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Tutoria_4abril - Contenido educativo

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Subido el 10 de abril de 2024 por María Jose De L.

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Bueno, pues vamos a empezar ahora un tema que habla también de la espectroscopía, pero en este caso se basa en la espectroscopía atómica. 00:00:00
Si recordamos los diferentes saltos a las diferentes transiciones que se podían dar, vemos que la parte de espectroscopía ultravioleta o espectroscopía visible, el salto era a nivel electrónico. 00:00:09
Veíamos una transición electrónica, pasábamos de un estado fundamental a un estado excitado. 00:00:20
En la espectroscopía infrarroja, en cambio, no teníamos una energía suficiente como para dar esta transición electrónica y se daba una transición vibracional. 00:00:26
Y en la espectroscopía microondas pasaba lo mismo. 00:00:35
La cantidad de energía que está relacionada con las ondas microondas es muy pequeña, por eso solamente pueden darse transiciones vibracionales. 00:00:38
Volvemos ahora a la espectroscopía de absorción o espectroscopía de emisión atómica. 00:00:46
En este caso, como veis, aquí en el amarillo y en el rosa, vemos que son saltos grandes, son transiciones electrónicas de nuevo. 00:00:51
Por lo tanto, para todo esto necesitamos mucha energía. 00:00:58
Pasa lo mismo que en espectroscopía ultravioleta visible. 00:01:01
por lo tanto podríamos decir que las técnicas de absorción y emisión atómica 00:01:04
se basan en la absorción de la radiación o en la generación de la misma 00:01:10
depende de cual sea, por parte de los átomos que están presentes en un material 00:01:15
que es sometido a una serie de procesos consecutivos de disolución, nebulización, ruptura de enlaces 00:01:19
y con esto se van a obtener átomos que están en un estado fundamental 00:01:27
y la excitación de estos átomos 00:01:31
Para ello se utilizan rayos X, en este caso la excitación es de los electrones más cercanos al núcleo, los que no participan en los enlaces, 00:01:33
y el espectro ultravioleta o el espectro visible, en la que hay una conversión del analito a partículas monatómicas en fase gaseosa. 00:01:42
Volvemos al espectro electromagnético, este ya lo tenéis que conocer casi de memoria. 00:01:50
Y vamos a ver dónde están ubicados los rayos X y la radiación ultravioleta o la radiación visible. 00:01:56
Como hemos dicho necesitamos una gran cantidad de energía, una gran cantidad de energía suele estar hacia la derecha del espectro electromagnético y una gran cantidad de energía va con una longitud de onda pequeña, volvemos a estar hacia la derecha del espectro electromagnético y nos vamos a centrar ya en los dos rangos del espectro que hemos dicho que serían los rayos X y la radiación ultravioleta. 00:02:01
La visilio también está incluida en la parte de absorción o emisión atómica, aunque un poco menos. Normalmente es rayos X o radiación ultravioleta. 00:02:25
Una de las fases fundamentales de la espectroscopía atómica o una de las características fundamentales es la atomización. 00:02:36
Es decir, nosotros necesitamos que la muestra con la que estamos trabajando esté en forma de átomos. 00:02:43
Si no la tenemos, tendremos que pasarla. Por eso hay una fase de atomización que es fundamental en la parte de espectroscopía atómica. 00:02:48
Desde la atomización es la conversión de los componentes de una molécula en átomos gaseosos libres. 00:02:58
Estos átomos van a absorber aquellas radiaciones cuyas energías coinciden exactamente con las de sus transiciones electrónicas. 00:03:04
Acordaros que ahí donde tenemos la parte del análisis cualitativo, 00:03:12
que la energía que nosotros hacemos incidir va a coincidir con la necesaria para dar la transición. 00:03:15
Y las transiciones que más se van a producir y a detectar son las que corresponden a la excitación del átomo 00:03:21
desde un estado fundamental a uno de sus estados excitados. 00:03:27
En un espectro estas transiciones dan lugar a las denominadas líneas de resonancia. 00:03:30
Lo que antes veníamos en el barrido como una banda ancha o en la parte de espectroscopía infrarroja, 00:03:35
pues veíamos los picos que bajaban y suelen ser anchos, aquí se ven líneas de resonancia. 00:03:41
Estas líneas espectrales corresponden a las transiciones de un estado fundamental a un estado excitado. 00:03:46
Es cierto que también se pueden dar de un estado excitado a otro excitado, 00:03:52
pero generalmente son tan débiles que no se detectan. 00:03:56
Entonces el espectro que nosotros obtenemos, tanto en absorción como en emisión atómica, 00:04:00
se caracteriza por ser líneas discretas que aparecen a una longitud de onda determinada para cada elemento. 00:04:05
pudiendo realizar análisis cualitativo y análisis cuantitativo. 00:04:11
En la imagen que veis aquí, aunque se trata de un espectro de un análisis de espectroscopía atómica, 00:04:15
sí es verdad que son bastante anchas las bandas. 00:04:21
Normalmente se ven líneas más finas, se ve una línea, no se ve la anchura del pico. 00:04:23
Aunque si lo comparamos con la espectroscopía visible, con la espectroscopía ultravioleta, 00:04:29
pues sí vemos que son mucho más estrechas. 00:04:33
Una vez que ya sabemos cómo va encaminada la espectroscopía de absorción o emisión atómica, 00:04:36
pues vamos a ver qué es lo que necesitamos, cuál es la instrumentación que necesitamos en los equipos. 00:04:42
Si nosotros estamos aplicando una radiación ultravioleta o una radiación visible, 00:04:48
podríamos decir que utilizamos el mismo equipo que en espectroscopía ultravioleta o espectroscopía visible, 00:04:52
ya que la bombilla que utilizamos es la misma. 00:04:58
Y hay algunas cosas que por aquí podéis reconocer. 00:05:00
la fuente de radiación, aquí digo la bombilla, o la fuente de luz que tenemos, el atomizador 00:05:03
sí que es nuevo, pero el monocromador ya lo hemos visto en otras técnicas, el detector 00:05:08
también, y luego el registrador o el que transforma los datos también lo hemos visto, 00:05:12
entonces ahí nuevo tendríamos el atomizador. Entonces podríamos decir, utilizo un equipo 00:05:17
de espectroscopía ultravioleta y le incluyo un atomizador o pongo la muestra ya en forma 00:05:23
de átomos y me sirve lo mismo, pero vamos a ver algunas cosillas que son diferentes 00:05:28
que nos hacen que el equipo sea un poco más especial. 00:05:33
Lo primero sería la fuente de radiación. 00:05:37
Los medios clásicos disponibles para generar estas radiaciones 00:05:40
son lámparas donde la energía es suministrada por una corriente eléctrica de radiofrecuencia. 00:05:43
Después surgieron las lámparas multielementales. 00:05:49
La calidad de la fuente es uno de los elementos más importantes 00:05:54
para obtener la mejor linealidad, sensibilidad y precisión en espectroscopía de absorción 00:05:57
atómica. Las lámparas de cátodo hueco son el medio más utilizado como fuente de radiación 00:06:02
en espectroscopía de absorción atómica debido a su estabilidad, al rápido calentamiento, 00:06:08
a la sencilla fabricación, a su vida útil y a su precio. Estas lámparas están constituidas 00:06:13
por un anodo, que generalmente es un hilo de Wolframio, y un cátodo que está situado 00:06:20
en el eje óptico del sistema. Tiene forma de cilindro hueco y está fabricado del elemento 00:06:26
a analizar. Es decir, si yo quiero analizar cobre, necesito que este elemento sea de cobre. 00:06:31
Si necesito analizar calcio, tiene que ser de calcio. Tanto el ánodo como el cátodo 00:06:37
se sitúan en el interior de un vidrio en el que hay un gas noble a una presión inferior 00:06:41
a unos 10 milímetros de mercurio. Hay otro tipo de lámparas que son las lámparas de 00:06:46
descargarse en el estrógeno. En este caso sería también un tubo de cuarzo que está 00:06:51
cerrado herméticamente y está recubierto por una carcasa metálica. Esta tiene en su 00:06:56
interior un gas inerte, normalmente suele ser el argón, a unos pocos torr de presión. 00:07:01
También hay sílice y una pequeña cantidad de lananito, bien en su forma metálica o 00:07:07
como una sal. Entonces la energía la obtiene a través de un campo intenso de radiofrecuencias 00:07:12
o de microondas. De este modo el gas inerte se ioniza y los iones se aceleran por el componente 00:07:18
de alta frecuencia hasta adquirir suficiente energía como para excitar los átomos del 00:07:24
analito, que al relajarse emitirán la radiación electromagnética a las longitudes de onda 00:07:29
características del elemento en cuestión. Estas lámparas se utilizan normalmente para 00:07:34
aquellos elementos que por ser muy volátiles no permiten disponer de una lámpara de cátodo 00:07:39
hueco. Lo bueno que tienen las lámparas de descarga sin electrodo, las ventajas, la sensibilidad 00:07:44
que ofrecen, que es mejor que las lámparas de cátodo hueco, siempre comparando para 00:07:48
el mismo elemento y también la vida útil, que suele ser mayor. Ahora, lo malo, pues 00:07:52
la estabilidad. El calentamiento es lento, las líneas de emisión que se obtienen son 00:07:57
más anchas y también necesitamos una fuente de radiofrecuencia, lo que aumenta el presupuesto 00:08:02
de mantenimiento. El siguiente punto sería el sistema de atomización, que esto es lo 00:08:07
nuevo. Las fuentes de radiación habéis visto que no son exactamente iguales, pero sigue 00:08:12
siendo una fuente de radiación. Y aquí tendríamos ahora la forma en la que nosotros vamos a 00:08:16
atomizar. ¿Cómo vamos a llegar a que la muestra se convierta en un átomo? El sistema 00:08:22
de atomización normalmente se compone de una cámara de nebulización y de un quemador. 00:08:26
¿Y qué va a pasar aquí? Bueno, pues nosotros normalmente vamos a partir de muestras en 00:08:32
disolución. Esta muestra va a ser aspirada a través de un capilar y va a ser conducida 00:08:35
al nebulizador. La aspiración se va a conseguir haciendo pasar un chorro de alta presión 00:08:40
formado por uno o varios gases de combustión por el extremo del tubo capilar que está 00:08:46
dentro de la muestra. Para ello es necesario trabajar en las mismas condiciones de velocidad 00:08:51
y de aspiración tanto en los patrones como en la muestra como en el blanco para no incluir 00:08:56
ningún tipo de fluctuación o ningún tipo de interferencia. Una vez que está en el 00:09:01
nebulizador la muestra impacta sobre un cuerpo sólido de geometría y diseño adecuados 00:09:05
que se llama esfera de impacto. 00:09:10
Así, la muestra se convierte en una fina niebla formada por pequeñas gotitas de disolución. 00:09:13
El nebulizador tiene además un conducto adicional donde llegan el resto de gases de combustión que sean necesarios, 00:09:19
mezclándose con la niebla formada. 00:09:25
También hay una línea conectada a la cámara de nebulización, que sería la vía de drenaje, 00:09:28
cuya finalidad es desechar las gotas que por su mayor tamaño condensan en la esfera de impacto. 00:09:33
Estas gotas pequeñitas formadas son arrastradas por el flujo de gases de combustión 00:09:42
y pasan al quemador o al mechero donde tienen lugar una serie de etapas. 00:09:47
La primera sería la desolvatación. 00:09:51
Aquí el disolvente es vaporizado produciéndose un aerosol molecular sólido finamente dividido. 00:09:53
Luego tendríamos la vaporización. 00:09:59
Aquí las moléculas pasan a estado líquido y luego al gaseoso. 00:10:01
Después de la vaporización, la disociación, donde las moléculas se disocian formando un gas atómico. 00:10:05
Y si nos pasamos de temperatura o pasamos a la siguiente fase sería la ionización. 00:10:11
Aquí en vez de conseguir átomos estamos consiguiendo iones, donde la energía que necesitamos para pasar al átomo o al ión es diferente. 00:10:17
Por lo tanto tenemos que evitar esta ionización. 00:10:27
Lo que se debe conseguir es pasar de la disociación a la llama. 00:10:29
El mechero de flujo laminar es donde se va a formar la llama y su diseño proporciona una llama estable, homogénea, simétrica y vertical, 00:10:34
que es muy importante para obtener las medidas reproducibles, es decir, para evitar las fluctuaciones del equipo, todo eso que veíamos en el patrón interno. 00:10:43
A continuación pasaría al quemador. 00:10:49
Aunque estamos intentando que sea reproducible, tenemos que tener en cuenta que la temperatura de la llama no es constante en todos sus puntos 00:10:52
Y que la altura óptima de la llama también tenemos que tenerla en cuenta para la parte esta de la temperatura. 00:10:58
Ese sería un tipo de sistema de atomización. 00:11:08
Aquí veis más o menos cuál sería el flujo que sigue tanto la muestra como la llama y todo el proceso. 00:11:11
Aquí se ve mejor la parte que veíamos de que tenemos la muestra en disolución. 00:11:20
Aquí pasaría el nebulizador por el tubo o por la aspiración. 00:11:24
Y aquí veis las pequeñas gotitas, las minigotitas estas que decimos. 00:11:27
No se ve la parte de la esfera de impacto, pero estaría por aquí. 00:11:31
Aquí tenemos la parte del drenaje que hemos dicho para las gotas que sean más grandes 00:11:35
y aquí tendríamos los gases que se incluyen. 00:11:38
Una vez que pasa por el nebulizador, ya pasaría al quemador, al mechero de flujo laminar, al quemador. 00:11:41
Aquí más o menos veis, un poquito más grande, aunque sea esquemático, veis cómo pasaría. 00:11:48
una vez que pasa por el quemador 00:11:54
¿vale? que tendríamos por aquí 00:11:56
la muestra pasaría por una ranura que hay en el quemador 00:11:58
y quedaría aquí en suspensión 00:12:01
¿vale? y con la llama pues es la parte esa 00:12:03
que pasamos a los átomos 00:12:05
que tenemos que evitar que pase a la ionización 00:12:06
y la fuente de luz 00:12:09
pasaría por aquí, atravesaría 00:12:10
esta niebla de átomos que tenemos 00:12:12
y pasaría luego al detector 00:12:14
¿vale? esta parte de esquema la tendríamos aquí 00:12:16
¿vale? o aquí, bueno también 00:12:19
la tenéis de forma esquemática 00:12:20
la muestra llega por aquí, entonces la muestra estaría, la forma atómica estaría por aquí 00:12:22
y la luz atraviesa, pasa por el monocromador y todo eso y luego llega al detector. 00:12:27
El otro tipo de sistema de atomización se llama atomización electrotérmica. 00:12:32
Generalmente los atomizadores son tubos cilíndricos de grafito 00:12:37
conectados con una fuente de alimentación eléctrica. 00:12:41
Normalmente se les llama cámaras de grafito 00:12:44
porque están formados por un pequeño tubo hueco de grafito 00:12:46
como un orificio por el que se introduce la muestra en disolución o en suspensión 00:12:51
mediante una micropipeta o un inyector automático. 00:12:55
La radiación que procede de la lámpara lo atraviesa a lo largo de su eje longitudinal, 00:13:00
es decir, se hace pasar una corriente eléctrica elevada a bajo voltaje. 00:13:05
Como el grafito es mal conductor, al aplicar la corriente se calienta el tubo 00:13:10
hasta alcanzar una temperatura suficiente para tonizar la muestra. 00:13:14
Se mantiene un flujo de gas inerte por el exterior del tubo de grafito 00:13:17
que evita su oxidación a alta temperatura y por el interior del tubo, también para 00:13:20
eliminar los componentes de la muestra volatilizados y que pueden interferir en la medida. 00:13:25
También va a pasar por una serie de etapas, igual que la lámpara de cátodo huevo. 00:13:31
Primero tendríamos un secado. En esta fase se mantiene una temperatura de 100 o 150 grados, 00:13:35
100 grados más o menos, para conseguir la evaporación del disolvente, igual que la 00:13:41
de salvatación en el caso anterior. El calentamiento es progresivo para evitar las proyecciones 00:13:45
de la muestra dentro del tubo y aquí la muestra queda en forma de residuo sólido. La siguiente 00:13:51
fase sería la mineralización. Lo que se pretende con la mineralización es eliminar 00:13:56
la mayor cantidad posible de interferentes de la matriz, pero sin perder el analito o 00:14:02
sin tener ningún tipo de pérdida. La muestra, que ya estaba seca, se va a calentar gradualmente 00:14:07
a una temperatura o hasta alcanzar una temperatura de unos 400 o 1000 grados centígrados. Esto 00:14:12
lo hace en unos 30 o 45 segundos para eliminar toda la materia orgánica y descomponer la 00:14:17
matriz inorgánica hasta transformarla en un compuesto simple. La temperatura de esta 00:14:23
etapa no puede superar la temperatura de volatilización del compuesto. Y la última 00:14:27
fase sería la atomización. Aquí alcanzamos temperaturas muy elevadas, de unos 2000 o 00:14:33
3.000 grados centígrados y también en muy poquito tiempo. Aquí mucho menos que en el caso anterior, 00:14:38
aquí tenemos que llevar a esta temperatura en unos 5 ó 8 segundos para poder atomizar la muestra. 00:14:44
Este calentamiento tiene que ser lo más rápido posible para poder asegurar la formación eficiente 00:14:50
y concentrada del vapor atómico, susceptible de absorber o emitir radiación característica 00:14:54
originando señales que requieren un sistema electrónico de respuesta rápida, ya que debe 00:15:00
ser capaz de seguir el proceso transitorio de atomización. He dicho última etapa, que 00:15:05
sería la última etapa que está relacionada con la muestra, con la fase de atomización 00:15:10
de la muestra, aunque nos queda una parte de limpieza. Aquí la cámara de grafito, 00:15:14
pues también para poder limpiarla vamos a someter a altas temperaturas superiores a 00:15:18
las de la etapa de atomización con el fin de arrastrar todos los residuos formados y 00:15:22
así evitar la contaminación cruzada o el efecto de memoria. Las ventajas e inconvenientes 00:15:26
que tiene la cámara de grafito respecto a la fotometría de llama o a la espectroscopía 00:15:31
de llama? Bueno, pues lo primero es que en la cámara de grafito podemos controlar las 00:15:36
etapas. También conseguimos que la atomización de la muestra sea completa. Evitamos la dilución 00:15:41
del vapor atómico, también tenemos un tiempo de residencia alto, una elevada sensibilidad, 00:15:47
unos límites de detección más bajos, el consumo de la muestra es mucho menor, pero 00:15:53
el inconveniente sería la reproducibilidad. Una vez que la fuente de radiación ha atravesado 00:15:59
la muestra, pasaría al monocromador. El monocromador va a estar formado por los componentes habituales. 00:16:05
Tenemos una rendija de entrada de radiación policromática, el sistema óptico que va 00:16:11
a eliminar la radiación no paralela y canaliza la radiación de interés, un elemento dispersor 00:16:15
de la radiación que separa la radiación incidente según sus longitudes de onda, puede 00:16:20
ser un prisma o un dispersor de red, un sistema óptico de enfoque y la rendija de salida 00:16:25
de la radiación monocromática. El principal objetivo del monocromador es proporcionar 00:16:30
una anchura de banda lo suficientemente estrecha como para permitir separar la línea escogida 00:16:35
para la medición de otras líneas capaces de interferir o disminuir la sensibilidad 00:16:40
del análisis. La anchura de la rendija, pues con lo que se intenta, o la anchura de las 00:16:45
rendijas van a determinar la fracción del espectro que incide en el detector. Entonces 00:16:52
la rendija deberá ser lo más estrecha posible para poder reducir la cantidad de radiación 00:16:56
emitida por la llama que llega al detector. El monocromador, como siempre, en filtro, 00:17:01
va a intentar pasar de luz policromática a luz monocromática. Y luego ya iría al 00:17:06
detector. Los detectores van a medir la intensidad de la radiación antes y después de la absorción 00:17:11
por la muestra. A partir de los valores obtenidos se calcula la radiación absorbida. Normalmente 00:17:16
el detector que más se utiliza en espectroscopía de absorción atómica 00:17:22
es el fototubo multiplicador, ya que no hay otro sistema que ofrezca 00:17:26
la misma sensibilidad y que el trabajar con un margen de longitud 00:17:30
de onda es determinado. 00:17:34
Ahora, una vez que ya sabemos cómo funciona el equipo, vamos a ver 00:17:37
qué podemos analizar o qué tipo de información podemos obtener. 00:17:40
Si nosotros vemos la muestra con la que tenemos que trabajar, 00:17:44
es importante que trabajemos con una muestra que sea líquida. 00:17:47
Si tenemos muestras que sean sólidas, tenemos que hacer una disolución. 00:17:50
La información que vamos a obtener va a ser tanto información cualitativa como información cuantitativa. 00:17:54
Es decir, podemos determinar presencia de un determinado analito en la muestra y podemos cuantificar su concentración. 00:17:59
Además también la sensibilidad y la exactitud que obtenemos son muy elevadas. 00:18:06
Pero tenemos que tener en cuenta que las señales observadas en espectroscopía de la absorción atómica suelen verse afectadas con frecuencia. 00:18:13
pero no pasa nada porque ya hemos visto varias metodologías de calibración que nos ayudan a eliminar estos interferentes. 00:18:19
La espectroscopía de absorción va a permitir el análisis cualitativo, aunque no es su principal objetivo. 00:18:27
Ya hemos dicho que sí podemos obtener información cualitativa. 00:18:33
¿Qué puede pasar? Nosotros podemos tener una muestra en el laboratorio que no sabemos qué es. 00:18:36
podemos caracterizarla 00:18:42
a simple vista, pues aquí 00:18:44
podemos ver que es un sólido blanco 00:18:46
que está en peles, en escamas 00:18:48
tenemos que ir diciendo cuáles son las características 00:18:50
de la muestra, por eso es importante 00:18:52
que siempre que hagáis un análisis 00:18:54
que identifiquéis todo lo que os llame 00:18:56
la atención a la muestra, todo lo que creáis 00:18:58
que pueda influir en el resultado final 00:19:00
o que algo que os llame la atención 00:19:02
tenéis que anotarlo, porque al día de hoy hay que trabajar con muchas 00:19:04
muestras y es muy complicado 00:19:06
acordarse de todas ellas, todas sus características 00:19:08
y pequeños detalles que puedan tener. 00:19:10
Toda la información que podamos tener de la muestra la vamos anotando. 00:19:13
Aquí, un sonido blanco, así como está en la foto, 00:19:16
no podemos ver si está compactado, si es hidroscópico o si no. 00:19:21
Parece que son pequeñas láminas y ya está. 00:19:25
Si nosotros cogemos parte de esta muestra y la ponemos en el mechero, 00:19:31
podemos ver con el asa de siembra, con un hilo, 00:19:36
podemos ver cómo cambia la llama del mechero. 00:19:39
Aquí, por ejemplo, si vemos un color que es naranjilla, 00:19:42
los bordes están un poco más oscuros, más rojizos. 00:19:46
Así, a simple vista, ahora mismo no nos dice nada. 00:19:49
Pero si nosotros tenemos una tabla o tenemos una base de datos 00:19:53
en la que sabemos cuál es el color que tiene cada uno, 00:19:57
pues podríamos identificar cuál es. 00:20:01
Pues el litio es muy rojo para ser litio, pues no podría ser litio. 00:20:03
El potasio, pues el potasio es más blanco, lila, todo eso no tiene nada que ver. 00:20:06
El cobre es verdoso, no tiene nada que ver, pues nos tendríamos que quedar, pues mira, puede ser sodio, puede ser calcio, 00:20:11
por la pinta que tiene, pues el sodio parece que es más rojizo. 00:20:18
Entonces podemos hacer un análisis cualitativo y determinar qué tipo de muestra es. 00:20:21
Para la cuantificación del elemento, en cambio, pues tendríamos que hacer una recta de calibrado, 00:20:26
Tendríamos que hacer una disolución y mediante una elaboración previa de patrones conseguiríamos la recta de calibrado. 00:20:32
La espectroscopía de absorción atómica es una técnica que solo necesita poner la muestra en una disolución 00:20:39
y realizar las medidas en las condiciones estándar de trabajo. 00:20:46
Pero para disoluciones orgánicas es importante evaluar el importante disolvente en la llama, 00:20:50
por lo menos en la parte de espectroscopía de absorción atómica. 00:20:56
Respecto a la calidad, hay que garantizar cierta precisión y exactitud mediante la verificación de la recta de calibrado, bien por duplicados o por el material de referencia. 00:20:59
La disolución madre y todo eso tenemos que hacerla con un material que sepamos cuáles son las condiciones. Un patrón primario, un material que esté certificado, un material que esté valorado. 00:21:08
en algunos casos debido a las condiciones de los elementos a determinar 00:21:20
es necesario utilizar algún procedimiento especial de trabajo 00:21:24
para obtener un correcto análisis. 00:21:28
Es lo que decíamos, que las muestras pueden llegar al laboratorio 00:21:30
en cualquiera de sus estados, sólido, líquido o gaseoso 00:21:32
y poco a poco debido al avance de las técnicas instrumentales 00:21:35
y a los diferentes sistemas que tenemos de toma y tratamiento de datos 00:21:40
pues la etapa final del análisis es relativamente sencilla 00:21:43
en la mayor parte de los casos, ya que se realiza una disolución 00:21:48
en la que se han estudiado las diferentes interferencias. 00:21:52
Entonces parece que es un análisis sencillo, que no tiene mucho, 00:21:55
como cualquiera de laboratorio que vimos en la espectroscopía visible 00:21:58
en las que estáis viendo las prácticas. 00:22:02
Ahora, si podemos encontrar algún tipo de dificultad, 00:22:04
y esto puede ser por la complejidad o las diferencias en su composición, 00:22:07
o la precisión requerida, el tiempo necesario o disponible, 00:22:11
el número de muestras, siendo el mayor tiempo destinado a la preparación de las muestras. 00:22:16
Luego, lo que es la parte del análisis tarda muy poco, lo que pasa es que la preparación 00:22:20
de los patrones o la preparación de las muestras sí nos puede llevar a que se alargue el tiempo 00:22:24
del análisis. Normalmente, si se requieren una serie de operaciones o de tratamientos 00:22:30
previos, que es la parte que va a ser más problemática respecto a otras muestras que 00:22:36
hemos analizado? Pues bien, porque necesitamos una filtración, una trituración, tamizado, 00:22:43
homogenizado, secado. No son fases o no son operaciones que sean muy complicadas, pero 00:22:48
sí nos van a alargar el tiempo de determinación, el tiempo del análisis. Como he dicho anteriormente, 00:22:54
en la mayor parte de los casos vamos a necesitar que la muestra sea una disolución, que la 00:23:00
muestra sea líquida. Entonces, si tenemos una muestra sólida, hacemos una disolución, 00:23:05
pero la forma de hacer esta disolución es diferente 00:23:10
si estamos con una muestra que es orgánica o una muestra que es inorgánica 00:23:13
y hay que tener en cuenta los reactivos que hemos utilizado para disolver la muestra 00:23:17
que en muchas ocasiones pueden originar algún tipo de interferencia 00:23:21
o incluso tener el contener al propio analito 00:23:25
una de las impurezas de los disolventes con los que estamos trabajando 00:23:30
puede ser el analito 00:23:33
entonces tenemos que tenerlo en cuenta y tenemos que tener cuidado 00:23:34
cuando se trata de sustancias orgánicas 00:23:37
puede llevarse a cabo una mineralización con la posterior disolución del residuo en ácidos minerales 00:23:39
o la disolución en disolventes orgánicos. 00:23:45
También hemos hablado de las condiciones de trabajo, hemos dicho si condiciones estándar o que si se dificulta más o menos. 00:23:48
Entonces para el análisis de una muestra tendremos que fijar unas condiciones específicas del elemento que vamos a analizar. 00:23:54
En muchos casos van a venir determinadas por el propio fabricante. 00:24:00
Pero un ejemplo para un análisis de espectroscopía de absorción atómica, pues podría ser, lo primero es seleccionar el tipo de llama. 00:24:04
Tenemos que seleccionar el oxidante y el combustible que se va a emplear, así como el porcentaje de cada uno de ellos, para obtener una llama diferente, en función de lo que queramos hacer. 00:24:12
También tenemos que ver cuál es la región de observación en la llama, es decir, vamos a regular la altura del quemador. 00:24:22
La velocidad de aspiración de la disolución, pues en el flujo suele ser entre 1 y 4 mililitros al minuto 00:24:28
El paso de banda espectral del monocromador, de la rendija que hemos estado hablando antes 00:24:34
La intensidad de corriente de la lámpara del cátodo hueco, si utilizamos esa lámpara 00:24:39
O los parámetros del sistema de detección y de lectura 00:24:43
Y también tenemos que tener en cuenta las condiciones de seguridad 00:24:46
Estamos en el laboratorio y aparte de todo lo anterior que hemos visto en otras ocasiones 00:24:51
pues la técnica de espectroscopía de absorción atómica en llama es necesario tener en cuenta 00:24:56
la seguridad ya que por el calor o los vapores y los humos generados por la llama 00:25:01
van a ser peligrosos para nosotros, para los analistas. 00:25:06
Por lo que estos humos tienen que ser extraídos del instrumento por un sistema adecuado de extracción de gases. 00:25:10
Es decir, necesitamos una campana de extracción. 00:25:16
No como la campana que tenemos en el laboratorio sino que encima del equipo 00:25:18
Aquí tenéis en el dibujo una campana de extracción. 00:25:22
Los gases con los que vamos a trabajar, los gases comprimidos que se utilizan en la técnica, también es otra fuente de riesgo. 00:25:30
Los gases deben ser almacenados y manipulados de una estricta conformidad con las regulaciones y los códigos de seguridad. 00:25:36
Y respecto al quemador de premezcla hay que considerar la posibilidad de un flashback. 00:25:44
Eso es respecto a la espectroscopía de absorción atómica. 00:25:51
Ahora vamos a ver la espectroscopía de emisión atómica. 00:25:54
Aquí se trata de una técnica espectroscópica que analiza las longitudes de onda de los fotones emitidos por los átomos o moléculas 00:25:56
durante su transición desde un estado excitado a un estado de inferior energía. 00:26:04
¿Qué tenemos que tener en cuenta? 00:26:10
Pues que cada elemento elimite un conjunto característico de longitudes de onda discretas en función de su estructura electrónica. 00:26:11
Mediante la observación de esas longitudes de onda puede determinarse la composición elemental de la muestra. 00:26:19
En espectroscopía de emisión atómica se van a utilizar el espectro visible, el espectro ultravioleta y los rayos X, como pasaba en la sorción atómica. 00:26:24
Hay muchas formas en las que los átomos pueden ser llevados a un estado excitado. 00:26:33
El método más simple es calentar la muestra a una temperatura alta, produjiéndose las excitaciones debido a las colisiones que hay entre los átomos de la muestra. 00:26:38
Cuando la fuente de excitación cesa, el átomo se relaja emitiendo el correspondiente fotón. 00:26:47
Cada elemento químico tiene su propia distribución de niveles energéticos específicos. 00:26:53
Por ejemplo, el litio y el hidrógeno tienen diferentes niveles energéticos, además de 00:26:58
diferente separación, por lo que emitirán fotones de diferente energía. 00:27:03
Esta especificidad es utilizada por la espectroscopía atómica y por la fluorescencia, que ya la 00:27:07
hemos visto, para identificar los elementos químicos. 00:27:12
Cuando tenemos un conjunto de átomos de un elemento químico y lo irradiamos con radiación policromática, 00:27:16
cada átomo puede absorber un fotón de energía concreta y excitarse hasta otro nivel. 00:27:22
Es decir, unos átomos se excitarán hasta un nivel y otros hasta otros niveles. 00:27:28
Cuando los átomos se relajen, emitirán los fotones que absorbieron, 00:27:34
por lo que habrá fotones emitidos de varias energías. 00:27:38
Algunos de ellos serán visibles, vemos colores, como el olor de la llama que hemos visto antes. 00:27:41
Los fotones emitidos se pueden imprimir en una película fotográfica o medir la intensidad y obtener el espectro gráfico, lo que hacemos en el laboratorio. 00:27:48
La espectroscopía de emisión es una técnica espectroscópica que en este caso investiga la longitud de onda del fotón cuando es emitido por átomos durante la transición del estado excitado a un estado de menor energía. 00:27:56
Todas las técnicas espectroscópicas al final tienen algo en común, 00:28:09
que quieren analizar una radiación electromagnética en una muestra y observar cómo responde a tal estímulo. 00:28:12
¿Qué información podemos obtener de la espectroscopía de emisión atómica? 00:28:20
Pues el nivel de luz emitida va a ser proporcional al número de átomos de este componente 00:28:23
y la longitud de onda de la línea espectral en el espectro de emisión va a dar la identidad de este componente. 00:28:28
es decir, obtenemos información cualitativa e información cuantitativa. 00:28:34
Los espectros atómicos son bastante fáciles de interpretar, 00:28:39
ya que en teoría cada elemento existente da una o varias líneas o picos, 00:28:43
seguimos con las líneas de resonancia. 00:28:48
Hasta aquí parece muy fácil, pero lógicamente luego se complica un poco en el laboratorio 00:28:51
y no es tan sencillo, ya que surgen una serie de complicaciones, 00:28:56
como la aparición de un fondo continuo o bandas debidas a una atomización insuficiente. 00:28:59
Vamos a centrarnos primero en la parte de procedimiento y luego ya veremos las interferencias que puede haber en la parte de instrumentación. 00:29:05
En espectroscopía de emisión atómica necesitamos una muestra que esté excitada. 00:29:13
¿Y cómo podemos excitar la muestra? 00:29:18
Pues hay varios procedimientos que pueden excitarla. 00:29:20
Para obtener un espectro atómico, como en el caso anterior, lo primero que hay que hacer es atomizar la muestra. 00:29:23
es decir, disociar sus moléculas en sus átomos y después se excita. 00:29:29
Primero se disuelve la muestra, si no la tenemos en estado líquido, 00:29:34
y la disolución se convierte en una niebla de diminutas gotas cuyas moléculas son atomizadas 00:29:38
y los átomos que se forman van a ser excitados. 00:29:44
Instrumentación. 00:29:49
Vamos a ver qué podemos reconocer parecido a otras técnicas espectroscópicas o incluso parecido a lo de antes. 00:29:51
Tenemos un sistema de atomización y excitación. 00:29:58
Esto ya lo teníamos antes, ¿vale? 00:30:02
La parte de atomización. 00:30:04
Lo que nos falta es la fuente de radiación, que nosotros no lo tenemos. 00:30:05
Sistema de atomización más excitación, se desprende radiación electromagnética, 00:30:11
pasa por un selector de longitud de onda, es decir, el monocromador, 00:30:17
llega a un detector y bueno, si es necesario, se amplifica la señal, 00:30:21
se registra, se trata, toda esta parte del registro de datos en función del equipo que 00:30:25
tengamos puede variar un poco. Pero lo que llama la atención es que no tenemos fuente 00:30:30
de radiación, es decir, es el primer equipo en el que no tenemos fuente de radiación, 00:30:35
el primer equipo de la parte de espectroscopía. ¿Por qué? Bueno, como vemos aquí, nosotros 00:30:39
para conseguir tener el átomo excetado no vamos a utilizar la radiación electromagnética. 00:30:46
Generalmente la atomización se hace calentando la muestra mediante una llama, un plasma, una corriente eléctrica, un arco eléctrico o por otros procedimientos 00:30:52
Si la muestra es gaseosa, se introduce directamente en el atomizador 00:31:02
Si está en disolución, se convierte en un aerosol mediante un nebulizador 00:31:07
Los sólidos se disuelven previamente, aunque algunos pueden vaporizarse directamente mediante electricidad o láser 00:31:13
Es verdad que ciertos metales en disolución se pueden volatilizar, obteniendo químicamente sus hidruros volátiles. 00:31:21
Al relajarse, los átomos emiten radiación en muchas direcciones, de muchas longitudes de onda, que llegan a un monocromador, 00:31:28
donde se seleccionan los fotones de una longitud de onda determinada que llegan al detector para poder obtener el espectro. 00:31:37
La atomización se hace generalmente calentando la muestra mediante una llama, un plasma, una corriente eléctrica o un arco eléctrico, 00:31:43
o por otros procedimientos. 00:31:51
Si la muestra es gaseosa, se introduce directamente en el atomizador. 00:31:52
Si está en disolución, ésta se convierte en un aerosol mediante un 00:31:56
ebolizador. 00:32:00
Los sólidos 00:32:01
se disuelen previamente. 00:32:02
Algunos pueden vaporizarse directamente mediante electricidad o láser. 00:32:04
Y ciertos metales en disolución se pueden volatilizar obteniendo químicamente 00:32:08
sus hidruros volátiles. 00:32:12
Al relajarse, los átomos emiten radiación 00:32:14
en muchas direcciones 00:32:17
y de muchas longitudes de onda, 00:32:18
que llegan a un monocromador, donde se seleccionan fotones de una longitud de onda determinada 00:32:20
que llegan al detector para obtener finalmente el espectro. 00:32:25
Este sería más o menos un esquema de lo que ha ocurrido, que sería lo que tenéis aquí. 00:32:30
Ahora vamos a ver los diferentes tipos de excitación que hay y lo que conseguimos con cada uno de ellos. 00:32:35
La fotometría de llama, en este caso, se mezcla o se lleva una muestra de la sustancia a la llama de gas 00:32:41
o directamente a la llama o al fuego. 00:32:48
La llama evapora la muestra del disolvente por el calor existente producido 00:32:50
y rompe los enlaces intramoleculares para producir átomos libres. 00:32:54
Esta energía va a incitar al átomo, especialmente a los electrones. 00:33:00
Cada elemento emite luz o fotón en una longitud de onda característica predefinida 00:33:05
que se dispersa mediante un prisma o aparato de rejilla y finalmente se observa en el espectrofotómetro. 00:33:10
De forma simplificada, la espectroscopía de emisión por llama se puede observar utilizando solo un mechero Gunsen y muestras de metales. 00:33:16
Por ejemplo, el metal sodio colocado a la llama se iluminará de amarillo, el metal calcio de rojo, el cobre una llama verde, que es lo que hemos visto antes en la parte de absorción atómica. 00:33:25
Cuanto más concentrada sea la muestra, mejor se va a ver el color de la llama. 00:33:38
También va a pasar por una serie de fases. 00:33:42
La primera sería la evaporación. La muestra que contiene partículas metálicas se deshidrata por el calor de la llama y el disolvente se evapora. 00:33:45
A continuación vendría la atomización. En esa etapa los iones metálicos que se encontraban en el disolvente se reducen a átomos de metal. 00:33:54
Por ejemplo, si tenemos magnesio 2+, en forma acuosa, más dos electrones, daría igual a magnesio 0 en forma gaseosa. 00:34:03
Los electrones en los átomos de metal absorben la energía del calor de la llama y pasan a niveles más altos de energía 00:34:11
El tercer paso sería la excitación 00:34:18
Los electrones en estado basal de los átomos de metal son ahora capaces de absorber la energía del calor de la llama 00:34:22
La cantidad de energía absorbida depende de las fuerzas electrostáticas de atracción entre los electrones con carga negativa y el núcleo de carga positiva 00:34:29
Esto, a su vez, depende del número de protones en el núcleo. 00:34:38
Como los electrones absorben energía, se desplazan a niveles más altos de la energía y pasan al estado excitado. 00:34:42
Y, a continuación, se daría la emisión de la radiación. 00:34:49
Los electrones en estado excitado son muy inestables y se mueven hacia un estado basal con bastante rapidez. 00:34:53
Cuando lo hacen, emiten la energía que absorbieron. 00:35:00
Para algunos metales, esta radiación corresponde a longitudes de onda en la región visible del espectro electromagnético 00:35:03
y se observan como un color característico del metal 00:35:09
Como los electrones de diferentes niveles de energía son capaces de absorber luz 00:35:12
el color de la llama será una mezcla de todas las diferentes longitudes de onda emitidas por los distintos electrones en el átomo de metal que se investiga 00:35:16
En espectroscopía de emisión atómica se trabaja en unas condiciones en las que la misma fuente energética de atomización excita a los átomos 00:35:23
pero en espectroscopía de absorción atómica y en la de fluorescencia 00:35:32
primero se atomiza la muestra y después esos átomos se excitan 00:35:37
sometiéndolos a una radiación electromagnética. 00:35:40
Esto se puede hacer mediante las lámparas de cátodo hueco, 00:35:43
la radiación continua, láseres, lámparas de descargas en electrodos. 00:35:46
La fotometría de llama es una técnica de emisión 00:35:50
que utiliza una llama como fuente de excitación 00:35:53
y un fotodetector electrónico como dispositivo de medida. 00:35:55
El principal objetivo de la espectroscopía de emisión 00:35:59
es obtener información cuantitativa, y aunque no lo parezca, es uno de los métodos más sencillos 00:36:02
y procesos para el análisis de metales alcalinos, la mayor parte de los alcalinotérreos 00:36:07
y algún que otro elemento metálico. 00:36:11
También es posible realizar un análisis cualitativo, examinando todas las longitudes de onda del espectro de emisión. 00:36:14
La llama va a tener tres funciones. 00:36:20
Primero, permite pasar la muestra a analizar del estado líquido al estado gaseoso. 00:36:22
Segundo, descompone los compuestos moleculares del elemento de interés en átomos individuales, 00:36:27
o en moléculas sencillas. Y por último excita estos átomos o moléculas. Pero no todas 00:36:32
las llamas sirven. Para que una llama sea satisfactoria, que la podamos utilizar, pues 00:36:37
tenemos que conseguir que tenga la temperatura adecuada y que en ella se forme un ambiente 00:36:43
gaseoso que permita las funciones que he dicho antes. Además, el ruido del fondo de la llama 00:36:47
no puede actuar como interferente en las observaciones o en los análisis que vamos a realizar. 00:36:52
Hay otro tipo de espectroscopía de emisión atómica que no la he incluido, que sería la de chispa o arco, que es otra técnica de análisis químico. 00:36:57
En este caso, la excitación se consigue mediante un arco eléctrico o una chispa de llama. 00:37:05
El procedimiento es un poco diferente. En este tipo de espectroscopía, la muestra se pulveriza y destruye. 00:37:11
¿Por qué? Bueno, porque se ataca con una chispa eléctrica para llevarla a temperaturas muy elevadas y esto volatiliza y excita los átomos de su superficie. 00:37:17
La espectroscopía con arco puede trabajar con una fuente continua y discontinua. 00:37:26
Con la corriente continua tenemos una peor reproducibilidad pero una temperatura más elevada. 00:37:31
Tampoco es que se utilice mucho la parte del arco, por eso tampoco la he incluido en la diapositiva. 00:37:36
Con la chispa se consiguen energías de excitación mucho más altas que con el arco 00:37:41
y además se ha comprobado que proporciona mayor precisión que otros métodos que hemos visto anteriormente. 00:37:45
generalmente el arco chispa se utiliza para la determinación e identificación de sustancias 00:37:50
presentes en una concentración muy baja ya que tenemos un bajo límite de detección las ventajas 00:37:56
del arco chispa es la poca interferencia que hay entre los elementos pero como inconveniente es 00:38:02
el tiempo de aplicación o el tiempo de duración del análisis y el coste de los equipos el más 00:38:08
utilizado es el ICP, que es la espectroscopía con plasma de acoplamiento inductivo. Es una 00:38:13
técnica de análisis multielemental capaz de identificar y cuantificar la mayoría de 00:38:20
los elementos de la tabla periódica, a excepción del carbono, nitrógeno, oxígeno, hidrógeno, 00:38:25
flúor, gases nobles, algunas tierras raras y elementos poco frecuentes. Y además en 00:38:33
concentraciones que van desde el portendaje hasta las partes por billón. En este caso, 00:38:40
las muestras son introducidas en forma líquida, transformadas mediante un nebulizador en un 00:38:45
aerosol y excitadas mediante un plasma de argón. Esta técnica de ICP utiliza un plasma 00:38:51
acoplado inductivamente para producir átomos excitados y los iones emitirán radiación 00:38:57
electromagnética en diferentes longitudes de onda, características de un componente 00:39:03
específico. Entre los beneficios de ICP encontramos la baja interferencia química, la señal 00:39:07
estable y reproducible. En esa técnica tiene que haber un flujo constante de una muestra 00:39:13
líquida y un sistema de nebulización que forman un aerosol. Este aerosol es transportado 00:39:17
por el argón a la antorcha del plasma, que está acoplado inductivamente por radiofrecuencia. 00:39:23
En el plasma, debido a las altas temperaturas generadas, los analitos son atomizados e ionizados 00:39:28
generándose los espectros de emisión atómico de líneas características. 00:39:35
Los espectros son dispersados por la red de difracción 00:39:40
y el detector sensible a la luz se encarga de medir las intensidades de las líneas. 00:39:43
La información es procesada por el sistema informático. 00:39:48
Para realizar el análisis de una muestra mediante espectroscopía de emisión atómica 00:39:51
tenemos que tener en cuenta que al preparar los patrones 00:39:56
debemos hacerlo lo más semejante posible a la composición de la muestra 00:39:59
para eliminar posibles interferencias. 00:40:03
Si hay algún tipo de interferencia debido a la composición de la muestra, 00:40:07
podemos utilizar el método de la adición estándar, 00:40:10
que nos permite trabajar en presencia de una interferencia sin eliminarla 00:40:13
y obtener resultados fiables. 00:40:16
Si tuviéramos otro tipo de interferencia, como interferencia física o interferencia química, 00:40:20
en vez de la adición estándar, podemos utilizar el método del patrón interno. 00:40:24
En el patrón interno se añadía una sustancia a todos los patrones, 00:40:29
de manera que la interferencia afecte por igual a todas las disoluciones, tanto a los patrones como a la muestra. 00:40:32
Cuando estamos hablando de interferencias físicas o químicas es porque se ha comprobado que sí se pueden dar y pueden ser de diversos tipos. 00:40:38
Las interferencias físicas están relacionadas con la efectividad con que la disolución es transportada a la llama 00:40:46
y son causadas por diferencias en las propiedades físicas de las disoluciones, 00:40:52
como la viscosidad, la tensión superficial, la presión de vapor... 00:40:56
Por ejemplo, un ejemplo de este tipo de interferencias lo podemos ver cuando determinamos magnesio y cobre en presencia de ácido fosfórico. 00:40:59
Al aumentar la cantidad de ácido fosfórico, la viscosidad de la disolución va a aumentar, disminuyendo la velocidad de aspiración. 00:41:08
Al reducirse la velocidad de aspiración, va a llegar una cantidad menor de muestra a la llama y, por tanto, se va a producir una absorbancia menor de la muestra. 00:41:16
También la presencia de disolventes orgánicos produce ese tipo de interferencias, 00:41:25
debido a un aumento en la eficiencia de la nebulización, lo que produce un aumento de la absorbancia. 00:41:30
Una forma de compensar ese tipo de interferencias es preparar las disoluciones PATROL con los mismos componentes que la matriz de la disolución problema. 00:41:35
Las interferencias químicas serían cualquier tipo de alteración en el número total de átomos libres formados por unidad de volumen, 00:41:42
es decir, cambios en la concentración. 00:41:51
Esto es debido a la formación de compuestos químicos termoestables. 00:41:53
Las causas más comunes de este tipo de interferencias serían la disociación incompleta de la molécula formada 00:41:56
o la formación de una sal difícil de fundir. 00:42:02
O la reacción espontánea de los átomos libres con otros átomos o con radicales presentes en el medioambiente. 00:42:05
Hemos hablado antes de que no podíamos pasar a la ionización. 00:42:11
Vamos a ver aquí cuáles serían los tipos de inconvenientes o las interferencias debidas a la ionización. 00:42:14
Un átomo neutro, en su estado fundamental, puede ser ionizado a temperaturas elevadas. 00:42:19
Estos iones tienen unas propiedades espectroscópicas que son diferentes a las de un átomo neutro 00:42:26
y no pueden ser determinados por espectroscopía de absorción atómica. 00:42:31
De forma que el número total de átomos disponibles para la absorción de la radiación electromagnética 00:42:35
por unidad de volumen disminuye, lo que produce una pérdida de la sensibilidad. 00:42:41
Esta interferencia depende tanto de la temperatura de la llama 00:42:45
como del potencial de ionización del elemento de estudio. 00:42:48
Y el otro tipo de interferencias que se pueden dar serían las interferencias espectrales. 00:42:52
Aquí podemos diferenciar interferencias de línea o interferencias de banda. 00:42:57
Este sería un ejemplo, por ejemplo, del espectro o de las líneas de resonancia que hemos hablado antes, 00:43:01
que son líneas que no tienen forma de pico. 00:43:05
Las interferencias espectrales de línea ocurren cuando hay una superposición de dos líneas atómicas 00:43:08
o cuando éstas no son resueltas por el monocromador. 00:43:13
Las interferencias espectrales de banda, en cambio, se producen debido a la absorción de la radiación por moléculas o radicales 00:43:17
y por la dispersión de la radiación por sólidos. 00:43:24
Para ambos efectos, que en principio son distintos, se emplea el término de absorción de fondo. 00:43:27
Para realizar un análisis cuantitativo vamos a realizar una recta de calibrado 00:43:33
en la que vamos a representar la concentración de los patrones respecto a la absorción. 00:43:38
en la linealidad se suele mantener a unas concentraciones de los patrones bajos 00:43:44
de forma que nos va a permitir hacer una interpolación de la muestra 00:43:49
para poder calcular su concentración 00:43:53
de todas formas, si queréis aquí tenéis un vídeo 00:43:55
que es de una universidad, creo que era 00:43:59
en el que explica un poco cuál es el procedimiento 00:44:01
veis un poco el equipo, veis las lámparas 00:44:04
por si queréis echarle un vistacillo 00:44:06
ya que aquí en el instituto no tenemos ese equipo 00:44:08
Autor/es:
Mª José Luna Medina
Subido por:
María Jose De L.
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10 de abril de 2024 - 16:37
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IES LOPE DE VEGA
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