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Proteínas tóxicas
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La alumna Irene Rubio hace su presentación sobre su proyecto de excelencia del curso 2019/2020 del IES Margarita Salas de Majadahonda
Hola, soy Elena Ruyo-Madrid y hoy os voy a presentar mi proyecto titulado Proteínas Tóxicas y Estudio y Caracterización de las Psicoalicinas 2 y 2.
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Un título que creo que no les importa, que no les aporta más información, pero es un título que hay en la tradición de las anémonas y los tratamientos contra el cáncer.
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Bueno, para responder a esta pregunta, voy a empezar mi proyecto de esta manera.
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Estoy segura de que alguien de aquí cuando me da la raya le ha picado una medusa.
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De hecho, las picaduras de medusas y otros vidarios, como pueden ser las anémonas, constituyen el 40% de las incidencias totales que ocurren en las plantas.
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Y estas picaduras tienen un gran impacto en nuestra salud, en nuestra economía y en el medio ambiente marino.
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Por ello, se decidió llevar a cabo estudios sobre los venenos de estos vidarios y se descubrió que estos poseían sustancias bioactivas muy interesantes,
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además de que los venenos tenían propiedades como antifrematorias o antitumorales.
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A raíz de estos estudios, los objetivos que se estudian en este proyecto son los siguientes.
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Estudiar uno de los componentes de esos venenos, concretamente el veneno de una nebona,
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que es una fenocorina llamada esticolisina 2.
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Además, también se quiere estudiar su mutante y caracterizarlo, la esticolisina 2, T42D.
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Y por último, comparar la estructura y la funcionalidad de ambas.
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Así, las hipótesis que se plantean en este proyecto son que la esticolisina mutante
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es igual, tiene las mismas características estructurales y monoflóficas que la salvaje,
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que además tiene la misma función y que es igual de eficaz a la hora de realizar dicha
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función tóxica. Antes de hablar de las arginomónicas y las
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asticolisinas hay que hablar del animal que las secreta, que son las anémonas. Las anémonas
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pertenecen al filo unidaria, al igual que las medusas o los corrales, por ejemplo, y
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son unos pólipos que vienen siempre fijos al sustrato. Tienen un cuerpo cilíndrico
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compuesto por un disco heredero de la base, un disco oral y que está regado por unos centáculos.
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En los centáculos se encuentran la mayor parte de los miocitos.
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¿Y qué son estos miocitos?
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Pues como recordarán, las anémonas son inmóviles, por lo tanto no pueden correr detrás de sus presas
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o esconderse cuando son atacadas.
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Por ello, recurren a la producción de venenos.
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Estos se almacenan en las células exclusivas del filo nidaya que se llaman miocitos.
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Concretamente se almacenan en los compartimentos llamados nematocitos.
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Los nematocistos contienen un tubo embriagado que termina en la bufa.
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Y cuando un animal roza los tentáculos de la nebuna, este tubo se dispara e inyecta el veneno, tal y como vemos en este vídeo.
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El veneno es un conjunto de muchas sustancias en las que destacan las proteínas tóxicas,
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como pueden ser las endotoxinas calizantes o las proteínas monodas de poros,
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que son las actinoporinas y las que se estudian en este proyecto.
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Las actinoporinas son un tipo de fitolisinas, es decir, que elizan las células a través de la formación de poros
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en las membranas empíricas, las que son secretadas por anemonas marinas y se caracterizan
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por ser láminas infectíricas cortas que carecen de cisterinas en toda su psicología
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de aminoácidos. Además, poseen un comportamiento particular en el interfase agua-membrana,
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ya que en su origen acuosa permanecen establemente plegadas, como una proteína cualquiera, pero
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cuando se encuentran en una membrana celular, interaccionan con esta de una manera muy peculiar.
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Todas las actinoporinas tienen una estructura muy similar, es decir, una conformación tridimensional,
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que es esta que se muestra en esta imagen y que consiste en un sándwich beta central
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y una helice alfa a cada lado, una que se muestra en rojo y otra que se muestra en azul.
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El rojo es la helice alfa del extremo en el terminal, que está formada por los 30 primeros residuos de la proteína,
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que tienen carácter antipático, es decir, una parte hidrófoba y otra parte hidrófoba.
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Esto es muy importante a la hora de la funcionalidad de la proteína, y de hecho se ha demostrado que cualquier cambio realizado en esos 30 primeros residuos podría afectar gravemente a su capacidad de formación del polvo.
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En azul son los residuos del sitio neumatoxorhitorina, conocido como COC, que también son antipáticos, y además la gelina 51 ha demostrado que tiene un papel muy fundamental en el reconocimiento de las ventanas.
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En amarillo se muestran los aminoácidos que componen la ocupación de residuos aromáticos,
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que tienen un papel fundamental en la unión de la actinoporina con el aminoácido.
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En verde se muestran los aminoácidos que pertenecen tanto a la diversidad de unión
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a la actinoporina como a la ocupación de aminoácidos básicos.
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Y por último, en naranja, la ocupación de aminoácidos básicos, que es muy importante
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en la primera parte de la formación del podo.
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Cabe resaltar que cualquier cambio realizado en la estructura de las actinoporinas puede
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afecta gravemente a su sutilidad y, por lo tanto, a su funcionalidad tóxica.
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¿Y cómo forman los poros las actinoporinas en las células? Bueno, cuando una actinoporina
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se encuentra con una membrana clínica, la hélice alfa del estímulo terminal, que se
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representa en rojo, se separa del sándwich beta, que es el cuadrado azul, y se apoya
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en forma planera en la membrana. Después, la hélice alfa se inserta, se penetra en
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la membrana y, casi al mismo tiempo, oligomeriza. Es decir, que varias actinoporinas se juntan
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y formar en foro la membrana lipídica, provocando la muerte de la célula por un cheque osmótico.
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La memora Sticholidactyla y Lantus secreta tres espicolisinas diferentes, de las cuales
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en este proyecto se estudia la espicolisina 2 y su mutante.
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Para el estudio de estas dos artiloporinas y poder compararlas, se han llevado a cabo
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tres técnicas, una para saber su estructura, otra para saber su masa molecular, y otra
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para hacer su actividad hemonítica, y estos han sido los materiales que se han necesitado
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para cada una de esas técnicas. La síntesis de las dos espiconesinas se acumula en una
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producción heteróloga en bacterias E. coli, que son de secuencia de nucleótidos que se
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introducen en la bacteria, y que codifica para formar la siguiente secuencia de aminoácidos.
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En la botante se cambia la treolina del lugar 42 por una cisterina, siendo esta la única
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que hay en toda la secuencia de aminoácidos, y a eso se debe el nombre de espiconesina
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2D42B. La primera técnica que se llevó a cabo fue el microdismo circular, que se basa
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en la acción tan específica que tienen las proteínas con la luz y que nos permite saber
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su estructura, es decir, su conformación y su acción. Concretamente, la región espectral
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de la ultravioleta lejana nos da información sobre la estructura secundaria, es decir,
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cómo se pliega esa secuencia de aminoácidos, y en la región espectral de la ultravioleta
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próxima obtenemos información sobre la estructura terciaria, es decir, su conformación tridimensional.
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La siguiente técnica que se realizó fue la electroforesis,
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completamente una técnica que se denomina como SPS-PACE,
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que separa proteínas diluidas sometidas a un campo eléctrico en función de su masa molecular.
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Por lo tanto, las proteínas de menos tamaño se desplazarán a mayor velocidad por el eje.
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Esta es una escena de la pública electroforesis donde se llevó a cabo el ensayo.
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La última técnica que se realizó fue la hemolysis,
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que consiste en determinar la actividad
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hemolítica de las proteínas
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a través de algo igual
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de velocidad por la que destruyen
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los glóbulos rojos, el sangre de cáncer
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o distintas concentraciones nanomolales.
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Los resultados
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que se obtuvieron al realizar dichas técnicas
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fueron los siguientes.
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Respecto al diploísmo circular, concretamente
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el diploísmo circular en lejano, que como recordarán
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nos aporta información sobre la estructura secundaria,
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esa teoría de las gráficas
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tanto de la mutante como de la salvaje
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son muy similares, lo que significa que tienen la misma estructura secundaria. Además, en
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esta imagen, que es el patrón de las 60 estructuras secundarias de las proteínas, se puede determinar
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que se correspondería a una estructura secundaria tipo lámina beta debido a la forma, y por
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lo tanto, esta correspondería con el salmónis beta central que poseen todas las actinoporinas.
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Respecto al diploide, un titular en el próximo y la gráfica se aprecia que los mutantes de la sala de tienen las mismas subidas y bajadas
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Lo que significa que ambas tienen la misma estructura terciaria y que por lo tanto el cambio realizado en la mutante no ha afectado a la misma
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Aquí se muestra los resultados de la rectoforesis, se aprecia que la salvaje y la mutante tienen la misma movilidad rectoforesica, es decir que están al mismo nivel
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Y por lo tanto que tienen la misma masa molecular
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Por último, esta es la gráfica con nuestros resultados de hemolysis, la de los puntos
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blancos es la importante y se ve claramente que es mucho más eficaz a la hora de formar
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los poros en las células que la más salvaje. Esto se debería a la cisteína que se introduce
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en su secuencia de aminoácidos, ya que esta contiene un grupo tiol, que es un grupo polar
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y por lo tanto podría ser mejor a la hora de interaccionar con las membranas y por lo
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tanto a la hora de formar los poros. Esto supondría una ventaja de la mutante respecto
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a la salvaje, pero además habría otra, y es que solo tiene una cisteína en toda su
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cadena. Entonces, cuando se lleven a cabo estudios de cómo interacciona esa cisteína
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polina con la membrana, y además sus futuras aplicaciones, se podría hacer un seguimiento
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mucho más fácil, ya que se localizaría con mayor rapidez esa proteína.
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la próxima. Las conclusiones que se pueden obtener con
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estos resultados son las siguientes. Por una parte, se ha podido estudiar la crinobolina
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estipolisina 2 y su mutante. Se ha podido caracterizar el mutante y se ha podido comparar
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la estructura y la función de ambas. Así, se verifican las hipótesis que se planteaban
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al principio que consistían en que la estipolisina salvaje y la mutante coincidían tanto en
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la estructura secundaria como en la terciaria, que poseían la misma masa molecular y que
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tenía la misma función, siendo incluso la mutante más eficaz a la hora de realizar
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dicha función tóxica.
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¿Y para qué se quiere estudiar las actinoporinas? ¿Cuál es la importancia de este proyecto?
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Bueno, pues las aplicaciones de las actinoporinas se pueden dividir en dos áreas. Por una parte
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el estudio de sus venenos nos podrían ayudar a crear antídotos que reducirán los efectos
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de las picaduras de los midarios, como en este caso con tratamiento de las anémonas,
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y además de las barreras químicas que impedirán el contacto de los nematocistos con nuestra piel.
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En segundo lugar, las artinoporinas, en las modificaciones necesarias, podrían ser unas potentes herramientas bioterminológicas y biomédicas.
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Así, debido a su alta especificidad, podrían servir para combatir plagas mediante el uso de venenos naturales.
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Además, la artinoporina, colocada en una sonda fluorescente, podría ser una sonda molecular que detectara la simiodelina de las barreras vulnares
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y por lo tanto las bases benéficas de estos. Además podría facilitar la acción de medicamentos
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como puede ser la quimioterapia convencional, ya que aumenta la permeabilidad de la membrana
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y por lo tanto la absorción de estos tratamientos. Y por último, y lo que responde a la pregunta
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que yo planteé inicialmente, que es la relación entre las anemonas y los tratamientos contra
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el cáncer, es que se podría aprovechar el potencial inmunotóxico de las actinoporinas
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para desarrollar nuevas inmunoterapias. Así, respecto a los tratamientos oncológicos que
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tenemos actualmente, que eliminan todas las células de nuestro cuerpo, esa inmunotoxina
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estaría formada por un anticuerpo que localizaría expresamente la célula que se quiere eliminar
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y una toxina, que en este caso sería la pinopolina, que mataría esa célula, se podrían crear
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tratamientos que matasen específicamente las células tumorales. De hecho, ya se han
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llevado a cabo estudios que demuestran la potencia que tienen las actinoporinas en células
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cancerígenas. Bueno, esta ha sido la biografía que se ha realizado durante el proyecto. Y
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bueno, por último quiero agradecer a Esperanza Rivera de Torre por haberme sumergido en el
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mundo de las actinoporinas en la medicina, al Departamento de Bioquímica de la Universidad
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de Cundinamarca para haberme permitido hacer uso de sus instalaciones, a mis tutoras por
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su dedicación durante todo el año y por último a mis padres por su apoyo.
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- Fecha:
- 1 de febrero de 2020 - 20:25
- Visibilidad:
- Público
- Centro:
- IES MARGARITA SALAS
- Duración:
- 11′ 59″
- Relación de aspecto:
- 4:3 Hasta 2009 fue el estándar utilizado en la televisión PAL; muchas pantallas de ordenador y televisores usan este estándar, erróneamente llamado cuadrado, cuando en la realidad es rectangular o wide.
- Resolución:
- 640x480 píxeles
- Tamaño:
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