Tutoría 28 de octubre | Mediateca de EducaMadrid

Vale, empiezo ya a grabar y a bajar la pantalla. Vale, lo que estoy diciendo es que como no lo veo en el chat, que me digáis si estáis viendo la presentación. 00:00:00

Sí, sí, se ve. 00:00:13

Sí, se ve. 00:00:15

La presentación la tenéis colgada en el sitio de la red de autoridades subjetivas, la tenéis ya colgada en la presentación, por si la queréis descargar, la podéis ir a la parte de ahí y podéis hacerlo. 00:00:16

No creo que llegamos a hacer una modificación en un momento. 00:00:25

lo que sea, medíamos la señal que producía el analítico que estábamos mostrando nosotros 00:00:55

y luego ya comparábamos, para comparar la muestra, pues si se preparaba o no se hacía 00:01:08

falta, si no hacía falta, no se preparaba y medíamos la señal. El analítico que tenemos 00:01:14

en la muestra tiene que estar también en la plataforma, tiene que ser con el que hayamos 00:01:20

tratado nosotros la disminución. Si no, pues no podría ser una operación, pero que la 00:01:25

preparación que estamos creando va a tener una respuesta diferente. Una vez que nos quedemos 00:01:29

bien dentro de la muestra, pues a través de la aplicación de la bibliografía podríamos 00:01:33

separar, podríamos hacer una interrelación dentro de la red. Nosotros estamos buscando 00:01:37

un banco que salga dentro de la red. Para ello, tenemos que tener en cuenta que la configuración 00:01:42

entre el patrón más concentrado y el patrón menos concentrado. Si la muestra se salía 00:01:48

de la red por aquí, pues tendríamos que ir a una dirección, ¿vale? Para que la muestra 00:01:57

se encontrara dentro de la red. Porque nosotros no podemos tener una realidad 100% que la 00:02:02

red está en ese punto que nosotros llegamos a aquí, por ejemplo, tenga una liquididad. 00:02:09

Bueno, a partir de aquí, justamente, si no decíais que es difícil. Entonces, para tener una fiabilidad buena, que es lo que voy a mantener, nuestra mosca tiene que tener una concentración que esté comprendida entre los patrones. 00:02:13

Podríamos hacer la concentración a nivel de un grupo, o podríamos sustituir la venta de calidad. Si queríamos un nivel de un grupo, sustituiría la venta de calidad, porque a nivel matemático, pues, íbamos a obtener mayor exactitud o mayor intercesión. 00:02:27

lo de esta 00:02:39

es un procedimiento muy complejo 00:02:42

y rápido 00:02:44

tiene mucho tiempo 00:02:45

y muchos requisitos de preparación 00:02:47

entonces es ahí que más se suele utilizar 00:02:49

otro tipo 00:02:52

de calibración que se utiliza 00:02:54

se va a llevar a cabo 00:02:55

o se va a utilizar 00:02:58

en las ocasiones en las que 00:02:59

la mayoría que tenemos de la muestra 00:03:02

puede interferir en el resultado final 00:03:04

por ejemplo 00:03:06

Yo tengo una masa de suelo y quiero determinar los patos. 00:03:07

Yo voy a hacer una técnica óptica, o voy a mirar una técnica instrumental de las ópticas espectroscópicas 00:03:13

para determinar la cantidad de los patos que hay en la mesa. 00:03:20

Pero, haciendo esa técnica, la señal que yo mira o la propiedad que yo mido de los patos es muy parecida a la del día. 00:03:23

Entonces puede que el objetivo tú mides los datos solos, que mira que los solos o que mide los datos que mide. 00:03:31

Entonces los resultados que yo tendría, como si fueran exactos, serían que ahora estoy viviendo en tierra, 00:03:39

como si fueran los datos, y no tendría sentido, no tendría sentido, no tendría sensibilidad, nada. 00:03:44

Entonces para ello, es una técnica de la distribución estándar o de un patrón. 00:03:50

Ahí se dice de las dos maneras. 00:03:54

¿Qué vamos a hacer aquí? 00:03:56

Para intentar evitar que todos los síndromes diferentes se les pueda venir luego, para que todos los síndromes diferentes que hay en la muestra intercindan en el resultado final, lo que voy a hacer es preparar las disoluciones de fosfatos. 00:03:57

Si yo quiero mirar los fosfatos, preparo la disolución de fosfatos y añado a cada fosfato un volumen reciente de las disoluciones de fosfatos para que la concentración sea con concentración infinita. 00:04:11

que, igual que estábamos 00:04:23

hablando antes, que tenemos 00:04:24

activos auxiliares, pues añadimos 00:04:26

activos auxiliares, igual a cada uno 00:04:28

de los patrones. Pero 00:04:30

la cosa que yo no sé hacer es que 00:04:32

a cada uno de los patrones 00:04:34

vamos a añadirle una cantidad de muestras 00:04:36

y a todos los patrones le vamos a añadir 00:04:38

la misma cantidad de muestras. 00:04:40

De forma que, si la muestra está 00:04:42

alterada por los diferentes, 00:04:44

los patrones también van a salir 00:04:46

alterados por los diferentes. 00:04:48

Si yo, por ejemplo, mido 00:04:50

La aplicación de los contratos que hay, con el mismo ejemplo, si yo pongo el partido de laboratorio y pongo el contrato clásico, el contrato sueldo, por ejemplo, el partido de laboratorio no va a tener interferencias, porque es un partido que se ha hecho con una pureza, de un 9% o al menos igual. 00:04:52

los diferentes patrones primarios no tienen 00:05:09

diferentes, entonces ahí 00:05:11

me he quedado solamente para un lado de los cuatro 00:05:12

pero yo ahora tengo una mezcla de 00:05:14

una mezcla de suelo 00:05:17

o una mezcla de agua 00:05:18

y ahí 00:05:20

yo puede que tenga 00:05:22

facilidades para hacer más agotación 00:05:24

y aislar, a mí también me interesa 00:05:26

o puede que no pueda aislar 00:05:29

si yo no puedo aislar 00:05:30

lo que voy a hacer es que yo añado 00:05:32

muestras a cada uno de los patrones 00:05:34

3 mililitros, 15 mililitros, 20 mililitros, lo que sea. 00:05:36

Pero a todos los patrones de ahí con él. 00:05:40

De forma que esos diferentes aparecen en cada uno de los patrones 00:05:42

y la señal que venden por él va a pintar en cada uno de los patrones. 00:05:46

Si yo he caído a 2, 3 mililitros y la señal de hielo a la 2, 3, 00:05:50

pintan en cada uno de los patrones, pues no hay ganas de una cantidad de, por lo que sea, más 3. 00:05:55

Entonces, de esa manera puedo regular su interferencia. 00:06:01

¿Vale? Hasta aquí el bien 00:06:04

¿Cómo lo vamos a ver nosotros representado? 00:06:07

Bueno, pues como todos los patrones 00:06:12

llevan una cantidad de puestos añadidos 00:06:13

todos los patrones van a dar la señal suya propia 00:06:16

del porfato que yo haya añadido por la disolución del mago 00:06:19

más la cantidad que yo haya añadido de puestos 00:06:22

que alguien está metido por el porfato más el hierro 00:06:25

Entonces todos los patrones tienen una 00:06:29

una señal 00:06:31

que se ve añadida 00:06:34

tiene una señal que es más alta 00:06:36

de la que se esperaba, o de la que he ubicado 00:06:38

de la que se esperaban solamente los enfadados 00:06:40

por eso es que aquí, yo cuando 00:06:42

hago la señal, no aparece 00:06:44

en el punto C, sino que aparece 00:06:46

en el punto C, entonces yo aquí 00:06:48

empiezo más arriba, entonces todos los 00:06:50

horrones tienen la señal de 00:06:52

aumentada. ¿Cómo voy a hacer yo 00:06:54

ahora la sustitución 00:06:56

de la T? Pues yo 00:06:58

Aquí, en vez de expresar la concentración como tal, presento que es la concentración añadida, ¿vale? 00:07:00

Como lo que yo he añadido en la instrucción madre. 00:07:08

¿Sabéis qué es lo que lleva lo que he añadido en la instrucción madre más la de la madre de la muestra? 00:07:12

Todo sería, pues, los 3 miligramos dentro de la instrucción madre más el de nuestra. 00:07:17

Tengo miligramos dentro de la instrucción madre más el de nuestra. 00:07:22

Tiene miligramos dentro de la instrucción madre más el de nuestra. 00:07:25

Como todos llegan al más XS, que es lo que se me fue faltando que nos muestran para lo que sale del hierro, 00:07:28

pues lo que vamos a hacer es reservar solamente la compasión añadida, 00:07:35

que es lo que yo sé, que es lo que yo he añadido, lo que yo he preparado en el laboratorio. 00:07:38

Para que se vea, antes, bueno, por si os pongo, es la clase más fácil. 00:07:42

Vengo aquí y hacemos la compasión, es decir, me venimos por aquí, 00:07:46

lo desagrajo por aquí, pues sale la compasión y es cual es la XS. 00:07:50

¿Qué pasa? Que yo al preparar los patrones no tengo un matraco muestra como lo tenía antes. 00:07:55

Yo he puesto muestra en todos los patrones. 00:08:01

Yo no tengo un matraco muestra total, porque los indiferentes no sabemos qué aportar. 00:08:04

Mi matraco muestra es que veis que tiene el tiempo cero. 00:08:10

Yo no he añadido eso, lo que es malo, pero sí he añadido muestra. 00:08:13

Entonces, para captar la circulación de la muestra lo que tengo que hacer es una extrapolación. 00:08:18

Voy a construir fuera de la resta de calidad. Para construir fuera de la resta de calidad, lo que vamos a hacer, la pregunta que haríamos sería el cuánto sería la concentración para que la señal no se quede. 00:08:23

Entonces voy a ver cuánto sería la concentración para i igual a 0. 00:08:37

Yo hago aquí y voy a ir a esta parte de la red. 00:08:42

Voy a ver cuál es el punto que importa con el eje de la equis. 00:08:47

de la X. ¿Sale o no hay? Pues cogemos el valor absoluto y ya está. Sería igual la 00:08:50

transformación que yo tendría que añadir o que yo tendría que quitar a los patrones 00:08:56

para que la señal no fuese fea. Entonces ese concentrador que me sale es el que enseguida 00:09:01

solamente la muestra, solamente los patrones de la muestra. ¿Vale? Igual yo puedo comparar 00:09:10

por varios patrones, tenemos la 00:09:20

extrapolación, vamos fuera de la recta 00:09:22

y sustituimos y igual a cero 00:09:24

cogemos el valor absoluto 00:09:26

o puedo comparar con un solo 00:09:28

patrón. Vale, me preparo 00:09:30

un patrón de la muestra 00:09:32

y 00:09:34

un patrón de la muestra más que se hacía en madera 00:09:35

y comparo las señales 00:09:38

pues cuánto es la concentración 00:09:40

y cuál es la señal 00:09:42

y al patrón, a la concentración 00:09:44

que tenía la muestra, cuánto es la señal 00:09:46

y ahí vamos despejando 00:09:48

Lo habitual es que nosotros tengamos una ruta de calibrado con varios patrones, pero no 00:09:50

se siente que la siguiente calibración no sea la suficiencia de la tarea. 00:10:03

Entonces, este sería por ejemplo el esquema que tendríamos en la adicción de un tablero. 00:10:12

Prepara una descripción de un tablero con concentración introducida, y prepara los 00:10:19

Y luego tengo una muestra que tiene computación desconocida y que tiene ideas diferentes. 00:10:23

Entonces yo añado a, eso es el orden en el que añadimos, es lo que nos llega aquí hoy. 00:10:29

Yo en este caso somos el primero, para que se vea que la configuración es la misma que la cantidad y el sistema de la línea en todos, 00:10:34

somos el primero en la muestra. 00:10:41

Añadimos a todos los patrones la misma cantidad de hueso, en mi caso es la amarilla. 00:10:43

Luego añado a todos los patrones una cantidad diferente de disolución más o menos. 00:10:48

Y luego ya en transacciones no hay depresiones auxiliares, en transacciones no hay depresiones auxiliares, pues sí. 00:10:54

Pero me da igual la cantidad que tenga de depresiones auxiliares, porque al final el volumen va a ser 50. 00:10:59

Entonces da exactamente igual si yo he añadido agua a las depresiones auxiliares o si he enrasado con otra cosa que no sea agua. 00:11:05

Lo que me interesa es saber cuál es el volumen final. 00:11:12

Y con esto haríamos la cantidad de calidad, pero para que veáis que nosotros tenemos muestras en todos los patrones y que la cantidad de muestras es exactamente igual con todos. 00:11:15

Aquí antes nosotros decíamos, nosotros preparamos una variedad de patrones que tienen un blanco y llamábamos blanco a aquel blanco que tiene todos los componentes de los demás patrones excepto en el ánimo de presión. 00:11:28

Aquí tenemos un mantra que sería en el ángulo nuestro. No lleva la descripción malo, pero sí lleva. Sería el ángulo nuestro. Para preparar los tipos, normalmente se prepara otro ángulo, que se llamaría el agua o los ángulos auxiliares. 00:11:42

Entonces, como veis, ese sería el largo de los estrellos. Pero el de los estrellos es este. 00:12:05

El de matar-matar, por así decirlo, que teníamos antes de nuestra, en la herramienta de la comparación externa, pues sería más o menos ese. 00:12:11

Aquí yo, en todos los casos, tengo la muestra distribuida. En todos los casos, tengo 5 mililitros de muestra y 50 mililitros de muestra original. 00:12:20

la concentración de la muestra en cualquiera de las patrones, porque en todas las patrones 00:12:28

hay 5 en 50 para estar en la muestra original. ¿Qué es esta? Pues deshacemos la variación 00:12:35

como pasaba siempre. Vamos a ver si se ve mejor. Entonces tenemos que determinar la 00:12:41

la aplicación de calcio en una muestra de hilo o en un vidrio, mediante la férmita de la absorción atómica. 00:12:53

Entonces, para ello, realizamos una calentación con adhesión instantánea. 00:13:00

Preparamos una serie de patrones, ¿vale?, y van a ser de calcio chocolate de 50 mililitros. 00:13:04

Para ello, preparamos también una disolución madre de calcio. 00:13:10

es de 50.000 gramos por mililitro. Y ahí ya cogimos las cúpulas para tratar los cálculos. 00:13:15

Entonces las cúpulas son de 0, 5, 10, 15 y 20 mililitros. Además, todos los cálculos 00:13:30

necesitaríamos 10 mililitros de muestro. Y tenemos que calcular la concentración de 00:13:36

cálculo, la muestra un problema. Para ello, tenemos una señal, ¿vale? Que será una 00:13:41

autónoma, pues será la estereotipia o la violenta, por ejemplo. Entonces, esta sería 00:13:46

la comunicación de cálculo que tenemos en cada uno de los patrones, la comunicación 00:13:53

de cálculo que yo he añadido y esta sería la señal que habrá. Hay un factor en el 00:13:58

yo y mi amigo muestra pero no me han dado de solución al 00:14:05

vale la cantidad de muestra que ha añadido, los 10 mililitros ya decía por aquí 00:14:09

en el siguiente patrón, añado 10 mililitros de muestra, 10 mililitros de vino 00:14:14

y 5, es lo que añado la cantidad necesaria 00:14:20

para que la alimentación de cada patrón sea 00:14:24

de 5 miligramos por mililitro 00:14:28

es que hay, bueno, que ya he hecho este curso 00:14:30

5, 10, 15 y 20. Si yo añado 5 mililitros de una disolución de 50 miligramos por litro 00:14:34

de 50 miligramos por litro 00:14:54

y con un valor de 50 mililitros 00:14:56

pues 00:14:58

hacíamos 00:14:59

lo que estábamos haciendo 00:15:03

el 7 00:15:04

con las reglas de las lecciones 00:15:05

un momento 00:15:08

perdona María José 00:15:10

¿este enunciado dónde está? 00:15:14

¿el qué? 00:15:16

¿el enunciado de este ejercicio dónde está? 00:15:17

tendría que estar en el ejercicio 00:15:19

de todo 00:15:21

vale, para calcular las concentraciones 00:15:22

Entonces hacemos como siempre que tenemos la concentración de la disolución madre, cogemos una alícuota y preparamos un patrón. 00:15:25

Entonces la concentración de la disolución madre por el volumen de la alícuota es igual a la concentración del patrón por el volumen del patrón. 00:15:34

Como la concentración de la disolución madre era 50 miligramos mililitros, el volumen de la alícuota, por ejemplo, eran 5 mililitros, que si lo expresamos en el sistema internacional serían 5 por 10 elevado a menos 3, sería igual a la concentración del patrón por el volumen del patrón que es 50 por 10 elevado a menos 3 litros. 00:15:43

Haciendo eso, X sería igual a 5 miligramos mililitro. 00:16:07

Haciendo eso con todos los patrones, pues ya tendríamos el cuadro que sale aquí. 00:16:14

¿Habéis encontrado el enunciado o no se ve? 00:16:19

Sí, bueno, ya me he ubicado. 00:16:23

Vale. Entonces, tenemos el cuadro este de concentraciones añadidas respecto a la señal. 00:16:27

Y a partir de ahí haríamos la señal. 00:16:34

Si hacemos la señal, sale una recta que vemos que es buena, que es fiable, que podemos seguir trabajando y ya hacemos la extrapolación. Tenemos que pasar a la parte de cortar en el eje de la X. Para cortar en el eje de la X, ¿cuánto sería la X si Y vale 0, que es el punto de corte? 00:16:37

Si hacemos eso, pues para I0, X sería 11,53, ¿vale? En valor absoluto. Y ahora ya, pues esa I sería la concentración de uno de estos matraces, ¿vale? 00:16:56

Entonces, para calcular la concentración de vino de verdad, pues tenemos que deshacer la dilución. Entonces, bueno, otra vez concentración por volumen igual a concentración por volumen o multiplicamos por la inversa del factor de dilución. 00:17:12

La concentración de vino en la muestra a mí me ha salido de 56,69 miligramos por mililitro, porque 50 es el volumen del matraz y 10 sería la alícuota de muestra que yo he añadido a cada uno de los patrones. 00:17:26

¿Ha quedado claro cómo plantearlo? ¿O hay alguna duda? 00:17:45

¿Puedes repetir la última parte? 00:17:53

Sí. Cuando nosotros hacemos la recta de calibrado, nosotros vamos a plantear, o sea, sale la recta de calibrado y comparamos la R para ver la fiabilidad. 00:17:54

Una vez que ya tenemos la recta de calibrado, para calcular la X tenemos que hacer extrapolación. Vamos a trabajar fuera de la recta. 00:18:05

Y vamos a ver cuánto valdría X para Y igual a cero. Eso sería más o menos el cuánto tendría que quitar de concentración para que las señales fueran solamente las debidas a la disolución madre. 00:18:13

En este primer punto, como no había añadido disolución madre, pues la señal supuestamente es cero. Entonces, vamos a calcular eso, cuánto tendría que quitar de concentración de fosfatos. 00:18:26

Entonces, hacemos la sustitución de Y igual a 0 y despejamos X. Entonces, quedaría que X es igual a menos 0,0544 entre 0,0047. Si hacéis eso, X sale 11,53. 00:18:38

11,53 es la concentración de fosfatos en el patrón que yo he añadido. 00:18:55

En el esquema que teníamos aquí, que no es el del problema porque son otras alícuotas, 00:19:01

en el esquema que tenemos aquí sería la concentración de la muestra en cualquiera de estos patrones. 00:19:06

Pero no es la concentración de la muestra original, es la concentración en los patrones que yo analizo, en los matraces que yo analizo. 00:19:11

Para calcular la concentración de verdad del vino, tenemos que deshacer la dilución. Para ello, la regla de las diluciones de concentración de la madre por volumen de la alícuota es igual a la concentración del patrón por el volumen del patrón o multiplicar por la inversa del factor de dilución. 00:19:18

Al final, como cuenta, se queda igual, pero si lo entendéis mejor el planteamiento por la regla de las diluciones, por lo que digo, concentración de muestra original por el volumen de la alícuota es igual a la concentración de la muestra diluida por el volumen de la muestra diluida. 00:19:38

Volumen de la muestra diluida, 50 mililitros, porque nosotros teníamos matraces de 50. 00:19:52

Concentración de la muestra diluida, 11,53 miligramos mililitros. 00:19:59

Y ahora, volumen de la licueta que yo trasvaso para preparar la muestra diluida, 10 mililitros. Todo esto venía aquí en el enunciado. Decía que añadíamos 10 mililitros de la muestra y que utilizábamos matraces aforados de 50 mililitros. 00:20:03

Y si no, pues eso, por la inversa de factor de dilución, que es por volumen preparado entre la licueta. Entonces, haciéndolo así, pues salía que la concentración de calcio en la muestra de vino, ya en el vino de verdad, serían 57,69 miligramos por mililitro. 00:20:18

Como es una concentración, me da igual que en una copa de vino, que en una botella de vino, que en un barril de vino. 00:20:36

Las concentraciones son para todo. 00:20:44

Me da igual la cantidad de muestra que yo tenga. 00:20:47

O sea, que da igual que en un sorbo de vino, pues nosotros tenemos esa concentración. 00:20:51

Otra cosa es que digas, sí, cuando yo me tomo una copa de vino, ¿cuántos miligramos de calcio me estoy tomando? 00:20:55

Pero ahí ya vamos a cuántos miligramos. 00:21:02

Pero la concentración es esa. 00:21:04

Si la expresamos en porcentaje, en miligramos por mililitro o en partes por millón o como sea. Si decimos el 5% es alcohol, pues el 5% de lo que yo me tome va a ser alcohol. Las concentraciones sirven para todo, da igual la cantidad que yo tenga. 00:21:06

Y luego quedaría el último método de calibrado que vamos a ver ahora 00:21:22

Ya os dije que había un cuarto, pero que ese último como se utiliza muy poco y en casos muy exclusivos 00:21:31

Lo vamos a ver solamente en la técnica que aparece, en la técnica que se utiliza 00:21:36

El último caso sería el del patrón interno 00:21:42

Hemos visto patrón externo cuando va todo normal 00:21:46

Adición patrón o adición estándar cuando hay interferentes en la matriz 00:21:48

Y luego el patrón interno. El patrón interno es debido a pequeñas fluctuaciones que hay debidas al equipo. Por ejemplo, que yo esté midiendo una cosa a la llama y la temperatura de la llama puede variar. No es lo mismo en todas las alturas. 00:21:54

Entonces, si yo me alejo más o menos de la llama, esa temperatura va a cambiar. O si viene una corriente de aire y yo tengo todo el equipo abierto, pues a lo mejor se fluctúa la llama un poco y baja la altura y no llega. 00:22:10

O, yo qué sé, si hay alguna burbuja a la hora de inyectar alguna muestra. Entonces, en los equipos, ¿vale? Sí, está todo automatizado, está todo regulado, va todo muy bien, pero no van siempre con la misma precisión a la hora de trabajar. 00:22:25

Yo el ejemplo que pongo siempre es que si vosotros abrís una Coca-Cola y llenáis dos vasos, no va a salir la misma cantidad de espuma en los dos vasos por la inclinación del brazo, por la fuerza que hagamos, por la cantidad que haya en la botella y que en el primer vaso tenemos la botella llena y en el segundo falta un poquito. 00:22:39

Entonces hay muchas variables y puede que haya una burbuja o que nos tiemble un poquito el pulso y no echamos lo mismo en cada uno de los vasos. 00:22:58

En muchos equipos nosotros tenemos que hacer una inyección de la muestra. 00:23:07

Entonces la fuerza con la que nosotros inyectamos es que puede variar de un caso a otro. 00:23:11

Entonces esas pequeñas fluctuaciones pueden interferir en el resultado final. 00:23:15

No quiere decir que el equipo esté roto. 00:23:20

El equipo funciona correctamente, pero son pequeñas variables que tenemos que tener en cuenta. 00:23:21

Una vibración que haya porque hayas apoyado, porque hayas pasado cerca, 00:23:26

o si ya estamos en un laboratorio que pasa el metro por debajo, pues ni os cuento. 00:23:31

Entonces son fluctuaciones que se dan en los equipos. 00:23:35

Para corregir esta fluctuación lo que vamos a hacer es añadir un patrón interno. 00:23:38

Sería una especie de elemento control. 00:23:42

A lo mejor el año pasado en microbiología visteis que al incubar algunas placas se puede poner un control positivo y un control negativo. 00:23:44

Entonces como control negativo poníamos un mío de cultivo sin ningún tipo de siembra y veíamos a ver si había crecido algo. 00:23:53

O el control positivo, nosotros ponemos el medio, ponemos un inóculo de algo que nosotros sepamos que va a crecer y vemos si de verdad es capaz de crecer. Si no crece es que el medio estaba mal. Pues aquí más o menos para hacerle una similitud sería algo parecido a eso. 00:23:59

Nosotros vamos a añadir un patrón interno. Como patrón interno, un analito que tenga unas cualidades físico-químicas similares al analito que yo estoy buscando, pero que no sean exactamente iguales. 00:24:15

Por ejemplo, si yo estoy midiendo la absorbancia o viendo la intensidad de un color, pues que yo pueda comparar entre un amarillo y un naranja, que más o menos podemos decir que están ahí en el mismo nivel de color. 00:24:30

No comparar entre un verde y un negro, o entre el verde y el rosa, que no tienen nada que ver. 00:24:43

O si estoy diciendo una separación de componentes, pues que uno tarde tres minutos en salir y el otro que tarde cuatro, no uno tres minutos y el otro una hora. 00:24:49

Porque entre esos tres minutos y la hora puede pasar de todo. 00:25:00

Entonces, que tengan unas cualidades similares. 00:25:03

¿Vale? Que es el problema de los patrones internos. 00:25:06

No puedo utilizar el mismo patrón interno para todas las técnicas del mundo, 00:25:08

sino que van cada una con su técnica. 00:25:12

Entonces, para determinar el sodio o el potasio en agua, pues utilizo el litio. 00:25:15

Para determinar el ta-ta-ta, pues utilizo este. 00:25:20

¿Vale? Entonces, tenemos que ver patrones internos para cada una de las determinaciones que hagamos. 00:25:23

El patrón interno que utilicemos, eso nos lo dice el procedimiento, a no ser que estemos nosotros en investigación y tengamos que verlo, pero no hay un listado que nos tengamos que aprender ni nada de eso, eso lo dice el procedimiento. 00:25:28

¿Qué va a pasar? Que si hay una burbuja, en el momento en el que yo inyecté el primer patrón, por ejemplo, 00:25:40

pues si aquí se produce una burbuja, se va a producir tanto en la parte amarilla como en la parte rosa. 00:25:48

¿Que aquí no hay burbuja? Pues no hay burbuja ni en la parte amarilla ni en la parte rosa. 00:25:55

¿Que aquí hay dos burbujas? Pues se producen dos burbujas y afectan tanto al amarillo, este oscuro, como al rosa. 00:25:59

Que en la muestra tampoco hay burbujas, pues no hay burbujas ni para la muestra ni para lo rosa. Entonces, de esa manera nosotros vamos eliminando esa fluctuación o esa invariabilidad en la medida que nosotros tengamos. 00:26:05

Entonces, prepararemos los patrones 00:26:19

Para preparar los patrones, como siempre, preparamos la disolución madre de concentración creciente para cada uno de los patrones 00:26:23

Y añado 5, 10, 15 y 20, o lo que sea, pero la disolución madre es creciente 00:26:33

Luego añadimos el patrón interno 00:26:39

El patrón interno, como es un control, lo vamos a añadir en la misma cantidad en todos 00:26:41

pues 3, 3, 3 y 3 00:26:47

y como es control se lo añado también a la muestra 00:26:49

y así yo puedo ver 00:26:51

la variabilidad que tiene 00:26:53

y luego voy a medir 00:26:54

entonces cuando yo voy a medir aquí 00:26:56

mido la señal de lo amarillo y la señal de lo rosa 00:26:58

la señal del amarillo 00:27:01

y la señal de lo rosa 00:27:03

la señal del amarillo y la señal de lo rosa 00:27:04

señal de amarillo y señal de rosa 00:27:06

y aquí señal del azul y señal de lo rosa 00:27:08

y ya hago la tabla 00:27:11

entonces voy a tener una tabla que tiene 00:27:14

dos concentraciones y dos señales y yo puedo comparar lo amarillo como la concentración es 00:27:16

creciente pues la señal de lo amarillo vamos a ver que va aumentando normalmente va aumentando 00:27:23

según aumenta la concentración y ese aumento es notable lo rosa como en la misma cantidad la que 00:27:30

estoy añadiendo en todos más o menos debería ser la misma señal vale pero si hay fluctuaciones en 00:27:36

en el equipo pues veremos que no pero pues puede que aquí sea por ejemplo 3 aquí sea 3 con 7 aquí 00:27:43

haya bajado a 2 con 8 luego aquí suba a 3 con 9 tiene fluctuaciones de subir bajar pero siempre 00:27:51

más o menos en el mismo rango vale a lo mejor si aquí claro son medidas 3 digo pues del 3 pasa al 00:27:57

3 con 9 y lo contamos como si fuera patrón interno cuando estamos haciendo medidas que a lo mejor 00:28:03

A lo mejor pasa de 1.000 a 1.300, que ahí a lo mejor la medida es más grande. 00:28:08

Pero no es creciente ni proporcional a la concentración que esté haciendo yo, a la concentración que esté preparando yo. 00:28:15

Entonces, lo que digo es eso. 00:28:23

Medimos la señal tanto del patrón analito como del patrón interno y hacemos la recta. 00:28:24

Para preparar la recta no hacemos dos rectas, tenemos que hacer una única recta. 00:28:29

En la recta vamos a representar en el eje de la X la relación de concentraciones y en el eje de la Y la relación de las señales. 00:28:34

Es decir, en el eje de la X concentración del patrón analito entre concentración del patrón interno. 00:28:43

En el eje de la Y señal del patrón analito entre señal del patrón interno. 00:28:50

Yo lo que hago es relación de concentraciones frente a relación de señales. 00:28:55

Al hacer esa división, esa fluctuación que hay tanto en el patrón analito como en el patrón interno, se va. Entonces, ya estamos eliminando las fluctuaciones y ya estamos eliminando ese error, no es error, pero por decirlo de alguna manera, ese error que hay en las señales. 00:28:59

para la muestra problema 00:29:16

en las mismas condiciones también puede haber 00:29:19

burbujas o no haber burbujas en la muestra 00:29:21

puede que los patrones no nos salgan ninguna burbuja 00:29:23

y de repente la muestra salgan tres 00:29:25

entonces para preparar la muestra 00:29:26

añadimos lo que sea de muestra 00:29:29

la dilución que nos digan en el procedimiento 00:29:30

la cantidad de patrón interno 00:29:33

la misma que hemos añadido a todos los patrones 00:29:35

y luego ya reactivos auxiliares 00:29:37

agua, lo que haga falta 00:29:39

¿vale? para salir en ras 00:29:41

y ya 00:29:43

hacemos la interpolación en la recta, la sustitución en la recta. Aquí sería más 00:29:45

o menos un esquema, aunque a lo mejor no se ve muy claro. Y aquí sería el esquema de 00:29:52

preparación de los patrones, es lo que digo. Disolución madre, en concentración creciente, 00:30:01

veis que lo rosa, aunque no esté a escala, pero se ve que va aumentando en cada uno de 00:30:06

los patrones patrón interno añadimos 5 mililitros a cada uno a la muestra 00:30:11

incluida vale 5 mililitros en muchos casos no nos dice cuánto tenemos que 00:30:17

añadir pues la cantidad suficiente para que aquí haya 3 miligramos por 00:30:22

mililitro o añadimos un patrón interno vale y no hace falta saber cuánta a ver 00:30:26

a nivel de ejercicio no hace falta saber cuánta cuanta licuada añadimos al 00:30:31

En el laboratorio sí, porque tenemos que prepararlo. 00:30:36

Entonces, concentración de patrón interno, la misma en todos los patrones y la misma en la muestra. 00:30:41

Disolución madre creciente y luego ya enrasamos. 00:30:47

En la muestra, el patrón anélito que hemos añadido a todos, la cantidad de muestra que sea, que es independiente de lo que hemos añadido. 00:30:51

Le hemos añadido 5 mililitros de patrón interno y 15 de muestra, no tiene nada que ver. 00:30:58

Y luego ya enrasamos. Lo único que los volúmenes no superen el enrase. 00:31:02

Ese sería como prepararíamos en el laboratorio. 00:31:09

Ahora medimos todo esto y tendríamos dos concentraciones y dos semiales. 00:31:12

Y con todo eso construimos la tabla. 00:31:17

Vamos a verlo en un ejemplo que creo que se ve más claro. 00:31:20

Aquí vamos a hacer la determinación de sodio y potasio en aguas. 00:31:26

y como patrón interno utilizamos el litio. 00:31:31

Entonces, vamos a ver solamente para el sodio. 00:31:34

Preparamos una disolución madre de sodio y a partir de ahí patrones que están entre 0 y 10 miligramos mililitro. 00:31:36

Ahora a cada patrón le añadimos lo que sea de litio para que la concentración de litio en los patrones sea de 2 miligramos mililitro. 00:31:43

Me da igual ahora para el ejercicio de cuánto da la disolución madre. 00:31:51

Quiero saber cuál es la concentración de litio en los patrones. 00:31:54

medimos señal de isodio y señal de litio 00:31:56

y hacemos nuestra tabla de datos 00:32:00

ahora preparamos la muestra 00:32:02

para ello cogemos 10 mililitros de la muestra de agua 00:32:04

y la llevamos a un matraz de 100 mililitros 00:32:07

añadimos además de esos 10 mililitros de agua 00:32:09

o esos 10 mililitros de muestra 00:32:13

añadimos la misma cantidad de litio que a los patrones 00:32:14

es decir, la cantidad de litio 00:32:18

o la concentración de litio tiene que ser de 2 miligramos mililitro 00:32:19

y ya enrasamos 00:32:23

y medimos la señal de la muestra 00:32:25

entonces medimos la señal de sodio 00:32:27

y la señal de litio en la muestra 00:32:29

ahora, los datos que nos dan 00:32:31

la señal de sodio y la señal de litio 00:32:35

en la muestra serían eso 00:32:37

3,255 y 1,210 00:32:39

y las de los patrones serían estas 00:32:43

todo eso son medidas 00:32:46

que hacíamos en el laboratorio 00:32:49

pues habíamos preparado los patrones 00:32:51

para que fueran 0, 2, 5 y 10. 00:32:54

Nos decía que era entre 0 y 10, 00:32:56

pues aquí ya nos ha dicho en la tabla de datos 00:32:58

cuáles fueron las concentraciones exactas 00:33:00

de cada uno de los patrones. 00:33:01

La de litio, en todos al final, es 2. 00:33:03

Y ya tenemos las señales. 00:33:07

Veis que de aquí a aquí 00:33:08

ha habido un gran aumento de la señal. 00:33:09

De 2 a 5, pues también. 00:33:12

De 5 a 10 se tiene que duplicar la señal 00:33:15

porque se ha duplicado la concentración. 00:33:17

Bueno, pues más o menos, un poquito menos, 00:33:19

Pero bueno, de 4 a 8 vemos son cambios grandes. Aquí en cambio de 1,4, 1,6, ahora 1,5, ahora 1,3. O sea, no va aumentando todo el rato, sino que va fluctuando y son pequeños los cambios que tiene. 00:33:22

Vale, pues ahora vamos a juntar todos los datos de la muestra con los datos de los patrones. 00:33:35

Y la relación de las señales. 00:34:07

El orden da lo mismo. 00:34:11

Yo suelo hacer patrón analito entre patrón interno. 00:34:13

Si queréis hacer interno entre analito, también se puede. 00:34:16

Pero siempre de la misma manera. 00:34:19

Seguir el mismo orden aquí que aquí. 00:34:21

Y, por supuesto, el mismo orden aquí que aquí. 00:34:23

No cambiéis. 00:34:26

Vale, pues hacemos 0 entre 2. 00:34:29

2 entre 2. 00:34:31

5 entre 2. 00:34:32

Y 10 entre 2. 00:34:33

Y rellenamos esta columna. 00:34:34

Y 0,050 entre 1,410 y lo ponemos aquí. 1,260 entre 1,160 y lo ponemos aquí. Y vamos rellenando el cuadro S. Haciendo eso quedaría esa tabla. 00:34:35

Con esa tabla y esos recuadros que están marcados en amarillo, construyo yo la recta de calibrado. 00:34:50

Ya el resto de la tabla me da igual. Yo represento relación de concentraciones frente a relación de señales y construyo la recta de calibrado. 00:34:57

Al construir la recta de calibrado, pues quedaría esa recta. 00:35:08

Pues como veis aquí, relación de concentraciones frente a relación de señales. 00:35:13

Ahora, yo voy a sustituir. Aquí, igual que en patrón externo, estamos haciendo una interpolación. Vamos a trabajar dentro de la recta de calibrado. ¿Por qué sustituyo ahí? Pues por la relación de señales que ha dado la muestra. 00:35:20

Sabíamos que la muestra tenía una señal de sodio de 3,255 y una señal de litio de 1,210. Hacemos 3,255 entre 1,210 y lo que salga es lo que sustituyo por I. 00:35:36

Entonces hacemos la división para que salga ahí 00:35:52

Y es igual a 269 00:35:57

Y sustituyendo aquí por 269 00:35:59

Sustituyendo la recta por 2,69 00:36:01

Sale que X es 2,23 00:36:04

Esa no es la concentración que tengo yo de sodio en la muestra 00:36:07

Porque nosotros a X le hemos dicho que era la relación de concentraciones 00:36:13

Entonces, para calcular la concentración de sodio, tengo que despejar la concentración de sodio. Es decir, X es la concentración de sodio entre la de litio. X sabemos que es 2,23. La concentración de litio sabemos que es 2, porque lo decía el enunciado. 00:36:18

Pues nada, calculamos y despejamos. Aquí tenéis para despejar y tendríamos que la concentración de sodio es 4,46. Eso en la muestra que nosotros hemos hecho. Ahora tendríamos que ver si hemos hecho una dilución o no. 00:36:37

Decía que nosotros preparábamos un matraz de 100 mililitros y añadíamos 10 mililitros de muestra 00:36:54

Entonces hay que quitar la dilución 00:37:04

Y la concentración de sodio en el agua muestra pues sería de 44,6 miligramos al litro 00:37:06

¿Se ha entendido este bien? 00:37:16

¿O repito alguna parte? 00:37:19

Para mi gusto va muy rápido 00:37:21

Vale, pues decirlo. ¿Qué parte repito? Nosotros tenemos siempre una muestra que queramos analizar y tenemos que ver cuáles son las condiciones de esa muestra y las condiciones de los equipos con los que estoy yo trabajando. 00:37:23

Si en el equipo, conociendo el equipo, sabemos que no presenta fluctuaciones, como puede ser una medida de pH o una medida de la conductividad o la medida del índice de refracción, por ejemplo, 00:37:43

si no presenta ningún tipo de fluctuación en el equipo, pues vamos bien encaminados. 00:37:56

La otra cosa que puede fluctuar o que puede interferir serían los otros componentes que tiene la muestra. 00:38:03

Si nosotros tenemos una muestra, nosotros podemos tener el analito que a nosotros no interesa, que estaría por aquí, y luego una serie de interferentes. Los interferentes son los que tienen unas propiedades similares al analito que yo estoy buscando. 00:38:11

Luego puedo tener otras cosas que no tienen nada que ver con la señal o con las propiedades que yo estoy mirando. Y todo eso es lo que forma la muestra. Si nosotros cogemos una muestra de suelo, tendríamos todas esas cosas. 00:38:28

Ahora, si no hay nada que interfiera, yo puedo hacer una calibración normal, por llamarla de alguna manera. 00:38:48

Entonces tendríamos la calibración por patrón externo. 00:38:56

En el patrón externo, lo único que tenemos que tener en cuenta es que la concentración de la muestra esté entre las concentraciones de los patrones que yo preparo. 00:39:01

Si no, tendríamos que hacer una dilución. 00:39:15

Entonces, en el patrón externo, yo hago o represento la concentración frente a la señal. 00:39:18

Hago la recta de calibrado, y es igual a A más BX, y yo al sustituir la señal de la muestra por Y, puedo calcular la concentración de la muestra, que es X. 00:39:25

¿Vale? Que esa es la que estuvimos haciendo el otro día. 00:39:38

El único cuidado que tenemos que tener es lo que digo, que la concentración de la muestra esté dentro de la recta de calibrado 00:39:40

Si no lo está, la diluimos 00:39:49

En muchos casos ya sabemos más o menos por dónde anda 00:39:51

Si me dicen que la concentración máxima de fosfatos que hay en el agua es de un miligramo litro, por ejemplo, que no me la sé 00:39:54

Pues yo ya sé que el agua potable no debe tener eso y lo habitual es que no tenga eso 00:40:03

Entonces, claro, pues yo puedo preparar patrones de fosfatos entre 0 y 1 o entre 0 y 2, por si acaso hay alguna que está en el límite. No voy a preparar concentraciones de fosfatos de 10 a 25. 00:40:09

Si yo sé que la concentración, como hacíamos el otro día, del agua del mar suele ser 36 gramos al litro, pues ya sé que los patrones tienen que ir ahí, en ese rango. 00:40:22

Que tengo que hacer una dilución porque no puedo trabajar en laboratorio con concentraciones tan grandes, pues hacemos una dilución. 00:40:33

Pero más o menos en algunas muestras ya sabemos por dónde van, porque para eso se hacen los procedimientos, sabiendo más o menos ajustándose a las muestras. 00:40:39

Luego tendríamos la adición estándar. En el caso de la adición estándar, lo que pasa es que estos interferentes, estos rojos que había puesto, tienen unas propiedades similares a las de la muestra. 00:40:49

Entonces, si yo hago una medida de algo, puede que mida los interferentes y la muestra sin darme cuenta a la vez. Lo que digo es que si nosotros cogemos una paleta de colores y vemos ahí el rojo, pues hay quien dice, no, yo solamente veo un rojo. 00:41:02

Y alguien dice, no, yo distingo entre tres rojos diferentes. Vale, pues la percepción esa que tenemos nosotros es diferente y a los equipos les va a pasar así. Entonces, hay muchas veces que el equipo no es capaz de diferenciar entre dos tonos de rojo y los va a medir a los dos como uno mismo. 00:41:20

yo no puedo hacer una separación de aquí 00:41:36

yo no podría ir aquí y quitar 00:41:38

o enmascarar todos los puntos rojos 00:41:41

entonces yo a la hora de medir 00:41:43

voy a medir, no he puesto aquí justo el ejemplo 00:41:44

que sean los colores iguales 00:41:47

pero bueno, mediría el rojo 00:41:49

y el negro todos en un pack 00:41:50

y a mí me va a decir la señal es de 5 00:41:52

pero dentro de esa señal de 5 00:41:54

quién es negro 00:41:57

y quién es rojo, a lo mejor son 3 y 2 00:41:58

o a lo mejor son 2 con 5 y 2 con 5 00:42:01

o a lo mejor es 1 y 4 la señal que dan 00:42:02

Yo ahí no soy capaz de distinguirlo. Para eso añadimos o hacemos la adición estándar añadiendo muestra a cada uno de los patrones, que son los esquemitas que venían en las diapositivas. 00:42:05

Al añadir muestra a cada uno de los patrones, yo estoy poniendo interferentes en cada uno de los patrones 00:42:18

y la cantidad de interferentes que estoy poniendo yo es la misma. 00:42:23

Por lo tanto, los patrones se van a diferenciar entre ellos por la disolución madre que tengan. 00:42:27

Da igual lo que haya añadido yo de interferente porque es el mismo en todas. 00:42:32

Es como si nosotros, si venís aquí al instituto y vamos a medirnos la altura que tenemos. 00:42:38

vale, pues si todos nos subimos 00:42:44

en una plataforma de 5 centímetros 00:42:46

pues todos vemos nuestra altura 00:42:49

aumentada 5 centímetros 00:42:51

y es como al final, si todos nos sumamos 00:42:52

5 centímetros, es como si no nos sumáramos 00:42:55

nada, porque al final las diferencias que va a haber 00:42:57

entre nosotros es la altura que 00:42:58

tenemos nosotros de verdad 00:43:00

vale, entonces la adición estándar pasa a eso 00:43:02

nosotros ponemos a todos 00:43:05

un poquito de muestra, un poquito de 00:43:07

interferente y ahí 00:43:08

lo que hacemos es 00:43:10

evitar que haya esas fluctuaciones en esa medida en la señal, porque todos llevan la 00:43:13

misma cantidad de interferente. Entonces, la señal que se dé, pues yo sé que puedo 00:43:17

hacer ahí una separación. No es que haga una separación manual de, puedo decir, el 00:43:21

interferente a medido 5 y los fosfatos o la muestra a medido 3, sino que si todos se vean 00:43:28

afectados por la misma cantidad de interferentes, todos van a ver afectado su señal de la misma 00:43:34

manera. Entonces, ahí yo lo que represento es la concentración que yo he añadido en 00:43:39

los patrones, ¿vale? Frente a la señal, ¿vale? Como os digo, no podemos diferenciar 00:43:46

la señal tal cual de separar analito de interferentes y por eso la señal de todo se va a ver un 00:43:55

poco aumentada, ¿vale? Porque yo tengo aquí los interferentes que tenga más la señal 00:44:03

cada disolución madre. En este patrón, los interferentes que tenga, que son los mismos 00:44:09

que este, más la cantidad de disolución madre. Entonces, si yo hago esta separación 00:44:13

o esta representación, luego a la hora de calcular la concentración de muestra, lo 00:44:18

que hago es hacer una extrapolación. Entonces, voy a trabajar fuera de la recta de calibrado, 00:44:25

me voy a venir aquí y voy a calcular este punto. Este punto sería lo que os digo, cuál 00:44:32

sería la concentración que tendría que añadir yo para que la señal fuese cero. Por eso 00:44:37

sale negativo, porque respecto a esto, en vez de concentración que tengo que añadir, 00:44:44

es concentración que tengo que quitar. Entonces, ahí lo que estoy averiguando es eso, cuál 00:44:48

es la concentración que ha dado este salto de aquí. Esa concentración que ha dado ese 00:44:54

salto de ahí va a ser la concentración de analito que tengo yo en la muestra 00:45:00

y luego la última sería la visión estándar el patrón el patrón interno en 00:45:06

el patrón interno no tenemos problemas de interferentes pero si tenemos 00:45:14

problemas con el equipo que no son problemas de que el equipo funcione mal 00:45:18

sino que hay pequeñas fluctuaciones si yo tengo 00:45:22

un mechero y tenemos la llama si nosotros ponemos la muestra a esta altura la temperatura que 00:45:27

tenemos no es la misma de tenerla a esta altura aquí me decís vale si lo veo muy claro porque 00:45:35

claro yo lo voy a poner siempre por encima vale pero entre ponerlo a esta altura y ponerlo a esta 00:45:41

de aquí a lo mejor la mano nos tiembla un poco o si hay una corriente esta llama hace así y no es 00:45:47

la misma, la altura que tengamos. Entonces, como eso puede que pase una vez sí, otras 00:45:54

no, o puede que pase en la muestra 1, pero que no pase en la muestra 2, no podemos estar 00:45:59

planteando a ver si ha habido fluctuaciones o no. Entonces, para compensar estas fluctuaciones, 00:46:03

lo que hacemos es añadir un elemento control, que tenga unas cualidades similares a las 00:46:09

del analito que yo estoy buscando. Al tener ese elemento control, si yo tengo en una misma 00:46:16

una inyección o en una muestra, si yo pongo aquí la muestra aquí, la pongo a esta altura, 00:46:22

si yo tengo en la muestra las dos cosas, el analito que a mí me interesa y el patrón 00:46:26

interno, si la llama se ha ido para un lado por una corriente, la temperatura va a afectar 00:46:31

de la misma manera al patrón interno que yo haya puesto, al control que yo he puesto 00:46:36

y el analito. Si yo he bajado mucho la mano y he medido justo aquí en la llama o aquí 00:46:40

en el medio, he bajado un poco la mano o el equipo a la hora de poner la muestra y he 00:46:47

medido aquí, aquí la temperatura va a ser diferente y esa diferencia de temperatura 00:46:53

va a ser la misma en el patrón interno que en el patrón analito. Por lo tanto, si yo 00:46:57

relaciono las concentraciones, las concentraciones a lo mejor no nos afecta tanto, pero si yo 00:47:01

relaciono las señales al dividir la señal del analito entre la señal del patrón interno, 00:47:06

el efecto 00:47:13

o la variabilidad 00:47:16

que han tenido las dos 00:47:18

al tenerlas divididas 00:47:19

como que se suprimen una a la otra 00:47:21

entonces tendría como la señal 00:47:23

de verdad 00:47:26

por decirlo de alguna manera 00:47:27

¿Puedes decir que lo que haces 00:47:31

es como un normalizado? 00:47:34

Pero es que la normalización de las áreas 00:47:36

¿Dices? 00:47:38

Sí, de la señal 00:47:41

Claro, pero la de la normalización es la otra tipo de calibración que se hace, que es un poquito más complicada. Pero iría por ahí. Lo que no quiero es que confundáis con la normalización de las áreas. 00:47:42

Vale, pero es como si os dijera, vosotros cobráis 5 y yo cobro 7 y a los dos nos duplican el sueldo, entonces por mucho que nos dupliquen el sueldo yo voy a cobrar un 3% siempre más que vosotros, aunque nos dupliquen el sueldo siempre va a ser ahí ese 3% 00:47:55

Entonces, si yo divido las señales que tenemos, es como si quitáramos ese 3%, o sea, ese doble que hemos puesto o si nos reducen a la mitad el sueldo, pues esa mitad que la quito. 00:48:20

Entonces, la proporción que hay entre vosotros y yo siempre va a ser de un 3% de diferencia y eso lo conseguimos con las divisiones. 00:48:31

Entonces, aquí lo que hago para evitar esas fluctuaciones es representar la relación de señales, relación señal-analito entre señal de patrón interno y la concentración del analito entre la concentración del patrón interno y sale la recta de calibrado. 00:48:39

Con la muestra hacemos lo mismo, calculamos la relación de señales que hay 00:49:01

Y al sustituir, pues si yo tengo I es igual a A más BX 00:49:07

Pero yo sé que I es una relación de señales y X es una concentración de señales 00:49:14

Entonces claro, a mí me interesa sacar la concentración del analito, no la relación de concentraciones 00:49:22

vale, aquí 00:49:30

que no lo he puesto y sería 00:49:31

igual, la forma de la recta de calibrado 00:49:34

es la misma para todos, pero 00:49:36

con la salvedad de que estábamos haciendo una 00:49:38

una extrapolación 00:49:40

entonces aquí, vale, sí 00:49:41

y es igual a A más BX 00:49:43

y hay que calcular X 00:49:46

para Y igual a 0 00:49:48

en la de la edición estándar 00:49:49

vale, entonces a la hora de diferenciar 00:49:52

sobre todo cuando nos digan 00:49:57

en algún procedimiento que tenemos que hacer 00:49:59

si no añadimos 00:50:01

cosas raras siempre va a ser patrón externo vale cosas raras de muestra o algún patrón yo puedo 00:50:02

añadir reactivos auxiliares y que siga siendo un patrón externo si no si tenemos nosotros los 00:50:09

patrones preparados no tenemos ninguna cosa ningún analito extra en los patrones y yo tengo una 00:50:17

relación de cada patrón con su señal sería el patrón externo. En la edición estándar yo lo 00:50:27

reconozco porque añadimos muestra a cada uno de los patrones y además no voy a tener un matraz 00:50:34

que me diga la señal de la muestra ha sido tanto, porque va a ser uno de los patrones que yo tenga, 00:50:40

esa sería la edición estándar. Y en el patrón interno añadimos un patrón interno, la misma 00:50:46

cantidad a cada uno de los patrones y además voy a tener dos concentraciones y dos señales de 00:50:52

Entonces, para reconocerlos, pues más o menos ahora hasta que cojáis un poco de conocimiento de todas las técnicas y a ver cuál es la calibración que más se ajusta a cada una de las técnicas, de momento ir con el truquillo. 00:50:57

Si no, vamos a hacer algún ejercicio ahora para que podáis verlo. 00:51:16

Voy a terminar de explicar la parte del tema que quedaba y ya hacemos los ejercicios. 00:51:23

Vale, una vez que ya tenemos todas las calibraciones y todas las propiedades de las técnicas, pues sí es verdad que deberíamos de ver cuáles son las ventajas de las técnicas instrumentales frente a las técnicas clásicas para ver qué hemos mejorado. 00:51:27

Como todos os digo que se está automatizando todo, pues ver las mejoras que presentan estas técnicas instrumentales. ¿Que las técnicas clásicas se siguen utilizando? Por supuesto que sí, pero pues vamos a ver por qué tendríamos que elegir una técnica clásica o una técnica instrumental. 00:51:44

Entonces, las técnicas instrumentales, sí es verdad que tenemos mayor selectividad. 00:51:59

Acordaros que la selectividad es lo efectivo que era o lo apropiado que era el método para el analito que yo quiero, la exclusividad que tenemos. 00:52:04

Entonces, aquí, por ejemplo, en las técnicas instrumentales, yo soy capaz de determinar entre hierro 3 y hierro 2. 00:52:13

En una técnica clásica, mido solamente el hierro. 00:52:20

O si yo tengo diferentes ácidos, pues a ver qué es ácido clorhídrico la mezcla. 00:52:24

La mezcla de ácidos quedaríamos con una valoración clásica. 00:52:30

Es verdad que la muestra tiene propia preparación, un análisis clásico que tampoco tenía mucho, 00:52:34

porque cogíais y hacíais en la dilución como mucho, aquí dilución, disolución. 00:52:39

Entonces, respecto a preparación de la muestra, está más o menos empatada las dos técnicas. 00:52:44

En las técnicas instrumentales sí podemos tener información cualitativa y cuantitativa y información estructural, que con las técnicas de análisis clásico la estructural no podíamos tenerla. 00:52:48

Aquí son métodos relativos frente a las técnicas de análisis clásico, que son técnicas absolutas, porque aquí comparamos con patrones y en las técnicas de análisis clásico la muestra, medimos tal cual y ya no hace falta que comparemos con nadie. 00:53:01

es la medida que nos han dado. Aquí las cantidades de muestra con las que trabajamos también 00:53:13

pueden ser más pequeñas, hay una mayor exactitud, los límites de detección y de cuantificación 00:53:20

son más bajos, por lo tanto aumenta la sensibilidad y lo bueno que tiene es que está casi todo 00:53:26

automatizado, entonces la posibilidad de error cada vez va redujiéndose. También nosotros 00:53:31

nos centramos más en la parte de la preparación de la muestra o en la interpretación de los 00:53:37

resultados y no tanto en el cacharreo lo que sí que los equipos pues valen mucho 00:53:42

mucho mucho mucho dinero respecto a las técnicas clásicas valen una bureta y 00:53:48

barata aquí simplemente el ph al mejor que de las técnicas más sencillas que 00:53:53

podamos ver el electrodo de ph puede costar 300 400 euros los equipos que 00:53:59

son más grandes pues de 10.000 no bajan el calcis el que lo hemos hablado alguna 00:54:04

vez pues 6.000, 10.000 euros los más básicos, eso una burrita no cuesta. Entonces, bueno, 00:54:10

hay que saber los procedimientos que tenemos que llevar a cabo, las determinaciones que 00:54:16

tenemos que hacer y ver si es rentable o no, ¿vale? O si la normativa dice que se puede 00:54:20

avanzar o no, ¿vale? Que esa sería la segunda parte. Cuando elijo yo qué método tengo 00:54:24

que hacer, si yo tengo que comparar dos métodos y tengo dos posibilidades de hacer una determinación 00:54:30

por dos métodos diferentes, ¿cuál es mejor y cuál es peor? Entonces, eso va a depender 00:54:35

del tipo de información que nos piden. 00:54:39

Por ejemplo, si nos piden información cualitativa 00:54:41

o cuantitativa, digo, muestra ácida. 00:54:43

Pues no hace falta que mida el pH 00:54:46

con un electrodo, 00:54:47

con un pHímetro, porque para ello 00:54:49

tengo primero que calibrar el equipo, 00:54:51

elegir el electrodo que me hace falta, 00:54:52

preparar una disolución de la muestra, 00:54:54

simplemente para ver si es ácida o básica. 00:54:56

Echamos unas gotas de fenolactaleína 00:54:58

y si se pone morado es básica, 00:55:00

si se queda en color es ácida. 00:55:01

Si no queremos saber nada más, 00:55:04

ahora, para que me digan, dime cuál es la concentración 00:55:05

de protones que hay en la muestra 00:55:08

pues ya sí, hacemos toda la parte 00:55:10

de la valoración 00:55:12

pero si simplemente es 00:55:14

análisis cualitativo, no tengo 00:55:16

que enredar mucho más, también la cantidad 00:55:18

de las muestras con las que estoy trabajando 00:55:20

vale, pues lo que decíamos al principio 00:55:21

pues si yo tengo que determinar la salmonella 00:55:24

en 25 gramos y no tengo 00:55:26

25 gramos, pues que puedo hacer 00:55:28

pues aquí igual, si en un método me piden 00:55:29

que utilice 10 gramos de muestra 00:55:32

y en el otro me dice que utilice un gramo 00:55:33

de muestra y yo solo tengo 5 00:55:36

pues tengo que elegir el que pide un gramo de muestra 00:55:37

o lo que sea 00:55:40

el tipo de reacciones que pueda haber 00:55:42

de la muestra con los materiales de trabajo 00:55:46

o las interferentes que pueda haber 00:55:48

para el tipo de calibrado que estamos haciendo 00:55:50

como estamos viendo ahora 00:55:52

el tiempo que tenga, por ejemplo 00:55:53

la exactitud y la precisión que me han pedido 00:55:58

pues si tienes que darme 5 decimales 00:56:00

o puedes darme un decimal 00:56:02

pues vamos a ver cuánto es 00:56:04

O puedes tener un 5% de fiabilidad o un 10%, pues todo eso lo tengo que ir viendo según los métodos, ¿vale? O la normativa que haya. Si los nitritos me dicen por normativa que se haga de alguna manera, pues yo lo tengo que hacer de esa manera por mucho que yo sepa hacerla de otra, ¿vale? 00:56:07

El nitrógeno, por ejemplo, que hemos puesto en el tutorial para ver si queréis hacer la práctica del Kedal, es para la determinación de nitrógeno. 00:56:24

Esa valoración que se hace después se puede hacer de varias maneras, por técnicas electroquímicas o por técnicas clásicas, según lo que yo quiera se hace. 00:56:34

Ahora que la normativa me dice que la determinación de proteínas se hace de esta manera, me da igual lo que diga el Kedal, 00:56:43

Que si la normativa dice eso, aunque el Kedal sea lo más extendido del mundo y lo haga todo el mundo, sí, pero si la normativa dice que se hace de otra manera, tenemos que hacer caso a la normativa. 00:56:49

El coste de los productos, las instalaciones, el tiempo que tengamos, todo eso influye, ¿vale? 00:56:59

Vale, entonces, esta parte, si la teníamos acabada, nos dice que vamos a determinar la cantidad de teobromina de una muestra de cacao. 00:57:06

Y nos dice cuál es el procedimiento. Primero preparamos una disolución A que es de teobromina con una concentración de 5000 gramos por 100 mililitros. Después preparamos una disolución B de cafeína con una concentración de 3000 gramos por cada 100 mililitros. 00:57:14

Y nos dice cómo tenemos que preparar los patrones 00:57:31

Entonces de la disolución A nos dice que añadamos 0, 1, 2, 3, 5 y 10 00:57:34

De la disolución B añadimos 3, 3, 3, 3 y 3 00:57:40

Eso en matraces de 50 00:57:44

Y luego preparamos la muestra 00:57:47

Así de primeras 00:57:49

Diríais que es una calibración por patrón estándar, por patrón interno o por patrón externo 00:57:52

Patrón interno 00:57:59

¿Por qué? 00:58:01

Porque se añade lo mismo 00:58:04

A todos, se añade tres 00:58:06

Vale, pues entonces patrón interno 00:58:08

Vale, voy a coger 00:58:10

Aquí, bueno, vosotros no lo veréis 00:58:12

Porque no lo tengo puesto 00:58:14

Pero aquí pongo tutoría 28 de octubre 00:58:15

Y ahí están las soluciones 00:58:18

De los ejercicios 00:58:19

¿Vale? 00:58:21

Si puedo poner las grabaciones 00:58:22

De las conferencias ahí, las pongo ahí 00:58:25

Si no, tendrán que ir en un enlace a la mediateca, ¿vale? Pero intento ponerlo ahí en la misma carpeta. Vale, pues es un patrón interno por eso, porque añadimos cafeína a todos los patrones. Entonces nosotros ya, esa es la cafeína que íbamos a utilizar como patrón interno, que es la disolución B. 00:58:27

La disolución A sería la disolución madre, que es la normal que hacíamos siempre. Y ahora medimos. Y como hemos dicho en el patrón interno, que sería la segunda pista que nos daría, tenemos una señal para cada una de las cosas que nosotros hemos añadido. 00:58:45

Si la cafeína fuera un reactivo auxiliar que yo añadiera de la misma manera a todos para que se formara un complejo, para que se forme un color, para que haya un medio en unas condiciones, no tendría señal de la cafeína. 00:58:59

Pero yo tengo señal de la cafeína aquí. Tengo señal de A y señal de B. Por lo tanto, es un patrón interno. 00:59:13

Y ahora preparamos la muestra y la muestra tiene 10 mililitros de muestra del cacao, los 3 mililitros de cafeína y enrasamos también a 50 mililitros. 00:59:18

Y ahora ya prepararíamos la recta de calibrado. Para preparar la recta de calibrado, yo he hecho el esquema primero. Para que se vea que 3 mililitros de cafeína a todos, la cantidad de teobromina es creciente, creciente o decreciente, pero en algún sentido siempre va a crecer. 00:59:33

Pero veis que aquí en el blanco yo he añadido disolución B, pero no he añadido disolución A. Entonces, el blanco lleva todo lo que llevan los demás menos el analito objeto de estudio, menos la teoromina en este caso. 00:59:54

Vale, pues preparamos los patrones y ahora preparamos la muestra 01:00:09

Para preparar la muestra, pues la cantidad de muestra que sea 01:00:14

Más la disolución B, que esa va en todos 01:00:17

Y luego ya enrasamos como sea 01:00:20

Vale, entonces el patrón interno 01:00:22

Para calcular la recta de calibrado 01:00:24

Tenemos que saber cuál es la concentración de cada uno de los patrones 01:00:30

Vale, tanto de cafeína como de teobromina 01:00:33

La de teobromina es la disolución madre, lo que hacíamos siempre, pero la de cafeína, que es la B, también tenemos que añadirla. La de cafeína, si es verdad que como hemos añadido los mismos mililitros a todos los patrones, la concentración de cafeína, la concentración del B, va a ser la misma en todos. 01:00:37

Pues concentración de la madre por volumen de la madre o volumen de la alícuota es igual a concentración del patrón por volumen del patrón. Despejamos y quedaría que la concentración de cafeína en cualquiera de los patrones es de 0,18 miligramos por cada 100 mililitros. 01:00:54

Aquí se ha separado un poco pero yo creo que sí se ve, por el formato yo creo que se ha ido un poco 01:01:11

Ahora calculamos la teobromina, la teobromina si es verdad que al tener diferentes alícuotas es diferente concentración en cada uno de los patrones 01:01:16

Entonces tengo que calcularlo para cada uno de los patrones, no como aquí que me ha servido un cálculo para todo 01:01:27

La teobromina que es el marrón oscuro, por el dibujo así se ve que van a estar en diferentes concentraciones 01:01:31

Y que este va a tener más cantidad de teoromina que este de aquí. Vale, pues entonces calculamos la concentración de teoromina. Como siempre, yo pongo un ejemplo y luego el resto se calculan de la misma manera. 01:01:38

Entonces, pues he puesto el ejemplo de los 10 mililitros. Pues concentración de la madre, que eran 5 miligramos por 100 mililitros, por el volumen de la alícuota entre el volumen del patrón que hemos preparado. 01:01:50

Y saldría que en ese patrón la concentración de teobromina es de 1 miligramo por cada 100 mililitros. Hacemos el mismo cálculo con los otros patrones y cambiamos este de mililitros de aquí a cada uno por el que corresponda. 01:02:06

Entonces saldrían concentraciones de 0, 0,10, 0,2, 0,50 y de 1 miligramo. Aquí estoy viendo que este no es patrón 1, es otro patrón. Este sería el patrón 5. 01:02:19

Hacemos la tabla de datos. De momento, todos los datos que yo tenga. En el patrón 1 teníamos una concentración de tebromina de 0 miligramos por cada 100 mililitros y la señal de esa tebromina ha sido de 47,3. Por otro lado, tengo que la concentración de cafeína es de 0,18 por cada 100 mililitros y la concentración de la cafeína ha sido de 37. 01:02:36

Tabla de datos. Con la muestra pasa igual. La concentración de muestra o la concentración de teobromina en la muestra que yo tengo, mi idea, X, es lo que tengo que calcular. La concentración de cafeína, 0,18, porque son los 3 mililitros que yo he añadido. Y luego las señales a nivel experimental las medimos. 01:03:04

Pasamos a la siguiente tabla, relación de concentraciones frente a relación de señales 01:03:23

Entonces, teobromina entre cafeína, teobromina entre cafeína 01:03:31

Y tenemos relación de concentraciones, relación de señales 01:03:35

Sería la siguiente tabla, que es la parte verde que tengo aquí 01:03:39

Nos quedamos solamente con lo verde 01:03:46

Entonces, 0,10 entre 0,18 es 0,56 01:03:48

0,20 entre 0,18 es 1,11. 59 entre 39,1 es 1,5. 117,5 entre 37,9 es 3,1. Vais viendo que la concentración de cafeína varía un pelín de 37,9, 39,3, 37,5, pero más o menos se mantiene en los mismos niveles de señal. 01:03:53

La de teuromina, 47, 59, 117, 300, 500, 94. Entonces es grande. Y ahora con lo verde hacemos la recta de calibrado. La parte de la muestra, acordaros que no se mete en la recta de calibrado. Vamos a hacer la recta de calibrado desde el 1 hasta el 5. 01:04:18

Así, ojeando un poco, vemos que la muestra tiene una relación de señales de 1,3 01:04:42

Pues coincide con esta, bueno, pues más o menos tendrá que tener una relación de concentraciones muy bajita 01:04:52

En este caso, pues cerca de cero 01:05:00

Si queréis fijar solamente en la teobromina, pues entre el 0 y 0,10, pero va a ser una 01:05:02

concentración de teobromina muy pequeña. 01:05:13

Con lo verde hacemos la recta de calibrado, solamente con esa verde, ya todo lo naranja 01:05:16

me lo quito del medio y hacemos la recta de calibrado sin incluir la muestra en la recta 01:05:25

de calibrado. En la recta de calibrado, relación de concentraciones frente a relación de señales 01:05:31

y la recta de calibrado dice que Y es igual a 2,613X más 0,603489, todo eso. Vale, pues 01:05:40

ahora sustituimos para Y igual al numerito que me haya salido a mí la división, entonces 01:05:52

Yo sustituyo Y por 1,3. 01:06:00

Pues cuando Y vale 1,3, ¿cuánto vale X? 01:06:03

Pues sustituimos aquí, bueno, aquí la tabla es 1,3, pero realmente la división daba todo esto. 01:06:08

He utilizado todos los decimales. 01:06:13

Entonces, haciendo la sustitución en la recta de calibrado, X saldría 0,2495. 01:06:15

X es teuramina entre cafeína. 01:06:24

Entonces, yo no puedo dar eso como dato final. 01:06:27

tengo que calcular cuánta teobromina hay. 01:06:30

Para calcular cuánta teobromina, pues despejo la cantidad de cafeína que hay, sabíamos que era 0,18. 01:06:34

Pues si X es igual a teobromina entre 0,18, pues 0,18 por 0,2495, todo eso, 01:06:41

pues podríamos saber cuánto es la cantidad de teobromina que hay. 01:06:49

Entonces la cantidad de teobromina que hay es de 0,04495. 01:06:55

Ya hemos dicho que era muy próxima a cero e incluso menos de 0,1. Eso es en el matraz que yo he analizado. No es en la muestra original. Es en el matracillo este que yo he analizado. 01:06:59

Ahora tengo que calcular la concentración de teobromina aquí. Entonces tengo que deshacer la dilución que me decían para calcular cuál es la concentración de teobromina ahí en el cacao. 01:07:13

Entonces, para calcular, deshago la dilución, como había llevado 10 mililitros a un matraz de 50, pues por 50 entre 10. Entonces, la cantidad de teobromina que hay en el cacao es de 0,225 miligramos por cada 100 mililitros. 01:07:24

mililitros. ¿Se ve mejor con los ejemplos o sigue siendo un lío? ¿Cómo lo veis? Iván, 01:07:43

creo que quieres hablar, o Carolina también. Sí, una cosa. Otro indicativo de que es patrón 01:07:54

interno es que esos 3 mililitros también se los has echado a la muestra. Sí, pero 01:08:01

Pero si fuera un reactivo auxiliar, también se los añadirías a la muestra. 01:08:08

Vale, bueno, pero entendemos que no es un reactivo auxiliar, ¿no? Porque te dice, añade lo mismo a todos. 01:08:13

Pero de los reactivos auxiliares también se los añades a todos. 01:08:20

Entonces, yo la mejor forma que hay de distinguir, creo que distinguir el patrón interno de los demás, es que tienes dos señales de dos cosas. 01:08:23

Si fuera un reactivo auxiliar, no tendríamos señal. 01:08:33

Carolina, no sé si lo que ibas a decir es lo que has escrito en el chat o hacemos otro, pero es eso, con el procedimiento intentar ver qué es. 01:08:35

Aquí nos dice que vamos a determinar la cantidad de calcio que hay en una muestra de leche. 01:08:48

Debido a la posible interferencia en el resultado de la vitamina D presente en la muestra, en la leche, se sigue el siguiente procedimiento. 01:08:53

Preparamos 50 mililitros de una disolución madre con una concentración de calcio de 350 miligramos por cada 100 mililitros. 01:09:01

Preparamos los patrones añadiendo 0, 5, 10, 20 y 25 mililitros de la disolución madre respectivamente. 01:09:09

Añadimos a cada patrón 5 mililitros de leche. 01:09:16

Enrasamos a la línea de enrase, que son 100 mililitros, con agua desionizada. 01:09:20

Y medimos la señal, por lo que fuera en este caso. Y luego nos dice que calculemos la concentración de calcio en la leche teniendo en cuenta los resultados. Entonces, lo mismo. Adición estándar, patrón interno, patrón externo. 01:09:26

Aquí la clave es esta frase de aquí 01:09:43

Añadimos a cada patrón 5 mililitros de leche 01:09:48

Aparte de esta 01:09:51

Debido a la posible interferencia del resultado de la vitamina D 01:09:54

Entonces, patrón externo lo descartamos 01:09:59

Porque no es la vía normal 01:10:05

¿El qué, perdón? 01:10:07

Edición estándar 01:10:09

¿Por qué? Bueno, por eso, ¿no? Porque añadimos leche a todos. 01:10:10

No, porque si fuera interno la interferencia sería del sistema, no de un componente que está en la muestra. 01:10:15

Eso es. 01:10:23

Como tenemos la vitamina D que interfiere, es adición estándar. 01:10:25

Y como hemos añadido leche a todos los patrones, es adición estándar. 01:10:29

Y como no tenemos aquí una casilla que diga muestra y señal, es adición estándar. 01:10:33

Vale, pues tenemos que calcular la concentración de calcio de cada uno de estos patrones. 01:10:40

Ahora, si nos vamos a las preguntas. 01:10:50

Entonces, el esquema. 01:10:54

Disolución madre. 01:11:00

Al primer patrón, el blanco, no le añadimos nada. 01:11:02

Luego añadimos 5, 10, 20 y 25 de la disolución madre. 01:11:05

También añadimos leche. 01:11:10

Y a todos le añadimos 5 mililitros, incluido el blanco. Sobre preparación de la muestra no dice nada porque no tenemos un matraz muestra. Y ahora enrasamos. 01:11:12

Para calcular la concentración de calcio que nosotros hemos añadido, la concentración de calcio que provoca lo naranja, no la suma de lo naranja más lo morado, para calcular la concentración de calcio debida a lo naranja, pues hacemos lo de siempre. 01:11:24

concentración por volumen igual a concentración por volumen y sale pues en 01:11:41

un matraz sale de 70 miligramos por cada 100 mililitros en otro de 17,50 vale eso 01:11:46

vamos cambiando la alícuota que hemos añadido y sale cada uno de los patrones 01:11:52

entonces ya la concentración añadida ha salido de 0 17 50 35 y 70 con esos 01:11:58

puntos hacemos la recta de calibrado. Entonces hacemos, no sé por qué he puesto, no he puesto 01:12:07

el 5 y he puesto el 6, pero bueno, no pasa nada. Hacemos la recta de calibrado. Teníamos la señal 01:12:16

de cada uno y ya sabemos cuál es la concentración de cada uno. Haciendo la recta de calibrado 01:12:26

saldría que aquí se ve muy poquito la diferencia 01:12:32

porque bueno, ahí ya justo si salía 01:12:37

es 0,017, entonces respecto a 0,9 01:12:40

es muy pequeña la cantidad y no se ve en la gráfica 01:12:45

pero sí debería estar un poco elevada 01:12:48

entonces saldría que y es igual a 0,0 01:12:50

1,10, 9,4, 4,1, ta ta ta 01:12:54

x más 0,009 01:12:57

y todos los decimales que salgan ahí 01:13:01

la recta la damos como válida 01:13:03

es muy buena, la r al cuadrado da 3 01:13:05

y encima el cuarto ya 01:13:08

tiende a ser un número alto 01:13:09

entonces es aceptable la r 01:13:11

los datos van a ser fiables 01:13:13

si la r no fuera buena 01:13:15

los datos no eran fiables 01:13:17

aquí representamos la concentración añadida 01:13:18

frente a la señal 01:13:23

y calculamos 01:13:25

cuál sería la x para y 01:13:28

igual a 0 01:13:29

Sustituyendo en la recta de calibrado, en esta de aquí, sale que X es igual a 0,8459 miligramos por cada 100 mililitros. 01:13:31

Las unidades son las mismas que hemos expresado aquí. 01:13:41

La señal, como en este caso no nos dice que tenga unidades, pues no hacemos nada. 01:13:45

Y ahora, esa es la concentración que tenemos en los matraces que tenemos por aquí. 01:13:52

en cualquiera de estos matraces 01:13:58

esa es la concentración 01:14:00

en cualquiera, ¿por qué? 01:14:02

porque tenemos la misma cantidad de leche en cada uno de los matraces 01:14:03

entonces me da igual 01:14:06

voy a tener 5 mililitros de leche en 100 mililitros de volumen 01:14:07

como la cantidad de leche es la misma 01:14:10

da igual lo que nosotros hayamos añadido 01:14:13

de naranja porque lo morado 01:14:15

es igual en todos 01:14:16

ahora hay que pasar de estos matraces 01:14:17

al brick de leche 01:14:20

para eso les hacemos la dilución 01:14:22

volumen final 01:14:24

entre el volumen de la alícuota que yo tenga, lo que sea que me haya salido X por 100 entre 5. 01:14:26

Entonces multiplicamos X por 100 entre 5 y si no sale la concentración de calcio en la leche. 01:14:34

Entonces tenemos 16,92 miligramos por cada 100 mililitros de calcio en la leche. 01:14:42

Ahora, preguntaba el ejercicio. ¿Creéis que la calibración llevada a cabo es la adecuada? ¿Está bien haber aplicado una adición estándar o teníamos que haber aplicado un patrón externo o un patrón interno? 01:14:48

Pues por ahí lo habéis dicho 01:15:08

Que como tenemos un interferente 01:15:13

Que es la vitamina D 01:15:15

Y es un componente de la muestra 01:15:17

La única forma de hacerlo 01:15:19

Es con la adición estándar 01:15:21

Si fuera cosa del equipo 01:15:24

Tendríamos que haber hecho un patrón interno 01:15:26

Porque hay interferencia de algo 01:15:28

Si no hubiera interferencia de nada 01:15:30

Sería el patrón externo 01:15:32

Pero como pasa algo que no es lo habitual 01:15:33

Pues como lleva vitamina D 01:15:35

Y la vitamina D interfiere en el resultado final 01:15:38

que lo dice el procedimiento 01:15:40

pues 01:15:42

tiene que ser la edición estándar 01:15:43

¿vale? entonces bueno 01:15:46

bien, los datos si son fiables 01:15:48

pues la R es buena 01:15:50

¿vale? y 01:15:52

lo otro que preguntaba es que 01:15:54

si cambiaríamos algo 01:15:56

del procedimiento 01:15:58

de lo que hemos hecho en el procedimiento 01:16:00

yo que sé 01:16:03

de las diluciones 01:16:06

de las concentraciones que se tienen 01:16:07

de la 01:16:10

recta de calibrado por si no son fiables 01:16:11

o los datos 01:16:14

o que 01:16:15

las diluciones 01:16:16

cumplen todo lo de la 01:16:20

el 1.50 que teníamos 01:16:21

aquí la más 01:16:24

pequeña que tenemos es de 01:16:26

5 en 100 01:16:27

5 en 100 01:16:29

es como 1 en 20 01:16:31

entonces el 1.50 01:16:33

ese todavía lo 01:16:36

lo estamos respetando 01:16:37

Esa parte no deberíamos cambiarla. 01:16:40

Si ha salido bien, la R sale bien, pues no tenemos que cambiar nada. 01:16:45

Los matraces que tenemos son de 100 que hay en el laboratorio. 01:16:52

Las pipetas que tenemos son números medio enteros que sí pueden estar en el laboratorio. 01:16:57

Lo único que sí, que normalmente si trabajamos con matraces de 50, pero bueno, si habéis visto el procedimiento que trabajamos con matraces de 100, pues ya está. 01:17:03

Pero lo digo que las diluciones están bien, entonces no tendríamos por qué cambiar nada. 01:17:13