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Crecimiento bacteriano (Formación de colonias) - Contenido educativo

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Subido el 15 de febrero de 2023 por Francisco J. M.

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A ver, acordaos que, para poneros un poquito en contexto, quería poneros unos vídeos, pero no estoy muy seguro de que funcionen todos, pero algunos sí que son quizás los más interesantes para que veáis exactamente qué es lo que está pasando, o qué es lo que ha pasado, más bien a cámara rápida. 00:00:00
antes de que os contemos un poco 00:00:16
algunas de las cosas que debéis saber 00:00:19
para entender la parte experimental 00:00:21
que vamos a hacer hoy 00:00:23
simplemente recordaros que estábamos 00:00:24
validando una hipótesis 00:00:27
y esa hipótesis cual era, ¿os acordáis? 00:00:29
el sol y bacterias 00:00:32
y eso 00:00:34
aquí tenemos la prueba 00:00:35
algunas de las placas del burrumino 00:00:38
algunas de las placas del burrumino 00:00:40
Ahora, cuando vayamos al laboratorio, lo primero que tenéis que ver es qué ha pasado en vuestras placas Petri. 00:00:45
Entonces, recordáis que hicisteis la extensión de las distintas diluciones seriadas, ¿no? 00:00:51
Que hicimos con agua estéril de la muestra de suelo sobre la placa Petri, sobre el agar. 00:00:58
Utilizamos aquellas especies de mini canicas, aquellas bolas para extenderlo bien. 00:01:04
Ha salido bastante bien porque están muy bien extendidas. 00:01:08
Como veis, están homogéneamente repartidas. 00:01:10
Si todo ha ido bien, deberíais ser capaces incluso de resolver un problema puramente matemático y contestar a la pregunta de cuántas bacterias viables o vivas o capaces de formar una colonia, lo que en microbiología llamamos cuántas unidades formadoras de colonia, asumimos que cada una de ellas corresponde a una sola célula bacteriana, que había originalmente, había en un gramo de tierra. 00:01:12
¿Cómo podéis hacerlo? Pues simplemente aplicando o multiplicando, digamos, por el factor de dilución. 00:01:38
Por ejemplo, si en mi placa de 10 a menos 4, yo ahora cojo un rotulador y empiezo 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8... 00:01:44
Tengo 217 colonias. 00:01:51
Fijaos que esta dilución 10 a la menos 4 proviene de la primera y final, ¿vale? 00:01:55
entonces si que hay 217 colonias 00:02:01
que eso son 00:02:04
que en la original había 00:02:04
217 por 10 a la 4 00:02:08
porque yo he diluido 00:02:10
esto 00:02:12
10.000 veces 00:02:13
10 a la 4 00:02:15
1 menos 2 menos 3 menos 4 00:02:16
y estas 10.000 veces, luego tendría 217 por 10 a la 4 00:02:19
pero cuidado 00:02:22
si lo quiero referir al gramo 00:02:24
acordaos que la primera dilución 00:02:25
la 10 a la menos 1 00:02:27
ya decía que una dilución 1-10 00:02:29
debía ser 00:02:31
217 por 10 a la menos 5 00:02:32
pero cuidado 00:02:37
porque no sembramos todo en mililitros 00:02:38
sembramos solo la décima parte 00:02:40
100 microlitros, que os acordáis 00:02:42
por tanto, lo original sería 00:02:44
217 por 10 a la 6 00:02:47
es decir, 2,17 por 10 a la 8 00:02:49
unidades formadoras de colonia 00:02:52
por mililitro 00:02:54
ese recuento lo podéis hacer 00:02:55
siempre que podáis contar 00:02:57
alguna de las placas, porque 00:02:58
en la mayoría de nuestras placas, en las instrucciones 00:03:00
más pequeñas, como por ejemplo esta de 10 a la menos 2, 00:03:03
esto es incontable, 00:03:06
esto es como contar todas las estrellas 00:03:07
que hay en la Vía Láctea, o sea, es 00:03:09
imposible. Tenemos que ir a placas 00:03:10
diluidas 10, 100 veces 00:03:13
respecto a la primera, como la 10 a la menos 4 00:03:15
o la 10 a la menos 5, 00:03:18
para poder contar, estar en un rango 00:03:19
de contaje. 00:03:21
Esto que se hace de rutina, cuando 00:03:23
a un laboratorio de microbiología 00:03:25
le preguntan, oye, mírame la carga microbiana 00:03:27
que tiene este agua para ver si es potable o no 00:03:30
y esto se hace en cualquier red de abastecimiento 00:03:32
aquí en Aranjuez, en Madrid, en todas partes 00:03:34
o, oye, esta carne 00:03:36
este producto, este alimento 00:03:38
que hay en el mercado, que está contaminado 00:03:39
se admite a un número de bacterias 00:03:41
las que sean normales 00:03:44
pero no demasiadas, entonces hay que hacer un recuento 00:03:45
y eso se hace exactamente igual 00:03:48
que lo que habéis hecho 00:03:50
cuando quieres ver la carga microbiana 00:03:51
de una muestra biológica, de un alimento 00:03:53
de lo que es. O sea que esta técnica ya la tenéis controlada. Entonces, ¿cómo hemos 00:03:55
llegado hasta aquí? ¿Qué ha pasado durante todo este tiempo? Bueno, pues nosotros hemos 00:04:01
llegado al incubador, en el laboratorio de estas placas, y lo que ha pasado en siete 00:04:05
días es esto, visto a cámara rápida. Al principio no se ve nada, pero poco a poco 00:04:12
empiezan a crecer, a crecer, a crecer. Esto es visto como a tamaño real y sigue creciendo. 00:04:21
Y este bicho, y este que es más peludo va a ser un hongo, este va a ser un bacillus... 00:04:28
¡Hala! Esta es amarilla, tal, poco a poco... 00:04:33
Esta es la cámara rápida, se ha tomado una imagen cada cinco minutos... 00:04:36
¡Tal, tal, tal! 00:04:40
¡Oh! 00:04:42
Han tomado una imagen cada cinco minutos y han ido montando este vídeo. 00:04:44
Y esto es lo que ha pasado, pues, aproximadamente en una semana. 00:04:49
Claro, esto no lo vemos a tiempo real, pero sigue ocurriendo. 00:04:53
Si dejáramos esto más tiempo, pues seguirían creciendo, creciendo, creciendo, 00:05:02
hasta que se montaran los nutrientes. 00:05:05
Y al final, ¿qué tenemos? 00:05:08
Pues toda esa diversidad de microorganismos. 00:05:10
Fijaos que tan interesante es esta colonia tan chiquitina 00:05:12
como cualquiera de esas tan gordas. 00:05:17
simplemente son más grandes 00:05:22
porque producen más biomasa 00:05:25
es decir, producen más bacterias 00:05:27
y invaden más superficie 00:05:28
pero eso es todo 00:05:30
hay probablemente muchos vídeos como este 00:05:31
en la red 00:05:34
¿y qué es lo que ha pasado ahí? 00:05:36
pues si lo vemos microscópicamente 00:05:37
donde dejasteis una célula 00:05:40
a los 20 minutos, a los 40 minutos 00:05:51
esto se va dividiendo cada una de ellas 00:05:54
por el sitio binario 00:05:56
esto ya no es una lupa a tamaño real 00:05:57
esto es al microscopio a mil aumentos. Entonces ahí estamos viendo las células. ¿Por qué 00:05:59
vemos colonias macroscópicas? Porque en realidad cada uno de estos puntos más grandes o más 00:06:04
pequeños que vemos es eso. Es un clon. Un clon en el que todos los individuos son genéticamente 00:06:10
idénticos y proceden por división vegetativa, por escisión binaria de la primera célula 00:06:17
que cayó ahí. Cayó en el paraíso porque le hemos dado alimento. Y lo que hay es como 00:06:23
una sopa ahí en gelatina maravillosa 00:06:28
y esos nutrientes van difundiendo 00:06:30
y va creciendo, creciendo, creciendo, creciendo 00:06:32
y va aprovechando esos nutrientes 00:06:34
y de hecho, podemos saber 00:06:36
que están pasando cosas que incluso 00:06:38
aunque fuéramos invidentes 00:06:40
nosotros abriríamos la estufa 00:06:42
del laboratorio y 00:06:44
oleríamos esto, que ya veréis 00:06:46
que huele bastante asqueroso 00:06:48
y diríamos, algo está pasando aquí 00:06:50
metabólicamente 00:06:52
¿por qué huele asqueroso? 00:06:53
hipótesis de por qué 00:06:55
los cultivos microbianos huelen asquerosamente 00:06:58
porque tienen molde 00:07:01
y armosos 00:07:05
y huelen peor que el molde 00:07:06
dice que hay procesos de experimentación 00:07:07
efectivamente 00:07:20
a ver, los microorganismos 00:07:21
están comiendo, ¿y qué están comiendo? 00:07:23
¿os acordáis que yo os dije que era ese medio TSA? 00:07:25
soja hidrolizada 00:07:29
¡Qué barbaridad! Los estudiantes universitarios no tienen este nivel, ¿eh? 00:07:30
Pues, efectivamente, la soja, que son proteínas de soja, proteínas de origen vegetal, ¿de qué están constituidas las proteínas químicamente? 00:07:38
Bueno, ya que es un enlazo. 00:07:47
De aminoácidos, efectivamente. ¿Y qué pasa cuando un microorganismo fermenta o aprovecha esos aminoácidos como fuente de carbono y energía? 00:07:50
¿Por qué? ¿Por qué químicamente? 00:08:00
Sí, sí, o sea, porque produce, produce volátiles, o sea, como parte de ese metabolismo, escoge esos aminoácidos, los asimila, ¿no?, en sus rutas anabólicas, produce sus macropoleculas, sus proteínas, sus líquidos, sus ácidos nucleicos y tal, 00:08:11
y digamos que su metabolismo 00:08:27
lo que le sobra pues lo echa 00:08:29
y muchos de esos productos sobrantes son volátiles 00:08:30
y cuando crecen muy deprisa 00:08:33
emiten muchos compuestos volátiles 00:08:34
que son por el nuestro intestino, ya sabéis lo mal que huelen 00:08:36
los volátiles que proceden de nuestro intestino 00:08:39
y, como dice Solán 00:08:41
los 00:08:43
algunos de esos volátiles son compuestos azufrados 00:08:43
los compuestos azufrados huelen como 00:08:47
bueno, podrían ser 00:08:49
coca-coles en 00:08:50
cocidas o ese tipo 00:08:52
pero estos 00:08:55
de estos bichos del suelo, como les hemos dado a comer, proteína de soja, y sí que 00:08:56
hay aminoácidos afluentes, como la cristalina, la mitilina, pero la mayoría de los aminoácidos 00:09:01
lo que van a tener son, lo que van a producir en la fermentación son volátiles de tipo 00:09:05
amina. Y las aminas volátiles huelen, pues eso, a pescar podrido, a basura, o sea, de 00:09:09
hecho, la basura huele a basura porque las bacterias están fermentando, eso es produciendo 00:09:14
aminas volátiles, porque están sufriendo. Entonces, están comiendo, son muy bonitas 00:09:19
y de colores y tal, que tienen ese huele irregular. Así que, bueno, preparaos vuestras, que nadie 00:09:25
sea un asquerosito y... Entonces, vamos a enseñaros varias cosas hoy. Lo primero es 00:09:33
que quiero que tengáis una visión global del experimento que vamos a hacer. Si os acordáis, 00:09:41
nuestro objetivo era seleccionar de estas bacterias que han crecido, a ser posible, 00:09:45
pues muchas distintas. De hecho, vamos a seleccionar al menos 15 distintas cada uno. 00:09:52
Entonces, lo primero que vamos a enseñar es a seleccionar parte bien. 00:10:00
Autor/es:
Departamento de Ciencias Naturales - IES Alpajés
Subido por:
Francisco J. M.
Licencia:
Reconocimiento - No comercial - Compartir igual
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10
Fecha:
15 de febrero de 2023 - 0:14
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Centro:
IES ALPAJÉS
Duración:
10′ 09″
Relación de aspecto:
1.78:1
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