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Subido el 1 de noviembre de 2009 por Francisco J. M.

683 visualizaciones

El descubrimiento de la Reacción en Cadena de la Polimerasa

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¿Qué es lo que se descubre? 00:00:00
Se descubre 00:00:02
una estructura 00:00:03
que podemos asignar a una cremallera, 00:00:05
a una cremallera retorcida. 00:00:07
En la parte importante, 00:00:09
los eslabones son distintos, 00:00:11
no todos los eslabones son iguales. 00:00:13
En unos eslabones se emparejan 00:00:14
una serie de compuestos químicos 00:00:16
que denominamos A y T 00:00:18
y en otros, 00:00:19
gente de valerina, 00:00:20
guarina y citosina. 00:00:22
Este tratamiento es relevante 00:00:23
porque cuando se emparejan A y T 00:00:24
se forman dos enlaces. 00:00:28
cando se emparejan G e C 00:00:30
se forman tres enlaces 00:00:32
es decir, esta cremallera 00:00:34
é máis difícil de abrir 00:00:36
cuanto máis G e C 00:00:38
tiene, porque hai máis enlaces 00:00:41
é máis fuerte, a cremallera está 00:00:43
mellor cerrada 00:00:44
e como abro yo a cremallera? 00:00:45
isto lo chamamos, como desnaturalizo 00:00:48
la doble hélice de ADN 00:00:50
como? calentando 00:00:52
por encima de unha tira de temperatura 00:00:54
la cremallera se abre 00:00:57
y aparecen las dosis que se marquen 00:00:59
cuanto mayor es el contenido 00:01:01
en G y C 00:01:03
mayor es la temperatura 00:01:04
a la cual tengo que desnaturalizar 00:01:07
a la cual se abre 00:01:09
¿a dónde nos lleva esto? 00:01:10
nos lleva que simplemente 00:01:12
por la secuencia, por el orden en el que aparecen 00:01:13
estas bases 00:01:18
estos componentes 00:01:19
y la cantidad de ellos que hay 00:01:21
solo por eso 00:01:24
ya puedo fijar la especificidad 00:01:25
Porque este apareamiento 00:01:28
É especifico 00:01:30
E a separación 00:01:32
Tiene lugar só a unha temperatura determinada 00:01:33
Entendéis isto? 00:01:37
Logo, já he logrado a especificidade 00:01:38
Simplemente diciendo a temperatura 00:01:40
Adecuada 00:01:42
Vamos a ver agora como podemos 00:01:43
Resolver o problema de sensibilidade 00:01:45
Vamos a utilizar a pizarra 00:01:47
Se eu tenho 00:01:50
Unha doble idea 00:01:52
E a hiervo 00:01:53
por encima de la agua 00:01:58
por encima de la temperatura 00:02:00
la polaca líquida 00:02:01
se separan dos hebras 00:02:02
se abre la cremallera 00:02:05
como he calentado 00:02:07
se separan todas 00:02:08
ya yo añado 00:02:12
que yo lo sintetizo 00:02:14
unos trocitos 00:02:15
que son complementarios 00:02:17
de este trozo 00:02:21
de tal manera que a una temperatura concreta 00:02:22
determinamos su composición 00:02:25
a especificidade 00:02:28
só a esa temperatura 00:02:29
ou esto 00:02:30
Estos trocitos 00:02:33
que eu he añadido 00:02:39
e que eu sei 00:02:40
quais son 00:02:40
e que por tanto 00:02:41
sea que temperatura 00:02:42
ou esto 00:02:42
se emparejan 00:02:43
Entendéis isto? 00:02:44
Agora eu dou 00:02:47
encima 00:02:47
que copia DNA 00:02:48
Como tenéis 00:02:49
aquí 00:02:52
e a próxima 00:02:52
E espero 00:02:52
que a cabo de un cierto tempo 00:02:53
o que teño é 00:02:55
en vez de unha hebra 00:02:56
tres 00:02:58
dos 00:03:00
Y ahí queda la original 00:03:00
En vez de esto 00:03:02
¿Entendéis en qué consiste? 00:03:03
Porque es fundamental el tema 00:03:05
¿Entendéis esto? 00:03:06
Esto se llama aplicación 00:03:07
Esto lo hacen las células 00:03:08
Esto lo hacen las células 00:03:09
Pero nosotros estamos en un tubo 00:03:11
Solo tenemos el ADN 00:03:12
Que han extraído los amigos de ratio 00:03:14
Los trocitos que nosotros hemos hecho químicamente 00:03:16
Y la enzima que le añadimos 00:03:19
No el bueno 00:03:21
Y hay que echar claro los monómeros 00:03:21
Los monómeros 00:03:23
Si habéis entendido esto 00:03:24
Entonces entenderéis 00:03:28
que se eu repito este proceso 00:03:29
unha serie de veces 00:03:31
estou amplificando geométricamente 00:03:32
a molécula original 00:03:35
de tal maneira 00:03:38
que se eu repito isto treinta veces 00:03:39
só treinta veces 00:03:41
onde teñía unha molécula 00:03:44
acabo teñendo máis de un millón de moléculas 00:03:47
já he amplificado a señal 00:03:50
e además son todas idénticas a la primera 00:03:53
Sin perder especificidad 00:03:57
Tremenda sensibilidad 00:03:59
¿Se ve? 00:04:01
Tiene un problema esto 00:04:04
Que es que cada vez que hiervo 00:04:05
Cada vez que caliento 00:04:07
La enzima se estropea 00:04:09
Enzimas en términos generales 00:04:11
Las proteínas 00:04:13
Se estropean al calentar 00:04:14
Por eso guardamos la comida en la nevera 00:04:16
Y otras cosas 00:04:18
No solo por eso 00:04:18
¿De acuerdo? 00:04:20
¿Qué haría una persona inteligente? 00:04:26
Diría, bueno 00:04:28
Se non quero estar alli 00:04:28
Añadindo enzima 00:04:31
Despois de cada vez que hiervo 00:04:32
O cual me lleva tempo e me cuesta moito dinero 00:04:34
Vamos a buscar unha enzima 00:04:36
Que non se estropea al calentar 00:04:38
Donde busco unha enzima 00:04:40
Que non se estropea al calentar? 00:04:43
Pois buscando un bicho 00:04:45
Que crezca a unha temperatura 00:04:46
Proxima aos 100 grados 00:04:49
Se o bicho vive a 100 grados 00:04:51
Pois pode ir a 100 grados 00:04:52
A pregunta é 00:04:54
Donde hai bicho que vive a 100 grados? 00:04:56
Un volcán 00:04:58
Un volcán é bastante male de grado 00:05:00
Pero se o volcán é onde? 00:05:03
O volcán é habitado 00:05:05
Se o volcán é un marino 00:05:05
Aí se tenemos agua líquida de grado 00:05:07
He visto que 00:05:08
Non sei se seguimos 00:05:10
Nosotros para terminar más 00:05:11
Nos han dado unha copa de calita blanca 00:05:12
É que he visto que a gente no ha presentado 00:05:14
Donde as placas tectónicas 00:05:16
Se separan ou se juntan 00:05:19
Aí sale o magma directamente 00:05:21
E sube moito a temperatura 00:05:23
Pero fijaos que 00:05:24
Esta é unha idea estupenda 00:05:26
E de hecho se ha hecho 00:05:27
Años despúes se ha hecho 00:05:28
Se han sacado de ahí bactérias 00:05:29
Pero non é fácil bucear 00:05:31
Entre 6 y 10 kilómetros de profundidade 00:05:33
Non é moi sencillo 00:05:36
Donde encuentro yo 00:05:37
A mesma situación en superficie? 00:05:40
En un país 00:05:43
Si señor, perfecto 00:05:44
Parece que hubiese leído el pensamiento 00:05:46
E máis concretamente 00:05:48
En el parque de hielos 00:05:50
Donde viví que no soy yo 00:05:55
Estas charcas tan bonitas 00:05:56
Por los colores que tienen 00:06:00
Resulta que los colores corresponden 00:06:01
Cada color corresponde 00:06:03
A unha temperatura 00:06:05
A la cual vive un bicho distinto 00:06:06
E é das más calientes 00:06:08
Donde máis calor hace 00:06:11
Porque é algo hirviendo 00:06:12
É espectacular isto dos gésicos 00:06:13
Han aislado unha bacteria 00:06:16
Que se chama termófilos aquáticos 00:06:18
De la cual han sacado unha proteína como esta 00:06:19
Unha enzima que non se estropea a dormir 00:06:22
E como consecuencia 00:06:24
Este procedimiento 00:06:27
Está automatizado 00:06:30
É barato 00:06:32
E non cuesta 00:06:33
Nenun trabajo hacerlo 00:06:35
É algo trivial 00:06:36
O señor que inventou isto 00:06:37
Que se ha dado o chamado 00:06:40
A reacción en cálida da polimerasa 00:06:41
A PCR 00:06:43
Tambén recibió o premio Nobel de Química 00:06:44
En 1993 00:06:48
E aquí le veis conmigo 00:06:49
Estos anecdóticos me gustaron 00:06:51
ponelo para presumir, 00:06:52
tomando unhas cervezas 00:06:54
en la cervecería de Santa Bárbara. 00:06:55
Aunque, mirándome, 00:06:58
tal vez ya no lo debería poner 00:07:00
porque se ve que pasan muchos años. 00:07:01
Bueno. 00:07:06
Ahora. 00:07:09
Esto ayuda. 00:07:12
Porque se estoy llevando a idea 00:07:13
de que lo que vamos a hacer es 00:07:15
coger un ADN y comparar, 00:07:16
amplificarlo, ¿no? 00:07:18
Amplificar otro ADN y comparar. 00:07:20
Y decir, ah, el que es igual, vale 00:07:21
Pero hay una trampa 00:07:24
Porque todos tenemos 00:07:26
O sea, en el ADN, ¿qué hay? 00:07:28
¿Qué es lo que hay en el ADN? 00:07:31
Y esa información, ¿cómo la llamamos? 00:07:34
Genes 00:07:37
Todos tenemos los mismos genes 00:07:37
Es decir, es imposible 00:07:40
Distinguir una persona de otra 00:07:43
Comparando los genes 00:07:44
Si uno es capaz de leer el gen completo 00:07:46
Tal vez, así, digamos 00:07:49
con unha prueba sencilla, rápida e automática 00:07:50
é imposible, todos tenemos 00:07:52
os mesmos genes, todos 00:07:54
é unha das cousas que ha quedado clara 00:07:56
tras a secuenciación do genoma humano 00:07:58
o truco está en que a maioria 00:08:00
do ADN, en contra do que a gente ve 00:08:02
como a gente ve vosotros, a maior porcentaje 00:08:04
do ADN non son genes 00:08:06
é unha DNA que non se sabe a que vale 00:08:08
hasta hace ben pouco, llevados 00:08:09
o desafán que tiene o ser humano, especialmente o que non conoce 00:08:12
se llamaba incluso ADN basura 00:08:14
en ese ADN basura 00:08:15
este seno se dió cuenta 00:08:18
que aparecen trocitos 00:08:19
que se repiten. 00:08:21
Es que ellos son 00:08:24
los de secuencia que se repiten. 00:08:25
Y la gracia está en que no se repiten 00:08:27
el mismo número de veces 00:08:29
en distintos individuos. 00:08:30
Es decir, si yo aplico esta filosofía 00:08:33
a los trocitos que se repiten 00:08:35
tres, cinco, ocho veces 00:08:38
y amplifico desde aquí, desde aquí, 00:08:39
porque esta secuencia es igual en todos los individuos, 00:08:42
la secuencia no es más que igual. 00:08:44
La secuencia no apunta. 00:08:45
Solo la secuencia azul aparece más veces. 00:08:46
Se eu aplico, que óptimo 00:08:48
Como é? Pero é de distinto tamén 00:08:50
Entendéis isto? 00:08:52
E non me fico nos genes, me fico no cosítico 00:08:55
E é moi fácil 00:08:56
Vai 00:09:00
É moi fácil separar 00:09:01
O tratamento de ADN e do tamaño 00:09:05
Porque o ADN é ácido 00:09:06
E é só se recuple 00:09:08
Ácido quere dir que é negativo 00:09:10
Se eu aplico un papel, onde é o negativo? 00:09:12
Se é negativo 00:09:15
É positivo 00:09:16
Pois, como veis aquí 00:09:17
Os acilucleicos se mueven hacia positivo 00:09:20
E os que son máis pequeños, como é máis estrella, se mueven máis lisa 00:09:22
E al final nos obtenemos un patrón 00:09:24
De distribución 00:09:26
De tamaños 00:09:28
Cada carril seria un mismo 00:09:30
Que isto si é significativo 00:09:32
De cada individuo 00:09:35
Que me vale para comparar unos con outros 00:09:36
É significativo porque me fijo 00:09:38
Solo en unha de estas que fijo muchas 00:09:40
Para que a combinación de todas 00:09:42
Me dé un patrón significativo 00:09:44
cando isto se hace bien 00:09:46
e chegamos ao principio outra vez 00:09:48
tenemos unha especificidade tal 00:09:51
que poderíamos distinguir un individuo 00:09:54
entre tres billones 00:09:56
tenendo en cuenta que a población mundial 00:09:57
son seis mil, seis mil 00:10:00
quinientos billones 00:10:02
sólo puede ceros, es mil veces menor 00:10:03
podría distinguir a un individuo 00:10:06
entre todos los que pueblan la tierra 00:10:10
con esta pregunta 00:10:12
teóricamente 00:10:12
claro, llevaría un pouco de tempo 00:10:15
hacer 6.500 pruebas 00:10:16
6.500 nieves de pruebas 00:10:18
pero podría 00:10:19
y en cuanto a la sensibilidad 00:10:20
como dice aquí 00:10:23
en 5 horas 00:10:24
y a partir de la mancha 00:10:25
de una mancha de sangre 00:10:27
del tamaño de la cabeza 00:10:28
de un alfiler 00:10:29
o de un velo 00:10:30
o de un abrigo 00:10:31
de un ave piel 00:10:32
podría terminar también 00:10:33
esta locura 00:10:36
aquí va a tener que ir toda la partida 00:10:37
que además cuesta solo 40 euros 00:10:38
todo lo que pasa 00:10:40
dime 00:10:42
que entonces según eso 00:10:42
también hay una posibilidad 00:10:43
de que alguien tenga 00:10:44
el amén repetido 00:10:45
con otra persona? 00:10:46
Digamos que si se hace bien, 00:10:48
no. 00:10:49
Sólo si los géneros 00:10:50
son los géneros idénticos, 00:10:51
sí. 00:10:54
¿De acuerdo? 00:10:55
Si no, 00:10:55
es prácticamente inédito. 00:10:56
¿De acuerdo? 00:10:58
Esto tiene matices, 00:11:03
pero no con igualidad. 00:11:05
Pero básicamente, 00:11:06
no. 00:11:07
Si se hace bien, 00:11:08
no. 00:11:08
¿Vale? 00:11:09
Entonces, 00:11:12
¿cuál es el resultado 00:11:13
que vamos a tener 00:11:13
y ya acabamos 00:11:14
con el experimento 00:11:15
e nos vamos ás aplicaciones. 00:11:16
Pois unha cosa é esta. 00:11:18
Esta é a mancha de sangue 00:11:19
ou, en general, 00:11:22
a mancha de sangue 00:11:22
impugnada en la escena del crimen 00:11:23
e estes son os cuatro suspirosos 00:11:24
da escatola vítima. 00:11:26
¿Quién sería el malo? 00:11:28
¿Quién sería el culpable? 00:11:29
Yo, efectivamente. 00:11:30
A cosa é un pouco máis complicada 00:11:32
porque isto é simplemente 00:11:33
unha idealización 00:11:34
do que obtengo 00:11:35
porque tengo que hacer esto. 00:11:36
Pero gracias ao señor Bill Gates 00:11:38
e aos informáticos, 00:11:40
hoy temos de escáneres 00:11:41
e de sistemas informáticos, 00:11:43
de software, 00:11:44
de programas, 00:11:45
que analizan isto de forma automática. 00:11:46
Non hai que facelo a ojo. 00:11:48
O programa o fa de maneira rápida, automática e segura. 00:11:50
Valoración:
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Idioma/s:
es
Autor/es:
Edición: IES Alpajés
Subido por:
Francisco J. M.
Licencia:
Reconocimiento - No comercial - Sin obra derivada
Visualizaciones:
683
Fecha:
1 de noviembre de 2009 - 17:48
Visibilidad:
Público
Enlace Relacionado:
Biología molecular
Centro:
IES ALPAJÉS
Duración:
11′ 55″
Relación de aspecto:
4:3 Hasta 2009 fue el estándar utilizado en la televisión PAL; muchas pantallas de ordenador y televisores usan este estándar, erróneamente llamado cuadrado, cuando en la realidad es rectangular o wide.
Resolución:
384x288 píxeles
Tamaño:
87.27 MBytes

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