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Medios de cultivo - Contenido educativo

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Subido el 7 de febrero de 2023 por Francisco J. M.

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Hoy vamos a hablar sobre los medios de cultivo, que son básicamente los sitios donde vamos a meter las bacterias para que crezcan, ver colonias y poder identificarlos después. 00:00:00
Bueno, primero, ¿qué es un medio de cultivo? Pues un medio de cultivo es básicamente una solución a cosas, es agua, que les metemos toda la comida que necesitan, que son nutrientes tanto esenciales como no esenciales, con factores de crecimiento y otras cosas. 00:00:12
eso al final es como una sopa 00:00:25
entonces tenemos que meterle también 00:00:28
un agar, un gelificante que es el agar 00:00:29
para que tenga esa consistencia 00:00:31
y se pueda gelificar 00:00:33
a ver, la posición del 00:00:35
medio de cultivo va a variar 00:00:39
en función de lo que queremos cultivar 00:00:42
luego os hablaré de los diferentes tipos 00:00:43
pero que básicamente 00:00:44
por ejemplo, no es lo mismo 00:00:46
una bacteria que vive en el océano 00:00:50
que vive en agua con una bacteria que vive en tierra 00:00:53
Entonces tenemos que tener diferentes nutrientes, entonces hay que tener eso en cuenta. 00:00:55
Así que es verdad que hay unos microorganismos como el Mycobacterium leprae, que es el que provoca la lepra, 00:01:00
y el Treponema quadridum, que es el que provoca la sífilis, que todavía no se han podido aislar en un medio de cultivo. 00:01:06
O sea, sabemos que existen, pero todavía no se han podido cultivar, ¿vale? 00:01:12
Bueno, aquí he puesto dos fotos. Este es el hongo Sporotrix. ¿Dónde estoy? 00:01:16
que, bueno, la voy a imitar a poco, pero casi nos va a salir. 00:01:22
Y este, pues, es porque es llamativo, porque es una bacteria que es fluorescente, 00:01:25
entonces, al aplicar otra violeta, pues, se define esa cosa. 00:01:32
Vale, tipos de medios de cultivo. 00:01:37
Entonces, en función de la composición, se pueden diferenciar los tipos. 00:01:39
Vamos a hacer los medios de cultivo, que son definidos sintéticos, 00:01:42
que vienen con un porcentaje determinado, 00:01:46
O sea, es 50% a lo mejor un corsa, por ejemplo, y un mento. 00:01:49
O sea, se sabe exactamente la cantidad que tiene. 00:01:53
Y luego están los complejos, que es como que no sabemos lo que tiene, 00:01:56
que metemos ahí sangre, pero no sabemos lo que tiene realmente. 00:01:59
Es como, pero sabemos que hay que retener ese sitio. 00:02:01
Luego están, en función de la utilización, los generales, 00:02:04
que son los que traemos hoy, que son el FSA y el DHA. 00:02:07
El DHA, por ejemplo, es Brain, Heart, Algarve. 00:02:12
O sea, es cerebro en corazón, o sea, es como un caldo de eso y ya está. 00:02:16
Eso lo general es donde crece la mayoría de microorganismos, o sea, casi todos crecen ahí. 00:02:21
Luego los selectivos son los medios especiales donde es como que permite el crecimiento de unas bacterias, 00:02:26
pero las otras las inhibe, o sea, no crecen. 00:02:34
Entonces como se utilizan selectivamente para aislar un tipo de bacteria. 00:02:36
Luego diferenciales, que es como para diferenciar si un microorganismo es lactosa positivo, bueno, para diferenciar cosas. 00:02:41
Luego del crecimiento, pues como que permite el crecimiento, como más el crecimiento de una bacteria que la de otra. 00:02:49
O sea, ambos crecen, pero una crece más, esta que más. 00:02:55
¿Por qué esa es la cosa? 00:02:59
Básicamente también se puede simplificar en función de tipo. Nosotros trajimos placas Petri con agar, son sólidos. 00:03:02
También se puede trabajar en líquidos, en tubos de ensayo y semisolidos, que es como se mete agar pero poco, entonces como semisolidos. 00:03:12
Este es un ejemplo de un medio, Semedioclet, que no sé por qué tampoco... 00:03:23
¿Le das un toque? 00:03:27
¿Un toque? 00:03:28
Un toque. 00:03:28
Ah, luego. 00:03:29
Vale, pues el medio es un ejemplo de esos medios diferenciales, 00:03:30
pero también es en este caso no selectivo porque crece a todo el mundo, 00:03:34
o sea, todas las bacterias que se meten ahí crecen, 00:03:38
pero sí que se puede diferenciar entre las lactosa positiva y lactosa negativa 00:03:43
en función del color. 00:03:45
Por ejemplo, las azules son diferentes a las amarillas, 00:03:47
entonces se diferencian ahí el tipo de metabolismo que tienen. 00:03:49
Por ejemplo, tenemos una bacteria que se llama Escherichia coli. Escherichia coli, como todo el mundo la conoce, está en todos lados, pero hay una como prepa diferente de Escherichia coli, que es la que causa patógenos, que es la que más nos provoca enfermedades. 00:03:52
y ese medio que está 00:04:13
mencionando Astrapes 00:04:16
es el que se utiliza habitualmente 00:04:18
en un análisis microbiológico de orina 00:04:20
si alguien ha tenido cistitis alguna vez 00:04:22
y ha ido y le han pedido una muestra de orina 00:04:24
y han hecho un cultivo 00:04:27
aunque no le hayan enseñado el cultivo 00:04:28
pues han sentado una placa probablemente de medioclet 00:04:29
es un medio en el que crecen 00:04:32
todos los microorganismos que típicamente causan infecciones de orina 00:04:33
Estas son 00:04:37
placas que hemos hecho nosotros 00:04:40
en prácticas de microbiología, bueno, exactamente ella, y aquí se puede diferenciar entre bacterias 00:04:42
aerobias y anaerobias, aquí con medios de iconos que enseñé antes, esto huele muy mal, 00:04:50
ese clostridium, pues eso huele mal, y este es el que lo paramos, o sea que al final hay 00:04:56
diferentes tipos. 00:05:04
El clostridium, igual que el escherichia coli, es un organismo de agüita intestinal, entonces 00:05:06
cuando fermenta produce volatiles que huelen más mal. 00:05:11
Vale, esto os lo pongo más que nada para que veáis el tema de las resistencias. 00:05:16
Al final eso es lo que tenéis que hacer vosotros, luego lo vais para identificar. 00:05:21
Cada uno de estos puntitos es un antibiótico. 00:05:25
Entonces en la placa nosotros lo metemos en la bacteria y vemos si hay un halo de resistencia. 00:05:29
Esto es un halo de inhibición. 00:05:36
Eso significa que la bacteria en este sitio no crece. 00:05:44
¿Por qué? Porque la está inhibiendo el antimicrobial que tenemos aquí. 00:05:47
¿Qué pasa? Pues que si desarrollas resistencia, por ejemplo, a este antimicrobial, sí que va a crecer en esta zona. 00:05:51
Y eso es lo que hace la diferencia entre una bacteria resistente o no resistente. 00:05:58
Aquí vemos que es resistente a este pero no tanto a este. 00:06:01
qué tal es que aquí, sé que eres sensible a todos. 00:06:04
Claro, esto es una placa Petri, son las que vamos a usar ahora mismo. 00:06:09
Nosotros en nuestro experimento, bueno, pues veis que tiene el medio sólido, el agar, 00:06:13
con todos los nutrientes necesarios para que crezcan los microorganismos, 00:06:18
pero bueno, pues no hay nada, no hay toda esta guarrería. 00:06:22
Esto es el crecimiento microbiano. 00:06:25
Cuando siembras ahí un microorganismo, al principio no lo ves, 00:06:27
Pero después de jugarlo 24 o 48 horas, pues come, crece y desarrolla algo que ves macroscópicamente. 00:06:30
Pueden ser colonias aisladas, que es lo que queremos conseguir hoy, o puede ser un césped. 00:06:37
Lo que llamamos nosotros un césped microbiano, es decir, microbios invadiendo toda la planta. 00:06:42
Estos son pequeños discos de celulosa, como de cartoncito, ¿no? 00:06:47
Son discos de papel de filtro. 00:06:52
Y esta técnica se llama antibiograma y esto es lo que se hace en los servicios de microbiología en los grandes hospitales a partir de los microorganismos que aíslan de los pacientes para ver si el microorganismo es sensible o resistente a los antibióticos. 00:06:54
Y lo que lo determina es precisamente el diámetro de este halo de inhibición. 00:07:11
Y esto al fin y al cabo, este antibiograma que está estandarizado en las comisiones internacionales, 00:07:16
que tiene la normativa, el protocolo y tal, para que salga el mismo resultado aquí que en Tokio o en Atlanta, 00:07:20
esto es exactamente el mismo tipo de ensayo que vamos a hacer nosotros, 00:07:28
pero en lugar de sobrediscos, lo que vamos a poner ahí es bichos vivos, 00:07:33
para ver si alguno de ellos, de casualidad, es capaz de producir este fenómeno de antibiosis. 00:07:35
Lo vamos a ver así. 00:07:42
Hacía modo de anécdota, cuando tuve que hacer un antibiograma en práctica, 00:07:44
que salía mucho más a la definición en ácidos esenciales que en lejía y en alcohol. 00:07:48
Lo cual, estábamos haciendo una prueba de si los ácidos esenciales eran antimicrobianos 00:07:54
y si había más que la lejía y el alcohol. 00:08:01
Efectivamente, esto es una de las grandes maravillas de la naturaleza. Los aceites esenciales salen de las plantas, de lavanda, de romero, de cítrico, lo que sea. 00:08:03
Las plantas llevan evolucionando millones y millones de años para resistir infecciones por parte de bacterias y hongos y producen antimicrobianos no muy potentes, 00:08:14
son antibióticos, son antibióticos de sustancias 00:08:25
y están en los aceites esenciales 00:08:28
son muy ricos en ellas 00:08:30
las otras cosas que he mencionado ya son desinfectantes 00:08:30
no son antibióticos pero sí que son 00:08:34
compuestos que darían 00:08:36
este tipo de comportamiento 00:08:37
bueno, pues para que veáis 00:08:40
porque se ve muy chulo 00:08:41
simplemente como os he hablado 00:08:43
de medios de cultivo, pues introduciros 00:08:46
el medio que vamos a utilizar nosotros aquí 00:08:47
podríamos haber seleccionado cualquier 00:08:49
medio rico, que tuviera 00:08:51
todos los nutrientes necesarios para que crezca cualquier cosa. Pero, de hecho, el éxito 00:08:54
de este proyecto depende de que nosotros utilicemos un medio que les guste a microorganismos potencialmente 00:08:58
productores de antibióticos. Claro, a priori no lo sabemos. Entonces, lo que hemos utilizado 00:09:04
es un medio muy general y un medio que su composición es tripticasa soja. ¿Qué significa 00:09:09
esto? Pues básicamente sabéis que la soja, que es rica en proteínas, es un hidrolizado 00:09:15
de las proteínas de soja 00:09:23
como si hiciéramos una sopa de soja 00:09:25
y hidrolizaramos esas proteínas 00:09:26
entonces esto es un medio que es muy rico en aminoácidos 00:09:28
que son nutrientes esenciales 00:09:31
para los microorganismos 00:09:33
como fuente de nitrógeno, como fuente de carbono 00:09:35
es decir, que es un medio rico que tiene de todo 00:09:37
pero lo hemos diluido 10 veces 00:09:39
respecto a lo que se suele usar 00:09:41
este medio se llama TSA 00:09:43
lo hemos diluido 10 veces 00:09:44
porque los bichos del suelo 00:09:48
son muy poco exigentes 00:09:50
se llama oligotrofo 00:09:51
Es decir, como que no les gusta la comida en abundancia, se agobian. 00:09:53
Entonces es mejor dársela en pequeña dosis. 00:09:57
Y así además evitamos que los que son muy glotones nos invadan la placa muy rápidamente. 00:09:59
Y les damos margen a estos oligotrofos, a estos microorganismos que van a ser los que crecen despacio, 00:10:03
los que más nos interesan, les damos tiempo a crecer. 00:10:08
Entonces vais a utilizar TSA al 10%. 00:10:11
Inhalar. 00:10:14
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Francisco J. M.
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7 de febrero de 2023 - 23:44
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