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Procedimiento para la tercera sesión - Contenido educativo

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Subido el 15 de febrero de 2023 por Francisco J. M.

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¿Recordáis de qué son las ESCAPE? 00:00:00
Son las bacterias multiresistentes más importantes que tenemos ahora, o sea, son como la emergencia número uno, las que hay que encontrar es primero antidiabético. 00:00:02
Aquí tenéis los nombres, son Escherichia coli, Staphylococcus, a mí me suena más la... 00:00:17
Flexiera, Cervinomax, Sonomonas y Enterococcus. 00:00:24
Esta es de... 00:00:28
básicamente estas son asesinas 00:00:29
y estas no las vamos a traer aquí 00:00:32
no las vamos a usar 00:00:34
pero realmente 00:00:35
sí que estamos buscando antibióticos 00:00:39
para tratarlas 00:00:41
es que justo esto 00:00:43
es como 00:00:47
dirigido hacia animales 00:00:48
dice que los grupos de riesgo son 00:00:49
animales inmunocomprometidos 00:00:52
y animales hospitalizados 00:00:54
también aplica a humanos 00:00:55
son muy peligrosas 00:00:56
Vale 00:01:06
Perdona, es que he preguntado 00:01:08
si se puede pintar en la pizarra 00:01:11
pero yo decía 00:01:12
que soy muy antes del siglo XX 00:01:14
y pensaba que sí 00:01:15
Es guapo 00:01:16
Gracias. 00:01:24
No vamos a ver todas las noticias. 00:01:54
Aquí os adjunte. 00:01:57
Una noticia. 00:02:02
¿Qué era? 00:02:03
Bueno. 00:02:07
Era básicamente una noticia del diario donde decía 00:02:10
Mujer sin tener infección bacteriana resistente, gracias por el coronavirus. 00:02:13
Una mujer que estaba en el atentado de México o algo así. 00:02:17
No sé, como que se hizo heridas y esas heridas acabaron infectándose en el hospital por una de estas bacterias muy preexistentes y varias. 00:02:21
El caso es que se probaron algún tipo de antibióticos, tal y cual, nada funcionó y al final se utilizaron fagos. 00:02:30
Fagos son virus que infectan a bacterias. 00:02:39
Entonces, gracias a esos virus se pudieron meter en las bacterias y las bacterias acabaron guisadas, o sea, muertas y explotaron. 00:02:42
Entonces, esto es solo para deciros que nosotros estamos intentando incorporar antibióticos, pero también hay otras alternativas, que son por ejemplo los virus, que no son antibióticos, pero también lo podemos utilizar. 00:02:49
Nosotros no las hemos traído aquí, pero hemos traído otras cepas más seguras, que son más o menos parecidas, que son estas. 00:03:06
Por ejemplo, vais a trabajar con... 00:03:14
Bueno, la historia, no sé si tenéis alguna 00:03:16
pregunta concreta de este tipo 00:03:32
de bacterias, pero 00:03:34
bueno, la historia es que 00:03:36
a ver, para que no perdáis un poco 00:03:39
el norte, estas bacterias 00:03:40
genéticamente 00:03:42
han ido acumulando, desarrollando 00:03:44
os acordáis por aquellos procesos de transferencia horizontal de genes, etc., que veíamos el primer día, 00:03:46
pero también por mutación de los genes que codifican las dienas de los antibióticos. 00:03:52
Estas bacterias, este grupo escape, son una de las alertas que ha dado la Organización Mundial de la Salud 00:03:56
de que ya no tenemos, en muchos casos, aparecen cepas o aislamientos en hospitales de estas especies 00:04:02
que ya no podemos tratar. Entonces, por eso, en este proyecto estamos buscando nuevos antibióticos. 00:04:09
pero bueno, como os decíamos 00:04:15
también hay otras alternativas 00:04:18
otras líneas de investigación 00:04:20
y algunas muy muy famosas 00:04:22
y probablemente leeréis sobre ellas 00:04:24
y oiréis hablar sobre ellas 00:04:25
que es la fagoterapia 00:04:27
el uso de virus bacteriófagos 00:04:28
igual que hay virus que nos fastidian a nosotros 00:04:30
como el virus Marburg 00:04:31
que ahora hay un brote en Ecuador 00:04:33
o el ébola o el coronavirus 00:04:35
o lo que sea, o la gripe 00:04:37
pues también no hay ninguna célula 00:04:38
ninguna especie celular 00:04:41
en el planeta 00:04:43
que no sufra el ataque de varias decenas 00:04:44
de virus. O sea, cada ser 00:04:47
en este planeta tiene los virus 00:04:49
que le atacan. Pues igual estas. 00:04:51
Entonces, bueno, pues hay investigadores que se dedican 00:04:52
a aislar virus del entorno, pero virus 00:04:54
bacteriófago, virus que matan a las bacterias 00:04:57
para, sin 00:04:59
alguna infección, no puede ya 00:05:01
tratarse con antibióticos, utilizar 00:05:02
esos virus como 00:05:05
forma farmacéutica de alguna manera 00:05:06
para tratar a esos pacientes. Lo cual 00:05:08
es bastante difícil. Un antibiótico tú lo puedes 00:05:10
dar en una pastilla, o meter en sangre, en un caso grave y tal, pero estos virus son 00:05:13
más difíciles de manejar como fármacos, es más complicado. Pero hay varios casos 00:05:18
de éxito, de hecho hay un chaval de Valencia que tiene fibrosis quística, que es un problema 00:05:23
que no puede secuestrar a mocos, es una enfermedad de componente genético, pero eso le hace 00:05:28
susceptible a sufrir infecciones precisamente por bacterias como pseudomonas y tal. Y tiene 00:05:33
una micobacteria, la micobacteria es muy parecida a la tuberculosis, pero es una micobacteria 00:05:38
que una persona normal no le hace nada 00:05:42
pero él como tiene esas defensas alteradas 00:05:43
y le están tratando con fagos 00:05:45
y le han salvado la vida con fagos 00:05:47
con virus bacteriófagos 00:05:48
con un equipo de investigación que hay en Valencia 00:05:49
aislando virus bacteriófagos en el laboratorio 00:05:53
que saben que matan a esas bacterias 00:05:55
seleccionándolos y utilizándolos 00:05:57
por inhaladores para tratar su infección 00:05:59
o sea que son otras alternativas 00:06:02
lo que hacemos nosotros es buscar nuevos antibióticos 00:06:03
pero también hay otras alternativas 00:06:06
bueno, simplemente si alguien tiene curiosidad 00:06:07
Tanto cinetobacter como pseudohormonas son bacterias ambientales 00:06:10
Que existen en el ambiente, en el agua, en el campo, en todas partes 00:06:13
Pero son naturalmente resistentes 00:06:18
Y estas proceden de nuestra microbiota 00:06:20
Esta glopopus está en la faringe, en las mucosas 00:06:24
Este es de la caca, como dice aquí, paetium et de efe 00:06:27
Este es del enterobacter, del intestino, del intestino grueso 00:06:30
El enterocopus y el enterobacter, y no positivo o negativo 00:06:34
Los dos son entéricos, etc. 00:06:38
Entonces, claro, nosotros lo que hemos traído son unos primos suyos y ¿cómo vamos a trabajar? 00:06:40
¿Cómo vamos a trabajar en el laboratorio? 00:06:46
Quería poneros otro vídeo para que entendierais otra cosa, pero bueno, luego os lo pongo y ya pasamos al laboratorio. 00:06:49
Por eso había preguntado cómo pintar. Vamos a intentarlo. 00:06:54
¡Huevos de tránsito! 00:06:59
bueno, vosotros 00:07:00
vais a tener 00:07:06
tres placas Petri que os vamos a dar 00:07:08
y nuestra misión 00:07:10
buscar 00:07:14
nuestra pregunta es 00:07:15
¿hay bacterias aquí de las que tengo ya aisladas 00:07:17
en estas colonias, especialmente en las placas 00:07:20
que tienen menos colonias, las más diluidas 00:07:22
que vais a ver las colonias mejor y además no hay riesgo 00:07:24
de que se os laven unas con otras 00:07:26
paréntesis interesante 00:07:27
mirar en las placas que hay mucho mogollón 00:07:29
o si encontráis ya, hay algún 00:07:31
fenómeno de antibiótico. Muchas veces hay 00:07:33
una bacteria que lo está invadiendo todo y de repente 00:07:35
es que frena porque 00:07:37
una más pequeñita no la deja pasar. 00:07:39
Esa pequeñita, esa probablemente 00:07:41
está produciendo antibióticos. Estamos viendo 00:07:43
en directo un fenómeno de antibióticos. Mirar 00:07:45
todas nuestras placas en busca de esto porque 00:07:47
esa promete. Las demás no sabemos, 00:07:49
ya las probaremos, pero esa 00:07:52
desde luego, picarla porque promete. 00:07:53
Entonces, nuestra misión es 00:07:56
enfrentar la mayor diversidad 00:07:57
de microorganismos distintos 00:08:00
de nuestra muestra de suelo, aparte de 00:08:01
ver cómo es la diversidad del suelo que habéis elegido 00:08:04
estudiar, que es curioso, ¿no? 00:08:06
La diversidad microbiana, todos los bichos que han salido 00:08:07
y comparar los vuestros con los de vuestros colegas 00:08:09
para que veáis que hay diferencias, 00:08:12
que hay bichos que tiene uno, que no tiene 00:08:14
otro, etc. ¿Vale? 00:08:16
Entonces, lo que vamos a hacer es 00:08:18
coger estos escape, 00:08:19
de hecho, Claudia nos ha preparado 00:08:21
un experimento extra para 00:08:23
el grupo de Aranjuez, que no están atiendo a otros grupos de Micromundo, por eso vais 00:08:25
a tener tres placas distintas. En una de las placas vamos a sembrar un césped, y eso es 00:08:30
lo que os voy a explicar ahora cómo hacer, de un césped gran positivo, que tenemos dos 00:08:36
a elegir, los repartiremos por ahí a ver qué os toca. Uno es Cocuria, es un gran positivo 00:08:42
que las colonias son de color naranja, entonces se verá muy bien el césped naranja, y si 00:08:47
Y el otro es Bacillus subtilis. Bacillus subtilis es el gran positivo favorito de los investigadores que trabajan en gran positivos, en Bacillus gran positivos, organismo modelo en el que se ha hecho muchísima genética, muchísimas cosas, ¿vale? 00:08:51
y tendremos 00:09:05
ese va a ir a una placa, el gran positivo 00:09:07
que dejáis, o que os demos 00:09:10
en la otra placa va a ir un gran 00:09:12
negativo, vamos a tener bien 00:09:14
Acinetobacter baile, que es el 00:09:15
primo inofensivo del terrible Acinetobacter 00:09:18
baumani, que mata a muchísima gente 00:09:20
en las UCI del mundo 00:09:22
y vamos a tener Escherichia coli, pero no 00:09:23
un Escherichia coli productor de resistencia 00:09:26
sino uno de estos del laboratorio que utilizamos 00:09:28
para biología molecular 00:09:29
podemos coger uno 00:09:30
de ellos y ese va a ser nuestro gram negativo. Por tanto, ¿cuál es el experimento que vamos 00:09:34
a hacer? Ver si cada una de estas colonias distintas es capaz de inhibir el crecimiento 00:09:39
de un césped de un gram positivo y de un gram negativo. Y la tercera placa es el experimento 00:09:45
que nos ha preparado Claudia para ver si alguna de estas bacterias tiene también propiedades 00:09:53
antifúngicas, es decir, es capaz de producir un antibiótico que sea capaz de inhibir no 00:09:59
a una bacteria prokaryótica, gram positiva o gram negativa, que es lo que buscamos en 00:10:04
el experimento general de micromundo, sino a un hongo patógeno. En este caso ha traído 00:10:09
una cepa de cándida albarata, ahora se llama de otra manera, pero bueno, también es un 00:10:14
organismo que causa infecciones en personas inmunodeprimidas, inmunocomprometidas. 00:10:19
Entonces, ¿cómo vamos a proceder? 00:10:24
Pues veréis que en primer lugar 00:10:30
lo que tenéis que hacer es mirar la biodiversidad 00:10:32
os vamos a dar rotuladores 00:10:35
y vais a decir, venga, yo voy a elegir 00:10:36
15 colonias, ¿no? 00:10:38
Los voy a ir por detrás de mis placas 00:10:40
y las que estén bien aisladitas y bien bonitas 00:10:42
y vean que son distintas unas de otras, las voy a marcar 00:10:44
Esta va a ser la 1, por detrás 00:10:46
sin abrir la placa, cuanto menos se abra la placa mejor 00:10:48
para no contaminarnos y tal 00:10:50
por detrás con el rotulador hacéis un circulito 00:10:52
Si tenéis aquí una colonia que mola, 00:10:55
pues con el rotulador, con el rotulador, 00:10:57
por detrás se hace un circulito y con el que esta va a ser la 1. 00:10:58
Aquí esta, 00:11:02
¡uh! aquí me mola esta, ¡ba, ba, ba, ba! 00:11:03
Esta va a ser la 2. 00:11:05
Así, luego vais a otra placa y tal, 00:11:07
así hasta que tengáis 15 más o menos marcadas. 00:11:09
¿Vale? Esas son las que vais a testar, 00:11:11
a las que vais a interrogar, 00:11:12
a hacer la pregunta, oye, ¿tú produces antibióticos 00:11:14
que me maten al gran positivo, 00:11:17
al gran negativo o al lombo? 00:11:18
¿Vale? Una vez que tenemos eso, 00:11:20
Vamos a coger las placas 00:11:22
Vírgenes, las placas estériles 00:11:25
Las placas vacías que os traemos hoy 00:11:27
Para hacer el ensayo de antibióticos 00:11:28
Vuestro experimento de hoy es hacer un ensayo de antibióticos 00:11:30
Y lo primero que vamos a hacer es crear el césped 00:11:32
Para generar el césped 00:11:35
Los compañeros 00:11:36
En la facultad 00:11:39
Os han preparado unas suspensiones 00:11:40
De bacterias vivas 00:11:43
O de la cándida viva 00:11:44
La positiva, la negativa y la rara 00:11:46
Entonces vosotros vais a tener que 00:11:48
distribuir con mucho cuidado por la superficie de esa placa Petri, por la superficie de 00:11:51
ese agar, esa suspensión de bacterias. Para lo cual, acordaros de esto, o nos recordaremos 00:11:55
cuando estéis trabajando. Primero, agítese antes de usarse. En el viaje se nos habrán 00:12:00
sedimentado y tal. Vamos a dar unos tubitos con las suspensiones, antes de abrirlo, agitarlo, 00:12:05
porque si las bacterias no son móviles y están por ahí curulando, pues se habrán 00:12:10
sedimentado. Entonces hay que agitarlo bien. Segundo, os vamos a dar torundas estériles. 00:12:14
¿Alguien sabe qué es una torunda? ¿O isopo? 00:12:19
¿No es isopo? 00:12:22
Sí, tú, me han hecho la... 00:12:23
Ya es que no se acuerda de lo del COVID, ¿no? 00:12:25
Que se metían hasta la cocina y... 00:12:27
Sí, bueno, 00:12:29
la cosa para tomar la muestra para PCR 00:12:31
o lo que viene en el kit 00:12:33
de autodiagnóstico. 00:12:35
Ese que parece el bastoncillo de los sabidos. 00:12:37
Eso, 00:12:40
antes de que todo el mundo lo conociera, 00:12:41
en las farmacias, en los kits y tal, 00:12:43
pues lo utilizábamos solo en los laboratorios 00:12:46
de microbiología para tomar muestras de mucosas. 00:12:47
Eso se llama isopo. Bueno, pues 00:12:50
se utiliza precisamente para hacer 00:12:51
antibiogramas y ensayos de antibiosis. 00:12:53
No es más que un algodoncito 00:12:56
estéril, ¿no? Cortáis un palo 00:12:57
como el bastoncillo de los oídos, Rami. 00:12:59
Entonces, lo que vais a hacer es mojarlo en la 00:13:01
suspensión. O sea, imaginaos que esta 00:13:03
placa va a ser vuestro gram 00:13:05
negativo, ¿vale? Ponéis gram 00:13:07
negativo y 00:13:09
lo marcáis, pues, escherichia coli, 00:13:11
lo ponéis con el rotulador por detrás, 00:13:14
tal, tal, y 00:13:15
con la torunda 00:13:17
o hisopo, 00:13:19
esta cosa, no pringáis 00:13:21
en el tubo 00:13:23
donde está la suspensión, que ponga 00:13:25
el escribíquia coli, me parece que pone 00:13:27
menos el ram negativo y luego 00:13:29
F, escribíquia coli, ¿vale? 00:13:31
Les diremos cuál es cada una. 00:13:33
Pringáis aquí la torunda, 00:13:35
la empapáis, 00:13:38
la escurrís un poco 00:13:40
al sacarla por el tubo, para que no vaya chorreando 00:13:41
o goteando ahí bacterias que 00:13:43
Y con mucho cuidadito y poniendo la torunda no así, sino así para aprovechar más, así como paralelo a la superficie, vais pasando esa torunda humedecida en la suspensión por toda la superficie con mucha paciencia, mucha paciencia, mucha paciencia, por toda la superficie de la placa. 00:13:44
y cuando hayáis acabado de hacerlo en una dirección 00:14:09
con la misma 00:14:13
torunda, sin cambiar, podéis 00:14:14
rotar un poco, dar la vuelta para aprovechar 00:14:16
otra parte, cruzáis 00:14:18
y en otra 00:14:20
dirección perpendicular 00:14:22
otra vez pasáis por 00:14:24
toda, toda, toda, toda, toda 00:14:26
la placa y por si fuera poco 00:14:28
antes de tirar la torunda al bote con la 00:14:30
bolsa de plástico que le vamos a poner 00:14:32
lo hacéis en una tercera dirección 00:14:34
pasando por toda, toda la placa 00:14:36
de lado, de lado, de lado. ¿Qué hemos conseguido? Pues a ver, si en este tubo teníamos una suspensión 00:14:38
con millones y millones de bacterias, pues lo poco que hemos primado, ahora, igual que 00:14:44
hicimos en su día con las bolitas, pues ahora ayudándonos de la torunda, aprovechamos toda 00:14:49
la superficie de la garra de esta placa para tener la bacteria por todas partes. Si hemos 00:14:53
hecho bien las suspensiones, cuando incubemos esto, en lugar de tener colonias, vamos a 00:15:00
tener un césped, es decir, colonias confluentes, unas con otras todo lleno de bacteria, ¿vale? 00:15:04
Bien, ese es el primer paso solo, ¿vale? Porque esto lo vais a hacer con el gran positivo, 00:15:09
con el gran negativo y con la nevadura, con cándida. Vais a tener tres placas, por supuesto 00:15:15
cada una con una nevadura distinta, no mezcléis unos bichos con otros porque los microbiólogos 00:15:20
siempre trabajamos en un cultivo puro, ¿ok? Una vez que tenéis esas placas marcadas con 00:15:25
rango positivo, rango negativo y cándida, por ejemplo, las cogéis, les dais la vuelta 00:15:31
y con el rotulador hacéis una cuadrícula de esta risa. 00:15:38
4 por 4, 16. Con el rotulador por detrás, o sea, por aquí por el culo hago cha, cha, 00:15:53
Ya tengo delimitados psicológicamente, en mi placa, 16 espacios en el agar para probar 00:15:58
16 mixers. 00:16:10
Que tenéis muchísimos si os venís arriba, podéis hacer una de 5x5 y probáis 25, pero 00:16:11
yo creo que con 16, que en realidad son 15, ya probáis bastantes, ¿vale? 00:16:16
Entonces, una vez hecho esto, los podéis numerar, si queréis, 1, 2, 3, 4, los estoy poniendo al revés, porque luego cuando dais la vuelta a la placa, 00:16:24
en el ataque 1, que lo habéis puesto aquí, pues está el otro, ¿vale? Un poco para que sepáis dónde mover, ¿vale? 5, 6, 7, 8, ¿vale? 00:16:32
Bien. Y en el último ponéis control, un acés de control. Bueno, el último sería este. 00:16:40
Porque lo que vais a hacer es ahora iros a vuestro 1, 2, 3, 4, estos 15 bichos que habéis seleccionado aquí como 15 bichos distintos 00:16:48
y con una herramienta de alta tecnología que se llama palillo de dientes, este es lo que utilizamos en biología molecular 00:17:00
cuando rastreamos una genoteca, por ejemplo, en Escherichia coli, que representamos todos los genes de un organismo, 00:17:10
los tenemos en colonias de coli como estas, y vamos, pica, tal, pica, pica, pica, imagínate, 00:17:15
mucho mejor así que con una pipeta o con tal palillo de dientes, picas un clon único 00:17:21
y lo rescatas, ¿vale? Pues eso es lo que vais a hacer, con un palillo de dientes, buscáis 00:17:26
aquí vuestra colonia, la que habéis llamado número uno, la tocáis solo con la punta 00:17:31
del palillo, o sea, no hace falta arrastrarla y lincharla y luego la clonar, con que toquéis 00:17:37
con la punta del palillo 00:17:41
la colonia 00:17:44
la parte cremosita de la colonia 00:17:46
estáis llevando 00:17:48
no lo veis pero lo estáis llevando 00:17:49
ya habéis visto cómo se ha formado la colonia 00:17:50
millones de células idénticas y crónicas 00:17:51
entonces esa punta del palillo 00:17:53
venís aquí, abrís la placa 00:17:56
y encima del cuadradito uno 00:17:58
hacéis 00:18:00
abajo 00:18:00
abajo 00:18:05
abajo 00:18:06
hacéis 00:18:07
solo 00:18:10
acariciáis la superficie 00:18:13
de la barra, en esa zona hacéis 00:18:16
una rayita en el centro 00:18:17
o un punto incluso en el centro 00:18:19
así 00:18:22
en el centro de la pasta 00:18:22
¿vale? 00:18:25
tiráis ese palillo 00:18:28
¿por qué? porque ese palillo 00:18:29
está contaminado 00:18:31
con lo que hay en el césped 00:18:34
con cándida, con cocuria, con el 00:18:35
que hay que colir 00:18:38
aparte de lo que ya habéis cogido 00:18:38
Cogéis un palillo nuevo y volvéis a la colonia 1 00:18:40
Que no os preocupéis, que aunque sea muy pequeña 00:18:43
Seguís teniendo millones de cédulas 00:18:45
La volvéis a tocar y os vais a la otra placa 00:18:47
Si está en el gran positivo, pues al gran negativo 00:18:49
Y al mismo sitio 00:18:52
Diráis el palillo 00:18:53
Al bote, cogéis otro palillo 00:18:55
Y esa misma colonia, la número 1 00:18:57
Al siguiente equivalente de la tercera placa 00:18:59
La del hongo 00:19:02
Por tanto, al final 00:19:03
Vamos a tener tres placas iguales 00:19:05
Cada una con un césped distinto 00:19:07
Un gran positivo, un gran negativo y uno 00:19:09
Pero lo que vamos a ir poniendo luego encima de ese césped, que todavía está sin crecer, claro, son las mismas 15 colonias en el mismo orden y al final el control que os lo vamos a dar nosotros, unas placas que hay por ahí circulando, unas placas que se ponen IA2, que ya os lo digo, es un pseudomonas entomófila que aislamos del río Manzanares, que tiene cierta actividad antibiótica, sobre todo frente a ramos positivos. 00:19:10
siempre hay que poner un control positivo en los experimentos 00:19:37
porque si ese no sale 00:19:40
pues algo ha salido mal 00:19:42
entonces no nos podemos fiar de los resultados 00:19:43
¿vale? 00:19:45
entonces, repito 00:19:48
testbed 00:19:49
3 plazas distintas y luego replicar 00:19:51
las mismas 15 colonias 00:19:54
más 00:19:56
el control 00:19:57
y ya tenemos sembrado el experimento 00:19:59
¿ahora qué va a pasar? pues que vamos a llevar esto a incubar 00:20:02
no veis nada, solo donde vais a pinchar 00:20:04
con el palillo y poco más. Vamos a llevar esto a incubar. ¿Qué va a pasar? Pues que 00:20:06
en 24-48 horas el césped va a crecer por todas partes. Y si aquí hemos pinchado un 00:20:10
microorganismo que produce un antibiótico, va a inhibir en torno a ese crecimiento, va 00:20:16
a generarse una zona en la que el propio césped no va a crecer. Es lo que se llama un halo 00:20:26
de inhibición. Eureka, este microorganismo está inhibiendo al otro microorganismo, al 00:20:31
del fondo. Este ensayo de antibióticos me ha dado positivo. Y este microorganismo es 00:20:38
interesante, es interesante estudiar su química, estudiar por qué está inhibiendo al otro. 00:20:42
Está produciendo un antibiótico, o una bacteriocina, o algo que inhibe al otro mismo. ¿Lo habéis 00:20:46
pillado? ¿Sabéis más o menos lo que hay que hacer? Vale, pues todavía os quiero poner 00:20:53
Antes de ir al laboratorio. 00:20:59
el campus virtual 00:21:29
de la universidad es un Moodle 00:21:51
como lo que estáis usando 00:21:53
es un Moodle 00:21:54
vamos a ver 00:21:55
el famoso experimento de Kishoni 00:21:58
Kishoni Lab 00:22:01
Kishoni es un investigador microbiólogo 00:22:05
de la Universidad de Harvard 00:22:07
y hizo un 00:22:08
experimento en vivo 00:22:11
con una bacteria 00:22:12
que era sensible 00:22:14
a un antibiótico 00:22:17
en concreto 00:22:18
entonces para que entendáis lo que va a pasar 00:22:19
es lo que hace es 00:22:22
hace una placa Petri como esta 00:22:23
pero cuadrada, rectangular 00:22:26
y lo que hace es incluir 00:22:27
antibiótico dentro de la larga, pero no una concentración única, sino un gradiente, 00:22:31
de tal manera que desde los lados al centro hay 0 microgramo mililitro de antibiótico, 00:22:39
1 microgramo mililitro, 10, 100 y en el centro hay 1000, es decir, en el centro de la placa 00:22:44
hay 1000 veces más antibiótico que en el centro. Lo que vamos a ver es lo mismo que 00:22:50
hemos visto al principio, esa placa está en una cámara y esto es un timelapse, van 00:22:55
sacando un fotograma pues cada 10 minutos entonces ahora lo que ha pasado en 11 días lo vemos en 30 00:23:00
segundos y lo que vamos a ver es como esa bacteria que la siembra en los lagos donde 00:23:07
no hay antibiótico crece hasta la frontera donde hay antibiótico y la pobre pues no puede seguir 00:23:13
no puede seguir hasta que muta hasta que muta y entonces comienza a invadir la parte con antibiótico 00:23:18
y se para donde empieza a haber 10 veces más antibióticos. 00:23:25
Y que, ostras, con esto no puedo. Hasta que mudas. 00:23:29
Entonces, sí, o sea, estáis viendo en vivo esa evolución albiniana de adaptación a la presión selectiva del medio 00:23:31
de cómo la bacteria va mutando y se va haciendo delante de nuestros ojos resistente al antibiótico. 00:23:40
Esto es la prueba de que si nosotros indicamos un antibiótico de manera más masiva, 00:23:46
las bacterias hacen esto y al final no la podemos tratar con nada. 00:23:50
A ver si me funciona. 00:23:53
esto tiene sonido 00:24:26
bueno, eso explica 00:24:40
no se ve todo 00:24:41
es que no sé si se puede poner en pantalla completa 00:24:43
Finalmente, la banda central tiene mil veces más antibióticos, y luego a través del topo, por supuesto, de agar, las bacterias pueden moverse alrededor de ella. 00:24:56
El fondo es negro porque es incoherente, y las bacterias, primero, se ven que se expanden en el área donde no hay antibióticos, hasta el punto en el que no podrían sobrevivir. 00:25:05
Luego, un mutante aparece a la derecha, es resistente al antibiótico, se expande, hasta que comienza a competir con otros mutantes alrededor de él. 00:25:21
Cuando estas mutaciones llegan a la siguiente frontera, también tienen que causar y desarrollar nuevas mutaciones para hacer que tengamos 10 veces más antibióticos. 00:25:29
Y luego ves que las mutaciones diferentes repeten esto a 100. 00:25:44
Y así podemos ver que con este proceso de acumulación de mutaciones sucesivas, 00:25:51
que las bacterias que normalmente son sensibles a un antibiótico pueden evolucionar en resistencia a concentraciones extremadamente altas en un tiempo corto. 00:26:08
Autor/es:
Departamento de Ciencias Naturales - IES Alpajés
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Francisco J. M.
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15 de febrero de 2023 - 6:56
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