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CLASE 2. OPERACIONES DIFUSIONALES - Contenido educativo

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Subido el 13 de mayo de 2026 por M.paz C.

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Vamos a comenzar con la última parte, las operaciones difusionales. En este apartado vamos a hablar de absorción, absorción y cromatografía. Vamos a empezar con la absorción, con B. Consiste en poner un gas en contacto, hay distintos tipos, pero básicamente vamos a hablar de la absorción de un gas en el seno de un líquido. 00:00:02
¿Vale? Entonces en este caso el absorbente es lo que llamamos el líquido, el que retiene el compuesto de interés y el absorbato será el gas. ¿Vale? Se hace pasar, básicamente lo que se hace pasar es una corriente gaseosa por el seno a través de un líquido y en función de ese líquido, pues uno o dos o el analito que sea, quedará retenido en ese líquido. ¿Vale? Quedará absorbido en ese líquido. 00:00:24
en función de, y de esta forma lo puedo eliminar del gas, ¿vale? 00:00:52
Entonces, en función del tipo de interacción que se produzca entre el absorbente y el absorbato, 00:00:58
pues hablaremos de absorción física o química. 00:01:03
Si se produce reacción química será química 00:01:06
y si no se produce ningún tipo de reacción química, pues no será física, ¿vale? 00:01:07
Y bueno, comentar también que la operación contraria es lo que llamamos desorción, ¿vale? 00:01:12
Este proceso de absorción de un gas en el seno de un líquido viene regido por la ecuación de Henry, ¿vale? En los apuntes viene expresado de esta forma, presión parcial del gas es igual a la constante de Henry por la fracción molar del gas en el líquido. 00:01:18
Hay otra forma de expresar la ley de Henry, ¿vale? Que yo creo que es la más habitual, pero bueno, como en los apuntes viene esta, pues esta es la que vemos, ¿vale? Entonces, como os he dicho, es presión parcial del gas, que bueno, se puede expresar en atmósferas con milímetros de mercurio, ¿vale? En función de las unidades en las que usemos la presión parcial del gas, así serán las unidades de la constante de Henry, ¿vale? 00:01:34
Y la presión parcial de gas es igual a la constante de Henry, viene determinada el gas y el líquido, el analito que yo vaya a absorber, y la fracción molar del gas, ¿vale? 00:01:59
Que ya sabemos que la fracción molar es moles de gas dividido entre moles totales, ese mole total incluye moles de gas más moles de disolvente, ¿vale? 00:02:12
Como en este caso la fracción molar son moles entre moles, es adimensional, 00:02:22
el constante de Ferry que tiene las mismas unidades que la presión parcial del gas, 00:02:29
que pueden ser atmósferas o milímetros de mercurio en la que queramos expresarlo, ¿vale? 00:02:34
Ya os digo que hay otra forma de expresar esta ecuación, pero que es concentración del gas en el líquido 00:02:39
es igual a la constante de Ferry por la presión parcial del gas, 00:02:45
pero como la que viene aquí en el tema es esta, pues esta es la que vemos, ¿vale? 00:02:48
Hay un ejercicio en el tema que nos pide calcular en miligramos litro la solubilidad del agua del oxígeno, bueno, en una condición de una atmósfera y 25 grados centígrados, ¿vale? 00:02:55
Básicamente se trata de despejar y sustituir los datos en la ecuación, ¿vale? 00:03:06
La mayor dificultad que tiene es darse cuenta que como los gases tienen poca solubilidad en los líquidos, ¿vale? 00:03:13
darnos cuenta de que 00:03:18
cuando calculamos la fracción molar 00:03:21
del oxígeno, del gas, que es moles 00:03:24
de soluto, moles de oxígeno, partido 00:03:26
entre moles de oxígeno más moles de agua 00:03:28
lo que se hace es una aproximación 00:03:29
en que la suma 00:03:32
de los moles de oxígeno más los moles de agua 00:03:34
es prácticamente igual a los 00:03:35
moles de agua únicamente, ¿vale? porque asumimos 00:03:38
que la disolución del 00:03:40
del oxígeno en el agua es 00:03:41
muy pequeña, ¿vale? 00:03:43
entonces eso es lo 00:03:51
mayor dificultad, ¿vale? Una cosa 00:03:52
que está mal en el ejercicio, para que nos demos cuenta 00:03:54
y no nos rayemos, es que aquí 00:03:56
cuando calculan los moles de agua 00:03:58
aquí calculan los moles de agua 00:03:59
¿vale? Porque tiene un litro de agua, mil centímetros 00:04:02
cúbicos, lo divido entre un litro, aplico el factor de la densidad 00:04:04
y el peso molecular 00:04:06
del agua, pero aquí pone 53 00:04:08
55,39 moles de oxígeno 00:04:10
estos son moles de agua, ¿vale? 00:04:12
Esto está mal expresado 00:04:15
aquí, y luego ya simplemente 00:04:16
sustituir, ¿vale? Si nos damos cuenta 00:04:18
cuando ya resolvemos el ejercicio y nos salen los moles de oxígeno 00:04:20
vemos que es 1,26 por 10 a la menos 3 00:04:23
es un número muy pequeño comparado con los 55,39 00:04:25
por eso esta aproximación que hace aquí 00:04:29
vemos que es correcta 00:04:31
lo miráis y si tenéis alguna duda me preguntáis el próximo día 00:04:33
vamos a seguir ahora con la absorción 00:04:38
la absorción es un fenómeno superficial 00:04:42
en la que el analito de interés o los analitos de interés 00:04:45
quedan retenidos, bueno, estos anaditos están dispersos en una fase fluida, en un líquido o un gas 00:04:49
y quedan retenidos en una fase sólida, absorbente, ¿vale? 00:04:57
En este caso el absorbente es el sólido y el absorbato es ese líquido o ese gas, ¿vale? 00:05:01
La sustancia que está en ese líquido o ese gas y queremos retener en el absorbente que es un sólido, ¿vale? 00:05:06
Cuando hablamos de este tipo de, cuando hablamos de absorbentes, hay una serie de características que son importantes, son relativas a ellos, ¿vale? 00:05:15
Uno es la selectividad y otro es la superficie específica que tenga ese absorbente, ¿vale? 00:05:22
El absorbente puede ser selectivo de una única sustancia, un único compuesto en concreto o un grupo de compuestos, ¿vale? 00:05:27
A veces nos interesa que solo sea capaz de retener un ácido en concreto o a veces que nos interesa que sea capaz de retener todos los compuestos que tengan el grupo funcional ácido 00:05:35
O el grupo funcional, alcohol, o el que sea, me da igual, ¿vale? Pero bueno, quiere decir que es una característica de los absorbentes, ¿vale? Y lo que digo, gran superficie, porque como lo que queremos es retener el absorbente, en la superficie del absorbente, cuanto más superficie tenga, mayor capacidad de absorción va a tener, ¿vale? 00:05:43
y generalmente se expresa esa capacidad de absorción como gramos absorbidos por 100 gramos de absorbente, ¿vale? 00:06:03
Y otra cosa que nos interesa o que es característico de los absorbentes es, no es que sea característico de ellos, 00:06:11
pero bueno, nos interesa que tengan, o sea, los hay que se pueden regenerar y los hay que no, ¿vale? 00:06:18
Ahora lo veremos a continuación. 00:06:24
Entonces, bueno, nos interesa que tengan buena capacidad de regeneración porque eso implica que puedan utilizar ese absorbente 00:06:26
muchísimas veces. Esto es lo que pasaba cuando hablábamos del desecador con el gel de sílice 00:06:31
que retenía por absorción el agua, pero luego yo caliento ese gel de sílice y desorbo 00:06:38
el agua. Entonces lo puedo volver a utilizar. Dependiendo del absorbente, unos se pueden 00:06:44
regenerar y otros no se pueden regenerar. Pero bueno, pues interesa que sí, porque 00:06:50
lo puedo utilizar varias veces. Es más económico usar uno que puedo regenerar que no uno que 00:06:56
no puedo regenerar, ¿vale? Porque si lo puedo 00:06:59
regenerar lo utilizaré n veces 00:07:01
y si no, pues solo uno. 00:07:03
¿Vale? Bueno, en función 00:07:06
del tipo de interacciones que se producen 00:07:07
entre el absorbente y el absorbato, pues hay 00:07:09
distintos tipos de absorción, ¿vale? 00:07:11
Puede ser por intercambio iónico, 00:07:13
¿vale? Que se produce un intercambio de iones 00:07:15
entre iones que están retenidos en el absorbente 00:07:17
y iones que forman parte de ese 00:07:19
absorbato, 00:07:21
¿vale? Se produce un intercambio entre ellos. 00:07:23
Esto es lo que ocurre 00:07:26
cuando se produce el abrandamiento 00:07:27
del agua, ¿vale? Cuando estoy limpiando el agua. Otro tipo de interacciones que se producen 00:07:29
es, o que se pueden producir entre el absorbente y el absorbato son fuerzas de Van der Waal 00:07:35
o fisisorción, ¿vale? Son fuerzas débiles. En este caso, bueno, en estos dos casos, los 00:07:40
absorbentes son regenerables, ¿vale? Y también puede ser que se produzca una absorción química 00:07:46
o fisisorción entre el absorbente y el absorbato, ¿vale? En este caso, el enlace que se produce 00:07:51
es fuerte y estos absorbentes 00:07:56
no son regenerables, ¿vale? 00:07:57
Les doy disculpas porque aquí me he comido la U 00:08:00
a falta de fotografía, ¿vale? 00:08:01
Bueno, en este 00:08:04
caso, sobre todo en el caso de 00:08:06
absorción por fuerzas de Van der Waal 00:08:08
o fisisorción, 00:08:09
se puede 00:08:12
el absorbato, o sea, el absorbente 00:08:12
puede tener 00:08:16
varias capas de absorbato, ¿vale? 00:08:17
Mientras que en el caso de la 00:08:21
quimisorción solo se 00:08:22
Realmente solo se tiene una única capa de absorbato, ¿vale? 00:08:23
Y eso, monocapa, multicapa, generable, no regenerable, ¿vale? 00:08:30
Como comentario, simplemente decir que muchas veces se producen los tres fenómenos 00:08:35
cuando se lleva a cabo un proceso de absorción, ¿vale? 00:08:41
O sea, en función del absorbente, del absorbato, pues tendrá en mayor medida uno u otro, 00:08:44
pero muchas veces se dan lugar los tres a la vez, ¿vale? 00:08:48
O sea, no es que uno sea exclusivo del otro, ¿vale?, o excluyente del otro, ¿vale?, sino que muchas veces aparecen los tres a la vez, ¿vale? 00:08:52
Bueno, hay distintos tipos de absorbentes, carbones activos, tiras de colorantes, ceres activos, como el gel de sílice, que comentábamos cuando los desecadores, pues miraros un poquito las características que tiene cada uno de ellos, ¿vale? 00:09:01
Y luego vamos a comentar, vamos a hablar de la cromatografía, ¿vale? 00:09:13
Entonces, los que hayáis cogido análisis instrumental, pues esto lo tenéis ya machacado, ¿vale? Porque esto en realidad se da sobre todo, o sea, aquí damos unos conceptos básicos y luego habláis de la cromatografía en profundidad en análisis instrumental. 00:09:16
Los que tengáis la asignatura de instrumental, esto ya lo sabéis. La cromatografía es una técnica de separación de una mezcla de solutos basada en la diferente velocidad de desplazamiento de los componentes de la muestra al ser arrastrados por una fase móvil a través de una fase estacionaria. 00:09:33
la fase móvil puede ser líquida o gaseosa 00:09:54
y la fase estacionaria puede ser líquida o sólida 00:09:57
en función de distintas combinaciones de los estados físicos 00:10:00
de la fase móvil y la fase estacionaria 00:10:03
tenemos distintos tipos de cromatografías 00:10:04
porque básicamente la cromatografía lo que trata es 00:10:06
yo tengo mi muestra disuelta 00:10:12
en una fase líquida o gaseosa 00:10:14
y lo que hago pasar es esa fase líquida o gaseosa 00:10:16
a través de una fase estacionaria 00:10:19
que esa fase estacionaria puede ser líquida o sólida 00:10:21
En función de las interacciones que se producen entre los analitos y la fase estacionaria, esos analitos quedan más o menos retenidos en esa fase estacionaria. Serán más o menos arrastrados a través de esa fase móvil. 00:10:24
Entonces, si yo tengo dos analitos y uno se mueve más rápido que otro 00:10:42
consigo separarlos, ¿vale? 00:10:46
Se trata de eso, a nivel así, como una idea muy general 00:10:48
Yo tengo dos analitos en la fase móvil 00:10:51
Como son retenidos en distinta magnitud por la fase estacionaria 00:10:54
se mueven a distinta velocidad, se pueden separar 00:10:58
¿Vale? 00:11:01
Entonces, como los tengo separados, ya los puedo identificar de forma más sencilla 00:11:03
Entonces, bueno, la cromatografía se puede clasificar de distintas formas, ¿vale? Entonces, bueno, esta tablita, estudiarosla, nos dice cómo se, en función de distintos factores, cómo se clasifican las cromatografías, ¿vale? 00:11:07
Dice, según se coloque en contacto la fase móvil y la fase estacionaria, pues será en columna o plana. 00:11:26
Según el estado físico de la fase móvil y de la fase estacionaria, pues tengo distintos tipos. 00:11:33
Entonces, líquido-líquido, líquido-sólido, gas-líquido y gas-sólido. 00:11:39
Y luego, en función de los mecanismos, las interacciones que se producen entre la fase estacionaria y los analitos, 00:11:45
que están inversos en esa fase líquida, 00:11:50
pues tenemos cromatografía de absorción, 00:11:53
de reparto, de intercambio iónico, 00:11:55
de exclusión y de afinidad. 00:11:57
Aquí viene una línea de cada uno de ellos. 00:11:59
Absorción. 00:12:03
El soluto es absorbido por la fase estacionaria 00:12:04
debido a interacciones polares o de Van der Waals. 00:12:06
Intercambio iónico. 00:12:09
La fase estacionaria actúa como un intercambiador 00:12:10
o cambiador de iones. 00:12:12
Es decir, el soluto de la fase móvil es retenido 00:12:13
porque se establecen fuerzas electrostáticas 00:12:16
entre las dos fases. 00:12:17
De exclusión. 00:12:19
Aquí lo que ocurre es una separación en función del tamaño de las partículas, 00:12:20
del tamaño de los poros que tiene esa fase estacionaria 00:12:25
y del tamaño de las partículas que forman parte de la mezcla, 00:12:27
de la cual yo quiero separar los componentes. 00:12:30
De hecho, el soluto se reparte en la fase estacionaria por su solubilidad. 00:12:34
Tiene distinta solubilidad entre la fase estacionaria y la fase móvil. 00:12:38
Eso hace que los componentes de la muestra sean más o menos retenidos 00:12:41
por la fase estacionaria y más o menos arrastrados por la fase móvil. 00:12:45
Y así los separo. 00:12:49
Y la cromatografía de afinidad. 00:12:50
Aquí me ha quedado esto tapado, no sé muy bien porque cuando yo lo puse no estaba tapado, 00:12:53
pero bueno, viene igual en el aula virtual, en los apuntes. 00:13:01
Este es un tipo especial de absorción aplicado a la bioquímica en la que un sólido tiene enlazado un ligando. 00:13:04
Entonces, en función de la interacción que se produzca entre el analito y ese ligando, 00:13:10
se produce esa separación de los componentes de la muestra. 00:13:13
Vamos a aprender los tipos de interacciones, los mecanismos que se producen entre los analitos y las fases estacionarias. 00:13:16
Vamos a comentar un poquito de cromatorracía en capa fina y cromatorracía en columna. 00:13:29
Dentro de la capa plana tenemos dos tipos, en papel y en capa fina. 00:13:34
entonces, aquí yo os aconsejo que os veáis 00:13:45
hay unos vídeos colgados en el tema 00:13:48
y viene 00:13:50
claro, se ve claramente, porque si no contarlo así 00:13:51
sin tener un vídeo, pues es un poco 00:13:54
complicado, ¿vale? 00:13:56
pero bueno, lo comento 00:13:58
y os miráis los vídeos, que es mucho más 00:14:00
intuitivo, más aclaratorio 00:14:02
¿vale? 00:14:04
en la cromatografía en capa plana 00:14:06
¿vale? la forma de, os habéis dicho 00:14:08
que hay dos tipos, en papel y en placa 00:14:10
¿vale? 00:14:12
La forma de operar es la misma, lo que cambia es el soporte en el que está la capa estacionaria, ¿vale? Pero la forma de llevar a cabo esa cromatografía es la misma. Entonces, vamos a comentar un poco, vamos a hablar un poco de los soportes y luego ya vemos cómo se lleva a cabo ese desarrollo de esa cromatografía, ¿vale? 00:14:14
Entonces, la cromatografía sobre papel, la capa estacionaria, es un papel de filtro en el que tengo retenido agua, ¿vale? 00:14:31
Que es el que va a actuar como separador de los componentes de la muestra, ¿vale? 00:14:39
Y luego la fase móvil, pues puede ser un disolvente o una mezcla de disolventes en función de los analitos que yo quiera separar, ¿vale? 00:14:45
Entonces, básicamente, aquí el mecanismo de separación es la distinta solubilidad de los distintos componentes en ese agua, ¿vale? 00:14:53
Porque ese agua va a ser lo que llamamos fase móvil. 00:15:09
Y, bueno, aquí vienen unas aplicaciones de la cromatografía en papel, ¿vale? 00:15:14
Pues determinar el número de componentes de una muestra. 00:15:17
Una cosa importante, la cromatografía en papel es una técnica cualitativa, ¿vale? 00:15:20
no puedo saber cuánto tengo de cada componente. 00:15:24
Sé si tengo dos, tres componentes y qué componente tengo, 00:15:28
pero no sé cuánto tengo. 00:15:31
¿Vale? Importante. 00:15:34
Entonces, bueno, 00:15:36
pues aquí vienen unas aplicaciones de la cromatografía. 00:15:38
Determinar el número de componentes de una muestra, 00:15:42
comprobar la pureza, seguir la evolución de una reacción, 00:15:44
determinar el disolvente más apropiado 00:15:47
para llevar a cabo luego una cromatografía preparativa 00:15:50
en columna o en placa 00:15:52
y seguiré el proceso de una cromatorgrafía en columna. 00:15:54
¿Vale? Pues esto mirároslo también porque, bueno, me parece importante. 00:15:57
Y en la cromatorgrafía en placa, ¿vale? 00:16:05
Aquí tenemos el soporte del papel, aquí lo que tenemos es el soporte donde colocamos la fase estacionaria. 00:16:09
Es, o bien, antes se usaba sobre todo un vidrio, ¿vale? 00:16:14
un vidrio, como un cristal 00:16:20
en el que yo colocaba 00:16:22
yo preparaba la fase 00:16:25
estacional y la dejaba allí, la colocaba y dejaba 00:16:27
que se secase, ¿vale? Ahora la mayor 00:16:29
parte de ellos, lo que más se usa 00:16:31
sobre todo es 00:16:33
la cromatografía 00:16:34
en placa en la que el soporte es aluminio 00:16:37
¿vale? Es un papel de aluminio 00:16:39
una chapita de aluminio finita 00:16:41
en la que ya, y ya lo compro 00:16:42
no se preparan, no es que sean 00:16:45
cosas muy específicas en investigación, pero bueno 00:16:47
Para el trabajo rutinario ya lo compras hecho, ¿vale? 00:16:49
Entonces, inventes como una especie de cifra un folio, ¿vale? 00:16:52
Solo que no es un folio de papel, sino que es un folio de aluminio, 00:16:55
más resistente que el papel de aluminio este que usamos en la cocina 00:16:58
y sobre el que hay una pequeña capa, una capa finita de absorbente, ¿vale? 00:17:02
Entonces, ese absorbente, pues depende de los analitos que yo quiero separar, 00:17:08
pues es de distintos materiales, gel de sílice, óxido de aluminio, tierra de atomeas, depende, ¿vale? 00:17:11
Y luego, esto es la fase estacionaria y luego la fase móvil, que también llamamos fluyente, ¿vale? 00:17:15
Fluyente y fase móvil son sinónimos en la cromatografía, pueden ser distintos disolventes orgánicos, 00:17:24
que pueden ser los mismos que utilice en cromatografía de papel, ¿vale? 00:17:31
Etes de petróleo, cicloxano, tolueno, etanol, metanol, acetona, puede ser uno o una mezcla de dos, tres disolventes, ¿vale? 00:17:34
En función de lo que yo quiera separar, ¿vale? Entonces la diferencia entre uno y otro es simplemente el soporte en el que yo coloco la fase estacionaria, ¿vale? Vamos, lo que es la fase estacionaria en realidad. Pero la forma de llevar a cabo la cromatografía en capa plana es la misma, ¿vale? 00:17:43
Bueno, aquí tengo otra diapositiva, ventajas de la cromatografía en capa fina respecto a la de papel. Es más eléctrica, de mayor resolución, es capaz de separar mejor los componentes de una muestra y tiene mayor velocidad de separación, ¿vale? Pero bueno, tampoco es el de mucho, en cualquiera de los dos casos. 00:18:02
y bueno, vamos a comentar un poco 00:18:19
el procedimiento, ¿vale? 00:18:22
ya os he dicho que 00:18:23
la croma, que la fase estacional 00:18:24
era lo que nos, habitualmente 00:18:28
lo que nos vende, si es en papel, pues es un papel 00:18:29
de filtro, nos vale para hacerlo 00:18:31
¿vale? y si es en 00:18:33
en capa 00:18:36
en placa, perdón, pues simplemente 00:18:36
es como si fuera un papel 00:18:40
un folio, pero en vez de ser de folio, pues es lo que os he dicho 00:18:41
del papel de aluminio 00:18:44
con su 00:18:45
cubierto, recubierto con una fina capa 00:18:46
de la fase estacionaria, ¿vale? 00:18:49
Entonces, tanto el papel de filtro como 00:18:51
el de placa 00:18:53
pues es una especie de folio y yo 00:18:55
corto, lo puedo cortar fácilmente 00:18:57
en caso de papel de filtro con las tijeras 00:19:00
en el caso de la cromatografía 00:19:02
en placa con un cúter 00:19:04
¿vale? Puedo cortar 00:19:05
corto el tamaño de 00:19:07
placa que yo necesite en función del número de muestras 00:19:09
que yo quiero cromatografiar, ¿vale? 00:19:12
Una cosa, bueno 00:19:14
ya digo que creo que hay un bit, viene hasta el vídeo 00:19:16
os lo veis, ¿vale? 00:19:18
generalmente cuando yo voy a cortar el 00:19:20
tamaño que necesito para hacer 00:19:21
el cromatograma 00:19:23
y lo corto con el cúter, lo corto por la parte 00:19:25
del aluminio, no por la parte del 00:19:28
de la fase estacionaria 00:19:30
¿vale? 00:19:32
bueno, dicho esto, yo corto 00:19:34
el sitio que yo necesite en función 00:19:36
del número de muestras que yo quiera 00:19:38
cromatografiar, separar los 00:19:39
componentes, ¿vale? en este caso aquí 00:19:42
tengo tres, ¿vale? yo he cortado esta plaquita 00:19:44
y he colocado tres muestras, ¿vale? 00:19:46
Primero lo que se hace, yo una vez que he cortado el tamaño de placa 00:19:50
que necesito en función de las muestras que yo quiero separar, ¿vale? 00:19:53
Lo que hago es marcar con un lápiz una línea más o menos a un centímetro del borde, ¿vale? 00:19:56
Con lápiz, no con rotulador, con lápiz. 00:20:02
Y sobre esa línea es donde yo deposito las muestras que yo quiero separar. 00:20:05
Las puedo depositar simplemente con una pipeta Pasteur, una gotita o con un tubito capilar. 00:20:09
es una gota, es una cantidad mínima lo que se necesita, ¿vale? 00:20:14
En este caso, pues he depositado tres muestras, 00:20:17
dice aplicación de las muestras, tres muestras, ¿vale? 00:20:19
En esa línea, que yo he marcado con papel, con lápiz, perdón. 00:20:23
Luego lo que tengo que hacer es introducir mi placa 00:20:28
dentro de mi fase móvil, ¿vale? 00:20:30
Ese disolvente, esas mezclas de disolvente 00:20:35
que yo voy a utilizar para separar los componentes. 00:20:37
El disolvente tiene que quedarme siempre por debajo 00:20:39
de la zona de aplicación 00:20:42
de las muestras. Si lo coloco por encima 00:20:44
lo que voy a hacer es disolver las muestras 00:20:46
en el disolvente orgánico, en la fase 00:20:48
móvil. ¿Vale? Y entonces me van a quedar 00:20:50
aquí estas 00:20:52
muestras disueltas en la fase 00:20:53
móvil. No es lo que yo quiero. Lo que yo quiero es separar 00:20:56
los componentes que forman parte de las muestras. 00:20:58
Entonces, siempre el disolvente, 00:21:00
la fase móvil, por debajo 00:21:02
de la zona de aplicación de las muestras. 00:21:04
¿Vale? 00:21:06
Lo que vamos a introducir, esto es una cubeta, 00:21:08
hay casas comerciales que te venden las cubetas 00:21:10
y si no, bueno, pues cualquier 00:21:12
frasco de vidrio nos sirve 00:21:13
digo de vidrio porque tiene que ser 00:21:16
algo transparente para que yo pueda ver qué es lo que está sucediendo 00:21:19
en la placa 00:21:21
para ver el desarrollo de ese cromatograma 00:21:22
¿vale? entonces bueno, yo he aplicado 00:21:25
las muestras, las he identificado 00:21:27
tengo que saber lo que pongo en el 00:21:28
saber que tengo en un vaso 00:21:29
de precipitados, tengo que saber 00:21:33
que la muestra 1, o sea, o esto 00:21:34
y sé que la 1 procede de la muestra 00:21:36
no sé, lo que sea, la 2 de lo que sea 00:21:38
y la 3 de lo que sea, ¿vale? 00:21:41
identificada 00:21:43
y yo con un lápiz 00:21:43
coloco, introduzco mi muestra 00:21:46
mi placa 00:21:49
en la cubeta, ¿vale? 00:21:50
aquí hay cubeta de vidrio 00:21:53
con matográfica, pero ya digo, una cubeta o simplemente 00:21:54
un poco de cristal, si lo hacemos en plan 00:21:57
cutre, la introduzco 00:21:59
y entonces ¿qué pasa? que ahora por 00:22:01
capilaridad, la fase móvil 00:22:03
va a ir ascendiendo a través de la fase 00:22:05
estacionaria. ¿Y qué va a ocurrir? 00:22:07
En su arrastre, al ir subiendo, va a ir 00:22:08
arrastrando los componentes 00:22:10
de la muestra. 00:22:13
En función de si son más solubles en la 00:22:14
fase móvil o en la 00:22:16
fase estacionaria. 00:22:19
Generalmente la fase estacionaria es polar 00:22:20
y los disolventes son apolares. 00:22:22
Si los dos componentes de la muestra 00:22:25
son componentes... 00:22:27
Vamos a suponer que tengo dos componentes. 00:22:28
Uno que es muy polar y otro que es 00:22:30
apolar. La fase estacionaria 00:22:32
suele ser 00:22:34
polares, va a quedar más retenido 00:22:36
el componente polar 00:22:38
mientras que la polar 00:22:40
va a ser menos retenido, con lo cual 00:22:41
va a avanzar más 00:22:44
al ir subiendo 00:22:46
al avanzar la fase móvil 00:22:47
¿vale? con lo cual 00:22:49
aquí si vemos en este caso 00:22:51
que ya está 00:22:54
la cromografía ya desarrollada 00:22:54
¿vale? aquí yo he aplicado, esto lo pone 00:22:58
para papel, ¿no? 00:23:00
la fase móvil que vemos que está por debajo 00:23:01
de la línea en la que yo he aplicado mi muestra 00:23:03
Es un puntito 00:23:06
Cuando ha subido la fase móvil 00:23:08
Por capilaridad, esto azul oscurito 00:23:11
Es la fase móvil 00:23:13
Que ha ido subiendo, entonces al ir subiendo 00:23:15
La polaridad de los componentes de la muestra 00:23:16
Y la polaridad de la fase estacional 00:23:19
Y la polaridad de la fase móvil 00:23:21
Se van separando 00:23:22
En distintos componentes 00:23:23
¿Veis? Aquí pone 00:23:27
Componentes separados, 1, 2, 3, 4 00:23:28
Bueno, aquí parece que hay otros 5 00:23:30
Entonces así yo los tengo 00:23:31
los he separado porque 00:23:35
se ven arrastrados por la fase móvil 00:23:36
en una diferente 00:23:39
en una distinta magnitud 00:23:40
vale 00:23:42
los he podido separar 00:23:43
el cromatograma termina 00:23:46
si aquí 00:23:48
veis esto es una 00:23:49
el papel llega hasta aquí arriba 00:23:52
yo no dejo que la fase móvil 00:23:54
siga hasta arriba 00:23:57
sino que cuando me quede como un centímetro 00:23:58
o así pues ya corto 00:24:00
y considero que ya está separado todos los componentes 00:24:02
corto la cromatografía 00:24:04
a ver, también depende de los componentes 00:24:06
que tenga, separar, a veces que con 00:24:08
un trocito de papel de 00:24:10
6 centímetros es suficiente, a veces 00:24:12
tengo que poner 10, pues depende de los 00:24:14
componentes que tenga que separar 00:24:16
pero vamos, lo que quiero decir es que generalmente 00:24:18
la fase móvil no se deja que suba hasta arriba 00:24:20
sino que lo termino antes 00:24:22
¿vale? esto sería igual 00:24:24
aquí pone cromatografía de papel, pero sería igual 00:24:26
en papel que en capa 00:24:28
fina, es lo mismo 00:24:30
¿vale? igualmente lo corto, pongo 00:24:31
la muestra, o sea, marco la línea, pongo 00:24:34
la muestra, lo meto en la cubeta, 00:24:36
dejo que se desarrolle, por eso tiene que ser algo 00:24:38
transparente, ¿vale?, de vidrio, para que yo vea 00:24:40
si veo que se me están separando 00:24:42
los componentes y veo cuando ya quiero terminar 00:24:44
la cromatografía, ¿vale? 00:24:46
Entonces, 00:24:49
en función de la fase móvil y la fase 00:24:50
estacionaria, ¿vale?, los 00:24:54
componentes de la muestra tienen una cosa 00:24:56
que se llama factor de retención, 00:24:58
perdón, que es este, FR, 00:25:00
RF, perdón, 00:25:03
que es característico de un componente determinado en una muestra determinada 00:25:04
con una fase estacionaria y una fase móvil determinada y a una determinada temperatura. 00:25:10
Entonces este RF es distancia recorrida por el compuesto y distancia recorrida dividido entre distancia recorrida por el disolvente. 00:25:15
Porque yo aquí he marcado esta línea con la muestra y luego con una regla lo que se hace es medir de aquí hasta aquí. 00:25:23
es la distancia que ha recorrido el disolvente 00:25:31
6,3 centímetros 00:25:35
de aquí a aquí es la distancia que ha recorrido 00:25:38
este componente, 5,8 00:25:41
ese valor es característico 00:25:43
de un determinado compuesto en una mezcla 00:25:46
para una determinada fase estacionaria 00:25:49
y una determinada fase móvil 00:25:52
y es una 00:25:54
constante 00:25:57
para ese compuesto, ¿vale? Una característica. 00:26:01
De todas maneras, esto lo que se hace habitualmente 00:26:03
es, si yo creo que en esta muestra 00:26:05
tengo, imaginaros, 00:26:07
distintos aminoácidos, 00:26:10
¿vale? Y yo sé que tengo 00:26:11
lisina, 00:26:13
¿vale? Pues yo lo que hago es 00:26:16
igual que, o sea, aquí yo coloco mi muestra, 00:26:17
mi gotita de muestra, y aquí coloco 00:26:20
una gota de lisina, ¿vale? 00:26:21
Si yo aquí tengo lisina, 00:26:24
la lisina subirá hasta este punto. 00:26:26
Si aquí tengo lisina, la lisina subirá 00:26:28
hasta este punto. 00:26:30
Entonces, como sé que la lisina, su RF es 3,8, si aquí es 3,8, tengo lisina. 00:26:31
¿Vale? Es una forma de determinar qué componentes tengo en una muestra. 00:26:39
¿Vale? Si tengo varios, pues lo que hago es aquí pinchar los que yo creo que puedo tener en esta mezcla. 00:26:44
¿Vale? Si este sube lo mismo que este, ese es el mismo compuesto. 00:26:51
Si este tiene otra mancha que ha subido igual que la de aquí, es que tengo este compuesto. 00:26:54
¿Vale? 00:27:00
No sé qué compuesto tengo, pero no sé cuánto tengo. A veces las manchas se ven a simple vista y otras veces tengo que observarlas con luz ultravioleta o añadir un reactivo. 00:27:01
a veces se pulverizan 00:27:17
con un fruflis de estos lo pulverizo 00:27:19
para que sea coloreada 00:27:21
la mancha, porque a veces no se ve el color 00:27:24
entonces depende del tipo de muestra 00:27:26
pues a veces hay que hacerlo 00:27:28
con luz ultravioleta o añadir un reactivo 00:27:29
pulverizarlo con un reactivo y entonces ya sí que lo veo 00:27:31
a simple vista, a veces sí se ve a simple vista 00:27:34
bueno, pues digo, esto es la cromatografía 00:27:36
en capa fina y el desarrollo 00:27:41
es el mismo, sea en papel o en placa 00:27:42
vale 00:27:45
ahora vamos a ver un poquito de la cromatografía en columna 00:27:46
entonces en este caso 00:27:49
aquí lo que ocurre simplemente es que la fase estacionera 00:27:50
está colocada dentro de una columna 00:27:52
de vidrio, como si fuera una especie de bureta 00:27:54
similar 00:27:56
¿vale? 00:27:57
que la fase estacionera se coloca en una columna 00:28:00
que es un tubo de vidrio de dimensiones variables 00:28:02
¿vale? y acaba con un estrechamiento 00:28:04
que dispone de una llave 00:28:07
igual hay un vídeo, os lo miráis 00:28:08
bueno, aquí os explico un poco como se 00:28:11
se lleva a cabo el desarrollo de una 00:28:14
cromatografía en columna 00:28:18
Una vez colocada en posición vertical la columna, se introduce en el fondo de la columna lana de vidrio o algodón ayudándonos de una varilla de vidrio. Esto es simplemente para que la fase estacionaria no se nos salga por el agujero de la llave. 00:28:19
este relleno de la colunda con la mezcla 00:28:35
de absorbente y el disolvente 00:28:38
con la llave abierta de manera que gotee un poco 00:28:40
de disolvente, lo que hago es una mezcla del 00:28:42
absorbente, la fase estacionaria y el disolvente 00:28:44
que yo voy a utilizar como fase móvil 00:28:46
¿vale? 00:28:48
bueno, cuando ya 00:28:51
veo que gote un poco 00:28:52
el disolvente, la fase móvil, cierro la llave 00:28:54
añado más 00:28:56
disolvente y me tiene que quedar un poquito 00:28:58
por encima del material de relleno 00:29:00
¿vale? no sé, o sea, si lo veis aquí 00:29:02
esta sería la fase estacionaria 00:29:07
bueno, es que aquí exactamente 00:29:09
por aquí, imagínate 00:29:11
que si esta es la fase estacionaria que añade un poquito 00:29:12
más de líquido, ¿vale? 00:29:15
un poquito por encima, luego colocamos 00:29:16
la muestra disuelta en el disolvente 00:29:19
en el que se ha preparado la columna 00:29:21
la depositamos 00:29:23
aquí está la mezcla 00:29:24
¿vale? esta es la columna 00:29:27
con el relleno del absorbente 00:29:29
la muestra 00:29:31
¿vale? 00:29:31
y luego lo que tengo que añadir 00:29:35
se añade, una vez que tengo la muestra colocada en la parte superior 00:29:37
se añade el disolvente, el huyente, hemos dicho que disolvente 00:29:40
bueno, disolvente, el huyente, fase móvil es lo mismo 00:29:43
y se abre la llave de la columna 00:29:45
la muestra se va separando en bandas a lo largo de la columna 00:29:47
en base a su diferente movilidad y se recogen las diferentes fracciones 00:29:50
veis aquí, esta es la columna 00:29:53
he colocado mi muestra 00:29:57
añado la fase móvil 00:29:59
la columna está abierta 00:30:02
voy añadiendo la fase móvil y lo que 00:30:06
hace es, pues en función de las interacciones que se 00:30:08
producen entre la fase estacionaria, la muestra 00:30:10
y la fase móvil, pues se van separando 00:30:12
los componentes 00:30:14
¿veis? aquí tengo dos, o sea, esto sería bueno 00:30:16
la lanza porque está todo mezclado 00:30:18
y se me van separando porque este 00:30:19
está menos retenido 00:30:22
en la fase estacionaria que este 00:30:24
¿vale? idealmente si son 00:30:26
compuestos coloreados pues lo veo fácilmente, si no son 00:30:28
compuestos coloreados pues ya tengo que añadir algo para que 00:30:30
sean los colores 00:30:32
¿vale? pero bueno, simplemente 00:30:34
He separado mis dos compuestos y luego lo que hago yo aquí es, cuando veo, como esto es transparente, en este caso que son coloreados, pues cuando veo que llega este rojo aquí, lo recojo en un tubito, en un empento, por ejemplo, porque suelen ser pequeñas cantidades, y luego recojo este otro componente. 00:30:36
Y así los he separado y los tengo separados en dos tubos, ¿vale? 00:30:51
Entonces, en función de las interacciones que se producen, pues hay distintos tipos de cromatografías, ¿vale? 00:30:56
Que es lo que hemos comentado antes, ¿vale? 00:31:00
De reparto, de intercambio iónico, ¿vale? 00:31:02
Pues eso varía en función de las interacciones que se producen entre la fase móvil, la fase estacional y el analito, ¿vale? 00:31:05
Es lo que pone aquí. 00:31:14
Dicen tipos de cromatografía en columna de absorción, de exclusión, de afinidad, de intercambio iónico o de reparto, ¿vale? 00:31:15
nada, quedaros con el nombre porque esto ya lo veréis 00:31:21
más en profundidad al año que viene 00:31:24
¿vale? y luego, bueno, simplemente 00:31:26
esta es la 00:31:28
líquida, ¿vale? 00:31:29
y luego, en la 00:31:33
cromatografía de gases, o sea, aquí en este caso 00:31:34
la fase 00:31:36
móvil es un líquido 00:31:37
¿vale? 00:31:40
en este caso, aquí en la cromatografía de gases 00:31:42
la fase móvil es un gas 00:31:44
¿vale? 00:31:46
la muestra es, y es necesario que la muestra 00:31:48
esté en fase vapor, ¿vale? 00:31:50
Se volatilice. 00:31:52
La muestra es volatilizada 00:31:53
y se lleva a la parte superior 00:31:54
de una columna cromatográfica. 00:31:55
La fase móvil es un gas inerte 00:31:57
porque no quiero que se produzca 00:31:59
ningún tipo de reacción 00:32:00
entre los componentes de la muestra 00:32:01
y la fase móvil. 00:32:02
Bueno, se puede utilizar nitrógeno, 00:32:05
helio, hidrógeno, ¿vale? 00:32:06
Transporta la muestra a través de la columna. 00:32:09
En este caso, 00:32:10
bueno, esto sería un cromatógrafo de gases. 00:32:11
A ver, digamos que esto que está aquí, ¿vale? 00:32:20
Es cromatografía en columna, pero clásica. 00:32:22
Luego hay otra obra que es, digamos, más moderno, más estrella, pero bueno, lo vamos a dejar ahí. 00:32:24
Entonces, en la cromatografía de gases, estos son los equipos. 00:32:36
Tenemos gas líquido y gas sólido. 00:32:40
Gas líquido se basa en la distribución del analito entre una fase móvil gaseosa y una fase líquida 00:32:45
y movilizada sobre la superficie de un sólido inerte. 00:32:49
Y en la gas sólido, la retención de analitos se produce por absorción física. 00:32:52
entre una y otra, pero en cualquier caso 00:32:58
la fase móvil es un gas 00:33:01
y tengo que ser capaz 00:33:03
para que se pueda llevar a cabo, tengo que ser capaz de pasar 00:33:05
la muestra a fase vapor 00:33:07
y está arrastrada 00:33:09
por el gas de la fase móvil 00:33:10
que es nitrógeno, helio, hidrógeno 00:33:13
o mezcla de gases 00:33:15
aquí la fase estacionaria 00:33:16
es un líquido 00:33:23
y aquí es un sólido 00:33:24
Bueno, aquí simplemente son las partes del cromatógrafo, el fuente del gas portador, microjeringa para inyectar la muestra, la columna cromatográfica, que es lo más importante, bueno, todo es importante, pero bueno, aquí es realmente donde se produce la separación de los componentes, el horno, porque necesito que esta columna esté a una temperatura determinada y esté muy controlado, 00:33:27
y luego, hemos dicho que la columna lo que me hace es separar, dice lo que tengo, entonces para saber lo que tengo tengo que tener colocado después de la columna un detector, hay distintos detectores, no vamos a entrar en ellos, 00:33:53
los nombres, ionización de llama, conductividad térmica, bueno hay distintos tipos, hay más detectores que estos que están aquí puestos, pero bueno, lo que tenemos que tener claro es que la cromatorracia de gas es la fase móvil es un gas, 00:34:09
La fase estacionaria puede ser un líquido o un sólido. Tengo que vaporizar la muestra. La columna tiene que estar a una temperatura controlada. Y luego tengo que tener un sistema de texto que me diga qué tengo y cuánto tengo. 00:34:20
Y luego, bueno, un sistema, un ordenador para registrar los datos, ¿vale? Y simplemente os he puesto aquí una foto de lo que son las columnas, ¿vale? Porque no es como la cromatografía de líquidos que es un tubito de vidrio, ¿vale? Estos son como así del tamaño, no voy a decir de un pelo, pero casi, ¿vale? 00:34:38
Y dentro de ese tubito, o un cable, digamos como un cable, ¿vale? Pues dentro de ese tubo de ese cable, que no es un cable en realidad, pero bueno, dentro de ese tubito es donde está la columna, que es lo que nos va a separar, bueno, gracias al gas portador también, hasta la fase móvil, lo que nos va a separar los componentes de la muestra, ¿vale? 00:35:00
Pero bueno, siempre te he puesto la foto para que sepáis lo que es, ¿vale? 00:35:19
Columna, bueno, hay distintos tipos, ¿vale? 00:35:23
En función de la longitud y el grosor de la columna. 00:35:27
Pero vamos, como si fuera un cable enrollado. 00:35:31
O sea, enrollado porque son muy largas, ¿vale? 00:35:33
Porque fijaros, dice columna cromatográfica. 00:35:35
Dependiendo del tipo de columna, las capilares, que son muy finitas, 00:35:37
suelen medir entre 15 y 100 metros, ¿vale? 00:35:41
las llenas que son un poquito más gruesas 00:35:43
son entre 2 y 6 metros 00:35:47
entonces eso está creado 00:35:49
¿vale? 00:35:51
estas son las partes del cromatograma 00:35:52
del cromatografo 00:35:55
y luego aquí simplemente he puesto 00:35:56
la jeringuilla 00:35:58
porque se usa, bueno, microjeringa 00:36:00
porque añado muy poquita 00:36:03
cantidad de muestra, se llama microjeringa 00:36:05
pero bueno, es como si fuera una jeringuilla 00:36:07
a través de un sexo 00:36:08
la muestra en el cromatograma 00:36:10
Bueno, pues esto es simplemente para que lo vierais, ¿vale? 00:36:13
Y bueno, esto es un cromograma resuelto. 00:36:18
Vamos, es lo que obtenemos, después de haber pasado por el detector, 00:36:22
lo que obtenemos como el resultado de esa separación, ¿vale? 00:36:24
Y pues nada más, esto es todo. 00:36:33
Pues ya hemos terminado, ¿vale? 00:36:35
Materias:
Química
Niveles educativos:
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  • Formación Profesional
    • Ciclo formativo de grado superior
      • Primer Curso
      • Segundo Curso
Autor/es:
Paz Calvo
Subido por:
M.paz C.
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13 de mayo de 2026 - 17:01
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Clave
Centro:
IES LOPE DE VEGA
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