a un matraz aforado de 50 mililitros 763 00:51:11,940 --> 00:51:14,980 y le añadimos 10 mililitros del ácido acetil salicílico 764 00:51:14,980 --> 00:51:17,739 al igual que los patrones que hemos añadido 765 00:51:17,739 --> 00:51:19,599 los 10 mililitros que tenemos aquí 766 00:51:19,599 --> 00:51:22,519 estos de aquí se los añadimos tanto a lo patrón 767 00:51:22,519 --> 00:51:26,880 como a la muestra, tiene que estar en las mismas condiciones 768 00:51:26,880 --> 00:51:29,679 hacemos un esquema de procedimiento 769 00:51:29,679 --> 00:51:31,260 aquí se me ha olvidado, este por ejemplo 770 00:51:31,260 --> 00:51:37,739 Bueno, este y los otros eran de examen de los de presencial, ¿vale? Para que veáis un poco el tipo de ejercicios. 771 00:51:38,719 --> 00:51:47,260 Y luego tenemos que ver la concentración que hay en una taza de café de 65 mililitros, ¿vale? 772 00:51:47,280 --> 00:51:55,460 Teniendo en cuenta los resultados. Y los resultados que tenemos son estos, ¿vale? 773 00:51:55,519 --> 00:52:01,579 Entonces, vamos a hacer el primer procedimiento y luego ya vamos haciendo la recta de calibrado 774 00:52:01,579 --> 00:52:08,659 para tener un poco idea de lo que estamos haciendo, que no nos liemos y que sepamos de dónde va cada una de las cosas. 775 00:52:10,460 --> 00:52:20,579 Tenemos primero una disolución de cafeína y luego tenemos una disolución del ácido acetilsalicílico. 776 00:52:21,900 --> 00:52:31,250 La disolución madre de cafeína tenía una concentración de 5 gramos litro 777 00:52:31,250 --> 00:52:42,000 y esta tiene una concentración de 140 partes por millón 778 00:52:42,000 --> 00:52:45,260 y ahora preparamos los patrones 779 00:52:45,260 --> 00:52:54,960 y me voy a dejar este para la muestra de café 780 00:52:54,960 --> 00:53:06,619 de ácido acetilsalicílico nos dice que tenemos que añadir a todos los patrones 10 mililitros 781 00:53:06,619 --> 00:53:08,360 a todos por igual 782 00:53:08,360 --> 00:53:21,000 y a la muestra también le añadimos 10 mililitros este va a ser la 783 00:53:24,000 --> 00:53:34,460 y luego aquí vamos a añadir las alícuotas que van creciendo entonces tenemos un blanco donde 784 00:53:34,460 --> 00:53:41,000 no añadimos nada de disolución madre sería nuestro punto cero que sí que tenemos que 785 00:53:41,000 --> 00:53:49,380 medir igualmente o hacer el blanco con él luego añadimos un mililitro añadimos dos mililitros 5 786 00:53:49,380 --> 00:54:12,949 10 y 15 y luego le añadimos el salicílico y la muestra lleva 10 mililitros de salicílico aparte 787 00:54:12,949 --> 00:54:21,489 De los 10 mililitros de café correspondientes y de aquí del café, trasvasamos 10 mililitros a 50. 788 00:54:21,929 --> 00:54:25,150 Y ya enrasamos a todos con la fase móvil. 789 00:54:26,070 --> 00:54:32,369 Me da igual con lo que enrase, mi volumen final va a ser de 50, entonces yo puedo calcular la concentración de lo que yo quiera. 790 00:54:34,369 --> 00:54:39,230 Porque ya sé lo que he añadido de cada uno y la concentración de partida. 791 00:54:39,230 --> 00:54:43,690 Siguiente paso, pues ya sería calcular la concentración 792 00:54:43,690 --> 00:54:46,489 Ya tenemos ahí todo puesto, ya estaría enrasado 793 00:54:46,489 --> 00:54:50,369 Y ya esto lo llevamos al HPLC y ya nos mide la señal 794 00:54:50,369 --> 00:54:58,230 Una vez que ya tenemos todo, pues aquí tendríamos muchas señales y muchas concentraciones 795 00:54:58,230 --> 00:55:04,030 Lo primero que tenemos que hacer es calcular la concentración de los patrones 796 00:55:04,030 --> 00:55:07,409 Para calcular la concentración de los patrones, pues acordaros 797 00:55:07,409 --> 00:55:13,210 La concentración de la madre por el volumen de la helícota es igual a la concentración del patrón por el volumen del patrón. 798 00:55:13,570 --> 00:55:16,210 La concentración de la madre, 5 gramos al litro. 799 00:55:16,510 --> 00:55:20,570 El volumen de la helícota va cambiando en 0, 1, 3, 5, todo eso. 800 00:55:21,010 --> 00:55:25,690 La concentración del patrón es X y el volumen que he preparado del patrón es 50. 801 00:55:26,070 --> 00:55:29,489 Este pues pongo yo que sé, de ejemplo el de 5 mililitros. 802 00:55:29,489 --> 00:55:37,869 ¿Vale? Haciendo todo eso, pues venga, vamos a calcular las concentraciones que tenemos de cada una 803 00:55:37,869 --> 00:55:46,389 ¿Vale? Entonces, aquí voy a poner concentración de cafeína, concentración de ácido acetilsalicílico 804 00:55:46,389 --> 00:55:52,630 señal de cafeína y señal del ácido acetilsalicílico, ¿vale? Para tenerlo en cuenta 805 00:55:52,630 --> 00:55:55,670 La concentración de la cafeína en el primero sería cero 806 00:55:55,670 --> 00:56:08,300 y la concentración de ácido acetil salicílico 807 00:56:08,300 --> 00:56:10,340 pues en vez de ser 5 gramos por litro 808 00:56:10,340 --> 00:56:11,820 sería en todos igual 809 00:56:11,820 --> 00:56:13,000 y tendríamos que hacer 810 00:56:13,000 --> 00:56:17,239 140 ppm por 10 mililitros 811 00:56:17,239 --> 00:56:19,679 es igual a X por 50 812 00:56:19,679 --> 00:56:22,099 pues 28 en todos 813 00:56:22,099 --> 00:56:27,579 y luego tendríamos ya las señales 814 00:56:27,579 --> 00:56:29,960 las señales 815 00:56:29,960 --> 00:56:31,719 ahí no tenemos que operar de momento 816 00:56:31,719 --> 00:56:33,739 tenemos las que son 817 00:56:33,739 --> 00:57:07,630 aquí también sería 28 818 00:57:07,630 --> 00:57:08,849 que no le he puesto 819 00:57:08,849 --> 00:57:11,489 y ahora el siguiente paso 820 00:57:11,489 --> 00:57:13,050 sería hacer la recta de calibrado 821 00:57:13,050 --> 00:57:14,909 para hacer la recta de calibrado 822 00:57:14,909 --> 00:57:17,610 en el patrón interno nosotros no representamos 823 00:57:17,610 --> 00:57:19,110 concentración frente a señal 824 00:57:19,110 --> 00:57:21,369 sino que hacemos la concentración del analito 825 00:57:21,369 --> 00:57:24,789 entre la concentración del patrón 826 00:57:24,789 --> 00:57:27,130 frente a la señal analito 827 00:57:27,130 --> 00:57:29,010 y señal de patrón 828 00:57:29,010 --> 00:57:30,710 es decir, relación de señales 829 00:57:30,710 --> 00:57:32,449 y relación de concentraciones 830 00:57:32,449 --> 00:57:35,110 como tenemos diferentes unidades 831 00:57:35,110 --> 00:57:37,190 tenemos que ponerlo todo en las mismas 832 00:57:37,190 --> 00:57:38,329 o todo en gramo litro 833 00:57:38,329 --> 00:57:40,710 o todo en partes por millón 834 00:57:40,710 --> 00:57:42,489 lo que queráis 835 00:57:42,489 --> 00:57:45,489 María José, partes por millón 836 00:57:45,489 --> 00:57:46,909 que es miligramo litro 837 00:57:46,909 --> 00:57:48,570 si, a ver, si 838 00:57:48,570 --> 00:57:50,750 si haces peso-volumen, normalmente 839 00:57:50,750 --> 00:57:57,090 miligramos al litro. Es con las que solemos trabajar nosotros. Entonces tenemos que hacer 840 00:57:57,090 --> 00:58:05,010 un cuadro de concentración entre concentración y aquí la señal de la cafeína entre la 841 00:58:05,010 --> 00:58:09,550 señal del ácido acetil salicílico. Pues si queréis en gramos al litro todo. En gramos 842 00:58:09,550 --> 00:58:14,829 al litro, vale. Entonces tendríamos que dividir entre 0,28. Todas las concentraciones tendrían 843 00:58:14,829 --> 00:58:16,369 que divididas entre 0,28 844 00:58:16,369 --> 00:58:24,510 y luego las señales dividir una entre la otra 845 00:58:24,510 --> 00:58:31,190 la muestra 846 00:58:31,190 --> 00:58:33,570 que no la he puesto yo, pues sería la muestra 847 00:58:33,570 --> 00:58:35,429 entre 0,028 848 00:58:35,429 --> 00:58:37,550 y luego la relación de señales 849 00:58:37,550 --> 00:58:39,610 si podemos irla haciendo, aunque no la pongamos 850 00:58:39,610 --> 00:58:41,530 en la recta de calibrado 851 00:58:41,530 --> 00:58:42,949 si podemos irla haciendo 852 00:58:42,949 --> 00:58:44,829 y sale 2,20 853 00:58:44,829 --> 00:58:49,309 Vale, y ahora esto es lo que utilizo yo 854 00:58:49,309 --> 00:58:50,889 Para la recta de calibrado 855 00:58:50,889 --> 00:58:53,530 O sea, yo ya lo otro me olvido de ello 856 00:58:53,530 --> 00:58:55,190 Y yo para la recta de calibrado 857 00:58:55,190 --> 00:58:56,449 Utilizo estos datos 858 00:58:56,449 --> 00:59:01,090 Entonces al hacer la recta de calibrado 859 00:59:01,090 --> 00:59:04,070 Ahora me decís si sale diferente 860 00:59:04,070 --> 00:59:07,309 Tendríamos que 861 00:59:07,309 --> 00:59:09,409 Es igual a 862 00:59:09,409 --> 00:59:12,110 0,35 863 00:59:12,110 --> 00:59:15,289 3, 5, 3 864 00:59:15,289 --> 00:59:27,829 más 0,2697X 865 00:59:27,829 --> 00:59:32,840 Vale, acordaros que nosotros hemos representado 866 00:59:32,840 --> 00:59:36,480 concentración de analito entre concentración del patrón 867 00:59:36,480 --> 00:59:39,639 y señal de analito, señal del patrón 868 00:59:39,639 --> 00:59:42,820 La Y, pues la sustituyo, esta Y 869 00:59:42,820 --> 00:59:45,579 va a ser el 2,20 de este 870 00:59:45,579 --> 00:59:47,559 entonces quedaría 2,20 871 00:59:47,559 --> 00:59:50,159 menos 0,353 872 00:59:50,159 --> 00:59:51,639 entre 873 00:59:51,639 --> 00:59:53,760 0,2697 874 00:59:55,360 --> 00:59:56,179 y eso sería 875 00:59:56,179 --> 00:59:56,940 igual a X 876 00:59:56,940 --> 00:59:59,559 y queda una X de 6,84 877 00:59:59,559 --> 01:00:04,809 tenía que haber salido 878 01:00:04,809 --> 01:00:06,510 un poquito más alta, porque 2,20 879 01:00:06,510 --> 01:00:08,610 si os fijáis, esta 2,20 880 01:00:08,610 --> 01:00:10,309 estaría entre estos dos 881 01:00:10,309 --> 01:00:12,570 entonces habría salido un poquito más alta 882 01:00:12,570 --> 01:00:14,130 del 7, pero 883 01:00:14,130 --> 01:00:20,349 pero bueno, puede ser por la recta 884 01:00:20,349 --> 01:00:21,389 tampoco es que se desvíe mucho 885 01:00:21,389 --> 01:00:23,489 y por los decimales, por supuesto 886 01:00:23,489 --> 01:00:27,500 vale, ahora 887 01:00:27,500 --> 01:00:29,699 empezamos a quitar esa X 888 01:00:29,699 --> 01:00:30,340 ¿qué es? 889 01:00:30,719 --> 01:00:32,519 pues antes de empezar a quitar diluciones 890 01:00:32,519 --> 01:00:33,539 me vengo aquí 891 01:00:33,539 --> 01:00:36,820 y digo la X que he representado yo 892 01:00:36,820 --> 01:00:39,139 es la concentración del analito 893 01:00:39,139 --> 01:00:40,699 entre la concentración del patrón 894 01:00:40,699 --> 01:00:43,039 pues yo voy a calcular la concentración analito 895 01:00:43,039 --> 01:00:44,159 que es lo que a mí me interesa 896 01:00:44,159 --> 01:00:45,519 sé que 897 01:00:45,519 --> 01:00:51,480 X es igual a concentración de analito entre concentración del patrón. 898 01:00:52,460 --> 01:00:57,519 Sé que la concentración del patrón era 0,028 y sé que X es 6,84. 899 01:00:58,119 --> 01:01:01,000 Por lo tanto, la concentración analito, que es lo que a mí me interesa, 900 01:01:01,519 --> 01:01:04,780 será lo que me haya salido de la X por la concentración patrón. 901 01:01:04,780 --> 01:01:17,980 La concentración analito será el 6,84 S que ha salido, 6,84, 6,85 por la concentración del patrón que era 0,028. 902 01:01:18,579 --> 01:01:29,960 Por lo tanto la concentración de analito sale 0,192 gramos litro. 903 01:01:29,960 --> 01:01:44,480 Y esa concentración analito es la del matraz que hemos analizado nosotros, que tenía los 10 mililitros de café más los 10 mililitros del ácido acetil salicílico más el rasado a 50. 904 01:01:44,900 --> 01:01:56,980 Entonces, la concentración de cafeína en el café sería igual al 0,192 por la dilución que hayamos hecho nosotros, que en nuestro caso era 50 entre 10. 905 01:01:56,980 --> 01:02:10,880 Entonces la concentración de cafeína en el café, en la muestra de café de verdad, sería igual a 0,959 gramos litro. 906 01:02:13,789 --> 01:02:23,690 ¿Vale? Porque acordaros que nosotros teníamos la muestra de café, de un vaso de café, que teníamos aquí, y habíamos trasvasado aquí 10 mililitros. 907 01:02:23,690 --> 01:02:32,849 en el ejercicio me dice que cuánto es la concentración de una taza de café de 65.000 litros 908 01:02:32,849 --> 01:02:40,630 es esta, yo hacer la dilución me vengo aquí y yo esos 65.000 litros no los he utilizado para nada 909 01:02:40,630 --> 01:02:45,849 si yo hablo de concentración, la misma concentración de cafeína va a tener un sorbo que dé 910 01:02:45,849 --> 01:02:52,489 que una cafetera entera que una taza, la concentración me sirve para el volumen que yo necesite 911 01:02:52,489 --> 01:02:57,690 otra cosa es que me dijera cuántos miligramos de cafeína hay en la taza que tú te tomas 912 01:02:57,690 --> 01:03:00,730 y ahí se tendría que tener en cuenta los 65 mililitros 913 01:03:00,730 --> 01:03:05,570 pero aquí no, aquí ya la concentración es 0,959 914 01:03:05,570 --> 01:03:11,829 sea en un vaso, que en una cafetera, que en un barril de 6 litros, que en una piscina de 3.000 915 01:03:11,829 --> 01:03:16,190 no tengo que tener en cuenta porque yo esos 65 mililitros 916 01:03:16,190 --> 01:03:19,210 que era esta taza de café que a mí me estaban preguntando 917 01:03:19,210 --> 01:03:21,989 yo esta no la he tenido en cuenta para nada 918 01:03:21,989 --> 01:03:24,489 estos 65 mililitros, he cogido 10 de aquí 919 01:03:24,489 --> 01:03:26,570 y lo he trasvasado al matraz 920 01:03:26,570 --> 01:03:28,230 entonces es lo que me interesa 921 01:03:28,230 --> 01:03:31,289 vale, pues ya está 922 01:03:31,289 --> 01:03:33,250 ya no había tenido más ejercicios