Repaso módulo Ensayos Microbiológicos - Contenido educativo
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¿Y ahora? Perfecto. He empezado a grabarlo también, porque así también entiendo que la gente que no puede estar en la videoconferencia, pues de algunas cosas no se entera.
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Entonces, que lo sepáis, que aunque ahora me preguntéis cosas y demás, se está grabando, pero no aparecen vuestros nombres.
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Entonces, nada, solamente era, bueno, me imagino que no hay así mucho que explicar, pero para que sepáis más o menos, ahí he puesto en qué van a consistir los exámenes, ¿vale?, que tenéis una parte teórica y otra práctica.
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Nosotros tenemos aquí un aula grande de exámenes, donde se supone que acabéis todos, pero ese aula va a estar ocupado porque han coincidido exámenes, o sea, para algunos de vuestros exámenes coinciden con otros exámenes de distancia y en concreto el mío coincide, ¿vale? De distancia me refiero de otras enseñanzas, ¿vale?
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Entonces, por eso no os he dicho el número del aula, porque también es en función un poco del calor que haga ese día, aunque parece que para el lunes que viene la temperatura baja.
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Entonces, si no hace excesivo calor, sí que haríamos el examen de la tercera planta en un aula, bueno, diferente, que no conocéis, pero bueno, que yo diría dónde está, ¿vale?
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Y si hiciese mucho calor, me quedaría en la primera planta, ¿vale? Por eso no os he puesto el número del aula. Vosotros llegar con tiempo, pues si tenéis que estar en la puerta del aula a las 3 y 4, pues intentar llegar, bueno, pues a las 3 y 10, como muy tarde, al vestíbulo de la calle de Oír, que es donde si habéis venido alguna vez, por donde se entra por la tarde, no por la puerta principal que está en San Bernardo.
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Esa estaría cerrada, ¿vale? Entonces, pues si llegáis a las seis y diez, como muy tarde, ahí estaré yo o las conserjes y también pondré un cartel indicando el número del aula.
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Bueno, si el número del aula empieza por uno, es la planta primera. Si el número del aula empieza por dos, es la segunda planta, si empieza por tres, es la tercera planta, ¿vale? Pues, para que vosotros os situéis de todas maneras, si estoy yo, o sea, hasta que esté yo, estaré yo más o menos hasta las tres y diez, seis y doce, os lo iré diciendo donde tenéis que ir y si no las conserjeis, os lo van a contar, ¿vale? No hay problema.
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Y habrá un cartel, un cartel grande donde las conserje para que sepáis a dónde tenéis que subir, ¿vale?
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Una vez que subáis, pues ya digo, sí que quiero que os vayáis reuniendo en la puerta del aula o de las aulas,
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porque a lo mejor tenemos que estar en dos aulas, depende del tamaño y demás,
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porque estoy en la 3 y cuarto, porque yo ahí empezaría a pasar listo, ¿vale?
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Y una vez que diga vuestro nombre, me enseñéis el DNI, pasáis dentro del aula.
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que os corresponde, hasta llenar la primera. Si hay más gente, pues llenaríamos una segunda
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aula, que estarían contiguas, ¿vale? O sea, que estéis en el sitio que… O sea, yo pondría
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un número de aula, ahí tenéis que ir, que es donde empiezo a pasar listas. Que se llena,
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me pongo en la puerta de al lado y seguiría pasando listas con los que queréis, sin haber
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podido entrar en la primera aula. Bueno, nos damos un cuarto de hora para eso, yo creo
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que es suficiente, que alguien por lo que sea nos llegue a las 4, llegue a las 25 y
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por orden de vista ya ha dicho su nombre, no pasa nada, se espera al final y yo con
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los que me queréis al final allí, pues vuelvo a pasar lista a los que más no habían venido
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en primera instancia, o me vais diciendo vuestros nombres y os voy a colocar, ¿vale?
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O sea, que no habría problema. La idea es que todos estemos dentro de las
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aulas o del aula, según lo que corresponda, a las 15 y 30 para dar comienzo a la lectura
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de instrucciones del examen en sí y para comenzar el examen, ¿vale? El examen de la parte teórica
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no es muy largo, yo he puesto que más o menos tiempo estimado 90 minutos desde que digamos
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que empezamos, ¿vale? Yo no cuento ese cuarto de hora en que estamos pasando listas y entrando
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y si dentro pues tengo que contar un poquito en qué consiste o cómo hacemos, bueno, pues
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no, en el momento que yo ya reparto los exámenes y le diga ya, ya podéis consultarlo, podéis
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abrir, os daré un juego de hojas, podéis abrirlo, entonces ya empezaríamos a contar
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los 90 minutos como más. Pero vamos, en principio seguro que antes habéis acabado.
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Le digo porque hay algunos que necesitan saber cuándo van a acabar. Pues considerar
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hora y media, cinco, las cinco seguramente estéis por, ¿vale? Más o menos, si no surge
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ningún cuentatiempo. Si alguien llega tarde por un motivo justificado, yo le voy a dejar
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pasar durante un tiempo prudencial, ¿vale? Lo único que no puedo alterar es la hora
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de salida. Si yo digo que para todos el examen acaba a las cinco, porque empezamos a las
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tres y media, a las cinco acaba para todos, también para los que llegáis tarde. Que
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llegáis más tarde de las tres y media, mucho más tarde, pues más que nada que han pasado
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20 minutos. Bueno, pues yo no me importaría eso, hasta un máximo de 20 minutos podíais
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pasar, siempre y cuando no haya salido nadie. Por eso también os pido a todos, y está
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como norma escrita, o sea, que no nos queda más remedio, que desde que empieza el examen
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hasta que podéis abandonar el aula, imaginaos que solo habéis llegado a ver el examen y
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bueno, lo ojeáis, veis que no queréis hacerlo, que solo queríais estar allí, pues para
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que figurar en vuestro presentado, que no hace falta, no hace falta que os deis por
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presentado. Bueno, pues habrá gente que yo que sé, o la
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intermedio escénico no quiere hacerlo y quiere irse, o es muy rápido y acaba enseguida,
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que ya sería raro un cuarto de hora acabar. Bueno, pues ya digo, por lo menos tenéis
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que estar sentados un cuarto de hora, veinte minutos, para asegurarme que si alguien por
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lo que se ha llegado tarde por un motivo justificarísimo, tipo un hecho estropeado,
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con justificantes o cosas así. Bueno, pues que pueda por lo menos pasar a hacer el examen
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aunque tenga menos tiempo, ¿vale? Y luego ya la parte práctica, como ya cuando voy
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a analizar el teórico, sé que vais a estar solo pensando en el teórico, pues también
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os cuento la parte práctica. Ya tengo puesto aquí que son dos pruebas. O sea, está constituida
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a su vez la parte práctica por dos pruebas, que van a ser unos supuestos prácticos que
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vayáis a desarrollar en un aula y una prueba práctica en el laboratorio. Para ese día
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llegáis todos, he puesto las tres y diez, bueno, pues porque tengo que distribuir en
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dos grupos y demás y tengo que pasar de estar en un grupo y en otro, ¿no? Pero bueno, tres
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y diez, tres y cuatro, ¿vale? Eso sí, ahí ya seguro vais a la tercera planta porque
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estaremos en el laboratorio de microbiología la mitad de vosotros, ¿vale? Y yo tengo que
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ver que estáis allí todos para ver cuántos sois y dónde parto la mitad. Porque necesito
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que en el laboratorio estéis la mitad de los que vais a examinar y la otra mitad en
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el aula haciendo supuestos prácticos. Y luego, y sin que haya trasvase de información,
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porque el examen será exactamente el mismo, os intercambiaréis, los laboratorios vais
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al aula y los del aula venís al laboratorio. Es muy importante que en todo ese proceso
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no utilicéis los móviles. Si por lo que sea alguien se pone a utilizar el móvil cuando
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ha salido de una de las pruebas de la parte práctica, podríamos incluso anular el examen,
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¿vale? Entonces, es muy importante. Lo volveré a decir cuando estemos todos delante, porque
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ahora solo me estáis escuchando un poco, ¿vale? Bien, las preguntas, como ya os puse
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ejemplos el otro día, pues ya visteis un poquito cómo pueden ser y también habrá
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ejercicio, pero ejercicio cortito, ¿vale? Pero bueno, que alguna pregunta, si es un
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ejercicio, pues lleva un poquito de cálculo, que no os pido los cálculos escritos en ningún
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sitio. Todos tendréis alguna hoja en sucio, si necesitáis, para hacer lo que tengáis
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que hacer, ¿vale? Yo solamente os pido las de esto. Bien, que descuentan las erróneas,
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ya lo sabéis, y estará indicada en la hoja de examen cuánto descuentan. Según lo que
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suma, según como sean el tipo, pues descuentan más o menos, pero siempre descuentan. Y ya
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está, yo creo que así de eso poca cosa más. Luego ya he puesto un montón de normas, si
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tenéis dudas sobre alguna de ellas y queréis preguntarme, porque eso ya sí que lo leo
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el día del examen o paso el folio con ellas escritas. Son todas estas que os he puesto
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¿Vale? Importante, como sobre todo si vamos a estar en dos aulas, que no es el aula grande
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de exámenes, no hay mucho espacio. Al examen de teoría tampoco vamos a dejar pasar con
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mochilas grandes, con abrigos, está claro que nadie va a traer abrigos, pero mochilas
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grandes tampoco. Entonces, si alguien viene de algún sitio, puede traer su comida, o
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sea, un mochilón o lo que sea, lo tiene que guardar en la caquilla, ¿vale? Un bolso pequeño,
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Bueno, pero siempre que sepáis que no lo vais a tener al lado, que cualquier objeto personal habría que ponerlo en un extremo del aula. Entonces, siempre es bueno que no paséis con nada, ¿vale? Porque si tenemos que estar pensando, esto es pequeño, esto es grande, esto me lo quedo, esto no me lo quedo, perdemos tiempo de comenzar el examen y eso perjudica a todos.
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Entonces, la de los llaves de la caquilla, podéis compartir la caquilla más de uno. Y primero que acabe el examen, que coja la llave para abrir. Y si luego tenéis que devolver la llave, porque una acaba muy pronto y otro que está compartiéndonos, me podéis dar mi la llave, que debe estar en el examen, y a quien salga el siguiente se la doy.
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que me la pida y ya está, ¿vale? Entonces, bueno, en ese sentido no hay problema.
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Al examen práctico ya ni os cuento, ahí absolutamente nada personal, solamente las cosas que se os piden.
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La rata, las gafas de seguridad, la pera, el rotulador, bueno, y por supuesto algún bolígrafo.
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O, bueno, sí, bolígrafo, porque con lápiz no dejamos hacer nada, ¿vale?
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Y, por supuesto, importante eso porque podría pasar que nadie se le olvide calzado, cubierto
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y piernas cubiertas. No vengáis en minifalas, no vengáis en pantalón corto porque no os
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puedo dejar pasar. Eso sí que es una norma fundamental, ¿vale? Las gafas de seguridad,
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sé que hay compañeros, depende de la actividad que tengamos en cada laboratorio, pues exigen
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las gafas todo el tiempo. Yo os diré cuándo exijo las gafas en concreto en esa parte práctica
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del laboratorio. Si yo estoy hablando, estoy explicando las normas de examen, no hay que
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tenerlas puestas. Si vosotros estáis escribiendo un folio lejos de lo que se pueda estar explicando
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pues calentando, preparando, pues tampoco, ¿vale? Pero sí que os diré exactamente
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cuándo sí es necesario tenerlas puestas, ¿vale? Si no las tenéis puestas, sería motivo
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de pérdida de puntuación, ¿vale? Bueno, pues esto es lo que yo os quería contar.
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¿Tenéis alguna pregunta, alguna duda?
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La biblioteca está abierta por la mañana, sí, ¿vale? Lo que pasa es que solo está
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Ya, pero a ver, lo que te cuento. La biblioteca está abierta por la mañana, una biblioteca histórica que tenemos grande, ¿vale? Que suele ser lugar donde mandamos a los alumnos de la ESO castigados. Lo digo porque no suele ser un sitio excesivamente tranquilo, depende del alumno que esté en ese momento, ¿vale? Lo digo por eso.
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Y luego, tenemos un aula de… en la segunda planta tenemos otra biblioteca de distancia, ¿vale? Entonces, ahora, en cuanto acabe, porque es verdad que tenía que haberlo hecho, lo tengo hecho. O sea, tengo una foto hecha del horario que se supone que está abierta, ¿vale? Porque no está abierta a cualquier hora, ¿vale? Entonces, tiene un horario porque tiene que estar como controlada por algún profe. Y no estamos siempre todos los profes disponibles para hacer guardia en esa biblioteca.
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Entonces, la biblioteca histórica está en la primera planta, la biblioteca de distancia, que es la que más te aconsejo, está en la segunda planta, ¿vale?
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Y tiene un horario que luego subo yo la foto al aula virtual, que no la había subido porque tenía que hablar con el jefe de estudio, bueno, el del otro, de distancia de bachillerato,
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porque te quería asegurarme que realmente
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ese horario funcionaba, es el que está puesto
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entiendo que sí, pero a mí me gusta confirmar las cosas
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antes de deciros venid y que luego lo encontréis cerrado
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y aún así, también os digo
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que si de pronto hay una urgencia
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de cubrir guardias
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para grupos de alumnos
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a veces tienen que tirar de esos profesores
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y si no está un profesor de guardia
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cierran la interceta, lo digo porque
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contéis con todos esos detalles, ¿vale?
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en principio, bueno
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tú quieres venir a estudiar lo que es por la mañana
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¿no? Es un lunes. Vale, ya te digo. Luego, de dos y media a tres y media te aseguro que
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nadie va a estar y las bibliotecas están cerradas. Ahí seguro, ¿vale? Y hasta las
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dos y media, pues, con esas prebendas que te he dicho, pues, eso es lo que hay, ¿vale?
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Entonces, bueno, para que cuentes conmigo, de todas maneras, subo ahora luego la foto
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del horario, pero que no me da tiempo porque no hemos coincidido físicamente el jefe de
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estudio de bachillerato a distancia y yo, ¿vale? Pero a ver si no se lo diré por correo
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que me lo confirme por si acaso. Entonces, yo subo la foto ahora con la calma, pero si
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está pendiente, por si la cambio, aunque pondré un aviso, si tengo que cambiarla porque
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me dice el profesor de estudios mía, pues no, pues ahora hacemos esto, hacemos lo otro.
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Yo os lo aviso, ¿vale? De todas maneras, por la mañana, estaba pensando qué profesor
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podía haber por la mañana, porque es verdad que ya hay muchas aulas vacías, ¿vale? Porque
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hay algunos alumnos que han acabado, pero yo en concreto no estoy por la mañana. Entonces,
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No sé, tengo que mirar. Si hay algún profe que pudiese subir a… O sea, nuestro departamento de FP está en la tercera planta, creo que lo sabéis. Entonces, ahí hay profesores siempre, pues, de nuestra especialidad, pero no todos son de distancia, quizás mejor no los conocéis.
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Lo que sí que también os digo, para poder entrar en el instituto, sobre todo si es antes de las tres y media, traer el carnet, ¿vale? Porque si no, nos dejan pasar, ¿vale? Eso es importante. Vale, bueno, pues eso quería decir. A ver si me suelto y puedes estar un ratito.
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Ya, no, no, se entiende perfectamente. Bueno, pues ahora lo que voy a poner es un esquema,
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bueno, lo voy a poner chiquitito, primero y luego… Mira, yo tengo este esquema hecho,
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disculpadme que lo tenga hecha a mano, pero yo me manejo mucho mejor a mano que a ordenador.
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Y aquí te he recogido todos los contenidos importantes del MOOC, ¿vale? Entonces, quería
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contaros un poco eso, que me da tiempo, que ya hemos hecho un tiempo ahora, nada, esto
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lo cuento en un ratito, para que os situéis un poco, bueno, os cojáis la visión global
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del módulo, ¿vale? Siempre digo que lo voy a hacer a ordenador y me lleva, me pilla siempre
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todo, porque me acuerdo ahora, de momento, y no tengo tiempo, nunca, de nada. Pero bueno,
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disculpadme, pero yo creo que se entiende, lo tenéis ya subido en el aula virtual, a
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quien le venga bien, bien, no hay nada, no hay nada, absolutamente nada de información
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nuevo, he simplemente sintetizado todos los contenidos del módulo en un esquema. Entonces,
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bueno, yo os lo voy a ir contando poquito a poco y así repasamos. Si de cada cosa que
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yo vaya diciendo tenéis alguna duda, pues es el momento de preguntarme, aunque también
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me podéis preguntar luego, por supuesto. Entonces, vamos a ello. ¿Lo estáis viendo,
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¿Verdad? ¿Estáis viendo dónde pone todo? ¿En un cuadrado? ¿Lo veis? Sí, vale. Vale, vale. Bueno, pues mirad, nosotros cuando tenemos que hacer ensayos microbiológicos, lo tenemos que hacer siempre sobre algo.
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Es porque tengo que analizar un río, un agua residual, un lote de bris de leche, un canal de un animal, un lineal de fabricación, lo que sea, ¿vale?
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Nosotros tenemos que dar unos resultados referidos a ese todo, entendiendo como todo, cuando pongo todo, me estoy refiriendo al río, al canal del animal, al lineal de fabricación, al lote de lo que sea, de un animal, ¿vale?
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Bien, entonces, como es imposible analizar el todo, siempre debo tomar una muestra, ¿vale? Entonces, cojo una muestra. Esa muestra la tengo que tomar siempre evitando toda contaminación externa, con envases estériles, con utensilios estériles.
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Y si fuese el caso de alimentos y, bueno, también medicamentos y alguna otra área, tengo que aplicar un plan de muestreo que recordar que había de dos tipos, de dos clases y de tres clases, ¿vale?
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En las de dos clases teníamos dicho cuántas unidades había que coger y cuántas unidades defectuosas se permitían, y aún así se afectaba el lote.
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Y si es de tres clases, tenemos como un intervalo, tenemos como dos valores, el M minúscula que dice lo que está por debajo de ese valor está bien, lo que está por encima está mal.
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y luego ya teníamos el M mayúscula que nunca jamás podía sobrepasar, ¿vale?
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En cambio, M minúscula sí podía ser sobrepasado por el número de unidades que me indicase.
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Aplicando todo eso, demuestre lo que se supone que sabemos, ya tenemos nuestra muestra cogida
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y que siempre debe conservarse en refrigeración y que no pase demasiado tiempo.
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Aquí no lo he escrito, pero máximo 24 horas.
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Esa muestra puede ser sólida.
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Si es sólida, tengo que transformarla a una suspensión líquida.
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Y eso se hace con algún medio diluyente y homogenizando luego perfectamente bien.
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¿Con qué? Pues lo más normal con el homogenizador de paletas.
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Recordad que esto es maker también llamado, que era por un aparato que iba golpeando rítmicamente.
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He puesto así con los colores que tenía, así como, no sé ni qué color es este, como
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violeta o fusia, el nombre de los equipos. En negro he ido poniendo nombres de medios
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de cultivo, ¿vale? Pues como medio diluyente, los he puesto aquí como ejemplo muy frecuente,
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el agua de pectona y agua de pectona con sal, ¿vale? Pero hay más, he puesto por poner
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algún ejemplo, ¿vale? Y para pesar esa muestra sólida, otro aparato que me hace falta es
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la balanza, ¿vale? Como he ido poniendo los nombres de los equipos para que sepáis también
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que esos son los equipos que tenemos en el laboratorio que podríamos llegar a necesitar
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o que yo os podía preguntar sobre ellos, ¿vale? Bien, si la muestra fuese líquida,
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pues solamente requiere una agitación, no hace falta ni siquiera aparato, se puede agitar
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reabrir de leche o se puede agitar de alguna manera el envase antes de abrir. Estoy hablando
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de muestra sólida o de muestra líquida. Si la muestra fuese gaseosa, bueno, pues entonces
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es muy frecuente tomar esa muestra y sembrarla conjuntamente, ¿vale? No tiene por qué ser
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siempre así, pero es muy frecuente. Y eso lo hacemos con un equipo que también os he
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contado, que es el SAS. Aquí es verdad que lo tenía que haber puesto con un potrador.
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Ahora me acabo de dar cuenta de eso. Bien, entonces cogemos la muestra, conjuntamente
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ya la cogemos en un medio de cultivo, es decir, que hemos dicho conjuntamente toma y siembra
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y lo voy a circular. Otra opción que puede ser que nos toque analizar será la superficie.
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Entonces, bueno, ahí sí que hay que hacer por una parte el muestreo y luego la siembra
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y luego ya pues en Cuba, ¿vale? Luego seguiremos viendo eso en Cuba. En general, mis dos objetivos
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de análisis, tanto de una manera como de otra, será recuento o identificación, a veces
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las dos cosas. Vamos a ver el área de recuento. Bueno, pues tenemos varias opciones. Puede
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que tengamos una baja carga microbiana. Cuando tenemos una baja carga microbiana, es decir,
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que esperamos pocas bacterias en la muestra que yo he cogido, pues imaginaros una bebida
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refrescante, agua de consumo, un suero fisiológico que se le va a poner a un enfermo, ese tipo
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de cosas. Pues hay que filtrar, porque si sembramos una cantidad pequeñita y apenas
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hay bacterias, la posibilidad de que haya bacterias en esa cantidad que yo he cogido
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es mínima. Entonces, tengo que coger una cantidad grande para asegurarme que si había
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alguna bacteria tengan bastantes posibilidades de ser cogidas. Pero lo más normal es coger
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100 mililitros. ¿De qué? De la muestra líquida o bien de la suspensión de la muestra
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sólida, ¿vale? O bien de una suspensión que hayamos hecho de una análisis de superficie
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que se haya hecho. Se coge la muestra, ¿vale? Merida, compró beta estéril, serían 100.000
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litros y tenemos dos opciones que habíamos comentado en clase. Hacerlo pasar por un filtro,
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un filtro que retenga los microorganismos de forma que el líquido pasa con ayuda de
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un poco de succión, bomba de vacío o tromba de vacío y ese filtro que ha retenido a esos
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posibles microorganismos que había en la muestra, se cogen con pinzas y se colocan
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en una placa de cultivo con el medio ya preparado. O bien porque se compra comercial o porque
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lo hayamos preparado en el laboratorio. Y otra opción es trabajar con monitores de
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filtración, que he hecho aquí el dibujito cutre, pero bueno, si lo tenéis, tenéis
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fotos y demás, y lo habéis visto, creo que lo visteis, es una rampa de filtración
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que se denomina la parte inferior, sobre la que se colocan unos monitores que tienen una
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tapa, un cuerpo intermedio y una base. En la base hay un filtro ya colocado que me tengo
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que manipular. Ahí echo mis 100 mililitros, o 50, a veces no siempre son 100, pero lo
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habitual es 100, y luego quito el cuerpo intermedio y echo el medio de cultivo sobre el filtro,
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De forma que la base y la tapa forman una placa de cultivo. ¿Vale? Eso sería una opción. ¿Vale? ¿Qué pero carga microbiana alta? Pues recordar, entonces, lo que tenemos que hacer son diluciones. ¿Qué significa hacer diluciones? Diluciones de cualquier tipo, ¿vale? Pero, en principio, lo más habitual son diluciones decimales.
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Y yo en el examen nos voy a preguntar por diluciones diferentes a las decimales. Indicaré, ¿vale? Y si por lo que sea pregunto por alguna otra, me digo exactamente. Se cogen 5 gramos y se llevan a 25 o se llevan a 30. Pero si no digo nada, lo habitual y es lo que yo os recomiendo es hacer diluciones decimales. Y seguramente os digan que hagáis diluciones decimales. Pongo el apellido.
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La muestra puede ser líquida o puede ser una suspensión, digo, el punto de partida puede ser la muestra líquida o puede ser una suspensión de la muestra sólida o lo que es lo mismo, ya la dilución 10 elevado a menos 1, porque esa suspensión que os he contado se suele hacer partiendo, pues a lo mejor de 10 gramos de muestra y llevándolo, uniéndolo con 90 mililitros para formar 100.
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10 en 100 es decimal. O cojo 25, lo junto con 225 para hacer 250. 25 en 250 es decimal.
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Siempre para saber cuánto de disolvente he hecho, lo pesado lo multiplico por 9. Así
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es la cantidad de media de cultivo que tengo que añadir. Y lo añado y ya he hecho esa
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dilución decimal. Una vez hecha la primera, o bien la muestra líquida, cojo un mililitro
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y lo pongo en un tubo con 9 mililitros. Las demás diluciones que yo vaya haciendo, con
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tenerlas en tubos e ir preparando un volumen final de 10 es suficiente, a no ser que tenga
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que hacer muchísimos análisis, que entonces a lo mejor el volumen final tendría que ser
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y voy haciendo así, cogiendo con micropipeta y cambiando de punta de pipeta cada vez, voy
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haciendo mis ilusiones de final y las voy marcando. Antes de hacer la siguiente, la
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que he preparado, tengo que agitarla y utilizo un agitador de tubo o lo puedo agitar con
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la mano, pero nunca voltear. Una vez que tengo hecho esto, este banco de diluciones, todo
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esto seguiría siendo preparación de la muestra. Todo, por supuesto, no lo estoy diciendo todo
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el tiempo, pero todo esto acerca del mechero, condiciones asépticas, etc. Y lo que hemos
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hecho ha sido la preparación de la muestra. Hemos tenido que diluirla bastante o no bastante
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o un poco, y eso va en función de la carga esperada o de lo que nos indique la legislación,
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¿vale? Lo he diluido suficiente para poder ahora sembrar en placas y que en las placas
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haya un número de colonias adecuado para contar, que suelen ser entre 30 y 300. También
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a veces se siembra en medio líquido, ¿vale? Eso sería la técnica del número más probable.
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Pero lo más habitual o lo más frecuente ahora es técnica por duplicado en placa. Esta siembra se hace por inmersión o por inmersión en masa o por extensión en superficie y luego se incuba y se cuentan las unidades formadas de colonia por mililitro, si es líquido, o por gramo, aquí también habría que cambiarlo, por gramo, si fuese la muestra sólida.
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aplicando la fórmula que os he puesto aquí arriba. Esta aplicará a mililitro, esta aplicará
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a muestra líquida, pero si fuese muestra sólida pondríamos grano. Y el resultado
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sería por grano. Y toda esta incubación en estufa, que es otro de los aparatos que
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hemos utilizado, os voy a contar, estufa microbiológica o incubadora también. Si la carga microbiana
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que esperamos no es ni mucha ni poca, podemos sembrar directamente. Y solemos sembrar o
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mililitro o 0,1 mililitro. Utilizamos las técnicas que se usan para recuento, que son
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por extensión en superficie o por inmersión en masa, y incubamos y contamos. Todas estas
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operaciones que os he dicho, si fuesen microorganismos especialmente peligrosos, ya de tipo 2 o
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superior, pues habría que hacerlas en cabina de flujo lamina. Si no, con estar cerca del
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de acero es suficiente. Y ya después de la incubación, pues hay que contar colonias,
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por eso les he puesto aquí el cuenta colonia, ¿vale? Porque es otro equipo que a veces
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también nos es útil, pero que también se puede contar a mano. ¿Veis que muchos de
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los equipos que tenemos en micro se pueden sustituir un agitador de tubos? Pues agitamos
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manualmente un cuenta colonia, contamos, uno, dos, tres, cuatro, mirando simplemente, ¿vale?
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Bien. Aquí arriba me he puesto algunos medios, ¿vale? Pues Agar.tcc para Procirio, Agar.comogénico para el COGI, Agar.comogénico para el COCO. Aquí creo que me sobra una R. Bueno, algunas erratas tengo aquí. Vale. Simplemente para ir contando medios ejecutivos que sería bueno tener, bueno, que tenéis que saber.
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Muy al principio, ¿vale? Y ahí tenéis ya un poco, bueno, cuando estamos analizando
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una muestra gaseosa, después de incubar, contamos también las colonias y lo empezamos
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como UFC por metro cúbico, en este caso. Para superficie lo incubamos y si no se dice
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nada, se expresa por UFC por centímetros cuadrados. Si no, se os dice nada. Lo digo
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porque me habéis preguntado en el foro, en un ejercicio determinado, que ahora luego
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lo vemos, se pide en el enunciado que digáis el resultado en UFC por nueve centímetros
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cuadrados. Si nos dicen unas unidades concretas, respetamos esas unidades, ¿vale? Es cuando
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no nos dicen unidades, cuando tenemos que saber que si hemos muestrado una superficie
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hay que decirlo en UFC por centímetro cuadrado, al igual que en muestra gasosa UFC por metro
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cuadrado y en muestra líquida UFC por 100 mililitros o por mililitros, según si hay
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mucha o poca concentración. Y si hay muestras sólidas, por grano. Esas son las formas de
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expresar o las unidades que hay que utilizar. Ya hemos visto todo el tema del recuento.
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¿Tenéis alguna duda? Vamos allá con la identificación. Cuando queremos identificar,
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Mi único objetivo es saber si está o no está la bacteria. Normalmente no queremos contarlo. Hay patógenos que normalmente su análisis es presencia o ausencia. Es verdad que hay otros patógenos que nos indican que tiene que estar por debajo de cierto valor.
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Entonces, acudo al recuento, lo hago, lo que está contando, pero recontando, o sea, pero para ese patógeno en concreto, pues haría lo que tenga que hacer, las discusiones que tenga que hacer y se enviaría por duplicado en placas de comarga selectivo, un medio cultivo selectivo para el patógeno que esté queriendo contar, ¿vale?
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Pero hay otros patógenos que no quiero contar, ¿vale? Que lo que quiero saber es si están o no están y lo que me dicen es que diga si hay presencia o no hay presencia.
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Vale, entonces lo único que tengo que hacer es identificar. Para ello, lo que se suele hacer es partir de 10 o de 25 gramos, si la muestra fuese líquida, y ponerle un medio de enriquecimiento, que ahí os he puesto algunos medios de enriquecimiento aún, pero no están todos, y incubar unas horas.
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Muchas veces son 24, otras veces son 6, es que depende y eso lo dice el protocolo, no
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tenéis que saber cuántas horas tienen que incubarse, solo que es frecuente hacer un
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enriquecimiento, incluso a veces, como viste en el último tema, un preenriquecimiento
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y luego un enriquecimiento, pero como eso solamente es a veces, no lo he puesto. Y luego
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ya, después de ese enriquecimiento o incluso el preenriquecimiento, lo que se tiene que
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hacer es sembrar por estría en medios selectivos y o diferenciales, ¿vale? Y aquí se siembra
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que es importante saber por estría. Dentro de la estría, yo o la que más he hecho hincapié
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es la siembra por estría en sectores, en tres sectores en concreto, pero hay otras
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siembras por escía que también están contadas. Y mi objetivo es el aislamiento. El objetivo
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de una siembra por escía es aislamiento, es decir, conseguir las colonias aisladas.
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Ahí os he puesto también un montón de medios ya selectivos o diferenciales, ¿vale? Bueno,
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pues para que tengáis recogido. Que vosotros tenéis alguno más o que no he puesto todos,
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porque, ya digo, voy a poner un ejemplo, pues podéis completar esto vosotros. Después
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puede sembrar en esos medios selectivos o diferenciales, pues se incuban, ¿vale? Y
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después, ¿vale? Aunque el aspecto de las colonias me pueda decir que parecen, que puede
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ser porque tengamos listeria o que tengamos salmonela o yo qué sé qué, por la descripción,
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aún así tendría que confirmar, siempre hay que confirmar, prácticamente siempre,
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¿vale? En algunos casos puntuales no. Lo que sí que tenemos claro es que si no ha
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crecido nada en uno de estos ágaras selectivos, habiendo hecho bien un análisis, la incubación,
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la siembra y demás, pues puedo decir que hay ausencia, ya podría decir que hay ausencia.
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Pero si me crecen algunas colonias sospechosas, pues imaginaos que he sembrado en el ágar
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XLD y me crecen unas colonias cuya descripción coincide con la posible salmonella. Bueno,
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pues tendría que hacer confirmación, pruebas confirmativas. Ahí os he puesto cosas que
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podemos hacer para esas confirmaciones. Lo más frecuente, pruebas bioquímicas. Os he puesto
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algunas también a modo de ejemplo. Digo, todo esto no quiere ser exhaustivo, son ejemplos.
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Los he ido poniendo para que os centréis. Producción de activas, oxidasa, catalasa,
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las pruebas invictas. También hay veces que la confirmación es sembrarlo, esa colonia
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sospechosos en otros medios diferentes, en medios diferentes, a distintas condiciones
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físicas, ¿vale? A lo mejor eso ya me confirma, a lo mejor si lo siembro en un medio determinado
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y me pongo a incubarlo a 44 grados, ya me está diciendo que es tal o tal. También
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puedo utilizar sistemas rápidos, como vemos, como pueden ser las galerías API o los ente
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los tubos. También puedo observar al microscopio. Ahí miraría la morfología, que recordad
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que vimos al principio de los tiempos, que si eran cocos, si eran vacilos, si estaban
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agrupados de una manera o de otra. También cómo responden a diversas tinciones. Y esas
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tinciones, pues la más importante, no la única, pero la más importante, tinción
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de grado, que tenéis que saber todo de la tensión de grado. Y del microscopio, que
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sería el aparato utilizado para esta parte última que os he contado, pues tenéis que
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saber, tener conocimiento de lo que es la resolución, el contraste, cómo se calcula
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el aumento, qué partes tiene, qué tipos hay, cómo se hacen las preparaciones, cómo
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se hace la tensión. Y por poner cosas, pues he puesto aquí, que también tenéis que
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saber, claro, las normas de seguridad, que también están vistas en su sitio concreto.
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Y también tenéis que tener conocimientos generales de metodología, sobre todo qué
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características diferenciativas tienen los microorganismos o qué condiciones de crecimiento
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son adecuadas o tengo que tener en mente para hacer que me crezcan, si lo que quiero es
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que me crezcan en el laboratorio, o eliminarlos, si lo que quiero es eliminarlos.
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Otra cosa que os he puesto aquí es el sistema ARCPC, que tenéis que también saber de qué va. En el centro había hecho un dibujillo como de un mechero y por eso en su base he puesto que tenéis que saber lo que es el mechero, cómo se enciende, cómo se usa.
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Y si venís al laboratorio, tenéis que saber utilizar el semillero, como cualquier otro equipo que os pida, ¿vale? Entonces, eso es importante que lo tengáis en mente.
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Otra cosa que es fundamental para todos estos análisis que os estoy contando es la preparación de medios de cultivo, ¿vale?
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Si es verdad que se pueden utilizar ya preparados, pero si hay que prepararlos, pues el procedimiento es genérico, aunque cada uno tiene alguna cosa y hay que leerlo, hay que leer la etiqueta.
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Bueno, pues es leer la etiqueta, hacer los cálculos según la cantidad que se quiera preparar y recordar que siempre preparamos un poquito más, sobre todo si el medio es sólido.
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Si es medio líquido, muy poco más. Si es sólido, suficiente, como un 10-15% más, como poco, para no quedarnos cortos. Ya pesamos, pues en la balanza, que ya ha salido antes. Muchas veces hace falta calor y agitación o solamente agitación, ¿vale?
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siempre que calentamos hay que agitar y en nuestro laboratorio lo hacemos con el mechero
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o también si no hubiese mechero para todo, no funcionase, no hubiese el tipo de para
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todo, también podemos usar la casca de todo. Y después, si así lo ponen la etiqueta,
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que suele ser también lo más frecuente, hay que llevarlo al autoplado. Si es un medio
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sólido se lleva en el frasco, en donde lo he preparado. Todo esto siempre lo preparo
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en frascos tipo ISO, que son resistentes a las temperaturas que va a alcanzar esa preparación
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y que va a alcanzar el autoclave. Pero si es medio líquido, primero lo reparto. Si
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es cierto que en algunos laboratorios no trabajan así, sino que no lo reparten y lo reparten
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luego. Entonces, habría que tener todo el material estéril para luego incluir la probeta,
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la pipeta, lo que necesite. Entonces, para evitar eso, en nuestro laboratorio hemos acordado
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que se reparte antes y luego se mete en el autoclave. Se puede hacer perfectamente de
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la otra manera. Si a alguien le toca hacerlo y lo quiere hacer de la otra manera, tendría
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que meter en el autoclave, pues, todo este, ¿vale? Los tubos donde vaya a utilizar, la
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pipeta que vaya a utilizar para repartirlo, todo. En el fondo, muchísimo más fácil.
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Vale. Aquí os he puesto todo resguardito con las técnicas de recuento porque lo que
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os he puesto o lo que he hecho mayor hincapié cuando os he contado antes los recuentos es
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células viables, ¿vale? Pero también hay otras formas de recuento, otras técnicas
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de recuento y ahí os la he puesto, ¿vale? Por último, y no menos importante, tener
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en cuenta, bueno, los útiles de siembra, os he puesto ahí el dibujito malamente, ¿no?
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Que tengáis que saber cómo se usan esos útiles y cómo se usan, cómo son, describirlos.
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Yo puedo pedir que me describáis una siembra por escrito, ¿vale? Entonces, bueno, ahí
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si me hacéis un dibujito, pues también os ayuda a lo mejor o no, no es necesario que
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hagáis un dibujito, pero tenéis que explicarlo con palabras. Y digo eso, que por último
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y no menos importante, os cuento todos los referentes a desinfección y esterilización,
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que hablamos en su momento del calor húmedo y el aparato que más se usa es el autoclave,
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el calor seco, que es a las llamas, aunque también puede ser en un horno, las radiaciones,
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por ejemplo, y los métodos químicos, como puede ser la utilización de hipotrólitos
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de sodio o de alcohol, que son los más habituales, aunque también hay más, ¿vale? Y creo que
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con esto he acabado el repaso del módulo. ¿Tenéis alguna duda o queréis que amplíe
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alguna cosa. Lo tenéis ya colgado. Si me he acordado de ponerlo en abierto, ya está abierto,
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lo he hecho antes, ¿vale? Lo esperamos a hacer. O sea, un momento, antes que está trabajando un
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poco la videoconferencia, a las seis y media, cuatro, lo he abierto, ¿vale? O sea, que ahora
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ya cuando… No, más tarde, cuatro y media, por lo menos. Ahora cuando lo acabéis, lo vais a
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entendido, ¿vale? Ya digo, no está perfecto, lo siento, pero no me da mucho más de sí
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la vida. No está completo del todo, o sea, que nadie me diga, bueno, ¿cómo es que no
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estaba en el esquema? No, vale. Es un intento de ayudar a estudiar, pero no es que esté
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100% bien ni 100% completo, ¿vale? Pero ya os lo he explicado un poquito, ¿vale? ¿Alguna
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duda más? Bueno, yo espero que os ayude, ¿vale? Es mi intención. ¿Qué ahora tenemos
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que hacer, que me acuerdo. Ah, ahora los casos prácticos. Bien, los casos prácticos. ¿Tenéis
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alguna duda de los casos prácticos? ¿O voy haciéndolo todo o qué me decís? En principio…
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Sí, ahora llego. También lo he visto justo antes… Te he contestado en el foro, pero
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ahora mismo… O sea, pero justo antes de empezar, no te preocupes, te voy a explicar,
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te lo explico ahora también. No, no, no te preocupes. Ahora mismo llego ahí y te explico
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por qué. Tanto tú como yo tenemos razón, ¿vale? Ahora lo vemos. Lo que sí que quiero
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hacer hincapié en lo que está también haciendo hincapié en el esquema, en cómo damos los
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resultados de los recuentos. Y eso va a ir lo de tu pregunta, Rosa. Si no nos dicen lo
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contrario, en un análisis de aire hay que darle un UCC por metro cúbico. Por eso yo
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he puesto como subrayado esta información que no tengo que darla, ¿vale? Es decir,
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que en el examen yo ya no voy a darla, ¿vale? Es decir, si yo te digo, indica el resultado
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del recuento, es suficiente. Tú tienes que saber que lo quiero en un EFC por metro cúbico
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y no por litro, no es que lo quiera yo, es que así es como hay que dar los resultados
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cuando se analiza ahí, ¿vale? Pues me imagino que una vez que ya sabéis que tenéis que
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pasar esos litros a metros cúbicos, pues no habréis tenido problema en este ejercicio.
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Otra cosa que tampoco tengo que indicar, si lo que se ha hecho es un análisis con una
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placa RODA, que son estandarizadas, que tienen 25 centímetros cuadrados, el resultado se
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tiene que dar en un FC partido por 25 centímetros cuadrados sin dividir. Es decir, que si yo
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he encontrado ocho colonias, esas ocho colonias están en 25 centímetros cuadrados. Y así
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lo expreso cuando digo 8UFC barra 25 centímetros cuadrados. No divido 8 entre 25, cuando es
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ROA, ¿vale? Y ahora vamos a lo que me preguntaba. Dime. No, sí y no, ¿vale? Puede que en el
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examen práctico va a haber casos prácticos, pero en el examen de teoría yo te puedo poner,
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porque estos son muy sencillos, ten en cuenta que llevan una operación súper sencilla,
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esto no lleva ni operación, segundo, ¿vale? Yo te puedo poner este enunciado como pregunta
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tipo test, ¿vale? Y dejarte una rayita para que tú me escribas 8 UFC partido por 25 centímetros
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de altura, ¿vale? O sea, que sí hay ejercicios muy cortos y muy básicos dentro del examen
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de teoría. O sea, teoría también es, yo he dado en teoría lo que es una placa roda
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y he dado en teoría lo que es, que tiene 25 centímetros cuadrados. Entonces, yo para
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constatar que tú sabes eso, yo lo puedo poner, dime cuántos centímetros cuadrados tiene
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una placa roda, lo puedo poner así, o dime cuál sería el resultado del recuento después
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de hacer esto. ¿Vale? Ya, estos ejercicios así, sencillitos, sí, que no requieren que
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no expliquéis nada y que sería o marcar la respuesta correcta si tenéis más de una
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o poner el resultado si lo que tenéis es una raíz, ¿vale? Nunca en esos casos lo
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que no me tendría que poner es el desarrollo ni explicar por qué lo hacéis de una manera
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o de otra. Pero sí pueden caer ejercicios de aplicación directa de la teoría en un
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examen de teoría, ¿vale? Vale. Y este otro, que es la pared interna, aquí se han sembrado
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0,5 mililitros, pero se había recogido todo el contenido de lo que podía haber en una
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superficie de 3x3, o sea, de 9 centímetros cuadrados, se había recogido en 5 mililitros,
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¿vale? Por eso lo primero es hacer ese cambio. Aquí me falta una rayita, pero es que no
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sé por qué no la he hecho, ¿vale? 8 entre 0,5 y por 5, ¿vale? Serían 80 UFC. Eso es
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que tenemos en 5 mililitros, ¿vale? O lo que es lo mismo en la superficie muestreada
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que eran 9 centímetros cuadrados. Si yo no hubiese dicho unidades, sí que tendría que
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hacer, como bien decía Rosa, 80 entre 9, que creo que era 8,8, y eso sería el resultado
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de UFC por centímetro cuadrado. Pero es que será el caso que aquí os he dicho que merece
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el resultado en UFC partido por 9 centímetros cuadrados. Es decir, que me lo ofrecéis con
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estas unidades. Por tanto, ese 80 que me ha salido, como son los que corresponden a 9
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centímetros cuadrados, el resultado que hay que dar es este, ¿vale? Porque yo pido que
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me lo deis en estas unidades. Si no me hubiese pedido un…, veis que en este caso no lo
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he subrayado. Esto, por supuesto, es porque en este caso yo lo estoy pidiendo así, porque
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hay veces que se pide así, ¿vale? Pero no tenéis que saberlo, porque además la plantilla
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puede ser de 3x3, de 10x10 o de lo que sea. Si yo no pido unas unidades concretas, sí
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tendríais que haber dividido 80 entre 9 y dármelo en UFC partido por centímetro cuadrado,
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porque si no digo unidades, en superficie siempre es UFC partido por centímetro cuadrado,
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salvo que se pida lo contrario, por eso lo he puesto queriendo, ¿vale? El protocolo
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o lo pida así, como he puesto en este ejercicio 3, o que sea una placa Rodak, que como es
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Rodak ya se sabe que tiene que ser por 25 centímetros cuadrados. Hay veces que, imaginaros
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que estamos viendo la superficie de una tabla de cortar, a lo mejor se ha mostrado la tabla
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entera de cortar. Entonces, hay que darlo en un FC por tabla de cortar, ¿vale? Pero
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eso es así. Dime. Sí, así tienes que expresarlo. Si no se te dice lo contrario, así tienes
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que expresarlo y presentarlo, sin dividir y poniendo el 25, ¿vale? Yo siempre os digo
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lo genérico y esto es lo genérico, esto es lo que funciona y cómo se hace en muchos
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sitio, a no ser que en el sitio X os digan que lo ofrecéis, aunque sea el análisis
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hecho con una placa roda, si os lo piden en un FC por centímetro cuadrado, vosotros hacéis
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caso. Pero cuando nos pidan unas unidades concretas y en el análisis se ha de utilizar
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una placa roda, entonces sí tienes que saberte que tienes que darlo como está dicho aquí,
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en un FC partido 25 centímetros cuadrados, sin dividir, ¿vale? No caigáis en el error
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que a veces alguno hace, de dividir y luego además ponerme el 25. Entonces, estaría
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doblemente menos, ¿vale? No se divide, el 8 no se divide entre 25, se deja el 8 y se
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deja el 25, ¿vale? Si dividís, ya el resultado sería UFC por centímetro cuadrado, pero
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en roda no se divide, ¿vale? En cambio, en el 3, 0, porque se está pidiendo que me lo
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deje expresado por 9 centímetros cuadrados. Si no se hubiese pedido, dividiríamos 80
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entre 9 y se queda como unidad UFC raya centímetros cuadrados. No vale dividir y poner el 9, eso
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estaría doblemente mal, o doblemente no tiene por qué. En este caso sí, porque lo pido
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así, pero si no lo hubiese pedido en estas unidades, como tienes que expresarlo en UFC
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centímetro cuadrado, dividís y ya el 9 no aparece, ¿vale? Digo, imagínate que no aparece
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la frase última que estaba buscando para poder escribir, pero aquí no me deja escribir.
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Imagínate que yo no te pido, no está escrito la última frase. Digo simplemente dar el
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resultado, ¿vale? Y no te tengo puesto de UFC por 9 centímetros cuadrados. Vale, pues
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tú harías la operación primera la misma, 8 UFC entre 0,5 por 5. Y tú sabrías que
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tienes 80 UFC en los 5 mililitros, por lo que es lo mismo en la superficie muestreada
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que han sido 9 centímetros cuadrados. Si yo no te he dicho unidades, tú me lo tienes
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que pesar en UFC partido por centímetro cuadrado. Por tanto, tendrías que dividir, ¿vale?
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Tendría que dividir 80 entre 9 y saldría 8,9 UFC partido por centímetro cuadrado.
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Ese sería el resultado que tendría que darme.
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8,89 partido, o sea, UFC partido por centímetro cuadrado.
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¿Entendido?
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Vale, pues venga, pasamos al siguiente. Este es un análisis cromogénico, ¿vale? Que lo
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tenéis contado en el tema de análisis de agua, porque es el que hay que utilizar de
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forma oficial para la recuenta de coliformes y echerichacobos. Entonces, se supone que
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se han sembrado 20.000 litros de una muestra de agua de lavado de una industria. De forma
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genérica antes he dicho que suelen ser 100, pero hay veces que se utilizan 50. Si la filtración,
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por ejemplo, es muy lenta, pues en vez de 100 se puede hacer 50. Si no dicen nada, nosotros
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100, ¿vale? Pero si os han dicho 50, pues son 50. Bien. Y pone, escribe el resultado
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de los recuentos en las unidades adecuadas. Veis aquí ya no he puesto unidades. Yo he
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puesto esta nota subrayada, ¿vale? Que también debéis saber vosotros, que el agar cromogénico
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es específico o selectivo para coliformes, ¿vale? Entonces, las colonias que crecen
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se tienen que considerar coliformes. Las colonias que crecen, tanto las rojas, como las azules
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y violetas. Vamos a llamarles rojas y azules, para no decirlos a nadie. Entonces, todas
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las colonias, tanto las rojas como las azules, se consideran coliformes. Siempre va a tener
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este medio pueden crecer a veces colonias con otros colores. Se ignoran, ¿vale? De
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hecho, si yo pongo un caso práctico, no pongo eso, ¿vale? Os he puesto aquí rojo y azul,
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¿vale? Que son las que me dicen que son coliformes. Y luego, en concreto, las azules son coliformes,
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pero son de Echerichia coli, porque la Echerichia coli es un coliforme, ¿vale? Pertenece al
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grupo coliforme. Entonces, yo puedo decir que hay dos colonias que pertenecen a Cherichia
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coli, y contando todas, las rojas más las azules, pues tengo los coliformes totales,
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¿vale? Entonces, tengo como resultado experimental dos colonias azules y nueve colonias rojas,
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y como todas las colonias sumadas, las azules y las rojas, son coliformes, yo tengo que
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decir que tengo de coliformes 11 colonias. Entonces, lo que tengo que hacer es expresar,
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como me dicen que lo expreso en las unidades adecuadas, esas son coliformes partido por
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100 mililitros. Pero como yo lo que he muestrado son 50, pues divido entre 50 y multiplico
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por 100. Entonces, tengo 22 UFC de coliformes por 100 mililitros. Y haría lo mismo, pero
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para Echerichia coli, que solo son dos, y el resultado sería ese. ¿Alguna duda?
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Otra cosa importante, eso es como igual que en bachillerato se exige que se escriba sin
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falta de ortografía, pues ya entiendo que vosotros no tenéis falta de ortografía y
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yo no la voy a tener en cuenta si alguno tiene alguna falta, pero sí que tengo en cuenta
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la falta de ortografía en microbiología, que es escribir mal el nombre de la bacteria,
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Si tenéis que escribir un nombre de la bacteria, el género va con mayúscula y el aspecto es con minúscula. Hay veces que el género se acorta con una sola letra, como aquí he puesto E.
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Esto se puede hacer, pero solo si ya antes se ha escrito de alguna forma entera. Tenemos que escribirlo bien y si puede ser en cursiva. Aquí no he puesto cursiva porque este tipo de letra no me lo permitía, pero es como hay que escribirlo.
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En el examen, como cursiva, a lo mejor no se entiende, bueno, pues lo podéis subrayar, ¿vale? Pero sobre todo, en lo que más hago hincapié, por favor, género, siempre con mayúsculas, especies, que sería coli, coli es lo que te dice qué especie es, con mi.
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Bueno, aquí, bueno, esto es un ejercicio, ¿veis? Esto, por ejemplo, ya no sería…, esto sería más tipo caso práctico, ¿vale? Y no sería preguntable en un examen de teoría de preguntas cortas, ¿vale?
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Entonces, aquí veis que sobre una misma cosa se hacen varias preguntas. Yo puedo describir como caso práctico un análisis determinado, algo que se ha hecho en el laboratorio y los resultados que a lo mejor se pueden haber obtenido.
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Y sobre ese caso que yo redacto, ¿vale?, en el que se supone que está toda la información, yo voy haciendo preguntas. Esto es un ejemplo de caso práctico, ¿vale?, un tema práctico, práctico del todo, porque no pregunto, pues, cómo se hace una siembra, que eso puedo preguntarlo, qué es lo que hay que meter en el autoclave, en fin.
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Entonces, bueno, tenéis ahí la etiqueta. En este caso, vale, está hecho con el medio Chapman que ya no se usa para agua. Entonces, yo no preguntaría para qué microorganismo se están buscando, ¿vale?
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Si os lo preguntaría con otros medios de los que sí hemos dado estudiante, ¿vale? Entonces, solamente el medio Charman es específico para coliformes, no tenéis que saberlo porque ya digo, se usaba mucho antes, pero bueno, seguro que lo encontráis todavía, se sigue usando, en nuestro laboratorio todavía lo tenemos, ¿vale?
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Pero yo no haría la primera pregunta si no es uno de los medios que hemos nombrado en los apuntes. Lo que pasa es que sí que lo he dejado como ejemplo, porque como es uno de los medios que después del autoclave requiere la adición de otra sustancia que no se adiciona desde el principio porque es termolabi, pues me ha parecido bien dejarlo.
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Pero sí que es verdad que tendría que haber quitado la primera pregunta, que no tendría en por qué saberlo. Bien, entonces pone que hay que preparar nueve placas. Bueno, pues como siempre consideramos 15 o 20. Yo lo voy a dar por bueno, tanto si decís 15 como si decís 20, pero ya os he dicho a todos que en el OPDB damos puestos como estándar 15.000 litros.
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Como lo hemos dicho tantas veces, pues, imagino que lo sabréis. Pero, ¿qué pasa? Que puede que a lo mejor aterrice alguno de vosotros, que no haya venido al laboratorio, que no me haya escuchado nunca y que en su laboratorio siempre lo haga con 20. Lo doy por bueno, porque 20 también está bien, pero cantidades diferentes ya no.
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¿Vale? Nosotros usamos 15. Bueno, pues, entonces, habría que preparar los 60.000 litros. Ahí ya he puesto el exceso. Cualquier exceso… O sea, aquí no hay una respuesta única. ¿Vale? Si me ponéis 155, incluso 145, 150. 145 sería muy poco. Si me ponéis 140, pues, vale.
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Pero bueno, siempre tenemos un intervalo que vamos a considerarlo correcto. Y siempre el volumen a preparar, intentar que sea múltiplo de 5, ¿vale? Para facilitar luego la medida con provecho.
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Salen los gramos que hay que pesar. Y bueno, 8,992, me da igual si pesáis eso o pesáis 9, me da igual si es de donde hay. Con que me digáis una cifra significativa está bien. Pero bueno, que no voy a entrar en quitaros notas si no me da de donde hay.
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Y luego ya dice que hay que echar, según las instrucciones, dos mililitros por cada litro, ¿vale? Por tanto, como solo tengo que preparar 160, pues echo la cuenta y sale que tengo que echar 0,32 mililitros, ¿vale?
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Y se añade después de que ha pasado por el autoclave y que se haya atemperado, ¿vale? Y para coger esa solución, pues, ¿qué se os ocurre? Pues, una micropipeta, ¿veis? Yo puedo decir cómo hacemos esta… o sea, poneros un procedimiento y cómo hacemos esta tarea.
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Entonces, ahí sí, en esos casos prácticos, tiene que ser lo más detallado posible. Yo comprendo que hay cosas… Si yo digo, yo qué sé, pues, ¿qué hago para dar clases? Mi procedimiento para dar clases. Cuéntamelo.
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yo a lo mejor a mi ventana
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no digo, pues, abro la puerta
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y entro, es lo que hago para dar clase
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tengo que entrar en un aula, lo primero
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y no se me ocurre decir eso, lógicamente
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eso no hay que decirlo, o sea, que nadie me diga
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abro la puerta del laboratorio y entro, ¿vale?
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Pero hay cosas que damos
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por sabidas o damos por hechas
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pero que yo sé de sobra que si estáis
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físicamente haciéndolo, lo vais a hacer
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bien y lo vais a tener en cuenta
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pero cuando hay que escribirlo
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pues muchas veces se nos olvida
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Entonces, ahí os tengo que pedir que seáis lo más detallistas posible, ¿vale? Que luego lo leáis. Y mi consejo es que cuando lo veáis, digáis, a ver si una persona que no sabe puede hacer esto, ¿vale? Entonces, eso os da pie a poder contar algún detalle que a lo mejor no habéis contado, pero que es importante que contéis, ¿vale?
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Entonces, bueno, pues se usan las micropipetas como una punta de pipeta estéril, limpia, claro, y se añade al medio en las inmediaciones del mesero, ¿vale? Porque es como habitualmente trabajamos. Y luego se homogeniza, claro, hay que agitar y ya tendríamos el medio listo para poder ser repartido en los clavos, ya se repartiría, ¿vale?
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Bien. Entonces, ¿cómo tiene que ser? Eso también no lo tengo puesto en el enunciado, no entiendo. ¿Vale? Se encuentran siete colonias y somos SIDASA negativos. Y pone, la prueba de SIDASA negativo es la prueba confirmativa para coliformes.
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Este tipo de cosas, si yo no las he contado, si las pongo. Si son cosas que se supone que sabemos, no las pongo. Pero aquí veis que está sin subrayar porque no tenéis por qué saber eso, no mucho menos. ¿Vale?
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Entonces, pues nada, como se han filtrado 100 mililitros y se encuentran 7 colonias,
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pues ese ya resulta, veis que no divido, lo dejo expresado y ya está.
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Que se encuentran dos colonias de la 7 y 2 positivo, que son las que son del coli,
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pues pongo eso, 2 UFC de coli por 100 mililitros.
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¿Vale? ¿Alguna duda?
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¿No?
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Bueno.
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Y ya por último, creo que es el último, el de la Galería ATI, ¿vale?
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Pues esto es solamente para que veáis lo fácil que es hacer un caso de esto.
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Y siempre, tanto en la Galería ATI como en los enterotubos, nos dan una plantilla,
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esto lo he sacado de la plantilla, ¿vale?
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Y entonces lo que nosotros tenemos, está sacado lo azulito, ¿vale?
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Lo que está así con azulito y los nombres de las pruebas.
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Pero yo luego he escrito que sería lo que vosotros tendríais que hacer si estáis leyendo el resultado de una prueba en una galería. Se va poniendo el positivo y negativo en función de los colores o de lo que yo observe en esa galería siguiendo las instrucciones.
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Entonces, se va poniendo por los positivos y los negativos. Y el 1, 2 y 4 también están
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puestos en esa plantilla. Y yo lo que tengo que hacer es sumar solamente el número correspondiente
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a cada positivo de cada triada. Luego aquí, como hay dos pruebas negativas y solo hay
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una positiva que pone que es 1, pues yo pongo 1. Aquí, como hay dos pruebas positivas y
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una con un 2 y en otra un 4, tengo que sumar el 2 y el 4 y el número sería el 6, ¿vale?
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Por supuesto, este código me lo he inventado, ¿vale? Pero, bueno, para que supiese cómo
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hacerlo. ¿Queda todo negativo? Bueno, pues entonces la suma va a ser un 0, pues así,
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¿vale? Y así sale el código. Luego ya lo que había que hacer con este código es ir
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a buscarlo en la tabla, ¿vale? O bien se tiene impresa en el laboratorio o se tiene
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en internet. Y al lado aparecería el nombre de la bacteria. O grupos bacterianos, como
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la bacteria, si se nos reúne. Alguna pregunta de galerías ATI o enterotubos, que sería
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igual, ¿eh? Los enterotubos es igual. Y además os he subido un vídeo de los enterotubos,
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acá ahí lo habréis visto. El que cada tubo se marque como 1, 2, 4 o 4, 2, 1, eso depende
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de la casa comercial, de lo que quiera hacer, pero siempre te lo indica. Entonces, como
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está indicado, pues ya está, no hay problema. Y este ejercicio simplemente era para recordar
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un poquito lo que era el plan de museo, ¿vale? Diciendo un M, un C, un M en minúscula y
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un M en mayúscula. Y bueno, solamente que si yo os pido esto, que tengáis en cuenta
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todas las opciones, que es lo que siempre pido, ¿vale? Indicando todas las opciones
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que se pueden dar. Es decir, que ustedes se ponen en situación, imaginaros que estáis
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analizando el bloque y qué pasa con esas cinco muestras que estáis analizando. Que
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sale una bien, que salen dos bien, que salen tres bien, que salen cuatro, que salen cinco,
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¿vale? Según los que salgan bien o mal, ¿vale? Pues así se toman las decisiones.
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Entonces, lo bueno es contar todas las decisiones, o sea, todas las opciones que nos pueden dar
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y que pasaría en cada caso para aceptar o rechazar. Y yo pienso no que acababa y no
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acababa, que me queda otro. Bueno, pues este tampoco creo que tenga mayor ciencia. Si hacer
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os menciono que muchas veces se habla de dilución menos 1, se pone así, realmente significa
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10 elevado a menos 1, ¿vale? Seguro, seguro, seguro que en un examen u otro, en teoría
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o en práctica, hay un ejercicio para que aplicáis esto, ¿vale? De haber sembrado diluciones
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y contar. Entonces, seguro, ya sabéis unas preguntas seguras, ¿vale? Y los errores que
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más cometéis es que cuando ponéis aquí la dilución no le cambiáis de signo, ¿vale?
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En la fórmula, recordad que tenéis los apuntes, es número de colonias contadas por el factor de dilución, que es el inverso de la dilución. Y 1 partido por 10 elevado a menos 1 es 10 elevado a 1.
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Si no queréis pensar en matemáticas, simplemente aquí se pone la dilución que se ha utilizado con signos positivos. Y no olvidéis siempre dividir entre el volumen que se siembra, que eso sí que tiene que estar indicado en el protocolo. No tenéis que saber. No siempre es 1. A veces es 1, a veces es 0.1, a veces es 0.5, a veces es 2, como en este caso.
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Y las unidades se ponen por gramos si la muestra es sólida. Y por mililitros si la muestra
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es líquida. Esta unidad está contenida en el factor de dilución, por eso sale. Y bueno,
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pues si sabe que es superior al valor máximo permitido, pues el producto está fuera de
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norma, no se cuelga bajo norma. ¿Vale? ¿Alguna duda de los casos prácticos? Voy a detener
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En la grabación, así.
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- Raquel M. B.
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- 30 de mayo de 2024 - 12:23
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