Saltar navegación

Identificación microbiológica - Contenido educativo

Ajuste de pantalla

El ajuste de pantalla se aprecia al ver el vídeo en pantalla completa. Elige la presentación que más te guste:

Subido el 13 de marzo de 2024 por Raquel M. B.

41 visualizaciones

Más información Transcripción

Descargar la transcripción

Inicio la evaluación nuevamente. Y sería, la última parte del tema ya serían técnicas de identificación. ¿Veis la diapositiva? Sí, sí se ve. Vale. Bien. Bueno, pues vamos a ver qué es eso de técnicas de identificación. Sería ya como lo último, más importante, que nos falta aprender en microbiología, ¿vale? 00:00:00
Es verdad que nos faltan tres temas, pero ya son de aplicación y, bueno, habrá muchos datos nuevos y mucha más información, pero ya con esto sabíamos todo lo genérico que hay que saber, ¿vale? 00:00:26
Entonces, lo que queremos cuando hacemos un análisis de identificación, un análisis cualitativo, es ponerle nombre al microorganismo que tenemos y para poder tenerlo, tengo que tenerlo aislado, ¿vale? 00:00:38
Si yo digo que me entráis en la… Yo, por ejemplo, ahí enfrente están dando clase unos niños de la ESO de refuerzo. Hay un montón, hay un montón, ¿vale? Si yo digo entrar y ponerle nombre, o sea, y buscarme apellido, como si llegáis allí y no sabéis encontrarme apellido, ¿vale? Porque no sabéis ningún dato, luego no sabréis quién sería apellido, ¿vale? 00:00:54
Pero si ahora os digo, en la clase de al lado hay un niño que se llama Pedro, decirle a Pedro que venga, a que sabéis llegar allí y decirle a Pedro que venga, porque es el único que hay, sabéis perfectamente quién es Pedro, ¿no? Pues, aquí pasa lo mismo. Yo tengo que ponerle nombre a mi bacteria, pero yo no la puedo tener mezclada con un montón de otras cosas, de otras bacterias. Yo tengo que tenerla pura, bacteria o microorganismo, ¿vale? En general. 00:01:14
Entonces, siempre que yo quiera identificar, tengo que tener a mi cultivo puro, es decir, saco a mi microorganismo, 00:01:40
al que le quiero poner nombre, del mogollón, del conjunto de microorganismos donde puede estar conviviendo, 00:01:45
y lo tengo que tener aislado. Para eso utilizaré una técnica de siembra que ya hemos dado, que es la de estrías. 00:01:51
Lo necesito tener aislado. Y no solamente la técnica de estrías, además iré utilizando herramientas 00:02:00
que me vayan eliminando a todos los microorganismos que no son los que quiero buscar. Entonces, para que tengáis una idea, 00:02:09
imaginaros que quiero buscar o que quiero analizar un alimento a ver si tengo salmonella. La salmonella es queridosilla, produce gastroenteritis, da la lata. 00:02:18
La salmonella pertenece a la familia de las enterobacterias y además es muy sensible, la pobre salmonella mía, y se muere con todo. 00:02:27
O sea, es que cualquier cosa es como, no sé si habéis visto por Instagram o por yo que sé dónde, hay uno que siempre tiene así como su broma, ¿no? Y le da ansiedad, ¿no? Y se cae. Bueno, pues la salmonella me recuerda, ¿no? A esa situación. O sea, la salmonella, cualquier cosa que le haga, pum, se muere, ¿vale? Y decís, uy, qué bien que se muera. No, sí, está bien. El problema es que es cuando se lo hago yo en el laboratorio. 00:02:36
Pero si está allí dentro de la tortillita de patata que hemos hecho, poquito hecha, con un huevo que estaba allí en la nevera y que a lo mejor allí vivía la salmonella tan a gustito, la hemos echado en la tortilla, en la tortilla gordita y tal, y hemos dejado ahí en medio la salmonella, el huevo de dentro no ha cuajado, es decir, no ha recibido mucha temperatura. 00:02:57
La salmonella está tan a gustito 00:03:15
Está en el huevito donde ella vivía 00:03:17
Ahora tiene un poquito de calorcito 00:03:19
Pero no ha sido mucho, no se ha muerto con ese calorcito 00:03:21
Y luego ya encima 00:03:23
Me sacan de la sartén 00:03:25
Y se queda allí en el platito 00:03:26
Esperando a que llegue alguien a comérsela 00:03:29
O me la llevo de excursión 00:03:31
Pues ya está la salmonella tan feliz 00:03:33
No se muere, ahí no se muere 00:03:35
Me tomo la tortilla 00:03:38
Y la gastroenteritis está garante 00:03:39
Ahora, yo me llevo esa tortilla al laboratorio 00:03:41
Como se me ocurra, meterla en la nevera, sacarla y darle mucho calor. Si hago muchas cosas, va y se muere. Entonces, hay que intentar tratarla bien, ¿no? Hay que mimarla. Y voy a intentar ponerla en un medio de cultivo que sea muy apropiado, porque yo lo que quiero saber es si está o no está. 00:03:44
si no está en la tortilla 00:04:02
fenomenal, por muchos mismos que le dé 00:04:03
no la voy a llevar a criar por generación espontánea 00:04:05
por eso no os preocupéis 00:04:08
pero si está, quiero que al final 00:04:09
me dé la cara, entonces yo la pongo 00:04:12
en un medio de cultivo a lo mejor 00:04:14
que sea muy apropiado para ella 00:04:15
porque tenga los componentes que le gusta comer 00:04:17
el pH que le gusta 00:04:20
la pongo en la estufa a la temperatura 00:04:22
que le gusta, e intento poner 00:04:23
alguna cosita ahí en ese medio 00:04:25
que no le guste 00:04:27
a todas las primas de las salmonellas, es decir 00:04:29
a todas esas bacterias que 00:04:31
podían crecer o coexistir 00:04:33
junto a la salmonela en el mismo hábitat, 00:04:35
en este caso en la tortilla, 00:04:38
pero que yo no quiero 00:04:40
ahora mismo tenerlas, porque a veces 00:04:41
se van a poner a crecer todas esas primas, 00:04:43
todo con comillas, para entenderme, 00:04:46
me refiero a bacterias de su misma 00:04:48
familia. 00:04:50
A veces se van a poner a crecer 00:04:52
y le quitan la comida a la salmonela, 00:04:53
que la pobre es muy tonta y se muere 00:04:56
con todo, y no 00:04:58
No crece la salmonella y digo, uy, la tortilla es fabulosa, cómetela, que está fenomenal. Y la tortilla no está fenomenal. Estaba la salmonella, pero es que las primas le han quitado la comida. Bueno, pues yo pongo en el medio de cultivo, pongo cosas que vayan quitándome del medio a toda la microbiota competitiva. Y ya entonces me crecen unas posibles colonias. Y digo, ¿será salmonella o no? Le he puesto todo lo que quiere la salmonella. 00:05:00
Luego, es probable que sea la salmonella. Además, viene de un hábitat en el que por día está la salmonella, como en la tortilla. Tengo bastantes sospechas que tengo ya la salmonella, pero lo que tengo que hacer es coger una de esas colonias que me ha crecido, hacer una siembra por estría y aislarla. 00:05:25
Como cojo una sola colonia, ahora cuando pase por la incubadora, tengo una placa llena de bacterias que vienen de la misma colonia y, por tanto, tengo un cultivo puro, ¿vale? 00:05:41
A lo mejor es salmonella o a lo mejor no. Y ya, sobre ese cultivo puro es cuando yo me voy a poner a hacer pruebas de identificación, ¿vale? Eso es para que un poco os ocurra. 00:05:53
Bien, os ya digo, siempre que yo quiera aislar al microorganismo haré siembra por estrías y de las técnicas de estrías que os conté, la más frecuente es por sectores, ¿vale? Que la repasamos. 00:06:05
Y luego ya me pongo a hacer técnicas de identificación. Tenemos lo que se llama método clásico, que es lo que se ha hecho hasta ahora, lo que se viene haciendo habitualmente, que es todo eso que os digo. 00:06:18
Es, veo la morfología de las colonias, es decir, veo el color, veo la forma, veo si tiene un borde liso, si es cóncava, convesa, si tiene pelitos, si parece que tenga brillo, que sea como pastosa. 00:06:28
O sea, puedo describir a las colonias de muchas maneras. Según el medio de cultivo donde siembren, puede que el aspecto de la colonia sea muy característico de una especie determinada. O sea, que hay especies que crecen en algún medio de cultivo, dando lugar a colonias muy características. Eso ya me da mucha información. 00:06:47
Antes, cuando yo no tenía todas las cosas que voy a seguir contando, tenía mucho peso. 00:07:06
Pero ahora, solamente por el aspecto de la colonia, no siempre podemos o debemos decir 00:07:12
tengo hasta las tres. Bien. También puedo verla a microscopio, ya sabemos, lo hemos 00:07:18
dado, ¿vale? La puedo teñir o no teñir. Puedo ver si la tiño, fijaros, con la tinción 00:07:25
negrán, por ejemplo, yo puedo saber, entonces, de momento, nada más que coja la colonia 00:07:31
y pase por el microscopio, me puede hacer atención, yo puedo saber si es un coco, si 00:07:36
es un vacilo, si es gran positivo, si es gran negativo, si está agrupada formando cadenas 00:07:42
o racimos, ¿vale? Eso me da mucha información, porque si yo de pronto hago una atención 00:07:47
de este cultivo puro, donde voy buscando a la salmonera y veo perfectamente que es un 00:07:53
positivo, imaginaros. Yo ya sé que no tengo la salmonella, es que ya paro de hacer ningún 00:07:58
análisis y digo, no hay salmonella, porque yo sé que la salmonella es un vacilo gran 00:08:03
negativo. Ahora, que encuentro que es un vacilo gran negativo, digo, sigo sospechando, tengo 00:08:08
cada vez más pruebas, como esto es una labor de detectives, ya tengo otra prueba más que 00:08:15
me dice que esto puede ser salmonella. Pero la salmonella, vuelvo a decir, tiene muchas 00:08:20
primas es que hay otras muchas bacterias de su misma familia que también son vacilos 00:08:25
gran negativo. Tengo que seguir haciendo cosillas. Bueno, también puedo ver si crecen diferentes 00:08:30
con higiene física. Hay veces que alguna bacteria concreta, por ejemplo, la Chirichia 00:08:36
coli, crece fenomenal a 44 grados y resulta que a 44 grados muchas que pueden estar junto 00:08:40
a la Chirichia coli se mueren. Ellas aguantan o les gustan los 37, los 38, pero los 44 se 00:08:48
mueren. Entonces, si yo cojo una placa, la pongo en la estufa a 44, una placa de una 00:08:55
colonia que yo he sembrado, que espero a lo mejor que podría ser Chirichia coli y no 00:09:03
me crece nada. Yo sé que no tengo Chirichia coli, pero si me crece, ya tengo otra sospecha 00:09:09
de que puede que sea el ceviche alcohólico. No sé si me va a ir siguiendo un poco. O sea, 00:09:16
que normalmente las pruebas de identificación… Yo siempre digo, yo no sé, bueno, no me sé… 00:09:20
Sí, sé que todos son más mayores, entonces a lo mejor sí. El juego este, no sé si alguien 00:09:26
lo conoce, el juego de quién es quién. Yo jugaba de pequeña y mis hijos han jugado, 00:09:30
por eso es un juego como muy atemporal, que es un juego que tiene muchas caritas. Bueno, 00:09:34
el clásico era muchas caritas y había dos tableros. No tenían las caritas, yo también 00:09:39
las tenía. Cogíamos una tarjetita cada uno que coincidía con una de esas caritas. Y 00:09:44
tú le preguntabas a tu oponente cualquier cosa y te podía decir sí o no. Entonces, 00:09:48
tú le preguntabas, ¿la tarjeta que tiene es una mujer? Él te decía sí. Pues tú 00:09:53
bajabas todas las fotos que tenían hombres, ¿vale? Porque ya te había dicho que era 00:09:58
una mujer. ¿Tiene gafas? Te dicen no. Pues tú bajas todas las caritas que tenían gafas. 00:10:01
O sea, que tú ibas eliminando según ibas contestándote tu oponente. Y al final podías 00:10:06
llegar a adivinar la foto que tenía él antes de que él adivinase la tuya, porque cada 00:10:13
vez hacíamos una prueba. Bueno, eso se os suena. Pero es que es muy característico 00:10:17
o es muy parecido a como hacemos aquí. Vamos haciendo pruebas y lo que podemos hacer es 00:10:22
eliminando. Es decir, que si yo encuentro un vacilo, yo lo que ya sé seguro es que 00:10:27
no tengo ningún coco, que ninguna especie bacteriana que sea un coco es el cultivo puro 00:10:32
que tengo. Todas esas las puedo eliminar, pero vacilos tengo. También hay muchas bacterias 00:10:39
que son vacilos. Luego ya sí que tengo un subconjunto más pequeño de todas las posibles, 00:10:43
no, ya solo tengo las que son vacilos y he podido eliminar muchas más, pero ahora tengo 00:10:49
que seguir eliminando de ese conjunto que son vacilos, ¿vale? Bien, también hay veces 00:10:53
que se les pone eso, medios de cultivo diferentes con distintos sustratos para que puedan crecer 00:10:58
o con distintos sustratos que pueden llegar incluso a ser tóxicos para algunas especies, 00:11:03
Y veo si crecen o no crecen. Se hacen pruebas bioquímicas y se utilizan también medios de cultivo diferenciales, que son, recordamos un poquito, que también lo hemos visto, esos que sí que dejan crecer a la gran mayoría de bacterias, pero las características de la colonia que va a crecer, de la vacía que yo estoy buscando, tendrían unas características muy concretas, muy concretas y diferentes de otras que pudiesen crecer ahí también. 00:11:08
¿vale? Estos son, por ejemplo, el agar cromogénico, ¿vale? Ya veremos, lo utilizaremos, ¿vale?, 00:11:37
más adelante. Pero el agar cromogénico, que se compra para diversos conjuntos de especies, 00:11:44
pues, según cómo crecen las colonias, solamente viendo a lo mejor el color de la colonia, 00:11:51
yo puedo saber si es Echerichia coli o si es cualquier otra bacteria. Bueno, cualquier 00:11:56
Por ejemplo, si es hechilichaco, si son coliformes. Luego ya, aparte de estos métodos clásicos, que es lo que me corresponde a mí contaros, porque es el temario de este módulo, también tenemos métodos modernos, aunque son modernos, pero vaya, modernos que me suenan ya como irrisorios, porque yo ya tengo mi edad y a mí me lo explicaron en la carrera. 00:12:01
Entonces, deberían ser modernísimos, entiendo yo, a las que ha pasado tiempo. Pero bueno, ahora le llaman métodos modernos. Están así clasificados, un poquito soletos. Serían las galerías API y los enteros rubros. También están dentro, es lo que se conoce, más que ahora métodos modernos, se le llaman pruebas rápidas, ¿vale? También está dentro de vuestro temario. 00:12:28
Hay otras pruebas rápidas ya realmente modernas, pero ya tampoco están dentro de vuestro temario y además requieren unos equipos muy concretos que no tenemos en este instituto y que no se tienen tampoco de forma genérica en cualquier laboratorio, ¿vale? Se tienen más bien en investigación todavía. Por eso supongo que hay otros, pero que ya nosotros no entramos a verlos. 00:12:50
Que vayáis a trabajar, cuando hagáis el módulo de formación en centros de trabajo, como cuando vayáis a trabajar y hay alguno de estos equipos, es que os lo van a contar. Siempre, en cuanto haya un poquito algo, un poquito ya más novedoso, más actualizado, más sofisticado, lo normal y lo lógico es que os expliquen las condiciones, las características, las normas de funcionamiento, incluso a veces serán cursos específicos para poder utilizarlos. 00:13:16
Vale. Las pruebas bioquímicas. Las pruebas bioquímicas se hacen siempre, como hemos 00:13:42
dicho, sobre un cultivo puro. Cuantas más pruebas haga, más fiable va a ser, eso está 00:13:49
claro, ¿no? Y qué tipo de pruebas haga, si hago unas pruebas o hago otras, me va a 00:13:55
depender un poquito de los resultados primeros y también del tipo de muestra, ¿no? Yo ya 00:14:02
he dicho, hablo antes de la tortilla de patata, pues la tortilla de patata hago muchos análisis 00:14:07
encaminados a enterobacterias, ¿vale? Por ejemplo, a ver si tengo aquí bacterias de 00:14:12
la familia de enterobacterias. Entonces, haría pruebas bioquímicas que me identifiquen las 00:14:18
enterobacterias. ¿Y por qué? Porque sé que la tortilla se hace con huevo, que es 00:14:22
una tortilla casera, bueno, sino también, digo, con huevo crudo, y en los huevos puede 00:14:27
a ver entre las bacterias. Es uno de los organismos más probables que haya. Si es una tortilla 00:14:35
de estas comerciales que se venden en supermercados y demás, se suelen hacer con huevina, que 00:14:42
la huevina es huevo, lógicamente, pero huevo pasteurizado. Es decir, que ya se le han eliminado 00:14:47
las bacterias para evitar ese riesgo que tenían siempre las tortillas. Entonces, bueno, de 00:14:52
todas maneras, para ver si se ha hecho bien esa pasteurización de ese huevo que se ha 00:14:59
utilizado para hacer esas tortillas, pues también puedo buscar salmonella, lo normal 00:15:03
es que no esté, pero lo puedo buscar, lógicamente. Bien, entonces, os voy a contar algunas pruebas 00:15:07
bioquímicas, así rápidamente, las tenéis en los apuntes, me preguntáis cualquier duda 00:15:15
que tengáis, ¿vale? He intentado poner fotos y también haremos cuando vengáis algunas 00:15:20
estas pruebas, ¿vale? Os explico las pruebas, bueno, las más frecuentes y no están agrupadas 00:15:27
de una manera o de otra, son las más frecuentes, simplemente, ¿vale? Entonces, hay veces que 00:15:35
nosotros queremos ver si la bacteria en su crecimiento produce ácido o produce gas, 00:15:41
¿vale? Estas dos pruebas se hacen en medio líquido y se hacen conjuntamente. Se utilizan 00:15:47
tubos de ensayo donde pongo el medio de cultivo, el apropiado para lo que esté buscando, por 00:15:55
ejemplo, caldo lactosado, si estoy buscando coliformes, que los coliformes son bacterias 00:16:01
que producen gas, y pongo en el interior una campana durja, que no es otra cosa más que 00:16:05
un tubito de ensayo, pero mucho más chiquitito que hemos usado para poner el medio de cultivo 00:16:12
y sembrar y lo pongo invertido, es decir, que está cerrado por aquí, que está cerrado 00:16:18
por la parte superior y está abierto por la parte de abajo. Es un tubito que simplemente 00:16:29
yo meto invertido. ¿Cómo lo meto invertido? Y que aparezca lleno de negros, pues tiene 00:16:33
su truquillo, ¿vale? Pero normalmente lo que se hace es coger un tubo, se echa al medio 00:16:38
de cultivo, los nueve o seis mililitros que requiera el friki, porque es medio líquido, 00:16:43
cojo esa campana dulce y la meto en el tubo, pero abierta hacia arriba, ¿no? Y luego cojo 00:16:48
esto tú y hago un rasgaso, así de golpe, ¿vale? Eso con práctica, no se cae nada 00:16:53
afuera y queda el tubo invertido y lleno de líquido. Me decís, pero mira que te complicas 00:17:00
la vida, podías echar el tubo, echar el medio y la campana invertida directamente, si hacéis 00:17:05
eso, metéis la campana invertida, no se llena de gas, perdón, no se llena de líquido y 00:17:11
yo necesito que esté llena de líquido. Si vosotros la metéis así tal cual, lo que 00:17:16
se queda es llena de aire y yo no vería si ese aire… Yo no distinguiría si la campana 00:17:20
tiene aire, porque yo no la he llenado de medio de cultivo, o tiene gas, porque la bacteria 00:17:26
la ha producido. Yo necesito que esté llena de medio de cultivo y que aquí, dentro de 00:17:31
la campana, también haya microorganismos igual que ahí fuera. Pero si un microorganismo 00:17:37
que está por aquí forma gas, esas burbujitas chiquititas que forma un microorganismo se 00:17:42
irían hacia arriba por densidad y salen del tubo y las perderían. Pero si yo pongo esta 00:17:49
campana, los microorganismos que crecen por aquí forman también su gas, esa burbujita 00:17:55
iría para arriba y se acumularía aquí arriba, no podía salir. Y muchos microorganismos 00:18:01
creciendo, haciendo su metabolismo y produciendo gas, pueden llegar a formar una burbuja tan 00:18:06
grande como la que veis aquí a la derecha. Si yo después de pasar por la incubadora 00:18:12
veo el tubo y tengo esta burbuja de gas, pues diré que mi microorganismo produce gas, es 00:18:18
productor de gas o que es gas positivo, que también se dice a veces. Entonces, es una 00:18:25
prueba bastante fácil de hacer. Un medio líquido sembrado en la incubadora en 24 horas 00:18:31
ya se ha formado bastante gas para poder verlo, ¿vale? Y, bueno, pues se hace mucho. Y si 00:18:37
no produce… Por ejemplo, si lo que estoy usando es caldo lactosado y me produce gas, 00:18:44
yo lo voy a contabilizar o voy a decir que ahí tengo coliformes. En cambio, si después 00:18:50
de pasar por la incubadora, aunque el tubo se me haya puesto turbio porque han crecido 00:18:56
algunas bacterias, si no han producido gas en este medio de cultivo, diré que mi bacteria 00:18:59
no es coliforme. Diré que no tengo coliforme, que la muestra que he sembrado no tiene coliforme. 00:19:05
¿Vale? Los coliformes es un grupo dentro de la familia de las enterobacterias. También 00:19:11
lo veremos en su momento. Bien. Y ya, si lo que quiero ver es si produce ácido, pues 00:19:17
en el medio de cultivo suelo echar un indicador. Bueno, no es que lo tenga que echar yo, sino 00:19:28
que el medio ejecutivo viene preparado ya con un indicador que no es tóxico para las 00:19:33
bacterias, pero…, o sea, que las bacterias pueden crecer en su presencia, pero que va 00:19:37
a cambiar de color si de pronto el medio vira ácido. ¿Por qué va a virar ácido? Porque 00:19:43
las bacterias en su crecimiento, en su organismo, en su crecimiento forman productos, forman 00:19:47
metabolitos que van segregando al exterior y muchos de ellos son ácidos, ¿vale? Por 00:19:54
tanto, se va acidificando. Vale. Si yo tuviese que ver si se ha producido gas en un medio 00:20:00
sólido, lo que se hace… O sea, se suele observar bien. Ahí sí que también procuro 00:20:11
tener ese medio sólido en tubo, ¿vale? Y se suelen ver desplazamientos del medio, 00:20:17
se suelen ver rayas como derroturas, se ven burbujas, etcétera, ¿vale? O sea, que bien, 00:20:24
que se ven bastante bien. También lo veremos cuando vengáis. Bien. Hay otra prueba, otra 00:20:31
prueba bioquímica, que es la prueba de la oxidasa, ¿vale? La prueba de la oxidasa consiste 00:20:40
en poner de manifiesto si mi bacteria tiene una enzima que se llama oxidasa o citocromo 00:20:46
oxidasa. Para los amigos, como digo yo, oxidasa, para que no tengas que estudiar tanto. Bien. 00:20:52
Entonces, lo que se hace es utilizar un indicador que va a poder ser oxidado en presencia de oxidación. Ese indicador es incolor y si es oxidado, se colorea. 00:20:58
Entonces, lo que se hace es colocar en un trozo de papel de filtro, que lo ponemos dentro 00:21:12
de una placa vacía, ponemos dos o tres gotas de reactivo osirasa. El reactivo osirasa tiene 00:21:22
ese indicador. Y luego se toca una colonia con el asa de siembra y se extiende sobre 00:21:28
el papel. Bien. Y después de unos segundos vemos si cambia de color el papel o no. Si 00:21:35
se pone el indicador que se usa, cambia como un color púrpura o violáceo. Entonces, si 00:21:44
vemos que tiene color, pues diremos que es positivo. Y si no cambia de color, diremos 00:21:49
que es negativo. Bueno, esto es la forma más barata de hacerlo, pero como es una prueba 00:21:54
que se hace con mucha frecuencia, se utilizan ya tiras, que no sé si habéis visto este 00:22:00
tipo de tiras, como el que está en la foto ahí a la derecha, que ya tienen el reactivo 00:22:05
impregnado y lo que tengo que hacer simplemente es acercarlo a la colonia o tocar la colonia 00:22:10
y llevarlo a la tira. Hay veces que las tiras son de contacto con la colonia, hay veces 00:22:18
que son para introducir el líquido. Bueno, aquí, que no había puesto la foto, veis 00:22:23
los trocitos de papel, se puede hacer en una placa por tenerlo de alguna manera y veis 00:22:29
como esos dos, los que aparecen en el signo positivo, tienen ese color púrpura, ese color 00:22:34
violáctico y son, pues entonces, oxidasa positivo, el microorganismo que he comprobado 00:22:38
que era, ¿vale? Perdón, bueno, y los otros eran negativos, ¿vale? O sea, que no es difícil 00:22:44
de hacer, ¿vale? Y lo ideal cuando hacemos estas pruebas es ver siempre lo que significa 00:22:51
el positivo y lo que significa el negativo. Si solo tenemos una bacteria, o me da positivo 00:22:56
o metanegativo. Normalmente, cuando venís al laboratorio y yo intento hacer estas pruebas, 00:23:01
pues intentamos tener microorganismos que den positivo esas pruebas o que den negativo, 00:23:06
para que así lo vean, ¿vale? Pero si no, bueno, pues se ponen a buscar fotos. Las casas 00:23:10
comerciales, en sus mismas páginas, te ponen fotos muy buenas de lo que significa positivo 00:23:15
y lo que significa negativo, ¿vale? Una información buenísima para…, o sea, una fuente buenísima 00:23:20
para conseguir información microbiológica son las casas comerciales, porque están súper 00:23:26
al día, tienen que vender sus productos y lo venden muy bien y la verdad que la información 00:23:30
que dan es bastante fiable y buena, ¿no? Eso lo digo como información. 00:23:35
La prueba de la catalasa, lo que quiere poner en manifiesto es si tenemos catalasa o no. 00:23:41
Todo esto, ya digo, pues imaginaos que yo hago todas estas pruebas, no tiene sentido 00:23:47
hacerlas todas juntas porque, ya digo, no están agrupadas de una manera específica, 00:23:51
son pruebas comunes. Pero si yo ya sé que mi enzima es oxidasa negativo, catalasa positivo, 00:23:54
que produce gas y que produce ácido, yo ya tengo mi grupo posible de bacterias bastante restringido. 00:23:59
Incluso a lo mejor ya pues tengo casi casi la solución, ¿no? Tengo la que es, pero bueno. 00:24:06
Si queremos determinar que tenemos la enzima catalasa, pues lo que tenemos que es ponerla en contacto con agua oxigenada. 00:24:13
O sea, ponernos a mi bacteria en contacto con agua oxigenada. 00:24:20
Hay algunas bacterias que tienen una extrema catalasa porque en su metabolismo forman agua oxigenada como metabolito. Si no hiciesen nada con ese metabolito, si fuese un metabolito final, la bacteria moriría en presencia de agua oxigenada, si es uno de los desinfectantes que hemos dado cuando vimos a los desinfectantes. 00:24:23
Entonces, es un metabolismo intermedio en el metabolismo de algunas bacterias, porque 00:24:41
enseguida ellas con su catalasa lo degradan y producen agua en los oxígenos, ¿vale? 00:24:48
El oxígeno se les prende y no les hace daño. Entonces, si nosotros ponemos en contacto 00:24:53
a la bacteria con el agua oxigenada y vemos que se produce burbujeo, que significaría 00:24:58
producción de ese oxígeno gaseoso, pues entonces la prueba es catalasa positiva. Y 00:25:04
si no se produjera, pues, catalasa negativa, ¿vale? Una forma de poner en contacto es 00:25:09
coger un porta, poner ahí unas gotas de agua oxigenada y con masa de siembra tocamos la 00:25:13
colonia y luego tocamos o introducimos el asa en la gota de agua oxigenada. Y si vemos 00:25:20
burbujitas, pues, positivo. Y si no vemos burbujitas, pues, negativo. Si la oxigenada 00:25:26
está muy concentrada, la de nuestro laboratorio solo está al 30%, como reactivo químico 00:25:32
me refiero, se ven esas burbujas que están ahí en esa foto. Si usamos el agua oxigenada 00:25:38
como producto farmacéutico, el que se usa para desinfectar heridas y demás, pues las 00:25:43
burbujitas son mucho más chiquititas, pero se ven, ¿vale? O sea, que hay que mirar un 00:25:49
poco más, pero también se ven. ¿El resultado positivo de esta prueba solo 00:25:53
en los microorganismos aerobios? En las de las oxidasas, siempre. Los aerobios 00:25:57
o los aerobios facultativos son los que dan oxidasa positiva. La catalasa suelen ser también 00:26:05
los positivos, ¿vale? Perdón, suelen dar positivo también los aerobios, perdona que 00:26:12
no te he contestado. Sí, también suelen ser. Las dos últimas que hemos visto, tanto 00:26:17
la oxidasa como la catalasa, suelen dar positivo en los aerobios, pero no significa que todos 00:26:21
los aerobios den positivo en la catalasa, ¿vale? Pero sí es verdad que los anaerobios 00:26:26
no suelen darlo, pero saber si la bacteria que estoy buscando va a dar positivo o negativo, 00:26:32
eso suele estar recogido en tablas y demás y es fácil encontrarlo. Y, nuevamente, en 00:26:39
micro no se genera… O sea, sí te voy a decir que la osirasa siempre es positivo en 00:26:46
los aerobios o aerobios facultativos, pero la catarasa no te puedo decir siempre. 00:26:51
Bien, las pruebas INVIC. Las pruebas INVIC, estas sí que son cuatro pruebas de identificación bioquímica que yo cuento agrupadas, porque se hacen en el laboratorio de forma agrupada y el objetivo de hacerlas es identificar a las bacterias de la familia de enterobacterias. 00:26:56
Ahí en la diapositiva lo he escrito en latín, si lo escribís en latín lo ponéis así en cursiva como está escrito, pero también así como más para andar por casa podemos decir enterobacterias como tenéis entre paredes, ¿vale? 00:27:19
Bien, pues si yo quiero utilizar bacterias, si quiero identificar bacterias de la familia de las bacterias, una forma sería hacer las cuatro pruebas que están agrupadas en lo que se conoce como pruebas INVIC, que son la prueba de Indol, rojo de metilo, bojes proscaue y citrato. 00:27:31
Si os dais cuenta, la I de INDON, la I primera de las pruebas INVIC, el rojo de metilo, bueno, como siempre hablamos en inglés y decimos primero metil, pues la M es la del rojo de metilo, la V corresponde a BOGES-FROSKAUER y luego la C a citrato, ¿vale? 00:27:57
Por eso hay una I minúscula y no es que me haya confundido, es que se pone la I minúscula, porque si no pongo la I es que digo, no soy capaz de decirlo, pero si pongo la I ya digo INVIC. Entonces, os sirve como regla mnemotécnica para acordaros de estas cuatro pruebas que corresponde eso, a INVIC, I de indol, M de rojo de metilo, V de bosque procaue y C de cidol. 00:28:16
Bien, ¿cómo se hacen esas pruebas? Vendrán los guiones de prácticas que haremos en abril, 00:28:39
que ya están por ahí…, bueno, ya están por ahí, ya tenemos nosotros al menos los 00:28:49
horarios de práctica. Yo ya he confirmado mi horario y he dicho que sí, y no sé si 00:28:53
todos mis compañeros han confirmado o no. En cuanto todos mis compañeros confirmen, 00:28:59
la coordinadora María José lo publicará, ¿vale? Le digo para que estéis atentos, 00:29:03
que no sé si la ha publicado hoy, no me da tiempo a preguntarlo. Ella, cuando tenga la 00:29:07
confirmación de todos los profesores, publica los horarios porque es justo a la vuelta de 00:29:11
Semana Santa, ¿vale? Pues para que ya os podáis apuntar y demás. Os lo adelanto para 00:29:15
que así estéis más atentos al módulo de tutoría, aunque cada uno, cada profe en su 00:29:20
módulo también lo dirá y pondrá la encuesta que ponemos siempre para que os apuntéis, 00:29:27
que lo tenéis presente. Con micro vendéis tres días y ofrezco dos turnos, ¿vale? Para 00:29:32
que os apuntéis al que os vengamos. Cierro por el día. Galería Happy. Bueno, si el 00:29:38
otro día acabé un poco antes, hoy me estoy pasando un poco de tiempo, pero os lo cuento 00:29:45
así un poquito rápido y el próximo día vuelvo a contarlo, ¿vale? Si vemos que algunos 00:29:49
han tenido que ir, nos han quedado, lo que sea. Bueno, esto ya era lo que os decía que 00:29:54
se conocen como métodos modernos o pruebas rápidas. Y es porque, pues claro, como se 00:29:59
hacían muchas pruebas bioquímicas y tenéis que ir haciendo una a una, pues se te hagan 00:30:05
poco, esas índices recontados, son cuatro pruebas que se hacen a la vez en el laboratorio, 00:30:09
pero se hacen de una en una, o sea, que se hacen juntas, perdón, juntas, se hacen en 00:30:13
la misma sesión de laboratorio a la vez, ¿no? Pero primero haces una, luego otra, 00:30:18
lo bota y luego lees los resultados y que salgan, no lo he dicho, pero que esas pruebas 00:30:22
INVI salgan positivos o negativos. Y luego lo que se hace es ir a buscar unas tablas 00:30:29
en las que aparecen las enterobacterias y lo que suelen dar en esas pruebas como positivas 00:30:34
o negativas. Y así al final puedo llegar a saber qué bacteria tengo. 00:30:39
Vale, pues la galería es API, ya digo, son para hacer pruebas simultáneamente, son sistemas 00:30:44
de 10 o 20 microtubos, hay API 10, serían 10 microtubos, o API 20 serían 20 microtubos, 00:30:50
a veces son pocillos en vez de microtubos, que lo que tienen es el medio deshidratado. 00:30:57
Entonces, yo lo que hago es preparar una suspensión bacteriana de un cultivo puro, es decir, cojo 00:31:02
a lo mejor un suero fisiológico, 0,9%, cojo mi colonia y la suspendo en ese suero, ¿vale? 00:31:07
Y ese suero, que tiene mi suspensión bacteriana, me sigue para ahí echando en esos tubitos pequeños que tengo y entonces estoy sembrando e hidratando el medio a la vez, ¿vale? Todo viene estéril, o sea, esteriliza hasta todo. 00:31:15
y luego ya cojo 00:31:30
esas galerías y las pongo 00:31:32
en una cámara de incubación especial 00:31:35
bueno, que no es otra cosa más que 00:31:37
unos plastiquillos 00:31:38
como alveolos, donde se pone 00:31:40
un poquito de agua y encima se pone la tira 00:31:43
y se lleva cerradito 00:31:45
a la tufa, el que sea así cerradito 00:31:46
y que tenga un poquito de agua 00:31:49
lo que me hace, como son tubitos muy chicos 00:31:50
lo que hace es evitar que se deshidrate 00:31:53
que haya mucha evaporación 00:31:55
y se me seque 00:31:57
todo esto también lo haré 00:31:57
Luego lo encubo muy poco tiempo, 18-24 horas suele ser, según la casa comercial se dice 00:32:00
el tiempo que encuban. Entonces, la bacteria según crece en cada tubito suele producir 00:32:07
cambios de color o bien luego he hecho algunos reactivos para que se produzcan estos cambios 00:32:13
de color. Y yo voy apuntando qué color ha aparecido y si eso implica, según siguen 00:32:18
las instrucciones, que la prueba sea positiva o que la prueba sea negativa. Yo voy apuntando 00:32:28
combinaciones de signos. Voy poniendo positiva, positiva, negativa, positiva, negativa, positiva, 00:32:33
positiva, negativa, negativa, negativa. O sea, voy poniendo así todas las 20 pruebas 00:32:38
que he hecho o las 10, ¿vale? Si son 10, en uno de los microtubos hago otra prueba 00:32:43
adicional y luego hago la prueba de la oxidasa también, normalmente. Y si son 20, también 00:32:50
hago alguna prueba aparte. Bueno, al final, realmente en las galerías API 10 hago 12 00:32:55
o tengo los resultados de 12 pruebas y en las galerías API 20 tengo los resultados 00:33:01
de 21 pruebas. Quedaros con esos números, ahora vemos por qué. Lo que digo, se constata 00:33:06
qué pruebas son positivas y cuáles son negativas. Y ahora, se agrupan de tres centros, ¿vale? 00:33:14
Por eso digo que son doce para una y veintiuno para otra. He utilizado múltiplos, sabéis 00:33:20
que son múltiplos de tres. Lo que os puedo agrupar es de gente y siempre en cada grupito 00:33:25
quedan tres pruebas. Al primero de los tubos se le suele asignar un uno, al segundo un 00:33:30
dos y al tercero un cuatro, ¿vale? Entonces, voy viendo si el resultado es positivo y si 00:33:36
es positivo, veo si corresponde al 1 o al 2 o al 4, ¿vale? Haremos ejercicio de esto 00:33:44
también, ¿vale? Que estoy queriendo correr y quizás no está generando. Entonces, yo 00:33:50
voy sumando para cada triada el número que le corresponde. Si el positivo está en el 00:33:56
1, pues sumo 1. Imaginaros que me hubiese dado una triada positivo, positivo, negativo. 00:34:01
Como los dos positivos están en el 1 y en el 2, pues lo sumo y digo 3. Entonces, el 00:34:08
resultado de esta criada sería un 3. ¿Vale? Entonces, si es un API 10, consigo 4 números, 00:34:13
4 números. Y si es un API 20, consigo 7 números. ¿Vale? Un código de 4 números o de 7 números. 00:34:21
Y eso ya me voy a buscarlo a unas tablas o bien lo meto en un software que te puede vender 00:34:29
también la casa comercial y en esas tablas te dice, pues al número 3410 le corresponde 00:34:35
y al lado aparece el chirichacolib. Pues yo sé que tengo el chirichacolib, no lo he pensado 00:34:44
más, ¿vale? Aunque, bueno, hay veces que no siempre aparece el nombre de una bacteria, 00:34:48
hay veces que aparecen dos bacterias. Tengo un problema, ¿vale? Porque a veces no es 00:34:57
suficiente, tengo que hacer alguna prueba adicional, pero ya sería o tengo esta o tengo 00:35:01
esta. Ya sería hacer alguna prueba que me distinga a las dos posibles bacterias. Sería 00:35:06
fácil, ¿vale? Para hacerla hay que seguir rigurosamente las instrucciones del fabricante, 00:35:12
porque como hagas algo raro o diferente, puede que no se vean las cosas bien. Son cosas 00:35:17
caras, ¿vale? O sea, estas galerías son caras y siempre te dicen que si tienes cualquier 00:35:27
duda, vayas a la casa a comer, ¿vale? Nuevamente bajo pago. También te piden que hagas un 00:35:30
control de las galerías, es decir, que tú lo que hagas es sembrar una bacteria muy concreta 00:35:37
que tú sabes ya, la tienes con nombre y apellido, entonces los números que tienen que salir, 00:35:44
los positivos y los negativos que tienen que salir, que son unos muy concretos. Si no te 00:35:49
sale es que la galería está mal y tienes que desechar esa y toda la caja. Y luego ya 00:35:53
cuando has acabado todo el análisis, pues todo, la cámara de incubación, la galería, 00:36:00
todo tiene que llevarlo a la autoplaza. ¿Alguna duda de las galerías, Api? No he puesto fotos 00:36:05
porque aquí sí que las casas comerciales, según a la que acudas, son un poquito diferentes, 00:36:23
pero intentaré buscar de las últimas que nos han llegado. Os lo explico con enterotubos, 00:36:29
es lo mismo, lo que os voy a explicar con enterotubos es lo mismo. Aquí sí que os 00:36:38
he puesto una foto porque esto sí que no cambia, llevan así, pues desde que yo hice 00:36:42
la carrera, imaginaos si no han cambiado nada. Entonces, los enterotubos son unos tubitos 00:36:47
de plástico que tienen 12 compartimentos, estos solo son de un tipo, tienen una marca 00:36:53
como tal, entonces es como 00:36:58
imaginaos que volvía Fosvic 00:37:00
esa carcasa 00:37:02
pero en vez de tener dentro lo que es 00:37:05
la tinta, lo que tenemos son como compartimentos 00:37:06
que ya tienen el medio de cultivo 00:37:09
preparado, se compra así ya tal cual 00:37:10
como veis en ese trocito de fotos que os he puesto 00:37:12
y para sembrarlo 00:37:14
se quita uno de los capuchones 00:37:17
y aparece como si fuese un vaso de siembra 00:37:18
se toca 00:37:21
con esa punta 00:37:22
a la colonia 00:37:25
que quiero identificar y por el otro extremo hay otro taponcito que quito y empiezo a tirar, 00:37:26
¿vale? De forma que al ir tirando, la bacteria que he cogido con este extremo va pasando 00:37:33
por todos los discos, ¿vale? Tengo un vídeo grabado de esto, ¿vale? Entonces lo pondré 00:37:39
el próximo día. Va pasando y se va sembrando toda… Uy, perdón. Se va sembrando toda 00:37:45
la foto. Se va sembrando en todos los medios de cultivo y luego se espera que crezca la 00:37:51
bacteria y se va viendo cada disco si ha cambiado de color o no. Entonces, en las instrucciones 00:38:02
del tubo te dice cuándo se considera positivo, pues cuando el disco se ponga amarillo, cuándo 00:38:09
se considera negativo. Están enmarcados, aquí en la foto no se ve, pero sí que sabes 00:38:13
a que corresponde cada uno de los discos, cada uno de los medios, ¿vale? Y se va poniendo. 00:38:18
Alguna prueba más se hace después en alguno de los discos, pues se echa algún reactivo 00:38:24
y demás. Al final son 15 pruebas y esto es igual que como antes, ¿vale? Se van agrupando 00:38:28
de tres en tres y se van considerando el positivo, el negativo, claro, porque estoy haciéndolo 00:38:35
Aquí se ve más grande. Se van agrupando también y se van sumando los que sean positivos. Todo es seguir las instrucciones. No tenéis que estudiarlo como tal, lo único que sí que tenéis que saber es lo de la agrupación que aparecerá en un caso práctico de los que os ponga en una siguiente relación con ustedes. 00:38:41
¿Vale? Entonces, hay que ir sumando los números, sabiendo… Pues, imaginaros el grupo 2, ¿veis? 00:39:08
Aquí, bueno, en los enterotubos, al primer grupo se le da el 4, al segundo el 2 y al tercero 1. 00:39:14
En las galerías API es al contrario, el primero es el 1, luego el 2, luego el 4. 00:39:19
Pero es que aparecen escritos, o sea, no es que tengáis que saberlo, es que aparecen escritos. 00:39:23
Entonces, yo puedo decir que me saquéis el código de un resultado determinado, entonces, bueno, como están agrupados, 00:39:27
tenéis los positivos y los negativos, 00:39:33
pues aquí sería sumar el 4 más el 2 00:39:35
más el 0, porque la prueba de H2S 00:39:37
era negativo, y este número sería 00:39:39
el 6. Vale, pues ya está. 00:39:41
Luego, se tiene un código, en este caso 00:39:44
en las fotos que os he puesto es el 3, 6, 2, 00:39:45
6, 1, y eso 00:39:48
buscándolo en la tabla significa que es 00:39:49
enterobacter aerógeno. Vale, pues ya está. 00:39:51
Se busca. Bueno, 00:39:54
perdón, que tenía ya mis fotos 00:39:56
en medio. Es o enterobacter 00:39:57
aerógeno o serratia. 00:39:59
Lo que os decía, que hay veces que coincide con dos bacterias. Bueno, pues eso significa que tengo que hacer una prueba adicional que me distinga entre esta enterobacter o esta serrapia. Bueno, pues se hace y ya. ¿Vale? ¿Alguna duda de eso que he contado? 00:40:01
Este equipo lo tenemos en el laboratorio 00:40:20
Sí, sí, tenemos tanto las galerías 00:40:27
API como los enterotubos 00:40:29
y cuando vengáis en abril, una de las dos 00:40:30
la hacemos segura y la otra la enseño 00:40:32
¿Vale? O sea que sí 00:40:34
Han llegado nuevos hace poco los enterotubos 00:40:36
o sea, lo más probable es que hagamos enterotubos 00:40:38
Pero vamos 00:40:40
Sí que lo tenemos, es fácil de usar 00:40:43
Sí es verdad que es caro 00:40:45
O sea, esto es una cosa muy cara 00:40:46
Entonces, no es muy frecuente 00:40:48
a lo mejor en cualquier laboratorio 00:40:50
Pero fijaros que hago 15 pruebas bioquímicas de golpe en 18-24 horas. Eso significa un ahorro de tiempo considerable. Y es verdad que esa gente lo tuvo. Tengo que conservarlos en nevera, que me ocupaba un espacio y me llevaba un gasto de almacenamiento. 00:40:52
Pero si yo tuviese que hacer 15 pruebas bioquímicas con 15 medios de cultivo diferentes, tengo que tener mis 15 frascos, tengo que dedicarme a preparar los medios de cultivo. Al final, tanto mano de obra y tanto espacio también de almacenamiento de 15 frascos, muchas veces compensa, depende un poco del número de pruebas que voy a hacer. 00:41:08
Si voy a hacer muchas veces estos análisis, pues a lo mejor sí me compensa tener los medios ejecutivos, prepararlos yo, hacer las pruebas. Pero si estamos, por ejemplo, en control de calidad de una fábrica y yo lo quiero ver puntualmente, quiero hacer un control aleatorio, si me crece a veces una enterobacteria o no, pues utilizo un enterotubo. Es muy rápido y muy fácil de hacer. Lo haremos. 00:41:28
¿Vale? Y ya por último, bueno, pues os comento ahí que hay otros métodos para hacer identificación, pero que nosotros no lo hacemos y que está más destinado a investigación, se hacen universidades, sitios más concretos y es lo que os decía, que si tenéis que utilizarlo, os lo tienen que contar. 00:41:53
O sea, cromatografía de gases, yo creo que es un tema entero que vais a tener en un módulo que se llama análisis instrumental, pues yo no puedo dar ni un boceto de esto, ¿vale? Solamente que sepáis que hay otras formas de identificar, más concretas, pero más destinadas a investigación. 00:42:17
Bueno, sí que hago mención especial a los medios de cultivo cromogénicos, estos sí los utilizaréis también, son medios de cultivo, esto es lo más novedoso que hay, sin pasarnos ya a cosas muy complicadas, que son medios de cultivo que también en 24 horas podemos llegar a saber el nombre de la especie, ¿vale? 00:42:34
Porque son selectivos y diferenciados y me dejan crecer a la bacteria y además con unas características muy concretas. También lo usaréis cuando vengáis. Aquí tenemos un medio de cultivo que me dice, vamos sembrando la muestra, puedo llegar a saber en 24 horas la cantidad de coliformes que tengo y si tengo presencia y el número de Xerichia coli. 00:42:56
O sea, presencia de Chirichacoli y, además, el número de Chirichacoli que tenga una determinada 00:43:22
muerte. Vamos, ahorra tiempo muchísimo. Es también un medio cultivo muy caro, también 00:43:27
requiere conservarlo en nevera, pero compensa. O sea, que ese sí que lo utilizaremos. Vale, 00:43:34
pues aquí lo dejamos. ¿Tenéis alguna duda? 00:43:42
Idioma/s:
es
Autor/es:
Raquel Bermejo
Subido por:
Raquel M. B.
Licencia:
Reconocimiento - No comercial - Compartir igual
Visualizaciones:
41
Fecha:
13 de marzo de 2024 - 9:58
Visibilidad:
Clave
Centro:
IES LOPE DE VEGA
Duración:
43′ 52″
Relación de aspecto:
1.78:1
Resolución:
1280x720 píxeles
Tamaño:
106.61 MBytes

Del mismo autor…

Ver más del mismo autor

EducaMadrid, Plataforma Educativa de la Comunidad de Madrid

Plataforma Educativa EducaMadrid