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Resumen paso a paso de cómo congelar células en cultivo
A continuación, vamos a ver los pasos que tenemos que seguir para congelar las células.
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Lo primero que tenemos que hacer es comprobar el estado de las células antes de congelarlas.
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Recordamos que es ideal tener una viabilidad superior al 85%.
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podemos ver la viabilidad del microscopio
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si las células por ejemplo parecen muy vacualizadas
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si está contaminado por supuesto
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por bacterias lo podemos ver si el medio está turbio
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y también al microscopio
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en definitiva chequear que hay un estado correcto y óptimo
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para poder congelar
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luego también tenemos que realizar un lavado previo con BSS
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sin calcio y sin magnesio
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hay que recordarlo también
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quitar el medio gastado y hacer un lavado después realizaremos la tripsinización pondremos la
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tripsina que nos indique el protocolo 0.05 015 o la que sea en la dilución que nos indiquen hay
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que añadir tripsina o también podemos raspar las células directamente según las células con las
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que estemos trabajando es muy importante aquí vigilar el tiempo de tripsinización y que no
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sea demasiado porque eso va a influir directamente en la viabilidad celular después realizaríamos el
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contaje lo suspenderíamos en un pequeño volumen contamos las células vivas en una cámara de
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neubauer con trip and blue por último procederíamos ya a la congelación utilizaríamos un criotubo y
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congelaríamos a menos 80 en un mister frost y hay que recordar que la solución
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de congelación llevaba dimetilsulfóxido para evitar que las membranas se dañen
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por la congelación del agua por la formación de cristales y también un alto
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porcentaje de suero bovino fetal a continuación vamos a ver cómo
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realizaríamos paso a paso este protocolo
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- Esther P.
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- 12 de mayo de 2024 - 23:49
- Visibilidad:
- Clave
- Centro:
- IES BENJAMIN RUA
- Duración:
- 03′ 05″
- Relación de aspecto:
- 1.78:1
- Resolución:
- 1280x720 píxeles
- Tamaño:
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